超高效液相色谱法测定风湿骨痛丸中5种成分的含量

目的： 采用超高效液相色谱法（UPLC）测定风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱5种成分的含量。方法： （1）乌头碱、次乌头碱、新乌头碱检测方法：色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,ACQUITY UPLC HSS T3预柱（5 mm×2.1 mm,1.8 μm）,流动相为甲醇-0.3 mol·L^-1三乙胺（65∶35,V/V）,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长235 nm,进样量10 μL;（2）麻黄碱、伪麻黄碱检测方法：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）,采用梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长210 nm,进样量10 μL。结果： 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱分离度良好;线性范围依次为4.00~80.04 μg·mL^-1（r=0.999 4）,4.00~80.02 μg·mL^-1（r=0.999 3）,4.03~80.57 μg·mL^-1（r=0.999 6）,6.40~640.25 μg·mL^-1（r=0.999 6）,6.41~641.34 μg·mL^-1（r=0.999 7）;检出限依次为2.03,1.98,1.93,3.67,3.73 μg·mL^-1;定量限依次为3.98,3.87,4.03,6.37,6.41 μg·mL^-1;平均回收率依次为99.06%,98.87%,99.95%,99.92%,100.54%,RSD依次为0.95%,1.55%,1.58%,1.18%,0.91%;风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱的平均含量依次为0.001%,0.004%,0.004%,0.041%,0.027%。结论： 本研究UPLC方法准确,重复性良好,可测定风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱的含量,为风湿骨痛丸的质量控制提供参考。     

高效液相色谱-电雾式检测器法同时测定小儿解感片中7种黄酮类成分的含量

目的：建立同时测定小儿解感片中芦丁、槲皮苷、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、山奈酚及黄芩素7种黄酮类成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱-电雾式检测器（HPLC-CAD）法,色谱柱为Waters XBridge C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,甲醇（A）-20 mmol·L^-1乙酸铵（乙酸调pH至4.5）（B）为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20 μL,CAD雾化器温度为35℃,过滤常数5.0。结果：芦丁、槲皮苷、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、山奈酚及黄芩素检测质量浓度线性范围为0.28~5.60 μg·mL^-1（r=0.999 2）,0.23~4.60 μg·mL^-1（r=0.999 6）,0.17~3.40 μg·mL^-1（r=0.999 1）,1.88~37.60 μg·mL^-1（r=0.999 6）,0.51~10.20 μg·mL^-1（r=0.999 5）,0.15~3.00 μg·mL^-1（r=0.999 4）,0.16~3.20 μg·mL^-1（r=0.999 1）;检测限分别为0.06,0.06,0.06,0.07,0.07,0.05,0.05 μg·mL^-1,定量限分别为0.17,0.16,0.16,0.18,0.19,0.13,0.13 μg·mL^-1;平均加样回收率分别为99.44%,98.83%,98.44%,98.60%,98.05%,99.02%及98.53%,RSD分别为1.70%,1.47%,0.89%,1.20%,1.13%,1.80%及1.32%（n=6）。结论：本法准确性好,灵敏度高,简便易行,可用于小儿解感片中多指标成分的质量控制研究。     

安太胶囊质量标准的提升研究

目的： 完善和提高安太胶囊的质量标准。方法： 采用薄层色谱法（TLC）对安太胶囊中大豆异黄酮、大黄、肉桂进行定性鉴别；采用高效液相色谱法（HPLC）对安太胶囊中大黄素进行含量测定，色谱柱为Kromasil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（97：3），检测波长为290 nm，流速为1.0 mL·min^-1，柱温为室温，进样量为20 μL。结果： 在TLC图谱中，斑点清晰，分离度好，阴性样品无干扰。大黄素在4.4~22 μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 9），平均加样回收率为97.87%（RSD=1.8%，n=6），精密度、稳定性和重复性试验的RSD分别为0.32%、0.26%和0.19%（n=6），大黄素的平均含量为0.115 mg/粒（n=3）。结论： 该方法快速、准确、专属性强，可作为安太胶囊质量控制的方法，并初步拟定其有效成分大黄以大黄素（C₁₅H₁₀O₅）计，每粒含大黄素不低于0.05 mg。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中大麦芽碱的研究

目的：利用高效液相色谱法（HPLC）建立大鼠血浆中大麦芽碱（Hordenine）浓度的测定方法。方法：色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,保护柱为Thermo Hypersil GOLD C₁₈（10 mm×4.6 mm,5 μm）,以酪胺（Tyramine）为内标,流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾（三乙胺调节pH 7.10）（5：95,V：V）,流速1.0 mL·min^-1,等度洗脱,紫外检测波长226 nm,柱温25℃,进样量20 μL,甲醇沉淀蛋白法处理血浆样品,取上清液进样分析检测。结果：大鼠血浆中大麦芽碱在6.25~800 μg·mL^-1的范围内呈良好的线性关系,回归方程为：Y=0.005 6X+0.016 9（r=0.998 0）,定量下限为6.25 μg·mL^-1。日内精密度在2.94%~8.15%之间,日间精密度在4.30%~7.23%之间,提取回收率大于80%,血浆样品稳定性符合生物样品方法学验证要求。结论：HPLC方法用途广、操作简便、速度快、重复性高、线性范围广、结果准确,可用于测定大鼠血浆中大麦芽碱的血药浓度。     

穿黄制剂定性指纹图谱及多组分含量测定方法研究

目的： 采用高效液相色谱（HPLC）法,建立穿黄制剂指纹图谱定性分析和10个主要成分定量分析的测定方法,为穿黄制剂质量控制方法的建立提供科学依据。方法： 色谱柱为Agilent Technologies EC-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,4.0 μm）,乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为25℃,采用323 nm和215 nm双波长切换模式进行检测。结果： 研究建立了该制剂的HPLC指纹图谱共有模式,确定了11个共有峰,17批次穿黄制剂的指纹图谱的相似度均大于0.9;同时测定了其中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯10种主要成分的含量,方法学考查结果显示,以上各成分的线性范围分别是0.009 2~0.101 0 mg·mL^-1（r=0.999 8）,0.012 9~0.142 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.010 1~0.111 1 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.013 0~0.143 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.008 9~0.097 9 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.004 7~0.051 4 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.032 6~0.359 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.051 7~0.569 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.011 7~0.129 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.056 6~0.623 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,平均回收率在98.10%~102.93%范围内,RSD<2.3%（n=6）。结论： 建立的穿黄制剂指纹图谱和含量测定方法准确可靠、快速高效,可用于穿黄制剂的定性、定量分析。     

蒙药山沉香醋酸乙酯提取物中开环异落叶松树脂酚和总木脂素含量测定

目的：分别建立高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法测定蒙药山沉香（Syringa pinnatifolia.）醋酸乙酯提取物中开环异落叶松树脂酚[（-）-secoisolariciresinol,SECO]含量和总木脂素含量。方法：采用95%乙醇对山沉香加热回流提取,采用醋酸乙酯萃取。利用高效液相色谱法,测定山沉香醋酸乙酯提取物中SECO含量。色谱柱：Agilent C₁₈色谱柱,流动相：甲醇-0.1%甲酸溶液,流速：0.5 mL·min^-1,柱温：30℃,检测波长：280 nm。利用紫外-可见分光光度法,以SECO为标准品,于280 nm波长处测定山沉香醋酸乙酯提取物中总木脂素含量。结果：高效液相色谱法中,SECO质量浓度在0.028~0.280 mg·mL^-1范围内与峰面积线性关系良好,线性方程为：Y=2 838.6X+59.354（r²=0.999 7）;平均加样回收率（n=9）为99.27%,RSD为1.55%（n=9）。紫外-可见分光光度法中,SECO质量浓度在0.002 6~0.084 0 mg·mL^-1范围内与吸光度线性关系良好,线性方程为：Y=21.393X+0.03（r²=0.999 4）;平均加样回收率为100.06%,RSD为1.12%（n=9）。结论：该方法操作简便可靠,适用于山沉香醋酸乙酯提取物中总木脂素及有效成分的含量测定及质量控制。     

微柱离心-高效液相色谱法在测定注射用紫杉醇（白蛋白结合型)包封率中的应用

目的：采用微柱凝胶离心法（Micro-Column gel centrifugation，MCGE）-RPHPLC联用技术测定注射用紫杉醇（白蛋白结合型）（Paclitaxelfor Injection（Albumin Bound））的包封率。方法：采用Sephadex G-50微柱离心对样品进行前处理，分离结合型药物与游离药物。色谱条件：Pro C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-水（50∶50）为流动相，柱温30℃，流速1.0 mL·min^-1，检测波长228 nm。结果：紫杉醇在浓度范围0.000 1~0.060 1 mg·mL^-1与峰面积呈线性关系，r=0.999 9，平均回收率为98.6%，RSD为1.1%（n=9）。微柱离心法能将结合型药物与游离药物完全分离，测得注射用紫杉醇（白蛋白结合型）的平均包封率为93.6%（n=3）。结论：该方法简便快速、重复性良好，可用于测定注射用紫杉醇（白蛋白结合型）的包封率。     

同位素稀释-HPLC-ESI-MS/MS法同时测定癫痫患儿血浆中左乙拉西坦、奥卡西平活性代谢物和拉莫三嗪的药物浓度

目的：建立基于高效液相色谱串联质谱技术（HPLC-ESI-MS/MS）同时测定癫痫患儿血浆中左乙拉西坦（levetiracetam,LEV）、奥卡西平活性代谢物10-羟基卡马西平（monohydroxy-carbazepine,MHD）和拉莫三嗪（lamotrigine,LTG）浓度的方法。方法：样品经沉淀蛋白法进行前期处理,分别以LEV-D6、奥卡西平-D4、LTG-¹³C3-D3为内标,采用Phenomenex Kinetex^®EVO C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,26 μm）,以0.07%甲酸-1 mmoL乙酸铵-水（A）和甲醇（B）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1。质谱检测采用电喷雾离子源正离子模式,多离子反应监测模式扫描。考察该方法的专属性、定量下限（LLOQ）、标准曲线、残留和稀释效应、准确度精密度、基质效应和稳定性。结果：LEV和MHD的血药浓度在0.1~50 μg·mL^-1内线性关系良好（r>0.999 1）,LLOQ均为0.1 μg·mL^-1;LTG的血药浓度在0.05~25 μg·mL^-1内线性关系良好（r>0.999 2）,LLOQ为0.05 μg·mL^-1。批内和批间精密度RSD ≤ 7.0%,稳定性良好,不受正常血浆和溶血血浆（溶血程度≤ 5%）基质的影响,方法学验证均符合《中国药典》2020年版规定。结论：本方法快速、简便、稳定、经济,可应用于左乙拉西坦、奥卡西平和拉莫三嗪儿童治疗药物监测和药动学研究。     

万古霉素个体化给药辅助决策系统在重症患者中的应用

目的： 评估个体化给药辅助决策系统"pharmVAN个体化给药方案"（A系统）与"万古霉素剂量推荐和血药浓度预测系统"（B系统）对重症患者万古霉素个体化给药的应用情况。方法： 以2019年9月至12月在东部战区总医院重症医学科住院并静脉使用万古霉素的患者为研究对象进行回顾性研究。测定入组患者的稳态血药浓度,并使用上述两款决策系统预测万古霉素初始给药方案的稳态血药浓度,计算实测值与预测值之间的绝对权重偏差和相对预测误差,利用单因素和多因素Cox回归分析探讨影响绝对权重偏差的相关因素。结果： A系统和B系统分别入组23例、15例样本,A系统入组患者的实测浓度为（20.36±13.65）μg·mL^-1（1.39~58.66 μg·mL^-1）,预测稳态药物浓度是（11.81±9.14）μg·mL^-1（1.1~36.04 μg·mL^-1）,绝对权重偏差为（42.83±23.21）%,相对预测误差为（-39.04±29.37）%;B系统入组患者的实测浓度为（19.67±9.88）μg·mL^-1（5.78~41.01 μg·mL^-1）,预测稳态谷浓度是（15.72±8.65）μg·mL^-1（4.53~33.83 μg·mL^-1）,绝对权重偏差为（37.29±29.95）%,相对预测误差为（-11.75±47.32）%。单因素分析发现,A系统绝对权重偏差的影响因素包括采样天数、给药次数和药物浓度,B系统绝对权重偏差的影响因素包括年龄和肌酐清除率。再进行多因素Cox回归分析,结果未显示统计学意义,上述因素均不是影响预测性的独立危险因素。结论： A系统和B系统两款个体化给药辅助决策系统不适用于重症患者万古霉素稳态血药浓度的预测。     

拉莫三嗪在双相情感障碍治疗中剂量校正浓度影响因素分析

目的： 研究拉莫三嗪在双相情感障碍治疗中剂量校正浓度（C/D）的影响因素,为其个体化用药提供参考。方法： 回顾性收集广州医科大学附属脑科医院2019-2020年拉莫三嗪血药浓度监测数据及139例患者统计学资料,考察年龄、性别、合并疾病及合并用药对稳态谷浓度及C/D的影响。结果： 患者拉莫三嗪血药浓度均值为（4.64±3.37）μg·mL^-1,平均日剂量为（142.35±81.66）mg,患者的C/D均值为（36.06±22.97）μg·mL^-1·g^-1·d,无合并用药患者与合并丙戊酸用药患者血药浓度分别为（3.2±2.19）,（6.42±3.70）μg·mL^-1,C/D分别为（24.76±14.76）,（50.31±23.16）μg·mL^-1·g^-1·d。合并丙戊酸患者组的C/D明显大于无合并用药患者组（P<0.001）。年龄、性别、合并疾病对血药浓度和C/D无显著影响。结论： 合并丙戊酸用药可显著增加拉莫三嗪剂量校正后血药浓度,建议合并丙戊酸用药患者可实施拉莫三嗪剂量减半,同时密切监测拉莫三嗪血药浓度,减少不良反应的发生。     

基于蒙特卡洛模拟评价头孢噻肟/他唑巴坦对产ESBL肠杆科细菌不同给药方案研究

目的：探讨头孢噻肟/他唑巴坦对产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株的最低抑菌浓度（MIC）分布情况,评估头孢噻肟/他唑巴坦不同给药方案下%fT_>MIC≥50%达标率,为该药临床给药方案的筛选及优化提供参考 。方法：采用微量肉汤稀释法测定头孢噻肟单药、头孢噻肟/他唑巴坦（他唑巴坦固定质量浓度4 μg·mL^-1）及头孢噻肟/他唑巴坦（6∶1）对临床分离菌株的MIC值,计算MIC₅₀及MIC₉₀,并统计MIC的分布情况。运用蒙特卡洛模拟（MCS）计算不同给药方案下头孢噻肟/他唑巴坦达目标 PK/PD靶值的达标概率（PTA）和累积反应分数（CFR）。结果：相比与单药头孢噻肟,头孢噻肟/他唑巴坦（他唑巴坦固定质量浓度4 μg·mL^-1）及头孢噻肟/他唑巴坦（6∶1）对于实验菌株的MIC₅₀和MIC₉₀均明显降低。头孢噻肟/他唑巴坦（他唑巴坦固定浓度4 μg·mL^-1）所有给药方案下的CRF均大于90%;头孢噻肟/他唑巴坦（6∶1）仅3.0 g q8h静滴4 h和6 g q24h持续静滴给药方案下CRF大于90%。当MIC≤2 μg·mL^-1时,头孢噻肟/他唑巴坦所有给药方案均能使PTA>90%。当MIC≤8 μg·mL^-1时,q8h及24 h持续静滴方案下的PTA>90%。结论：对于国内产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株,头孢噻肟/他唑巴坦钠（6∶1）的配伍明显提高了头孢噻肟对产ESBL大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的抗菌作用。对于肾功能正常患者,当MIC≤2 μg·mL^-1时,可以选择头孢噻肟/他唑巴坦2 g q12h给药方案,对于高MIC菌株,日剂量不变时,q8h方案比q12h方案更具优势。     

气相色谱-质谱联用法测定不同厂家盐酸二甲双胍缓释片中N-亚硝基二甲胺的含量

目的：建立气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）法测定不同厂家盐酸二甲双胍缓释片中N-亚硝基二甲胺（N-nitrosodimethylamine,NDMA）的含量。方法：采用GC-MS法,标准曲线法计算盐酸二甲双胍缓释片中NDMA的含量。色谱柱为Agilent VF-WAXms （30 m×0.25 mm,0.25 μm）,程序升温,以多反应监测（MRM）模式进行离子检测。结果：该方法线性范围为0.25~50.00 ng·mL^-1,r=0.999 9;平均加标回收率为107.79%,RSD为3.53%;检出限为0.25 ng·mL^-1。采用该方法对市面上31家企业共75批次的盐酸二甲双胍缓释片进行NDMA含量测定,2018年、2019年和2020年批次中均存在一定比例的超限。结论：该方法操作简单、灵敏、准确,适用于盐酸二甲双胍缓释片中NDMA的检测,可为其质量控制提供参考。     

全自动二维高效液相色谱测定霉酚酸血药浓度的研究

目的：采用全自动二维液相色谱（2D-LC-UV）建立测定霉酚酸（MPA）血药浓度的方法,并应用于临床。方法：样品去除蛋白后直接进样,待测物在一维柱AstonSC2T （3.5 mm×50 mm,5 μm）上初步分离,通过中间柱Aston SBR（3.0 mm×10 mm,5 μm）截取保留,转移到二维柱Aston SBX4（4.6 mm×150 mm,5 μm）上进一步分离。一维流动相为MPA-1A移动相,流速0.8 mL·min^-1;二维流动相为MPA-2A移动相,流速1.2 mL·min^-1;柱温40℃;紫外检测波长304 nm。结果：在所建立的色谱条件下,霉酚酸与各杂质分离良好,在0.32~25.03 μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,可在13 min内完整出峰,方法回收率高于95%;日内、日间的精密度RSD值均小于5%;稳定性试验RSD小于5%。结论：本方法简便快速、结果准确、稳定性良好、自动化程度高、检测成本低,适用于临床霉酚酸快速检测。