慢性淋巴细胞白血病外周血T细胞亚群及免疫球蛋白研究

 目的　分析慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者的免疫状态及其与疾病分期的关系。方法　应用流式细胞术（FCM）分析60例B-CLL患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，用免疫速率比浊法分析其中37例患者血清中IgG、IgA和IgM的变化，比较各Binet分期患者免疫功能的变化。结果　与正常对照组相比，60例B-CLL患者外周血中CD+3、CD+4和CD+8细胞比率均明显降低（P＜0.01），Binet B、C期组患者CD+4／CD+8比值也明显低于Binet A和正常对照组（P＜0.01）。37例B-CLL患者中有21例患者（56.8 %）出现有免疫球蛋白（Ig）减低的情况。Binet C期组Ig减低发生率高于Binet A和B期（P＜0.05），Binet C期组IgG、IgA、IgM的平均水平明显低于Binet A和B期组（P＜0.05）。结论　CLL患者存在细胞免疫和体液免疫功能的低下，与CLL病程密切相关。检测CLL患者外周血T细胞亚群及Ig水平的变化，对了解CLL免疫功能状态，从而判断病情具有重要作用。     

基于基因组突变数据分析肝癌预后分子标志物

目的  探讨肿瘤突变负荷（tumor mutational burden，TMB）及关键信号通路的基因变异与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者预后的相关性。 方法 从TCGA数据库及cBioPortal数据库schulze2015队列分别获取376例和243例HCC患者全外显子测序数据，从ICGC数据库获取JP队列 394例及FR 队列250例HCC患者全基因组测序数据。采用生存分析研究TMB、关键信号通路的基因变异与HCC患者预后的关系。结果 TCGA队列、JP队列、schulze2015队列和FR队列中，对数转换后的TMB与年龄均呈正相关（P<0.001）；在schulze2015队列中，对数转换后的TMB与肿瘤大小呈正相关（r=0.204，P=0.002）。在TCGA队列中，与低TMB组比较，高TMB 组HCC患者的OS（P<0.001）及DFS（P=0.088）均明显降低，高TMB组HCC患者的死亡风险是低TMB组的2.156倍（P<0.001）。JP队列和FR队列均未发现TMB与OS及DFS有统计学意义。TCGA队列、JP队列和FR队列中，细胞周期调控通路基因变异的HCC患者中位DFS和中位OS均低于无变异的患者（P<0.05），而复发风险和死亡风险均高于无变异患者（P<0.05）。结论 肿瘤突变负荷高和细胞周期调控通路的基因变异的HCC患者预后较差。     

PES1对肝细胞癌预后和肝癌BEL-7402细胞生长的影响

目的 探讨pescadillo核糖体生物发生因子1（pescadillo ribosomal biogenesis factor 1，PES1）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）组织中的表达及其对肝癌BEL-7402细胞生长的影响。方法 采用免疫组化法检测HCC癌组织和癌旁正常组织中PES1的表达。肝癌BEL-7402细胞转染PES1小干扰片段后，采用Western blot检测PES1、CDK4、CDC25A蛋白表达，MTS法检测细胞生长情况，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果 95例HCC癌组织中，PES1表达阳性率高于癌旁正常组织（90.5% vs 72.6%，χ²=10.122，P=0.001）；癌组织中PES1染色评分高于癌旁正常组织的［（6.30±3.56） 分 vs （2.10±1.64） 分，t=10.423，P<0.001］。PES1表达与HCC患者的肿瘤大小、门脉癌栓和TNM分期有关（均P<0.05）；PES1高表达患者总生存期较PES1低表达患者短（P<0.05）。转染PES1小干扰RNA组的细胞与对照组相比，细胞生长受抑制（P<0.01），G1期细胞比例增加，S期细胞比例减少（均P<0.01），CDK4、CDC25A蛋白表达下调，但细胞凋亡未见明显变化。结论 HCC组织中PES1表达上调，且与患者预后相关。PES1可通过上调CDK4、CDC25A蛋白表达，加快细胞G1/S期的转换，促进肝癌细胞生长。     

原发性肝癌患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞的检测及意义

探讨CD4+CD25+CD127low调节性T细胞（Tregs）在原发性肝细胞性肝癌（HCC）患者外周血中的变化及其临床意义。方法:采集40例乙型肝炎病毒（HBV）相关的HCC患者［巴塞罗那临床肝癌（BCLC）分期A期患者7例、B期患者8例、C期患者20例、D期患者5例］、35例慢性乙型肝炎（CHB）患者及28例正常健康人的外周抗凝血,应用CD4（PE-CY5）、CD25（FITC）、CD127（PE）三种特异性荧光抗体标记后,通过流式细胞术对CD4+CD25+CD127lowTregs水平进行三色荧光抗体检测。结果:HCC患者外周血CD4+CD25+CD127lowTregs占CD4+T细胞的百分比显著高于正常健康人（P<0.001）和CHB患者（P=0.017）,CHB患者外周血CD4+CD25+CD127lowTregs占CD4+T细胞的百分比高于正常健康人（P=0.035）;HCC中BCLC分期为C期的患者外周血CD4+CD25+CD127lowTregs占CD4+T细胞的百分比显著高于A期患者（P=0.020）和B期患者（P=0.019）。结论:CD4+CD25+CD127lowTregs水平异常增高可能是HCC免疫逃逸的一个重要机制,且其变化水平与临床病情的进展存在一定的相关性。      

埃克替尼与吉非替尼治疗EGFR突变型晚期肺腺癌的临床疗效比较

目的 比较埃克替尼和吉非替尼治疗表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）突变型晚期肺腺癌患者的临床疗效、不良反应及用药后机体免疫功能状态。方法 选取2012年1月至2019年12月于广西医科大学附属肿瘤医院经病理活检证实为肺腺癌的176例EGFR突变阳性患者作为研究对象,按靶向治疗方案分为埃克替尼组和吉非替尼组,并依据RECIST 1.1标准对患者进行疗效评估;比较两组患者不良反应发生情况、细胞免疫和体液免疫指标的差异。结果 埃克替尼组和吉非替尼组客观缓解率（60.0% vs 63.2%）,疾病控制率（94.0% vs 92.1%）,中位无进展生存期（9.5个月 vs 8.9个月）,中位总生存期（21.7个月 vs 18.5个月）,药物总体不良反应发生率（31.0% vs 34.2%）比较,差异均无统计学意义（均P>0.05）;两组细胞免疫指标（CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞、CD8+T细胞、CD4⁺/CD8⁺、自然杀伤细胞）和体液免疫指标IgM比较,差异均无统计学意义（均P>0.05）;但吉非替尼组体液免疫指标IgG和IgA水平高于埃克替尼组（均P<0.05）。结论 埃克替尼和吉非替尼在治疗EGFR突变型晚期肺腺癌患者的临床疗效、不良反应相似。用药后两组细胞免疫功能亦相似,但吉非替尼组治疗后体液免疫IgG和IgA水平略优于埃克替尼组。     

TACE联合靶向、免疫治疗在BCLC B/C期肝细胞癌中的应用

经动脉化疗栓塞(TACE)是巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期系统B期肝细胞癌(HCC)的标准治疗方法。但TACE存在一定的局限性, TACE联合系统治疗或许更能使BCLC B/C期HCC患者获益。探索TACE分别联合靶向治疗、免疫治疗及靶向+免疫治疗BCLC B/C期HCC的疗效及安全性, 将为HCC的临床治疗提供新的思路。     

YEATS2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨YEATS2在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达及其与预后的关系。方法 收集我院2010年1月至2014年1月112例手术切除的HCC癌组织和癌旁组织石蜡标本，采用Real-time PCR检测HCC癌组织及癌旁组织中YEATS2 mRNA的表达，Western blot和免疫组化染色检测YEATS2蛋白水平，免疫荧光染色检测YEATS2在HCC癌组织中的表达定位，并分析YEATS2与HCC患者临床病理特征和预后的关系，同时采用TCGA数据库数据验证。结果 Real-time PCR结果显示，YEATS2 mRNA在HCC癌组织中的表达较癌旁组织上调（P<0.001）；Western blot检测结果显示，YEATS2在约66.67%（12/18）的HCC癌组织表达升高；免疫组化染色分析发现，约71.43%（80/112）的HCC患者中YEATS2表达上调，其表达与TNM分期明显相关（P<0.001）；YEATS2主要在HCC癌组织细胞核中表达；多因素分析结果显示YEATS2高表达是患者不良预后的独立危险因素（HR=2.204，95%CI：1.388~3.500，P=0.001）。TCGA中HCC队列分析也表明YEATS2高表达的患者OS更差（HR=1.751，95%CI:1.107~2.770，P=0.017）。 结论 YEATS2在HCC组织中高表达，且与患者不良预后相关。     

ACCα在肝细胞癌中的表达及对细胞生长的影响

目的  探讨乙酰辅酶A羧化酶α（acetyl CoA carboxylase alpha，ACCα）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma ，HCC）中的表达及其在HCC细胞生长中的调控作用。 方法 采用qRT-PCR及Western blot法检测30例HCC患者癌组织及其相应癌旁正常组织中ACCα mRNA与蛋白的表达。采用siRNA下调HCC SNU-368细胞中ACCα的表达后，采用MTS法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡情况。结果 qRT-PCR及Western blot结果显示，HCC组织中ACCα mRNA与蛋白表达水平均显著高于癌旁正常组织（3.26±0.81 vs 1.88±0.64，P=0.021；3.41±0.71 vs 1.74±0.54，P=0.019）。下调ACCα表达后，HCC SNU-368细胞的增殖能力降低（P<0.01），细胞周期进程被抑制（P<0.05），细胞凋亡比例增多（P<0.01）。 结论 HCC细胞SNU-368中ACCα表达显著上调，可能通过诱导细胞周期进程并抑制细胞凋亡促进HCC细胞增殖，ACCα可作为HCC治疗的潜在靶点。     

核苷类似物联合TACE治疗HBV相关性肝细胞癌的预后分析

目的 比较肝切除术后核苷类似物联合经肝动脉化疗栓塞（TACE）与单用TACE治疗对提高乙型肝炎病毒（HBV）相关性肝细胞癌（HCC）患者总生存率的效果。方法 回顾性分析345例行肝切除术的HBV相关性HCC患者资料,其中术后接受核苷类似物抗病毒联合TACE治疗者89例（观察组）,术后单用TACE治疗者256例（对照组）。采用倾向性匹配法均衡组间混杂因素的影响。结果 观察组的90天死亡率（2.2%）稍低于对照组（3.1%, P=0.672）。同时,观察组患者的1、3、5年累积总生存率显著高于对照组,分别为93%、66%、45%和90%、54%、36%（P=0.014）。倾向性分析显示,观察组患者的1、3、5年累积总生存率为93%、67%和45%,亦显著高于对照组患者的87%、46%和24%（P<0.001）。基于肿瘤分期的亚组分析显示,巴塞罗那临床肝癌分期A/B期的患者中,观察组患者的累积总生存率显著优于对照组（P=0.011）。结论 HBV相关性HCC肝切除术后核苷类似物联合TACE治疗有利于降低存在高危复发因素且术前HBV DNA≥103 IU/ml患者围手术期死亡率并提高其总生存率。     

TIPIN分子与肝细胞癌预后的关系及其生物学作用机制

目的 分析节律分子Timeless（TIM）相互作用蛋白（TIM interacting protein,TIPIN）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其与患者预后的关系,并探究TIPIN对肝癌细胞增殖的影响及可能的生物学作用机制。方法 通过UALCAN数据库分析TIPIN在HCC组织中的表达情况及其与HCC患者预后的关系。将siTIPIN及其阴性对照序列分别转染至肝癌MHCC⁃97H细胞,采用qRT⁃PCR和Western blot检测TIPIN的表达情况,采用MTS实验和平板细胞克隆形成实验检测TIPIN表达对细胞增殖的影响。利用UALCAN数据库对TIPIN进行GO和KEGG富集分析,以及TIPIN与TIM、TP53的关联分析。 结果 UALCAN数据库分析结果显示,TIPIN在HCC组织中的表达明显高于正常肝组织（P<0.01）;TIPIN高表达患者的总生存期和无病生存期均明显短于TIPIN低表达患者（P=0.037,0.021）。与正常肝细胞HL7702相比,肝癌细胞MHCC⁃97H、MHCC⁃97L、HepG2、BEL⁃7402中TIPIN的mRNA和蛋白表达水平均明显升高（均P<0.01）。MTS和克隆形成实验结果显示,沉默TIPIN表达后肝癌MHCC⁃97H细胞的增殖和平板细胞克隆形成能力明显受到抑制（均P<0.05）。GO和KEGG富集分析结果显示,TIPIN可能通过调控细胞分裂、DNA复制、细胞周期的相互作用通路促进肝癌的恶性进程。Pearson相关性分析结果显示,TIPIN分子与TIM表达呈明显正相关（r=0.67,P<0.01）。TIPIN在TP53突变HCC患者中的表达显著高于TP53野生型HCC患者（P<0.01）。 结论 TIPIN在肝癌中表达上调,且与患者不良预后密切相关,沉默TIPIN可抑制肝癌细胞增殖。TIPIN在肝癌中可能通过与TIM形成复合体或调控TP53信号通路发挥其生物学作用。     

Clp蛋白酶复合体亚基ClpX在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨Clp蛋白酶复合体的ATP依赖性亚基（ATP-dependent Clp protease ATP-binding subunit，ClpX）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC） 组织中的表达及临床意义。方法 收集2013年1月至2014年12月于空军军医大学西京医院肝胆外科行根治性肝切除术的166例HCC患者癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组化法检测HCC癌组织及相应癌旁正常组织中ClpX的表达，并分析ClpX蛋白表达与HCC患者临床病理特征及预后关系。在HCC癌细胞株SNU739中分别干涉或过表达ClpX后，采用MTS法检测细胞增殖能力。结果 ClpX在HCC癌组织中的表达水平低于癌旁正常组织（P＜0.001），ClpX高表达的HCC患者总生存期优于低表达患者（P=0.009）。ClpX表达水平与TNM分期相关（P=0.008），ClpX低表达是影响HCC患者总生存期的独立危险因素（P=0.046）。干涉ClpX表达后，SNU739细胞增殖能力较对照组增强（P＜0.001）；而过表达ClpX后，细胞增殖能力降低（P＜0.001）。结论 ClpX在HCC癌组织中呈低表达，且低表达患者预后更差；下调ClpX可促进细胞增殖，ClpX可作为HCC患者潜在的预后标志物。     

放射性肺炎患者血清C-反应蛋白（CRP）和体液免疫功能变化及意义

目的：探讨放疗后发生放射性肺炎患者血清CRP和体液免疫功能变化及意义。方法：用自动生化分析仪INMAGE测定血清CRP和免疫球蛋白IgG、Iga、IgM及补体3（C3）、补体4（CA．）量。放射治疗后同时间段,未发生放射性肺炎的肺癌患者作为对照组。结果：放射性肺炎和未发生放射性肺炎的患者血清中CRP分别为5．54±4．00和1．80±1．78,两者有显著差别（P〈0．001）,放射性肺炎的程度与血清CRP呈正相关（r=0．62,P〈0．01）,血清免疫球蛋白及补体两组间无显著差别。结论：放射性肺炎患者血清CRP明显升高,CRP对诊断放射性肺炎有一定的帮助。     

免疫增强型肠内营养对中国人群胃癌根治术后免疫功能影响的Meta分析

目的 系统评价胃癌根治术后患者应用免疫增强型肠内营养制剂辅助治疗对免疫功能的影响。方法 计算机检索中国知网、万方医学网、维普医学网、中国生物医学网、PubMed、EMBASE等数据库，搜集胃癌根治术后患者采用免疫增强型肠内营养制剂辅助治疗对免疫功能影响的相关临床随机对照研究，目标人群为中国人群，检索期限均为建库至2018年7月。按照文献纳入及排除标准，筛选文献、提取资料并评价纳入文献的偏倚风险，采用 RevMan 5.3 软件进行 Meta 分析。结果 共纳入10篇文献，合计534例患者，其中采用免疫增强型肠内营养制剂（试验组）283例，常规肠内营养制剂（对照组）251例，文献质量评价均为B级。细胞免疫指标Meta分析结果显示，试验组术后1 d CD3水平低于对照组 （MD=-2.06，95%CI：-3.68~-0.43，P=0.01），其余指标差异无统计学意义。术后7~10 d试验组CD3、CD4、CD4/CD8、NK水平高于对照组（MD_CD3=6.74，95%CI：1.36~12.12，P<0.01；MD_CD4=5.93，95%CI：3.68~8.19，P<0.001；MD_CD4/CD8=0.53，95%CI：0.33~0.73，P<0.001；MD_NK=1.40，95%CI：0.05~2.76，P<0.05），两组CD8水平差异无统计学意义（MD=2.00，95%CI：-2.87~6.88，P=0.42）。体液免疫指标Meta分析结果显示，术后1 d试验组和对照组IgA、IgM、IgG水平差异均无统计学意义，术后7~10 d试验组IgA、IgM、IgG水平均高于对照组（MD_IgA=0.33，95%CI：0.24~0.41，P<0.001；MD_IgM=0.21，95%CI：0.14~0.27，P<0.001；MD_IgG=1.91，95%CI：1.11~2.72，P<0.001］。 结论 胃癌根治术后患者采用免疫增强型肠内营养制剂7~10 d后在改善患者免疫功能中较常规肠内营养制剂有优势，但术后1 d效果不明显。     

巴塞罗那（BCLC）B/C期肝癌患者术前抑郁相关因素分析及对免疫功能的影响

目的:探讨巴塞罗那（BCLC）B/C期肝癌患者术前抑郁的相关因素及对免疫功能的影响。方法:对160例BCLC-B/C期肝癌患者术前采用一般资料调查表、医院焦虑抑郁量表（HADS）、患者健康问卷9（PHQ-9）和NＲS疼痛数字评价量表进行问卷调查,用logistics回归分析BCLC-B/C期肝癌患者术前不同抑郁程度（无抑郁、轻度抑郁、中重度抑郁）的相关因素;同时测定IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、C反应蛋白（CRP）、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4+/CD3+CD8+、CD3-CD16+CD56+（NK细胞）、CD19+、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）含量。结果:160例BCLC-B/C期肝癌患者中抑郁的发生率为64.4%（103/160）,其中无抑郁57例（35.6%）、轻度抑郁63例（39.4%）、中重度抑郁40例（25%）。回归分析显示抑郁与年龄、社会支持、经济状况、疼痛相关,差异有统计学意义（P<0.05）;随着抑郁程度的增加,患者NLR、CRP、hs-CRP、CD3+CD8+含量呈递增趋势,CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD4+/CD3+CD8+、CD3-CD16+CD56+含量呈递减趋势,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:BCLC-B/C期肝癌患者术前抑郁发生率较高,年龄、社会支持、经济状况、疼痛是患者术前抑郁的相关因素,抑郁能引起患者免疫功能低下,应寻找针对性的个体化心理干预措施,改善患者抑郁情绪和免疫功能。     

老年食管贲门癌术后早期肠内营养对体液免疫功能的影响

目的 研究早期肠内营养(EEN)对老年食管贲门癌患者术后体液免疫功能恢复的影响.方法随机将64例老年食管贲门癌术后患者分为EEN组34例,施行EEN治疗；N-EEN组30例,按早期单纯肠外营养治疗；分别对2组术后血清IgA、IgG、IgM进行统计分析.结果术后第9天EEN组血清IgA、IgG、IgM均恢复并超过术前水平...     

CK-20和LGALS4在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的 探讨角蛋白-20（cytokeratin-20，CK-20）和半乳糖凝集素4（galectin-4，LGALS4）在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义。方法 选取2010年1月—2014年6月在张家口市第一医院手术且经病理证实的甲状腺乳头状癌患者128例为研究对象，免疫组化检测癌组织及相应癌旁正常甲状腺组织CK-20、LGALS4的表达；ROC曲线分析CK-20、LGASL4对甲状腺乳头状癌的诊断价值；多因素Cox回归分析影响患者无病生存期（disease-free survival，DFS）的因素。结果 甲状腺乳头状癌组织中CK-20阳性表达率高于癌旁正常组织，而LGALS4阳性表达率低于癌旁正常组织（均P＜0.05）；CK-20高表达、LGALS4低表达均与肿瘤远处转移、TNM分期、淋巴结转移有关（均P＜0.05）；CK-20与LGALS4表达水平呈负相关（r=-0.531，P＜0.001）；CK-20、LGALS4联合诊断甲状腺乳头状癌的曲线下面积、敏感度均优于其单独诊断（均P＜0.05）；CK-20阳性表达患者5年DFS低于阴性表达患者，而LGALS4阳性表达患者5年DFS高于阴性表达患者（均P＜0.05）；CK-20高表达、远处转移、淋巴结转移是DFS的独立危险因素，而LGALS4高表达是DFS的保护因素（均P＜0.05）。结论 甲状腺乳头状癌组织中CK-20与LGALS4表达呈负相关，CK-20高表达预示预后不良，而LGALS4高表达预示预后良好，两者有望成为监测甲状腺乳头状癌预后的生物标志分子。