反相高效液相色谱法测定板蓝根注射液中靛玉红的含量

目的：建立板蓝根注射液中靛玉红的含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法，固定相为AHTC C18柱，以0．02mol．L^-1磷酸二氢钠-甲醇（25：75）为流动相，检测波长为280nm。结果：靛玉红平均回收率为97．35％，RSD为1．49％。结论：该法操作简便、准确，可作为板蓝根注射液中靛玉红的含量控制方法。     

七叶皂苷钠对小鼠急性淋巴白血病L1210细胞的体内外作用研究

目的 探讨七叶皂苷钠对小鼠急性淋巴白血病L1210细胞的体外增殖抑制作用和体内抗白血病作用.方法 采用MTT法观察七叶皂苷钠对小鼠急性淋巴白血病细胞L1210的体外增殖抑制作用;建立L1210小鼠白血病移植模型,观察七叶皂苷钠对荷瘤小鼠生命的延长率,以及对化疗药阿霉素的增敏作用,并绘制生存曲线.结果 七叶皂苷钠(20～60 μg/mL)对L1210细胞具有一定的增殖抑制作用,作用呈时间和剂量依赖性,体外作用72 h的IC50为(24.86±2.23)μg/mL;体内实验结果显示,七叶皂苷钠中、高剂量组能明显延长荷瘤小鼠的生命期,生命延长率分别为32.3%和25.8%(P＜0.01),低剂量组对常规化疗药阿霉素具有增敏作用.结论 七叶皂苷钠能有效抑制L1210细胞体外增殖,对体内L1210白血病小鼠移植模型也具有一定的治疗效果.     

气功外气对小鼠红白血病效应初探

实验观察气功外气对体外培养的小鼠红白血病细胞系（ＭＥＬ）增殖的效应,结果证明实验组细胞的增殖受到明显的抑制。实验采用细胞培养的小鼠红白血病ＭＥＬ的抑瘤效应。以外气对ＭＥＬ瘤细胞系增殖的影响为主要观察指标。     

大戟注射液对L615白血病小鼠体内药物实验及DNA含量的检测

以大戟注射液为实验用药 ,对L6 15白血病小鼠进行了体内的药物实验研究 ,观察了细胞动力学。结果表明 ,给药组L6 15白血病小鼠的生存期明显延长 ,并阻断了S期的癌细胞     

清开灵注射液用板蓝根芦头对制剂的影响研究

目的研究清开灵注射液用板蓝根中芦头对板蓝根提取液及其制剂的影响。方法利用统计分析方法,通过测定与分析总固体、总氮、指纹图谱、腺苷、尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春情况研究板蓝根中芦头的多少对提取液及清开灵注射液的影响。结果板蓝根中芦头与总固体和总氮成正相关,与腺苷、尿苷、鸟苷含量成正相关,与(R,S)-告依春含量成负相关。随芦头重量比的增大指纹图谱相似度逐渐降低,但在25%以内对指纹图谱相似度影响不明显,可通过控制特征峰比例防止提取液及其制剂质量下降。结论板蓝根应控制芦头重量比,除指纹图谱相似度评价外应增加特征峰比例以提高质量控制精确性,并且应建立适合相应药材的专属性强的含量测定方法以降低制剂控制风险。     

槲皮素对白血病细胞杀伤作用的研究

目的:研究槲皮素对白血病细胞的杀伤作用以及诱导的凋亡研究。方法:CCK-8试剂盒检测不同浓度的槲皮素(0~100μM)对白血病K562和HL-60细胞活性的影响;Hoechst33342染色技术观察40u M槲皮素处理细胞24和48小时后细胞核形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;caspase8、9、3(半胱天冬酶)特异性抑制剂预处理K562细胞后,检测药物对细胞活性的影响;40u M槲皮素处理细胞24和48小时后,Western blot检测细胞中caspase家族蛋白8、9、3的表达情况。结果:0~100u M的槲皮素能够引起K562和HL-60细胞剂量依赖型的活性下降,40u M的槲皮素处理细胞24和48小时后,K562细胞核明显发生皱缩,引起凋亡,随着处理时间增长,凋亡率增加,处理24和48小时后细胞的凋亡率分别为(45.8±2.06)%和(83.6±1.89)%。caspase 9、3抑制剂预处理K562细胞后,槲皮素能够引起细胞活性的增加,而caspase 8抑制剂预处理后,槲皮素没有引起细胞活性的上升。Western blot检测结果表明40μM的槲皮素处理细胞后能够上调caspase 9、3蛋白的表达,而没有引起caspase 8蛋白表达量的上升,随着处理时间的增长,caspase 9、3的表达量更高。结论:槲皮素对白血病细胞具有很强的杀伤作用,并诱导细胞caspase 9、3蛋白参与的内源性通路介导的凋亡。     

生物热力学法观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞的影响

目的:观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响。方法:分离培养小鼠淋巴细胞,以生物热动力学方法观察板蓝根不同提取部位的免疫活性,并以常规离体细胞培养法进行药效学验证。结果:板蓝根水提部位、萃后部位具有明显的淋巴细胞增殖作用。有机溶剂萃取部位均具有一定的淋巴细胞增殖作用,但其活性不显著。生物热力学方法与常规药效学方法结果基本一致。结论:板蓝根不同提取部位对淋巴细胞的作用为:萃后部位>水提部位>正丁醇部位>醋酸乙酯部位>氯仿部位>石油醚部位。     

板蓝根多糖对小鼠的免疫调节作用

腹腔注射板蓝根多糖可明显增强小鼠对DNCB的迟发型变态反应,诱导体内淋巴细胞转化和增强脾细胞的NK活性。     

板蓝根提取物对小鼠免疫功能的影响

目的观察板蓝根提取物Fructopyrano-(1→4)-glucopyranose(FG)对小鼠免疫功能的影响。方法连续灌胃FG10 d后,处死小鼠,测定体质量、脾脏及胸腺重量,计算脾指数与胸腺指数,观察小鼠免疫器官重量的变化;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测试FG对小鼠非特异性免疫的影响;采用血清溶血素形成实验测试FG对小鼠体液免疫的影响。结果 FG能够增加小鼠免疫器官重量,提高巨噬细胞吞噬功能及增加B细胞产生抗体能力。结论 FG具有调节免疫功能,对非特异性免疫和体液免疫均有一定的增强作用。     

葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒作用评价

目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作用48 h后,葫芦素B以剂量依赖方式抑制SK-N-SH细胞的生长,0.143和0.716μmol.L-1葫芦素B固体脂质纳米粒对SK-N-SH细胞的抑制率分别为(34.9±4.6)%和(53.6±6.3)%,与对应浓度的葫芦B原料组的(13.2±2.3)%和(43.4±5.5)%相比较有显著性差异(P<0.05)。葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的IC50为0.508μmol.L-1,而葫芦素B原料为12.6μmol.L-1。细胞形态观察结果显示,与二甲基亚砜(DMSO)组相比较,葫芦素B原料及葫芦素B固体脂质纳米粒组的细胞密度下降,细胞体积缩小,大多数细胞形状发生改变。流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B原料可将SK-N-SH细胞抑制在S期和G2/M期,而葫芦素B固体脂质纳米粒可把SK-N-SH抑制在G2/M期。结论葫芦素B固体脂质纳米粒与葫芦素B原料药既能抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性,且前者毒性更强。     

升降散在体外抗甲型流感病毒的作用与对病毒血凝滴度的影响

目的 ,通过对升降散体外抗流感病毒作用及影响感染FMl株的小鼠肺组织中病毒血凝滴度的实验观察 ,探讨升降散抗流感病毒作用 ,为其临床治疗流感及其并发症提供实验依据。方法 :接种FMl流感病毒于MDCK细胞 ,观察升降散体外抗流感病毒作用 ;并以甲型流感病毒滴鼻感染小鼠 ,观察升降散对肺组织中病毒血凝滴度的影响。结果 :体外实验中 ,升降散对流感病毒FMl株的最小有效浓度为 1.5 6 g/ml,表明其能有效地抑制流感病毒在细胞内复制。升降散能明显降低受感染小鼠肺组织病毒血凝滴度 (P <0 .0 5 )。结论 :升降散对流感病毒在体外培养中及在鼠肺组织中的增殖有一定抑制作用。因此 ,该药可能是一种有实用价值的治疗流行感冒的有效药物。     

益气回阳注射液对心肺复苏后大鼠血及心肌ICAM-1表达的影响

目的：研究益气回阳注射液对大鼠缺氧型心脏骤停模型（CA）心肺复苏（CPR）后血及心肌细胞黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法：将50只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、肾上腺素组、益气回阳组和肾上腺素＋益气回阳组，每组10只；采用夹闭气管窒息法制作大鼠心脏骤停动物模型，造模成功后根据不同分组给予不同药物，从股静脉内注射，每5min一次，直至复苏成功，或复苏时间达到30min为止，流式细胞仪（FCM）检测血白细胞及心肌细胞ICAM-1表达量。结果：模型组ICAM-1的表达与空白组比较有显著性差异（P〈0．05）；肾上腺素组、益气回阳组以及肾上腺素＋益气回阳组血、心肌组织ICAM-1的表达受抑制，与模型组比较均有显著性差异（P〈0．05），组间比较无差别（P〉0．05）。结论：益气回阳注射液可能通过抑制血白细胞及心肌ICAM-1表达，在一定程度上减轻因复苏引起的心肌细胞的损伤。     

五海丸对体外培养肺癌细胞生长及诱导细胞凋亡的影响

目的观察中药五海丸对体外培养肺癌细胞生长的影响及其诱导肺癌细胞凋亡作用.方法应用血清药理学方法,对小鼠肺腺癌 LA795细胞株进行体外培养,予五海丸、环磷酰胺 (CTX)、顺铂 (DDP)进行干预,通过 MTTI法、流式细胞仪法、 DNA提取凝胶电泳法等对肺癌细胞生长及其凋亡指标进行测定.结果五海丸能够抑制体外培养肺癌细胞的生长,高剂量组杀伤率可达 (59 48± 9 87)%,并能够促进肺癌细胞凋亡;高剂量组凋亡指数为 (27 75± 4 15),与 CTX合用既可以降低其增殖指数,又可增加其凋亡指数.结论 五海丸能够抑制肺癌细胞生长,促进肺癌细胞凋亡,与化疗药物具有协同抑瘤作用.     

益气解毒方提取物对CNE2细胞的体内外抑瘤作用

目的观察益气解毒方提取物对鼻咽癌CNE2细胞及移植瘤的抑制作用。方法采用MTT法测定益气解毒方多糖提取物、乙酸乙酯提取物（EAE）、乙醇提取物对CNE2细胞体外增殖的影响。建立CNE2裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组、EAE组、顺铂（DDP）组和联合治疗组,分别给予生理盐水、益气解毒方EAE、DDP注射液以及EAE联合DDP注射液,12 d后检测各治疗组的肿瘤抑制率。结果益气解毒方EAE对CNE2细胞具有明显的抑制作用,并呈明显的剂量效应关系（P〈0.05）。联合治疗组能明显抑制裸鼠CNE2肿瘤的生长,抑瘤率高达56.7%,明显高于EAE组和DDP组（P〈0.01）。结论 EAE是益气解毒方中的一种有效的抗鼻咽癌肿瘤成分,EAE联合DDP对裸鼠CNE2鼻咽癌移植瘤的生长具有协同抑制作用。     

紫龙金抑制人乳腺癌细胞系MCF-7生长的体内外实验研究

目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影响;(3)17-β-雌二醇缓释药片包埋法构建MCF-7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,并检测紫龙金(实验组灌胃生药20g紫龙金/kg体重)对肿瘤生长的抑制效应。结果 (1)紫龙金降低MCF-7细胞的存活率,并呈剂量和时间依赖性;(2)紫龙金组MCF-7细胞克隆形成率显著低于对照组,且随着浓度的增加,克隆形成能力明显降低[0.75、1.5、3.0、6.0mg/mL紫龙金组细胞克隆形成抑制率分别为(12.66±1.54)%、(88.83±2.13)%、100%、100%],克隆直径也明显减小或无克隆形成;(3)紫龙金下调p-ERK1/2蛋白的表达;(4)实验组裸鼠与对照组裸鼠4周后移植瘤的平均体积分别为(0.73±0.58)cm3、(1.36±0.64)cm3,平均瘤重分别为(1.02±0.25)g、(1.66±0.09)g,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05),实验组抑瘤率为38.55%。结论紫龙金可显著抑制MCF-7细胞的体内和体外增殖、转化和致瘤性,这可能与p-ERK1/2蛋白的表达下调有关。     

葛根素通过调控PI3K/AKT信号通路影响食管鳞状细胞癌体内外生长和转移

目的:探究葛根素对食管鳞状细胞癌体内外生长和转移的影响及机制。方法:MTT实验确定葛根素给药浓度为20、40、80μmol/L,取TE-13细胞,设置空白对照组、葛根素20、40、80μmol/L给药组,CCK-8法检测细胞增殖能力、细胞划痕实验检测细胞迁移能力、细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力、软琼脂克隆形成实验检测细胞生长能力、流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期、Western blot检测细胞磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(Protein Kinase B,PKB,又称Akt)磷酸化水平;构建TE-13细胞裸鼠皮下移植瘤模型,并设置模型对照组、葛根素25mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg灌胃给药组,检测给药期间小鼠瘤体积变化,给药结束后取肿瘤组织称重、Western blot检测瘤组织中PI3K和Akt磷酸化水平,取肺组织拍照,苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE staining)检测肺组织肿瘤转移情况。结果:相较于空白对照组,葛根素20、40、80μmol/L组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著下降、克隆形成数目显著减少、细胞凋亡显著增加、细胞周期显著阻滞、PI3K和Akt磷酸化水平明显降低(P <0. 05);相较于模型对照组,葛根素25、50、100μmol/L灌胃给药组小鼠瘤体积生长缓慢、肺组织转移节点显著减少、肿瘤组织PI3K和Akt磷酸化水平明显降低(P <0. 05)。结论:葛根素能够抑制食管鳞状细胞癌的体内外生长和转移,其机制可能为抑制PI3K/AKT信号通路。     

清开灵体外抗氧化活性与机制研究

目的:本文旨在研究清开灵注射液的抗氧化活性。方法:通过建立XO/XTT氧自由基生成体系和黄嘌呤氧化酶致尿酸生成反应,以及次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶诱导的细胞氧化损伤模型,分别研究不同浓度清开灵的自由基清除能力,对黄嘌呤氧化酶活性的干预作用和对氧化损伤细胞的保护作用。结果:清开灵具有良好的清除氧自由基作用,并可显著抑制黄嘌呤氧化酶活性,对细胞氧化损伤模型显示明显的保护作用,可显著提高细胞生存率。结论:清开灵注射液具有良好的抗氧化活性,该作用与清除自由基和抑制黄嘌呤氧化酶活性有关。     

环孢素A-Eudragit S100纳米粒的制备及其体内外评价

 目的制备环孢素A-Eudragit S100纳米粒,并考察相关特性;以新山地明(Neoral)为参比制剂,考察大鼠体内药动学及相对生物利用度。方法以溶剂-非溶剂法联合冷冻干燥技术制备环孢素A-Eudragit S100纳米粒(CyA-NP)胶体溶液及其冻干粉末(Fd-CyA-NP);动态透析法研究其体外释药动力学;以新山地明(Neoral)为对照,大鼠分别灌胃3种制剂后,HPLC测定全血中的CyA浓度,3P97程序计算药动学参数。结果CyA-NP和Fd-CyA-NP的平均粒径分别为(44.8±3.2)和(55.7±3.6)nm;包封率大于90%;电镜下呈均匀规则的圆球形;且2种制剂在pH>6.0的释放介质中释药速率明显增大,具有显著pH敏感性;3种制剂均符合二室模型,CyA-NP和Fd-CyA-NP的相对生物利用度分别为Neoral(的162.1%和130.1%。结论以pH敏感性材料Eudragit S100为载体有望开发成一种高效、低毒的环孢素A纳米制剂。     

小儿解感颗粒体内外抗呼吸道合胞病毒实验研究

目的:研究小儿解感颗粒体内外对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的影响及意义。方法:体外实验用人喉癌细胞(Hep-2)培养法,以治疗指数(TI)为研究指标,以利巴韦林为阳性对照药,研究不同剂量小儿解感颗粒对RSV的抑制作用;体内实验选用BALB/c小鼠,运用肺指数检测法、HE染色法、ELISA检测法研究该药体内抗RSV作用。结果:体外实验,小儿解感颗粒TC50=1.65 mg/mL,TC0=1.25 mg/mL,TI=5.06;体内实验,与模型组相比,小儿解感颗粒高、中剂量组肺指数显著下降(P0.05);HE染色观察得出小儿解感颗粒高剂量组与正常组形态最为接近;ELISA检测得出,用药组白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量随剂量的增大而减少,且均比利巴韦林组效果显著,小儿解感颗粒高剂量组TNF-α含量明显降低(P0.05)。结论:小儿解感颗粒体外抑制RSV作用明显,体内对RSV引起的疾病有明显治疗作用。