HIV感染者中ELISA法与RT-nPCR法检测HCV的比较

目的 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录巢式聚合酶链反应(RT-nPCR)检测HIV感染者血清中抗-HCV与HCV RNA的结果是否有差异.方法 采用ELISA法和RTn-PCR法对300例HIV感染者的血清进行抗-HCV与HCV RNA检测.结果 在300份血清标本中,抗-HCV与HCV RNA均为阳性者114份,占38％ (114/300);抗-HCV阴性、HCV RNA阳性者41份,占13.67％ (41/300);抗-HCV阳性、HCV RNA阴性者32份,占10.67％ (32/300);两者均阴性113份,占37.67％ (113/300);两种方法检测结果的一致率为75.67％,两种方法结果的差异无统计学意义(x2=1.11,P＞0.05).结论 ELISA法与RTn-PCR法在HIV感染者中诊断丙型肝炎其结果差异无统计学意义,但二者联合检测可提高检出率,在HIV感染者中存在免疫抑制造成血清学结果假阴性率较高,因此,对HIV感染者中抗-HCV阴性者应进行HCV RNA检测,降低漏诊率.     

HCV RNA检测在献血者筛选中的应用分析

目的　探讨我国目前采供血模式下将HCVRNA检测用于献血者筛选的可行性与必要性。　方法　采用HCV核酸扩增酶免检测技术检测 4170例抗 -HCV阴性及 76例抗 -HCV阳性献血者血清HCVRNA。　结果　 4170例抗 -HCV阴性血清中未检出HCVRNA阳性 ,76例抗 -HCV阳性者中 ,两种试剂检测抗 -HCV阳性者HCVRNA检出率 48.0 % ,单试剂检测抗 -HCV阳性者HCVRNA检出率 9.80 %。　结论　HCVRNA检测目前尚不能完全取代血清学检测用于献血者筛选。     

两种不同基因型NS3抗原在HCV感染者血清学诊断中的应用

目的 研究两种不同基因型NS3抗原在HCV感染者血清学诊断中的应用价值. 方法 分别用两种不同基因型NS3单片段抗原、两种单片段抗原的混合物(MIX)作为包被抗原,对血清标本进行ELISA测定;应用反转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)检测血清中HCV RNA,数据以X2检验. 结果 85份抗-HCV阳性血清以不同基因型HCV NS3单片段抗原检测,阳性检出分别为52份(Ⅰ型)和50份(Ⅵ型),X2=0.06,P>0.05;100份健康成人体检血清以此两种抗原检测均为阴性;90份抗-HCV阳性血清经MIX抗原检测,阳性检出为65份;51份抗-HCV阳性血清经RT-nPCR检测,29份阳性. 结论 HCV不同基因型NS3编码区抗原片段有不同的抗原反应性,在HCV感染者的血清学诊断中将不同基因型NS3抗原混合使用可能是更好的选择.     

母亲丙型肝炎病毒血清学标志与子代受染的关系

目的：探讨母亲丙型肝炎病毒血清学标志与子代受染之间的关系。方法：选择母亲与胎儿抗-HCV均阳性者为研究对象，检测母亲与胎儿的抗-HCV、HCV RNA、抗-HCV的型别。结果：16对母亲与胎儿抗-HCV均阳性，血清分型一致，其中12例母亲HCV RNA阳性，其胎儿6例阳性，4例阴性母亲的胎儿HCVRNA均阴性，结论：母亲HCVRNA阳性其子代受染率为50%。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用价值

目的将HCV核心抗原检测与HCV RNA PCR法和抗-HCV检测进行比较,评估HCV核心抗原检测的临床应用价值。方法采用ELISA法检测121份怀疑为HCV感染患者血清中的HCV核心抗原,并以HCV RNA PCR法和抗-HCV检测结果作为比较。结果121份样本中,PCR法测HCV RNA,阳性56例,阴性65例,ELISA法测HCV核心抗原,阳性52例,阴性69例,ELISA法测抗-HCV,阳性44例,阴性77例;HCV RNA PCR、HCV核心抗原、抗-HCV阳性率分别为46.28%、42.97%、36.36%。同HCV RNA PCR检测结果比较:HCV核心抗原检测符合率90.08%、假阳性率3.31%、假阴性率6.61%;抗-HCV检测符合率81.81%、假阳性率4.13%、假阴性率14.05%。结论HCV核心抗原检测与PCR检测的符合率较高。说明PCR法与HCV核心抗原检测都可以对抗-HCV出现前的感染进行早期诊断,从而缩短窗口期。     

分娩方式对丙型病毒性肝炎母婴垂直传播的影响

目的 探讨丙型肝炎孕妇分娩方式对其新生儿丙型肝炎病毒(HCV)感染的影响,以降低新生儿HCV感染.方法 2010年1月-2011年12月行常规产前检查孕妇10 843例,筛查血清抗-HCV;凡抗-HCV阳性者列入研究对象,进行血清HCV-RNA检测,随访跟踪至产后,并对其新生儿抽取血样行HCV-RNA检测.结果 孕妇丙型肝炎感染率为1.42％,HCV-RNA阳性者66.88％,HCV母婴传播率为17.48％;HCV-RNA阴性者33.12％,无1例新生儿感染;抗-HCV阳性孕妇分娩方式与HCV母婴传播无关;HCV-RNA阳性孕妇剖宫产组HCV母婴传播率低于阴道分娩组(P＜0.05);HCV高病毒载量(HVL,HCV-RNA≥2.5×109拷贝/L)孕妇HCV母婴传播率高于非HVL组孕妇(P＜0.05),HVL孕妇分娩方式与新生儿HCy感染有关(P＜0.05),非HVL丙型肝炎孕妇的分娩方式与新生儿HCV感染无关.结论 仅抗-HCV阳性的孕妇,分娩方式不影响HCV母婴传播率,HCV-RNA阳性的孕妇,特别是HVL的丙型肝炎孕妇,剖宫产能降低HCV母婴传播,可适当放宽剖宫产手术指征.     

丙肝患者HCV-RNA病毒载量和ALT浓度的关系研究

目的研究丙肝患者血清HCV-RNA含量和ALT浓度的关系。方法采用荧光定量PCR法检测296例疑似HCV感染患者的血清HCV-RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪测定ALT。结果296例血清标本中,HCV-RNA和抗-HCV均阳性155例,HCV-RNA阳性而抗-HCV阴性的9例,HCV-RNA阴性而抗-HCV阳性的67例。HCV-RNA含量和ALT浓度水平相关性不显著。结论HCV-RNA和抗-HCV的检测是诊断HCV-RNA感染的重要指标。但HCV-RNA含量和ALT浓度水平无明显相关。     

自制抗-HCV诊断试剂评价体系的建立

目的建立ELISA法抗-HCV诊断试剂评价体系,筛选出适合本地区丙肝流行特征的的献血员抗-HCV检测策略。方法采用重组免疫印迹试验(RIBA)对献血员中抗-HCV筛查阳性或处于检测高值阴性的441份血清标本进行确认,选取部分阳性、高值阴性血清,建立抗-HCV ELISA试剂评价体系,并评价8种试剂的灵敏度、特异度和一致率等。结果构建了抗-HCV诊断试剂参考评价体系,其中24份阳性系列血清包含多种RIBA试验阳性条带组合;24份阴性系列血清中有8份属于含干扰物质的高值阴性标本;并建立浓度梯度稀释系列标本用于灵敏度评价。在评价体系中8种抗-HCV ELISA试剂检测一致率分别为83.33%、85.42%、87.50%、87.50%、89.58%、93.75%、89.58%和79.17%,应用双抗原夹心法的6号试剂灵敏度检测值明显高于其他试剂(P0.05)。结论自制抗-HCV ELISA诊断试剂评价体系适用于实验室日常工作,在制定本地区筛选策略时应充分考虑试剂间的互补性,以保障血液安全。     

免疫层析法与酶联免疫吸附法检测血中HBsAg、抗-HCV、抗-HIV的比较

〔目的〕分析比较乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、HIV抗体(抗-HIV)的免疫层析快速试剂在实际应用中的灵敏度、特异度和准确度,为今后的工作提供参考。〔方法〕对502份健康体检血清标本同时用快速免疫层析法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV,对其灵敏度和特异度进行比较。〔结果〕与ELISA相比,502份血清标本中HBsAg金标法有2份假阴性,5份假阳性,灵敏度为99.6%,特异度为99.0%,准确度为98.6%;抗-HCV金标法无假阴性,有9份假阳性,灵敏度为100%,特异度为98.2%,准确度为98.2%;抗-HIV硒标法有2份假阳性,灵敏度为100%,特异度为99.6%,准确度为99.6%。〔结论〕金标法检测HBsAg灵敏度和特异度稍低于ELISA,有漏检和误检现象,而抗-HCV、抗-HIV快速法与ELISA比较灵敏度相当,而特异度稍低,因此,都要结合ELISA结果才可出具最终检测报告,抗-HIV的检测任何一种方法出现阳性时都要进行确认试验。     

HCV-RNA载量与抗HCV阳性率及ALT异常率的相关性分析

目的分析实时荧光PCR定量检测HCV-RNA载量与酶联免疫吸附法检测抗-HCV和丙氨酸转氨酶(ALT)水平之间的相关性。方法采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术和酶联免疫吸附实验(ELISA),对258例疑似HCV感染阳性的血清检测HCV-RNA和抗-HCV,并同时检测ALT。结果 258例样本中HCV-RNA的阳性率为64.7%(167/258),抗-HCV的阳性率为67.1%(173/258),ALT异常率为56.2%(145/258)。抗-HCV阳性率和ALT异常率随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 HCV-RNA载量与抗HCV(+)和ALT异常率均呈正相关性,三者联合检测可以大大降低HCV漏诊率。     

献血员人群HCV感染状况及其输血传播的调查

采用ELISA对1572份献血员血清进行抗HCV检测,阳性率为12.15％。其中女性献血员抗HCV阳性率较男性为高、单采浆献血员者较单纯献血全血者为高,抗HCV检测阳性率随献血员年龄增长而增高。近期ALT升高的单采浆献血者血清抗HCV阳性者显著地高于无近期ALT升高史的同类单采浆献血员。结果证实严格开展献血员HCV感染者筛选将有助于输血相关性的丙肝的预防。     

武汉市美沙酮门诊治疗者丙型肝炎病毒基因分型

目的 探讨武汉市美沙酮门诊治疗者丙型肝炎病毒(HCV)及不同基因型感染状况.方法 用酶标记免疫(ELISA)法检测抗-HCV抗体,在86份抗-HCV抗体阳性的血清标本中,分别提取HCV RNA,通过逆转录巢式聚合酶链反应(RT-nested PCR)扩增C基因的羧基至E1基因的氨基端长度为474 bp的片段,测定其核苷酸序列,与GenBank中已知的HCV序列进行系谱分析,确定HCV基因型.结果 武汉市美沙酮门诊332名治疗者中抗-HCV IgG阳性率为94.3%;其中86份血清的HCV序列通过系谱显示6a型71例,占82.5%;3b 7例,占8.2%;1a 5例,占5.8%;1b 3例,占3.5%.结论 武汉市美沙酮门诊入组的吸毒者HCV感染以6a型为优势株,其次为3b,吸毒者中HCV感染率较高,且基因亚型呈现多样性.     

出入境人员丙型肝炎传染性及危险因子研究

目的了解出入境人员丙型肝炎(HCV)感染水平,研究HCV感染者的传染性及影响感染的危险因子。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查出入境人员抗-HCV,并对150份抗-HCV阳性血清采用实时荧光定量PCR法测定HCV RNA病毒载量,以性别、年龄、抗-HCV阴性、HCV RNA阴性、1∶4比例为匹配条件,选择600例为阴性对照组。采用单因素和多因素非条件Logistic回归分析。结果23781名出入境人员传染病监测体检中,检出抗-HCV阳性150例,检出率为0.63%。男女间感染HCV的几率均等;抗-HCV阳性率随年龄增长而升高,各年龄组间差异有统计学意义(χ2=86.065,P<0.001);外籍人员抗-HCV阳性率显著低于中国籍,两者差异有统计学意义(χ2=12.376,P<0.005);78.67%抗-HCV阳性者HCV RNA病毒处于复制状态,抗-HCV滴度≥1∶64感染者HCV RNA病毒载量均≥1.02×104copy/ml,各抗体滴度间病毒载量有显著性差异(χ2=136.593,P<0.001);经单因素回归分析发现,年龄、国籍、谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、直接胆红素(DBIL)、尿素(BUN)、总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)等8个因子均有统计学意义,对这8个因子进行多因素Logistic逐步回归分析,年龄、ALT、LDL等3个因子进入模型。结论78.67%出入境人员HCV感染者具有传染性,抗-HCV滴度≥1∶64指标可作为HCV具有传染性的判断指标;影响HCV感染的危险因子有年龄、国籍、ALT、AST、DBIL、BUN、CHOL、LDL等8个。     

出国移民中丙型肝炎病毒感染检测结果分析

〔目的〕探索简便而准确的丙型肝炎血清学诊断方法,并了解一般人群中丙型肝炎病毒感染的状况。〔方法〕以酶联免疫吸附试验(ELISA)作为主要检测方法,用金标法复核,并与HCV-RNA的检测进行对比;同时对2004年7月￣2006年6月的26366份血样抗-HCV检测的结果进行分析。〔结果〕用ELISA法为主,结合金标法来判断抗-HCV的检测结果,与HCV核酸检测的方法符合率为96.0%;在出国移民中丙型肝炎病毒感染率为0.44%,且男性高于女性,其中有64.10%的人丙氯酸转氨酶(ALT)超过正常值范围。〔结论〕用ELISA与金标结合的方法判断抗-HCV检测结果,可避免单纯使用ELISA方法假阳性较高的现象;有2/3的HCV感染者中ALT超过正常值范围。     

丙型肝炎病毒总核心抗原测定方法及临床应用

目的建立丙型肝炎病毒总核心抗原（总HCV-cAg）酶联免疫测定方法,并对相关的临床样品进行测定。方法通过对样品进行裂解处理,采用酶联免疫试剂盒（ELISA）检测总HCV-cAg,对201名抗-HCV阳性者血清进行总HCV—cAg检测,同时进一步作HCV-RNA检测,其中176例采用荧光定量PCR（FQ—PCR）,25例采用逆转录PCR（RT—PCR）检测HCV．RNA。结果共检测201份血清标本,其中经PCR测定HCVRNA阳性88人份,阳性率43．8％;总HCV—cAg阳性71份,阳性率35．3％。经统计学分析,总HCV—cAg检测和HCVRNA检测的阳性率的差异无统计学意义。结论建立的总HCV—cAg酶联免疫测定方法适合临床应用,尤其适合在缺少RT-PCR或荧光定量PCR的中小医院使用。     

原位PCR检测肝组织中HCV基因状况分析

为了探讨肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的意义，使用原位ＰＣＲ检测技术，对２６例血清ＨＣＶ标志物阳性肝病者进行检测。结果显示该方法特异性强，肝组织ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６９２％，阳性信号主要定位在细胞浆，个别呈浆核型，但仍以浆型为主。肝功损害与肝细胞中ＨＣＶＲＮＡ有一定相关性。     

维持性血液透析患者丙型肝炎病毒感染的调查与分析

目的 调查与分析维持性血液透析患者丙型肝炎病毒(HCV)的感染及其亚型的分布初步状况.方法 收集210例血透患者的临床资料,采用ELISA法检测抗HCV抗体(IgM和IgG),采用RT-PCR方法检测HCVRNA,并进一步对抗HCV抗体IgM阳性的患者进行哑型测定.结果 210例血透患者中,抗HCV IgM阳性91例(43.3%),抗HCV IgG阳性87例(41.4%),HCV-RNA阳性105例(50.0%),≥1项指标阳性117例(55.7%),所有HCV指标均阳性81例(38.6%);血透患者3项HCV感染标志≥1项阳性组的肝功能指ALT、AST、LDH、γ-GT显著高于3项HCV感染标志全部阴性组;91例抗HCV lgM阳性感染者中单1型55例(64.4%),2型的9例(9.8%),3型的13例(14.2%),6型的7例(7.6%),1+6型的3例(3.2%),1+3型的4例(4.3%).结论 维持性血液透析患者丙型肝炎病毒感染率较高,其中单1型感染率最高,与国外报道大概一致.     

2006年南宁市某社区部分注射吸毒人员HBV、HCV、HIV、梅毒感染情况调查

[目的]了解南宁市社区注射吸毒人员的乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病病毒（HIV）、梅毒螺旋体（TP）感染情况。[方法]2006年3月，对南宁市某社区内的189名注射吸毒人员进行调查，采血检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体。[结果]检测189人，HBsAg阳性率为7．94％，抗-HCV阳性率为91.01％，TP感染率为4.76％，抗-HIV阳性率为19．05％，36名HIV感染者均合并感染HCV。[结论]某社区注射吸毒人员HCV、HIV、TP感染率较高。     

丙型肝炎病毒核心抗原在丙肝检测中的应用分析

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原在丙肝感染诊断中的临床应用价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对162例疑似HCV感染者血清进行HCV RNA检测,同时用ELISA法对其进行HCV核心抗原和抗-HCV检测。结果 162例样本中,抗-HCV阳性率64.20%(104/162),HCV RNA阳性率51.85%(84/162),HCV核心抗原阳性率35.19%(57/162);HCV RNA和HCV核心抗原均阳性样本57例,二者符合率为67.86%;HCV核心抗原和HCV RNA阳性而抗-HCV阴性者1例。结论 HCV核心抗原是HCV早期感染的标志之一,检测HCV核心抗原有利于HCV感染的早期诊断。