氟中毒大鼠睾丸细胞一氧化氮合酶活性变化的形态计量学研究

 目的探讨氟中毒对睾丸结构和功能损害的分子机制,研究其对睾丸一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.方法选用2月龄Wistar雄性大鼠16只,均分为实验组和对照组,实验组饮用含200 mg/L氟化钠的去离子水,对照组单纯饮用去离子水.12周后,采用NADPH-d组织化学法显示睾丸细胞NOS活性.结果与对照组相比,氟中毒大鼠睾丸间质细胞NOS阳性细胞数目明显增多(P＜0.01),NOS活性明显增强.结论氟中毒大鼠睾丸细胞NOS活性明显增强,这种变化可能是氟中毒损害睾丸结构和功能的分子机制之一.     

缺锌对大鼠睾丸细胞凋亡影响机制的研究

 目的 探讨缺锌对睾丸细胞凋亡影响的可能机制,研究其对睾丸一氧化氮合酶(NOS)活性和血清睾丸酮水平的影响.方法 选用2月龄Wistar雄性大鼠16只,均分为实验组和对照组,实验组和对照组分别喂养缺锌和常锌饲料,喂养4周后,采用原子吸收分光光度法测定血清锌含量;采用放射免疫分析法测定血清睾丸酮含量;采用NADPH-d组织化学显示睾丸细胞NOS活性;采用原位缺口平移法计数睾丸细胞凋亡数目的 变化.结果 缺锌大鼠血清锌较对照组明显降低(P<0.05);血清睾丸酮较对照组明显降低(P<0.01);睾丸间质细胞NOS阳性细胞数目(378.44±51.78No./10个曲细精管)较对照组(192.57±26.30No./10个曲细精管)明显增多(P<0.01),NOS活性反应强度明显增高;睾丸曲细精管生精细胞凋亡的数目(21.41±3.82 No./10个曲细精管)较对照组(6.94±12.44 No./10个曲细精管)明显增多.结论 锌是睾丸发育必需的营养素,缺锌可诱导睾丸生精细胞凋亡;缺锌大鼠睾丸酮水平降低,睾丸细胞NOS活性明显增强,这种变化可能是缺锌诱导睾丸细胞凋亡的重要机制.     

镉对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

 目的 探讨镉对睾丸结构和功能损害作用的分子机制,研究镉对生精细胞凋亡的影响.方法 选用2月龄Wistar雄性大鼠16只,均分为染镉组和对照组,分别自腹腔注射氯化镉(2 mg/kg)和等量生理盐水,7 d后采用原位缺口平移技术检测睾丸生精细胞凋亡数目的变化.结果 与对照组相比,染镉组大鼠睾丸生精细胞凋亡数目明显增多(P<0.01).结论 染镉后大鼠睾丸生精细胞凋亡明显增加,这种变化可能是镉影响睾丸结构和功能的分子机制之一.     

参芪合剂对大鼠睾丸NO、NOS及总抗氧化能力的影响

目的 观察参芪合剂(MGA)对大鼠睾丸组织NO、NOS及总抗氧化能力的影响.方法 40只大鼠随机分为空白对照组和MGA 40、20、10 ml·kg-1组,实验组腹腔注射相应药物,1次/d.连续给药8周后,睾丸称重并测定睾丸组织中NO、NOS和T-AOC的含量.结果 (1)MGA高、中、低剂量组大鼠睾丸重量与对照组相比无明显差异(P>0.05).(2)与对照组比较,MGA高剂量组睾丸组织中NO、NOS、T-AOC均有明显的升高,结果有显著性差异(P<0.05);MGA中剂量组仅NOS流性升高(P<0.05);MGA低剂量组睾丸组织中NO、NOS、T-AOC均无明显变化.结论 MGA可增强大鼠睾丸组织的抗氧化能力,40 ml·kg-1为有效剂量.对大鼠生育功能有一定的保护作用.     

糖尿病鼠血清及睾丸中一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的变化

目的研究1型糖尿病大鼠血清和睾丸中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的动态变化。方法63只Wistar雄性大鼠随机分为对照组(C)和糖尿病组(D)，采用四氧嘧啶腹腔注射复制糖尿病动物模型。糖尿病组分别于观察1、2、3、4、5、6、7和8周后断头处死动物，取血收集血清，取睾丸制备组织匀浆，分别测定NO含量和NOS活性。结果与对照组比较，糖尿病组血清NO含量升高，NOS活性先升后降；睾丸组织在诱模后NO含量下降，而NOS活性变化不明显，随后两者均呈升高趋势。结论糖尿病大鼠血清和睾丸NO含量和NOS和活性均有改变。     

腹腔注射环磷酰胺对小鼠精子凋亡的影响

目的观察腹腔注射环磷酰胺对小鼠精液常规和精子凋亡的影响。方法将20只雄性昆明小鼠随机分为对照组和实验组,按60 mg/kg体重给对照组小鼠腹腔注射NS,60 mg/kg体重给实验组小鼠腹腔注射环磷酰胺,每天1次,连续5 d,常规饲养观察34 d,然后对小鼠睾丸进行病理切片观察病理形态变化,对小鼠精子进行精液常规分析,对精子行FITC-AV/PI染色后用流式细胞仪检测精子凋亡率。结果实验组小鼠睾丸生精细胞、间质细胞和部分支持细胞明显变性,对照组与实验组精子密度分别为（5.20±1.34）×106/ml、（1.73±0.03）×106/ml,精子活力分别为（14.49±0.30）%、（6.64±1.88）%,精子成活率分别为（68.39±15.13）%、（39.96±4.89）%,精子凋亡率分别为8.38±0.45、14.84±1.22,两组比较有显著差异（P〈0.05）。结论腹腔注射环磷酰胺可使小鼠睾丸生精功能降低,精子凋亡增加,造成小鼠少弱精症。     

低强度激光照射对大鼠血管平滑肌细胞一氧化氮生成通路的上调作用

目的 观察低强度激光照射(low power laser irradiation,LPLI)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)左旋精氨酸(L-Arg)转运、一氧化氮(NO)生成以及NO合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性的作用,以探讨LPLI血管保护作用的细胞分子机制.方法 取Wistar大鼠主动脉,贴块法培养VSMCs,分别以能量密度0、0.9.2.7和4.5 J/cm2的He-Ne激光(波长632nm)照射,无照射组为对照组.重氮化学反应法测定培养液中NO含量,细胞孵育液中加入3H-L-Arg测定细胞L-Arg的摄入,测定3H-胍氨酸的生成反映NOS活性.结果 能量密度分别为0.9,2.7和4.5 J/cm2的LPLI照射VSMCs,促进细胞NO生成分别较对照组增加-1.3%(P＞0.05)、60.4%(P＜0.01)和78.6%(P＜0.01);细胞NOS活性分别较对照组增加16.9%(P＞0.05)、44.6%(P＜0.01)和53.0%(P＜0.01);而且细胞摄入L-Arg(Vmax值)分别较对照组增加11.0%(P＜0.05),66.7%(P＜0.01)和38.7%(P＜0.01);激光照射对L-Arg跨细胞膜转运的米氏常数(Km值)无明显影响(均P＞0.05).结论 低强度He-Ne激光照射激活大鼠VSMCs的L-Arg/NOS/NO通路,可能为低强度激光扩张血管、改善器官血流等生物学效应的机制之一.     

一氧化氮参与大鼠红藻氨酸致大鼠诱导性癫痫发作

目的 探讨内源性一氧化氮(NO)参与癫痫发作机制。方法 用分光光度法检测红藻氨酸(KA)诱导性癫痫发作大鼠海马结构、杏仁核内NO合酶(NOS)活性的早期变化。结果 发现注射KA(15mg/kg)后10min和30min海马结构内NOS活性升高(P<0.05);注射KA后30min杏仁核内NOS活性升高(P<0.05);注射KA60min后海马结构和杏仁核内NOS活性均下降。KA全身给药引起海马结构内NOS活性很快升高,继之杏仁核内NOS活性升高。结论 KA毒性直接导致海马结构神经细胞活性增强,并激活其中的NOS,参与大鼠癫痫发作的始动过程及传播过程。     

牛黄酸锌对染汞大鼠皮质NOS活力和nNOS阳性神经元的影响

 目的观察牛黄酸锌对染汞大鼠皮质一氧化氮合酶活力和神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化,探讨TZC对汞神经毒性拮抗的作用机制.方法采用NADPH-d组织化学和ABC免疫组织化学方法,观察了饮用含4.3mg/(kg·d)氯化汞(HgCl2)和不同剂量(0.23,0.46g/L)TZC溶液的大鼠皮质NOS活性和nNOS阳性神经元数目的变化.结果TZC可缓解汞所致的皮质NOS活力增强,并明显增加nNOS阳性神经元的数目.结论汞中毒时TZC可通过减少皮质NOS活力和增加nNOS水平来发挥其拮抗作用.     

壬基酚对雄性大鼠生精功能及相关激素和酶的影响

目的初步研究不同剂量壬基酚对雄性大鼠的生精功能及血清激素和睾丸内相关酶的影响。方法雄性大鼠48只,随机分为4组,即对照组、壬基酚低、中、高(50、100、200 mg/kg)剂量组,对照组每日灌胃给予植物油(0.15 ml/100 g),给药组每日灌胃给予壬基酚油溶液,连续28 d。染毒28 d后处死大鼠,取血,放免法检测血清睾酮(T)、皮质酮(CORT)、促卵泡刺激素(FSH)以及黄体生成素(LH)水平。摘取右侧睾丸制备组织匀浆,采用分光光度法测定SOD、MDA、GSH以及LDH的活性。取左侧睾丸分析初级精母细胞染色体畸形率。取附睾,检测附睾尾精子数量、精子活动率和精子畸形率。结果染毒28 d后,与对照组相比,壬基酚组大鼠血清T、FSH和LH水平降低,其中高剂量组降低显著(P<0.05)。CORT升高,但无显著性差异。另外,随染毒剂量增加,大鼠睾丸组织SOD活力、GSH和MDA水平呈现逐渐上升趋势,各染毒组LDH活性升高。壬基酚组大鼠精子数、精子活动率显著低于对照组,精子畸形率显著高于对照组,初级精母细胞染色体畸变率高于对照组。结论壬基酚对雄性大鼠有明显的生殖毒性。其可能通过降低大鼠血清T、FSH和LH水平,增加睾丸组织GSH和LDH活力产生作用。     

红景天对高原大鼠脑缺血损伤中神经保护作用的研究

目的：探讨红景天对高原大鼠脑缺血损伤的神经保护作用。方法：采用红景天制剂给大鼠灌胃（治疗组）。造模30天后取各组的脑组织,采用HE染色和NISSL染色观察脑组织的形态学变化;免疫组织化学方法标记一氧化氮合酶（NOS）,并进行分析。结果：对照组大鼠脑新皮质结构内NOS的阳性表达较正常组明显增高,治疗组的表达较对照组减少。结论：在低氧环境下红景天对脑缺血损伤的神经细胞有保护作用。     

低剂量电离辐射对雄性糖尿病模型大鼠生殖损伤的影响

目的 探讨75 mGy照射对12周糖尿病(DM)大鼠睾丸生精细胞凋亡及抗氧化和性激素水平的影响。方法 随机将Wistar大鼠分为3组:健康对照组、75 mGy＋DM组及DM组,12周末记录其存活率和体重。采用流式细胞术和TUNEL染色法检测生精细胞凋亡率,应用试剂盒分别检测血清及睾丸抗氧化和激素水平的变化。结果 12周后,DM组大鼠存活率为25%,健康对照组为100%(χ²=15.938, P<0.01);75 mGy＋DM组大鼠存活率为56.25%,与DM组比较差异有统计学意义(χ²=4.00,P<0.05)。糖尿病大鼠生精细胞凋亡率较健康对照组明显增加,亦高于75 mGy+DM组(F＝5.496,P<0.05)。与健康对照组比较,糖尿病大鼠血清和睾丸组织中丙二醛(MDA)及NO含量不同程度增加,而75 mGy＋DM组大鼠血清和睾丸MDA含量显著低于单纯DM组,以睾丸组织中尤为明显(F=10.644,P<0.01);75 mGy照射显著降低了DM组大鼠血清NO含量(F=14.379, P<0.05),同时增加了DM组大鼠血清中的一氧化氮合酶(NOS)活性及睾丸酮(TS)和促滤泡激素(FSH)含量(F值分别为9.676、43.194和5.282,P<0.05或P<0.01)。结论 低剂量辐射显著降低睾丸组织及血清MDA和NO含量,增加抗氧化酶活性和TS及FSH含量,可能与其抑制糖尿病大鼠生精细胞凋亡增多所致生精障碍有关。     

The effect of dexamethasone on the uptake of p-boronophenylalanine in the rat brain and intracranial 9L gliosarcoma.

The steroid dexamethasone sodium phosphate (DEX) is routinely used to treat edema in brain tumor patients. The objective of the present study was to evaluate the effects of DEX on the uptake of boronophenylalanine (BPA) using the rat 9L gliosarcoma tumor model and surrounding brain tissue. Two steroid dosage protocols were used. The high-dose DEX protocol involved five 3mg/kg intraperitoneal injections at 47, 35, 23, 11 and 1 h prior to the administration of the BPA for a total dose of 15 mg DEX/kg rat. The low-dose DEX administration protocol involved two doses of 1.5mg/kg at 17 h and 1h prior to BPA injection for a total dose of 3mg DEX/kg rat. The control animals received no pretreatment, prior to the administration of BPA. Seventeen days after tumor implantation, rats were injected i.p. with 0.014 ml/g body weight BPA solution (1200 mg BPA/kg; approximately 59 mg (10)B/kg). In all groups, rats were euthanized at 3h after BPA injection. Administration of the steroid had an effect on tumor weight, which decreased to approximately 78% (p > 0.05) of the control weight in the low-dose DEX group, and approximately 48% (p < 0.001) of the control weight in the high-dose DEX group. At 3 h after the administration of BPA, the concentration of boron in tumor was comparable (p > 0.1) in the control and high-dose DEX groups. The lowest mean value (73.8+/-1.6 microg/g) was obtained in the low-dose DEX group. This was significantly lower (p > 0.02) than the tumor boron contents in the high-dose DEX and control groups, which were 81.1+/-1.9 and 79.9+/-1.7 microg/g, respectively. Tumor:blood boron partition ratios for the control, low- and high-dose DEX groups were 2.3, 2.3 and 2.5, respectively. Boron concentrations were also measured in the normal brain and in the zone of brain adjacent to the tumor exhibiting edema. Although treatment with DEX had no appreciable effect on boron uptake in the normal brain of the rat, after the administration of BPA, it did impact on the boron levels in the zone of peritumoral edema. After the high-dose DEX administration protocol, boron levels in the zone of edema were reduced by approximately 14% (p < 0.02). This finding suggests that BPA targeting of tumor cells in the peritumoral zone could be compromised by DEX. These cells appear to play a critical role in tumor recurrence after BNCT or conventional radiotherapy.     

不同月龄大鼠阴茎组织中一氧化氮合成酶的含量比较

 目的比较2月龄及18月龄Wister大鼠阴茎海绵体组织中一氧化氮合成酶(Nitrie oxide synthase,NOS)的含量,讨论其生理意义并对阴茎勃起功能障碍发病的年龄依赖性作出相应的解释。方法使用NADPH-d脱氢酶组织化学染色方法观察并进行图像分析。结果发现阴茎海绵体组织中NOS阳性成分是普遍存在的,特别是在阴茎动脉外膜层周围及血窦内皮细胞系统中的含量较多。18月龄大鼠阴茎海绵体组织总体NOS染色水平下降,进一步行图像分析,测定阴茎海绵体组织中NOS的含量,结果显示18月龄大鼠阴茎海绵体组织中NOS含量明显低于2月龄大鼠。结论 阴茎海绵体组织中NOS含量下降是阴茎勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)年龄依赖性的原因之一。     

阴茎组织中一氧化氮合成酶的分布及生理意义

 目的观察大鼠阴茎组织中一氧化氮合成酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)的分布,并就其生理意义进行讨论.方法NADPH-d脱氢酶组织化学染色方法.结果发现大鼠阴茎海绵体及尿道海绵体中均含有NOS阳性染色神经纤维,海绵体平滑肌小梁内分布有NOS阳性神经纤维,阴茎动脉外膜层环绕着阳性染色神经纤维,而阴茎静脉外膜则无阳性染色神经纤维环绕.血窦内皮细胞系统及血管内皮细胞均呈阳性染色.阴茎勃起组织内未见NOS阳性染色神经元.结论一氧化氮(Nitric Oxide,NO)可能是调节阴茎勃起的生理性介质之一.     

人神经干细胞在宿主鼠脑内分化成神经元呈脑位点特征

目的研究人胎脑神经干细胞植入年幼大鼠脑后的成神经元分化作用,探讨神经干细胞替代治疗小儿脑病的可行性。方法自孕16周的胎脑组织分离培养出神经干细胞球,在小儿脑脊液中培养诱导分化以证明其分化潜能。将培养14d的神经干细胞球移植10d龄鼠的侧脑室内,于移植后第4、7、14天杀鼠取脑,切片,行人神经丝特异性标志的免疫荧光分析,显示神经元的分布和细胞形态。结果培养获得典型神经干细胞球,呈漂浮生长,在小儿脑脊液中能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。用抗人神经丝混合单抗检测移植物的成神经元分化,移植后的第4天,观察到阳性反应细胞在颗粒层表现为颗粒性细胞,锥体细胞层则出现长突起的锥体细胞,还有连接神经元样中间神经元,小脑内有单层排列的浦肯野细胞。对比各时间点的观察结果,阳性细胞分布位置未变。随着移植后天数的后延,阳性细胞数量呈减少趋势,但锥体细胞的突起明显加长。结论体外培养获得的人神经干细胞脑室途径移植年幼大鼠,在脑内发生迁移,并分化成形态上与其临近宿主细胞一致的神经元。提示宿主脑组织局部微环境在引导移植物分化成神经元中发挥了重要作用。     

肠淤血大鼠肠神经系统内胆碱能和氮能神经的改变

目的研究肠淤血大鼠肠神经系统内乙酰胆碱酯酶（AchE）神经元和一氧化氮合酶（NOS）神经元的改变,以探讨肠淤血影响肠道运动功能的神经机制。方法SD大鼠分成实验组（依据肠道淤血时间分为肠淤血20min组、60min组）和对照组,取各组相同部位的回肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色,观察比较各组AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况。结果与对照组比较,实验组大鼠的回肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量减少（P〈0．01）,阳性表达减弱,而NOS阳性神经元数量增多（P〈0．01）,阳性表达增强;与肠淤血20min组比较,60min组AchE阳性神经元较少（P〈0．01）,胞体染色较浅,而NOS阳性神经元数量较多（P〈0．01）,胞体大而染色深,但节间束NOS阳性神经纤维稀少。结论肠淤血会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是肠淤血后肠道运动功能障碍发生的神经机制。