茅莓及其总皂苷对K562白血病细胞体内外作用的实验研究

目的:从体内和体外实验探究茅莓及其总皂苷的抗白血病肿瘤效应。方法:应用已建立的荷白血病瘤裸鼠模型,观察不同浓度茅莓水煎液治疗荷白血病瘤裸鼠后瘤体体积、重量、组织病理的影响;半固体琼脂培养观察不同浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562细胞株集落生长的影响;MTT法观察不同浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562细胞株的增殖作用的影响。结果:低中高剂量茅莓水煎液(0.5g/mL,1g/mL,2g/mL)治疗荷瘤裸鼠后,瘤重分别为(0.95±0.13)g、(0.49±0.09)g和(0.33±0.01)g,抑瘤率分别为57.55%、75.40%和87.16%,抑制效应呈剂量依赖性方式;HE染色治疗组瘤体内可见多个坏死灶,瘤细胞肿胀、破裂,细胞核溶解、消失;琼脂半固定集落培养发现不同浓度含药血清及茅莓总皂苷均能抑制K562细胞株集落形成,抑制效应呈剂量依赖性方式,其中终浓度为10%和20%的含药血清抑制集落形成率为(21.6±2.2)%和(48.8±1.2)%,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05),20 mg/L茅莓总皂苷抑制集落形成率为(22.5±1.9)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且当浓度增加至150mg/L时,无集落形成;MTT示不同浓度的含药血清及茅莓总皂苷均能抑制K562细胞株的增殖,呈剂量依赖性方式,其中20%的含药血清可明显抑制K562细胞增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),20mg/L浓度的茅莓总皂苷能明显的抑制K562增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:茅莓水煎剂对荷白血病瘤裸鼠瘤体生长有明显抑制作用,且一定浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562集落形成和增殖均有明显的抑制作用,为临床用药提供了一定的理论依据。     

灵芪胶囊含药血清对人红白血病K562细胞增殖抑制作用的影响

目的：观察灵芪胶囊（LQC）含药血清在体外对K562白血病细胞增殖抑制作用的影响。方法：采用血清药理学方法制备灵芪胶囊含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,并测定抑制率、分裂指数以及克隆形成能力,观察灵芪胶囊含药血清对肿瘤细胞的抑制作用;用W right-G iemsa染色方法观察肿瘤细胞形态的变化。结果：不同浓度灵芪胶囊含药血清对K562细胞的增殖具有抑制作用,并呈剂量依赖关系;灵芪胶囊含药血清对肿瘤细胞的分裂指数和克隆形成能力均具有显著的降低作用,在一定的时间内与剂量呈正相关,同时亦使肿瘤细胞的形态结构发生改变。结论：灵芪胶囊含药血清对K562白血病细胞具有细胞毒作用,其直接杀伤和破坏肿瘤细胞的作用是灵芪胶囊抗肿瘤的主要机理之一。     

健脾养阴泄毒法药物对K562细胞凋亡的影响

目的:探讨健脾养阴泄毒法组方的生血灵糖浆合定清片治疗髓细胞白血病的作用机理.方法:采用血清药理学方法观察健脾养阴泄毒法药物对K562细胞及10例正常人骨髓CFU-GM的影响.结果:健脾养阴泄毒法组方的生血灵糖浆合定清片能诱导K562细胞的凋亡,而对正常人骨髓CFU-GM无明显的抑制作用.结论:健脾养阴泄毒法治疗髓系白血病的作用机理可能与诱导白血病细胞凋亡有关.     

灵芪胶囊含药血清对K562白血病细胞的诱导凋亡作用

[目的]观察灵芪胶囊含药血清在体外对K562白血病细胞凋亡的影响.[方法]采用血清药理学方法制备灵芪胶囊含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,采用流式细胞仪(FCM)及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡情况.[结果]不同浓度灵芪胶囊含药血清能够诱导K562细胞的凋亡,且凋亡率随着剂量的增加而增大,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见典型的DNA梯形带形成.[结论]灵芪胶囊含药血清具有诱导细胞凋亡的作用,其作用强度与时间-浓度呈正相关.灵芪胶囊含药血清对K562细胞发生细胞毒作用可能与诱导K562细胞凋亡有关.     

解毒化瘀方含药血清抑制白血病K562细胞增殖作用的研究

目的：研究解毒化瘀方对白血病K562细胞增殖的影响。方法：应用中药血清药理学方法制备解毒化瘀方的兔血清，用台盼蓝拒染、MTT法、流式细胞仪检测含药血清对K562细胞增殖的影响。结果：台盼蓝拒染试验和MTT法细胞毒作用均显示含药血清可抑制K562细胞的增殖，抑制率随含药血清浓度的增高而增高，流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示，中、高剂量含药血清组G1、G2期DNA含量明显减低，凋亡细胞百分率较高。结论：解毒化瘀对白血病K562细胞增殖具有抑制作用．     

灵芪胶囊含药血清对人红白血病K562细胞增殖抑制作用影响的实验研究

1实验材料人红白血病K562细胞株,购自中科院上海生物细胞所。灵芪胶囊由黄芪、山慈菇、莪术、人参等组成,所需药材均购自黑龙江中医药大学附属第一医院药局,并经本校药学院生药鉴定室鉴定。浓缩煎液成2g/ml的生药浓度,灭菌后冷藏备用;脲嘧啶替加氟片,齐鲁制药有限公司,批号0502     

解毒化瘀药含药血清对白血病K562/A02细胞耐药逆转作用的研究

目的研究解毒化瘀方对白血病K562／A02细胞的耐药逆转作用。方法应用中药血清药理学方法制备解毒化瘀方的兔血清,以MTT法检测经含药血清处理后K562／A02细胞对化疗药物的敏感性;免疫组化法检测含药血清对K562／A02耐药细胞内柔红霉素（DNR）潴留的影响。结果解毒化瘀方含药血清中、高剂量组可增加化疗药物对K562／A02细胞的细胞毒作用,明显提高K562／A02耐药细胞内DNR的浓度（P〈0．05）。结论解毒化瘀方含药血清能逆转K562／A02细胞的耐药性,并呈剂量依赖性。     

中医治法对K562细胞增殖抑制及定向红细胞分化的实验研究

目的：研究滋养肝肾、温补脾肾、补益心脾等不同中医治法对人红白血病细胞株（K562）增殖抑制及定向红细胞分化的影响。方法：以K562细胞为体外模型,用台盼蓝拒染法检测滋养肝肾、温补脾肾、补益心脾等不同中医治法对K562细胞增殖的影响,用联苯胺染色法、分光光度法检测滋养肝肾、温补脾肾、补益心脾等不同中医治法诱导后血红蛋白细胞阳性率、细胞平均血红蛋白含量和细胞溶液中血红蛋白含量的变化。结果：经不同中医治法在体外对K562细胞作用后,滋养肝肾、补益心脾组细胞生长明显受到抑制;经不同中医治法诱导后K562细胞的联苯胺染色阳性率增高,合成血红蛋白的量提高。结论：滋养肝肾、补益心脾法在体外对K562细胞均有明显的增殖抑制作用,其中滋养肝肾法明显优于阳性对照羟基脲组;三种疗法均有诱导其向红系细胞分化的作用,其中滋养肝肾法明显优于阳性对照羟基脲组。     

解毒化瘀含药血清抗白血病细胞K562及K562／A的体外实验研究

目的：以解毒化瘀法立意,选取解毒化瘀中药复方,拟通过体外细胞培养证实其是否存在抗白血病细胞及多药耐药白血病细胞的作用。方法：采用MTT比色法,选择白血病细胞K562及阿霉素诱导的白血病多药耐药细胞株K562／A为靶细胞,观察不同浓度解毒化瘀含药兔血清对其细胞毒作用。结果：解毒化瘀含药兔血清对K562及K562／A均有明显的抑制作用,且其对K562／A的细胞毒作用呈剂量依赖性。结论：解毒化瘀中药在抑制白血病细胞生长及白血病多药耐药细胞生长方面具有深入研究的价值。     

复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞生长及其周期影响的实验研究

目的：探讨中药复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞系（bel-7402)生长及其细胞周期分布的影响。方法：应用MTT比色法检测肿瘤细胞活性。流式细胞仪分析细胞周期时相分布。结果：中药复方犀黄丸含药血清对人肝癌细胞系（bel-7402)有抑制作用。其抑制率与含药血清浓度呈直线相关;FAM结果显示含药血清处理24h,S期细胞比例增加,G2/M期细胞减少;处理48h后,G0/1期细胞增多,S期细胞减少。结论：中药复方犀黄丸含药血清可抑制人肝癌细胞系（bel-7402)细胞生长,并可干扰其细胞周期。     

电针对血清和大脑中肉毒碱的影响

目的：电针对于改善长期疲劳症状有一定的疗效,但是治疗机理尚不清楚,本实验旨在探讨其机理。方法：对电针组大鼠,针刺双侧肾俞,并进行捻转补泻1分钟。然后将针柄连接到疏密波电针仪上,频率为3Hz,通电30分钟,振幅正脉冲50V,负脉冲25V。电针治疗每天进行一次,连续五天。对照组（正常组）的大鼠,不采取针刺和电针刺激。治疗结束后的第二天杀死所有实验老鼠,检测它们的血液和大脑组织中的肉毒碱含量。结果：电针组和对照组（正常组）的大鼠血清内的肉毒碱含量分别为5．10±0．50μmol／L和2．17±0．46μmol／L;大脑组织内的肉毒碱含量分别为44．66±2．67μmol／L和24．05±3．65μmol／L。电针组血清和大脑组织中的肉毒碱含量明显高于对照组（P〈0．001）。结论：本研究显示电针可以明显提高血液和大脑中肉毒碱的含量,表明电针对能量代谢和改善疲劳具有影响。     

柚肉黄酮降脂作用研究

目的探讨柚肉黄酮的降脂作用。方法1.试验性高血脂模型法将40只昆明种小鼠随机分成5组,对照组、高脂饲料组(模型组)、不同含量柚肉黄酮+高脂饲料组(柚肉黄酮小、中、大剂量组)。2.测定柚肉黄酮对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量以及动脉硬化指数(AI)的影响。3.离体胆固醇微胶粒形成实验。结果1.柚肉黄酮明显降低喂以高脂饲料小鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C含量以及AI水平,提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,且作用与柚肉黄酮剂量呈正相关。2.柚肉黄酮体外实验有轻度抑制胆固醇微胶粒形成的作用。结论柚肉黄酮有显著的降血脂效应,其机理可能与其减少肠道胆固醇的吸收相关。     

灵猫方对急性肝损伤模型保肝降酶作用的实验研究

应用急性肝损伤动物模型观察灵猫方的保肝降酶作用。方法：建立ANIT小鼠急性肝损伤、CCl4大鼠急性肝损伤动物模型,实验分为正常对照组、模型组、阳性对照组、灵猫方低剂量组、灵猫方中剂量组和灵猫方高剂量组,分别给予相应处理,处死动物。分离血清测定AST、ALT。结果：与模型组相比,灵猫方低剂量、中剂量和高剂量可明显降低ANIT急性肝损伤小鼠ALT水平（P〈0．05）,灵猫方中剂量、高剂量组的AST均明显降低（P〈0．05）;与模型组相比,灵猫方低剂量、中剂量和高剂量可明显降低CCI。急性肝损伤大鼠的ALT水平（P〈0．05）,低剂量组的AST水平明显降低（P〈0．05）。结论：灵猫方对急性肝损伤具有保肝降酶作用。     

四逆汤保护缺血心肌功能的实验研究

本研究在Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ心脏灌流模型上观察了四逆汤（ＳＤ）对缺血心肌功能的保护作用，结果表明：ＳＤ可提高缺血心 电兴奋程度，减少心律失常的发生率，加强缺血心肌心缩功能。ＳＤ的上述保护作用可能与其改善缺血心肌自由基反应有关。此外，ＳＤ尚有扩张冠脉，增加冠脉流量的作用。     

芪地茅花汤对微小病变肾病大鼠VPF、IL-18影响的实验研究

目的：观察芪地茅花汤对阿霉素诱导的微小病变肾病大鼠血清血管通透因子（VPF）、白细胞介素-18（IL-18）表达的影响,探讨其肾脏保护作用机制。方法：实验动物随机分为6组：正常组,模型组,阳性对照组,中药高、中、低剂量组。用表柔比星（阿霉素）尾静脉注射法（6mg/kg）复制微小病变肾病大鼠模型,分别给予不同剂量芪地茅花汤药液、强的松混悬液。测定大鼠24小时尿蛋白定量、血清白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、血清VPF、IL-18的含量;并电镜下观察肾脏组织形态学变化。结果：芪地茅花汤可减少微小病变肾病大鼠尿蛋白的排泄量,改善血清生化指标,降低血清VPF、IL-18含量（P〈0.05～0.01）,修复肾小球上皮细胞足突的结构。结论：芪地茅花汤可降低微小病变肾病大鼠增高的VPF、IL-18表达,从而减轻肾脏病理损害。     

萆苓方对糖尿病痛风模型大鼠血糖、血尿酸的影响及其抗炎作用的研究

目的:观察萆苓方对糖尿病痛风模型大鼠血糖、血尿酸和炎症因子的影响及其抗炎作用,探讨萆苓方对糖尿病痛风模型大鼠的保护作用机制。方法:采用链脲佐菌素腹腔注射复制糖尿病模型后,关节腔注射尿酸钠诱导痛风模型。Wistar大鼠随机分组,即正常组,模型对照组,萆苓方高、中、低剂量组,二甲双胍组,吲哚美辛组。分组给药后观察大鼠步态及关节肿胀度,并测定血糖、血尿酸、血清白介素-6、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α的表达水平。结果:糖尿病痛风模型大鼠血糖、血尿酸、白介素-6、C-反应蛋白、肿瘤坏死因子的水平升高,步态异常,关节肿胀明显;萆苓方可明显干预上述变化。结论:萆苓方对糖尿病痛风有肯定疗效,其作机制与调节炎症因子有关。     

5%鱼肝油酸钠对慢性骨髓炎造模的影响

为验证 5 %鱼肝油酸钠作为沈霖法慢性骨髓炎模型中重要的处理因素可能影响模型成败的假说。参照沈霖法复制慢性骨髓炎模型 ,并以 5 %鱼肝油酸钠和生理盐水模拟造模 ,对比模型之间 X线片和病理组织学指标。结果显示模拟模型组与沈霖法造模组之间此 2项指标有明显差异 ,模拟模型组间对比则无明显差异。说明 5 %鱼肝油酸钠作为慢性骨髓炎造模中重要的处理因素进行造模具有可行性     

理气补血汤对周围神经再生影响的实验研究

为探讨理气补血汤对周围神经损伤功能恢复的影响 ,采用钳夹 SD大鼠坐骨神经的方法建立周围神经损伤的动物模型。将 6 6只造模大鼠随机分为实验组和对照组 ,每组再分为 2、4、6周 3个时间组 ,每日分别给予理气补血汤水煎剂和生理盐水灌胃。分别进行坐骨神经功能指数 (SFI)、神经电生理指标、小腿三头肌湿重的检测。结果显示 ,实验组 SD大鼠一般情况优于对照组 ;实验组的 SFI恢复率显著优于对照组 ;实验组运动神经诱发电位潜伏期的延迟率、复合肌肉动作电位振幅的恢复率、小腿三头肌单收缩力和强直收缩力的恢复率均优于对照组 ;小腿三头肌湿重的恢复率实验组显著高于对照组。表明理气补血汤可以促进周围神经损伤的修复再生 ,明显提高神经功能的恢复。     

固肾健脾方对绝经后骨质疏松妇女血清抵抗素、内脂素的影响

目的:探讨固肾健脾方对绝经后骨质疏松妇女血清抵抗素、内脂素的作用。方法:选择绝经后骨质疏松症患者85例,随机分为观察组43例,对照组42例。两组均给予钙尔奇口服,观察组再予固肾健脾方口服。采用酶联免疫吸附测定法分别在治疗前、治疗后3个月测定血清抵抗素、内脂素水平。结果:观察组治疗后内脂素水平均低于治疗前及同时间段的对照组,其差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后抵抗素水平与治疗前及与同时间段对照组比较,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:固肾健脾方可以降低绝经后骨质疏松妇女内脂素水平,但对抵抗素的作用效果不明显。     

EXPERIMENTAL STUDY OF CYTOBIOLOGY ON ANTITUMOR EFFECT OF MOXIBUSTION AND IMMUNOMODULATORS

TheproectwassupportedbytheNationalNaturalffeienceFoundationofChinaInthepast,mostofstudiesonthemecha-nismofantitumoractionofmoxibustionandacupunctureusuallypaidlessattentiontothein-fluenceofcytobiology.Asamatteroffact,thedevelopmentofcancerinhostisarathercompli-catedbiologicalprocess.Inonehand,itisde-pendedonbiologicalcharacteroftumorcellit-self,intheotherhand,ithasacloserelationshipwiththeactionorreactionbetweenhostandtu-mor,reflectingbothsidesofstrugglestatementbetweenthevitslenergyandpatho…