超顺磁性硫酸链霉素PLA-PEG微球的制备和体外特征研究

目的:制备超顺磁性硫酸链霉素(Streptomycin sulfate,SM)PLA-PEG微球(Superparamagnetic streptomycin sulfate PLA-PEG microspheres,spSPM),探索并建立一种准确、方便和有效的硫酸链霉素HPLC检测方法;研究此微球的特征,并对其在振荡磁场作用下的体外药物释放规律进行研究,为今后的动物实验及临床应用提供理论依据.方法:用化学共沉淀法合成超顺磁性壳聚糖Fe3O4纳米粒(Superparamagnetic chitosan Fe3O4 nanospheres,spCFN),再用双乳化(W/O/W)溶剂挥发法制备spSPM,检测其特征参数.将此spSPM在37℃模拟体液中进行体外药物溶出试验,振荡磁场干预,用HPLC检测硫酸链霉素(SM)的释放量.结果:本实验制备的spSPM包封率47.56%±1.39%,载药量25.20%±1.52%,体积平均粒径为2.467μm,体外释放周期超过7 d.结论:本实验制备的spSPM具有隐形微球的各项特征,可应用于进一步的研究中.     

键合多西紫杉醇的聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用

目的研究键合多西紫杉醇(TSD)的聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物(PLA-PEG/TSD)对人前列腺癌细胞PC-3的增殖抑制作用。方法 TSD、PLA-PEG/TSD和聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)作用于PC-3细胞,应用MTT法检测各组药物在不同浓度下作用24、48、72 h后PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期变化,应用电镜观察PC-3细胞凋亡的形态学特征。结果 PLA-PEG/TSD和TSD比较,对PC-3细胞的增殖抑制作用相似(P>0.05),并且两组均具有浓度和时间依赖性,随药物浓度和作用时间的增加,抑制率逐渐增高。PLA-PEG和对照组比较,对PC-3细胞的增殖没有影响(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示:PLA-PEG/TSD和TSD两组PC-3细胞明显阻滞于G2/M期,两组相比较差异无统计学意义(P>0.05),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。电镜观察:PLA-PEG/TSD和TSD两组PC-3细胞凋亡的形态学特征一致。结论 PLA-PEG/TSD与TSD相比较,抑制PC-3细胞增殖的特点和机制相似,PLA-PEG/TSD在治疗前列腺癌方面有研究价值。     

油包水型芍药苷微乳在大鼠肠道的吸收动力学研究

目的 比较油包水型芍药苷微乳[PaeME(W/O)]和芍药苷(Pae)水溶液在大鼠肠道的吸收情况.方法 采用大鼠在体肠回流模型,通过高效液相色谱(HPLC)法分别测量肠循环液中的PaeME(W/O)与Pae的含量,计算出PaeME(W/O)与Pae在大鼠肠道的吸收药量、吸收速率常数值(Ka)和吸收半衰期(t1/2).结果 在2～20 μg/ml浓度范围内PaeME(W/O)的吸收量与浓度呈线性关系,PaeME(W/O)的Ka值基本不变;PaeME(W/O)在十二指肠、回肠和结肠吸收药量均明显高于Pae;PaeME(W/O)型制剂在十二指肠、回肠和结肠的t1/2均低于相应的肠段的Pae.结论 PaeME(W/O)在整个肠段均有吸收,PaeME(W/O)在肠道吸收要明显好于Pae.     

脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子的制备及表征

目的应用微乳法制备脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子并初步探讨其相关特性,以期获得一种合适的口服脲酶制剂.方法以碳化二亚胺为耦联剂,制备脲酶-Fe3O4磁性纳米粒子,后用Bradford蛋白测定方法测定脲酶耦联量;运用TEM测定其粒径,用FTIR来检测脲酶与Fe3O4磁性纳米粒子的耦联.结果Fe3O4磁性纳米粒子与脲酶耦联后,其粒径稍有增大;Fe3O4磁性纳米粒子耦联脲酶的量与其粒径大小、碳化二亚胺/Fe3O4纳米粒子(W/W)等因素有关,粒径越小,耦联剂用量越大,耦联脲酶的量越高;Fe3O4磁性纳米粒子平均粒径为180 nm,当温度为4℃,碳化二亚胺与Fe3O4磁性纳米粒子用量比为1:2(W/W)时,脲酶的耦联率约为4.75%(W/W);固定化脲酶的活性约保留原酶活性的30%.结论Fe3O4磁性纳米粒子可用于酶、蛋白质等药物的固定化.     

包封和释放过程中稳定蛋白质结构的研究进展

药用蛋白质从生物可降解聚合物中释放的过程始终影响蛋白质的三维结构、化学性质和完整性.在使用最常用的水/油/水(W/O/W)双重乳化技术包封蛋白质时,要想保持其稳定性就需要提高蛋白质的热力学稳定性或者通过使用各种添加剂使蛋白质避免接触失稳剂(如W/O界面).然而,当人们使用W/O/W技术时,蛋白质的稳定性仍存在问题.因此,探索其他解决这种问题的方法就受到了关注.这些替代方法,如固/油/油(S/0/O)和固/油/水(S/O/W)技术是基于将干燥的蛋白质粉末悬浮于无水有机溶剂中的一种技术.很明显,蛋白质结构在有机相中的稳定性是由于蛋白质在此状态下是"僵硬的",因而蛋白质结构的干扰是禁阻的.本文主要介绍在应用各种不同的包封技术时如何保持蛋白质结构和性能的稳定性.     

水/十二烷基硫酸钠/正丁醇/正辛烷系统的微乳液相行为和结构

用滴定法和色谱分析测定了H_2O/C_(12)H_(25)SO_4Na/n-C_4H_9OH/n-C_8H_(18)系统在表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与助表面活性剂正丁醇不同配比下的相图。微乳液只有在一定配比范围内方始形成,随着SDS配比增加,微乳区先逐步扩大。电导测定还可区别W/O型、双连续相和O/W型微乳液,并且双连续相区随SDS配比增加而扩大。但是当SDS配比很高时,由于溶解度减小和出现粘稠液晶相,微乳液区反而缩小。对分相区的系线测定还表明,富水相微乳液中SDS的含量恒高于富油相微乳液。     

慢性阻塞性肺疾病患者恒定功率运动时摄氧动力学改变及其影响因素

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者在低于无氧阈的恒定功率运动时是否存在摄氧动力学延迟,讨论影响摄氧动力和完成恒定功率所增加摄氧量的相关因素。方法:16例COPD患者和19名健康对照者完成50W恒定功率运动实验,计算开始运动到稳定状态期间的平均反应时间(MRT)、氧赤字(O2deficit)、静息状态摄氧量(Vo2rest)、稳定状态摄氧量(Vo2stea)和稳态-静息摄氧量差(ΔVo2)、静息到稳态累计增加摄氧量(ΣΔVo2)和单位摄氧量完成功率(W/ΣΔVo2)。用Pearson相关分析影响摄氧动力和完成恒定功率所增加摄氧量的相关因素。结果:COPD组O2deficit、MRT和ΣΔVo2显著高于健康对照组。W/ΣΔVo2、Vo2rest、VO2stea和ΔVo2无显著差别。MRT和O2deficit显著正相关,和1秒用力呼气量(FEV1)、1秒用力呼气量占预计值百分比(FEV1.0%)、1秒用力呼气量与用力肺活量比值(FEV1/FVC)、W/ΣΔVo2、运动中血氧饱和度(SpO2exer)、Vo2rest和Vo2stea显著负相关;ΣΔVo2和O2deficit、ΔVo2、Vo2stea正相关,和FEV1/FVC显著负相关。结论:COPD患者存在摄氧动力障碍和高氧耗状态,摄氧动力障碍可能和气流受限、运动肌肉氧化代谢效能降低和低氧血症有关,是COPD患者运动耐力降低的可能负影响和机制。     

选择性内皮素-A受体拮抗剂sitaxsentan治疗肺动脉高压

目的:确定选择性内皮素A(ETA)受体拮抗剂sitaxsentan治疗肺动脉高压(PAH)的最佳剂量;研究中也包括开放标记(OL)的波生坦仅用于观察。背景:内皮素是PAH的致病介质。在PAH初步研究中,选择性ET受体拮抗剂sitaxsentan改善了6m in步行(6M W)距离世界卫生组织(W H O)功能级别(FC)和血流动力学状况。方法:在此项持续18周的双盲、安慰剂对照研究中247例PAH患者(原发性或与结缔组织病/充血性心脏病相关)被随机分组。245例患者接受安慰剂(n=62)sitaxsentan50m g(n=62)、sitaxsentan100m g(n=61)或OL(6M W试验、Borg呼吸困难评分和W H O …     

中性条件下魔芋胶微球的制备及其药物释放

以span-80为表面活性剂,石蜡为油相(O),魔芋胶溶液为水相(W),采用W/O乳化法,在中性条件下添加硫酸钠制备魔芋胶微球。研究表明：在85 ℃反应5 h,当油水体积比（O/W）处于6~10时,微球粒径为0.120~0.330 mm;增加O/W比,可减小微球粒径;增加反应物浓度,可减少微球的溶胀度。对包裹牛血清蛋白(BSA)的微球进行体外释放表明,增加微球粒径、反应物浓度可以减缓药物释放速率。     

超顺磁性异烟肼聚乙二醇-聚乳酸共聚物微球制备工艺及体外药物释放研究

目的:制备超顺磁性异烟肼聚乙二醇-聚乳酸共聚物(Poly(ethylene glycol)-co-poly(d,l-lactide),PELA)微球(SPIPELA-MS),优化其制备工艺,考察其在振荡磁场影响下的体外释放.方法:用化学共沉淀法合成超顺磁性Fe3O4纳米粒,用复乳溶剂蒸发法制备SPI-PELA-MS.考察均质机转速、内水相与油相体积比、PELA浓度等不同因素对微球的影响,通过正交实验优化制备工艺,并对其粒径分布、形态、和体外释放性质进行了研究.结果:SPI-PELA-MS最优工艺处方为:均质机转速13 000r/min、内水相与油相比1:20、内水相中药物水溶液体积与磁流体体积比1:2、PELA浓度40 mg/ml、超声功率600 W、PVA浓度1.5%.在体外释放中,通过外加振荡磁场的影响,能显著提高SPI-PELA-MS中药物的释放.结论:采用复乳溶剂蒸发法可成功制备SPI-PELA-MS,体外释放表明药物具有缓释功能,振荡磁场可以增加体系中药物的释放.     

链霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的体外跨膜转运研究

目的：探讨纳米化对链霉素的胞内渗透率和胞内浓度的影响。方法：以氰基丙烯酸正丁酯为聚合材料，通过乳化聚合法制备链霉素纳米粒，以人外周血单核细胞为体外细胞模型，采用高效液相色谱-质谱法检测链霉素的胞内浓度，对链霉素纳米粒和链霉素的跨膜转运情况进行对比考察。结果：链霉素纳米粒组的链霉素透过率和链霉素胞内浓度在各时间点均明显高于链霉素组，至16h时，链霉素纳米粒组链霉素的胞内浓度为链霉素组的两倍，两组之间具有显著性差异（P〈0．05）。结论：纳米化能增强链霉素的胞内渗透能力，提高链霉素的胞内浓度，使进入细胞内的链霉素浓度增加。     

高原护肤霜的制备及抗紫外线作用研究

目的：制备适合高原地区使用的防晒、防裂护肤霜。方法：选用疏水性强、润滑涂展性好、能抗高寒气流的聚甲基硅氧烷为主要基质,壬基酚聚氧乙烯醚（OP）为主要乳化剂,附加其他多种防晒护肤成分制得O/W型高原护肤霜。抗紫外线实验采用氯丙嗪在光照下发生光毒反应模型,从光毒反应的减轻程度反映霜剂抗紫外线作用的强弱。结果：动物实验表明,高原护肤霜具有显著的抗紫外线效果,优于擦脸油产品,且对皮肤、角膜等均无刺激性和过敏反应发生。结论：高原护肤霜具有可靠的防晒作用,建议作为一种特殊防护用品装备部队使用。     

胰岛素微乳大鼠肠道给药降糖作用的研究

目的：比较两种含有不同乳化剂的W／O型微乳在大鼠不同肠段对胰岛素（INS）的促吸收作用。研究微乳以及结合促吸剂N-[8-（2-羟基苯甲酰基）氨基]辛酸钠（SNAC）对INS在大鼠十二指肠给药时的降糖作用。方法：用油水乳化法制备胰岛素W／O型微乳；用葡萄糖．氧化酶法测定大鼠经时的血糖变化；采用分肠段给药的肠襻法比较两种微乳的主要促吸收部位；用大鼠十二指肠给药的方式，研究微乳及其与促吸剂SNAC结合后对胰岛素的肠道促吸收作用。结果：与溶液剂相比。遇水性介质易转化为反相微乳的微乳A，对胰岛素的主要促吸收部位在大鼠的回肠和结肠段。而遇水性介质后形成复乳的微乳B，对胰岛素的主要促吸收部位在大鼠的十二指肠以及结肠段。大鼠十二指肠给药时，微乳A中加入低剂量的SNAC就可以显著增加其降糖作用，并延长作用时间。结论：微乳制剂对胰岛素有显著的促吸收作用，促吸剂SNAC可以协同易发生转相的W／O型微乳显著增加胰岛素在肠道中的吸收。     

雾化吸入右美托咪定对单肺通气大鼠肺内分流及肺组织HO-1表达的影响

目的:评价雾化吸入右美托咪定对单肺通气大鼠肺内分流及肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)的影响.方法:健康成年雄性SD大鼠48只,体质量300~350 g,按随机数字表法分为4组(ni=12):双肺通气组(C组)、单肺通气组(O组)、静脉注射右美托咪定组(V组)和雾化吸入右美托咪定组(I组).C组气管插管后行双肺通气1 h,潮气量10 mL/kg,通气频率60次/分,呼吸比1:2;O组、V组及Ⅰ组气管插管后行右侧单肺通气1 h,潮气量5 mL/kg,通气频率80次/分,呼吸比1:2.V组于术前经10 min静脉输注右美托咪定5 μg/kg后,以2.5 μg·kg-1·h-1的速率输注至实验结束,Ⅰ组采用自制装置氧气驱动术前10 min雾化吸入右美托咪定0.1 μg+0.9%氯化钠溶液4 mL,氧流量为2 L/min,气管插管后持续雾化吸入右美托咪定1 μg;C组及O组给予等容量0.9%氯化钠溶液.于机械通气前(T0)、机械通气结束时(T1)、机械通气后30 min(T2)时采集动脉血样,检测动脉血气,计算呼吸指数(RI)、氧合指数(OI),肺内分流(Qs/Qt)后处死大鼠,取肺组织,ELISA法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的含量,肺组织湿/干重比(W/D)和HO-1表达,观察肺组织病理学改变.结果:与C组比较,O组、V组和I组肺组织TNF-α、IL-6、IL-10含量及W/D升高,HO-1表达上调,T1、T2时RI升高,OI降低,Qs/Qt升高(P<0.05~P<0.01);与O组比较,V组和I组肺组织TNF-α、IL-6含量及W/D降低,IL-10含量升高, HO-1表达上调,RI降低,OI增高,Qs/Qt降低(P<0.01),病理学损伤减轻,V组和I组间比较各指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论:雾化吸入右美托咪定可减轻大鼠单肺通气所致肺损伤,其机制与其上调肺组织HO-1的表达、降低肺内分流有关.     

乙肝扶正排毒胶囊联合医用三氧对犬四氯化碳肝损伤的保护作用

目的 研究乙肝扶正排毒胶囊联合医用三氧对犬药物中毒性肝损伤的保护作用,为其临床应用提供实验依据.方法 用四氯化碳建立犬急性肝损伤模型:一次性腹腔注射50.0%(W/W)CCl4花生油溶液,0.9ml/kg体重.选择24只健康犬,随机分4个组(n=6),即模型组、齐墩果酸组、乙肝扶正排毒胶囊组和联合用药组.造模前,齐墩果酸组(齐墩果酸片,10mg/d·kg体重,口服)、乙肝扶正排毒胶囊组(乙肝扶正排毒胶囊,0.2 g/d·kg体重,口服)、联合用药组(乙肝扶正排毒胶囊用法同前;三氧与纯氧混合气体,三氧浓度20μg/ml,150ml/次·只,直肠吹注,隔天一次)均给药30 d.分别观察各犬的全身情况、记录生存时间、测定血液生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶与天门冬氨酸氨基转移酶比值(AST/ALT)、血清总胆红素(TBIL)、凝血酶原时间(PT)、血氨(AMMO)、尿素氮(BUN)]、犬死亡时或存活15 d时取肝脏组织病理检查.结果 联合用药组能控制犬的全身情况变化(活动性、精神、饮食、大小便等),提高生存率(P＜0.05vs模型组),降低ALT、TBIL、PT值(P＜0.05vs模型组或齐墩果酸组)和AMMO值(P＜0.05vs模型组),使AST/ALT值维持在较为正常的水平.肝脏病理检查显示联合用药组的肝损伤程度较其他3组轻.结论 乙肝扶正排毒胶囊联合医用三氧能降低肝损伤实验犬的转氨酶、黄疸、血氨,延长生存时间,具有保护肝脏、减轻肝损伤的作用.     

布比卡因聚乳酸缓释微球的制备及体外释药研究

目的:制备布比卡因聚乳酸缓释微球,并对其体外释药特性进行考察.方法:以聚乳酸为载体,采用W/O/W乳剂-扩散溶剂挥发法制备布比卡因聚乳酸缓释微球,考察了微球的粉粒学特征,并进行了体外溶出研究.结果:差热分析表明,布比卡因在载体中以分子状态存在,与聚乳酸形成了包嵌的微球体;其体外释药曲线可用Higuchi方程拟合,t1/2=22.76 h.结论:布比卡因聚乳酸缓释微球体外具有缓释作用.     

不同功率的Er：YAG激光对白榴石玻璃陶瓷与树脂粘接面粘接强度的影响

目的：探讨掺铒钇铝石榴石（Er：YAG）激光处理后白榴石玻璃陶瓷与树脂粘接面剪切粘接强度（SBS）和表面形貌的变化,阐明不同功率Er：YAG激光作为预处理方式对于瓷修复体粘接面粘接强度的影响,为其临床应用提供参考。方法：将IPS Empress CAD玻璃陶瓷块制备成84个7 mm×6 mm×3 mm的瓷片样本,并根据表面处理方法不同随机分为对照组、酸蚀组、2 W激光组、4 W激光组、6 W激光组、8 W激光组和10 W激光组,每组12个样本。除对照组外对其余各组样本进行表面处理,酸蚀组使用9.5%氢氟酸处理,2 W激光组、4 W激光组、6 W激光组、8 W激光组和10 W激光组分别使用功率为2、4、6、8和10 W的Er：YAG激光处理。样本表面处理完成后,各组分别选取10个样本采用电子万能试验机检测处理后表面与树脂粘接后的SBS值,然后采用光学立体显微镜观察粘接失效模式。各组剩余2个样本采用扫描电镜（SEM）观察处理后的表面形貌改变。结果：与对照组比较,其他各组样本SBS值均升高（P<0.01）;2 W激光组、4 W激光组、6 W激光组、8 W激光组和10 W激光组样本SBS值依次升高,各组间样本SBS值比较差异有统计学意义（P<0.01）;与酸蚀组比较,2 W激光组、4 W激光组、6 W激光组和8 W激光组SBS值均降低（P<0.01）,10 W激光组样本SBS值差异无统计学意义（P>0.05）。失效模式观察,各组样本失效模式均以粘合剂失效为主,偶见混合失效,无内聚失效。SEM观察,对照组样本表面光滑无变化;酸蚀组样本表面可见许多深浅不一的不规则凹槽,呈现出明显的"蜂窝状"结构;2 W激光组样本表面可见小范围的瓷层剥脱形成的凹坑状改变,4 W激光组样本表面凹坑的面积和深度有所增加,6 W激光组样本表面可见连续的大块剥脱,8 W激光组和10 W激光组样本表面可见凹坑数量增多,呈现出明显的"鳞片状"外观。结论：随着Er：YAG激光辐照功率的增加,白榴石玻璃陶瓷与树脂之间表现出逐步升高的粘接强度和逐渐粗糙的表面形貌改变,当激光辐照功率达到10W时,能够获得与氢氟酸处理相近的效果。     

失血性休克合并内毒素血症兔肺cAMP反应元件结合蛋白表达和活性的变化

目的探讨失血性休克合并内毒素血症诱发急性肺损伤（ALI）兔肺cAMP反应元件结合蛋白（CREB）表达和活性的变化。方法采用家兔失血性休克合并内毒素血症诱发肺损伤模型,36只家兔随机分为：造模后2h组,造模后12h组和对照组。分析动脉血氧分压（PaO2）、肺湿重／干重（W／D）和肺组织病理学改变,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺组织匀浆肿瘤坏死因子（TNF）-α含量,Western印迹检测肺组织CREB蛋白的表达,凝胶电泳迁移率（EMSA）法检测CREB／DNA结合活性：结果病理学显示造模后12h组肺泡结构破坏,肺泡壁和肺间质内有大量中性粒细胞浸润和较多红细胞渗出,造模后2h组病变轻微。造模后12h组PaO2显著低于对照组（55．0±11．0 mmHg vs 92．9±14．6mmHg;P〈0．01）,W／D高于对照组（5．5±1．1 vs 3．5±0．8;P〈0．01）,而造模后2h组与对照组比较变化不明显;造模后12h组肺组织匀浆中TNF-α含量显著高于对照组（491．6±59．2pg／m vs 159．3±44．9pg／ml;P〈0．01）,而造模后2h组与对照组比较变化不明显。造模后2h组和12h组肺组织CREB蛋白的表达量均显著高于对照组（0．874±0．182,0．775±0．258 vs 0．483±0．199;P〈0．01）,造模后2h组和12h组CREB／DNA结合活性也显著高于对照组（355±79,330±108vs185±68;P〈0．01）。结论失血性休克合并内毒素血症促进了肺组织CREB的表达和活化,CREB可能通过促进炎症因子的表达而参与了急性肺损伤的炎症反应过程。     

依达拉奉对在体成年兔肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察氧自由基清除剂依达拉奉对在体成年兔肺缺血再灌注损伤的影响,从而探讨其可能的保护作用机制?方法:由南京农业大学实验动物中心提供的 27 只健康成年新西兰白兔,随机分为3组:假手术组(Sham,n=6),缺血再灌注组(IR,n=10)和依达拉奉干预组(IR+Edaravone,n=11)?用小儿肠钳钳夹左肺门 60 min,然后再开放 60 min制备成年兔在体肺缺血再灌注模型?依达拉奉干预组于阻断前和开放前各予静脉注射依达拉奉 3 mg/kg?对比观察各组肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力?丙二醛(MDA)含量?谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力?过氧化氢酶(CAT)活力?总抗氧化能力(T-AOC)?抑制羟自由基能力(IHR)?髓过氧化物酶(MPO)含量,肺组织湿干重比(W/D),并在光镜下比较组织形态学改变?结果:依达拉奉干预组与 IR 组相比,SOD?GSH-PX?CAT 与 T-AOC 活力显著增高,MDA?MPO 含量及 W/D 显著降低(P < 0.05);IR 组镜下见有肺间质增宽水肿,大量炎症细胞浸润,肺泡腔中可见明显出血?渗出,部分肺泡萎陷不张;而依达拉奉干预组肺组织上述改变明显减轻?结论:在体成年兔肺缺血前后用依达拉奉处理,可减轻缺血再灌注损伤,其机制可能与依达拉奉自由基清除和抗氧化作用有关?