外周血白细胞人巨细胞病毒抗原检测及其临床意义

本文使用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)法,对35例婴儿肝炎综合征患儿外周血白细胞分别进行了人巨细胞病毒(HCMV)前早期抗原(IEA)、早期抗原(EA)及晚期抗原(LA)检测。结果显示20例IEA阳性(20/35)、18例EA阳性(18/35);淋巴细胞、粒细胞、单核细胞均有较高阳性率,而LA阳性率较低(5/15)。5例阳性者恢复期复查,2例检测出HCMV抗原。HCMV IEA、EA检出阳性率明显高于血清抗HCMV IgM、急性期与恢复期双份血清抗HCMV IgG和尿HCMV分离。15例IEA阴性者仅1例抗HCMV IgM阳性,检测证实为巨细胞病毒感染,示其特异性、敏感性均佳,可作为HCMV急性活动性感染的较好诊断方法。     

实时荧光PCR检测黄疸婴儿尿中人巨细胞病毒感染研究

目的探讨实时荧光PCR技术检测尿中人巨细胞病毒(HCMV)在黄疸婴儿HCMV活动性感染的检测价值。方法分别应用实时荧光PCR法和ELISA法检测2585例黄疸婴儿尿HCMV-DNA和血清HCMV-IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果 2585例黄疸婴儿尿中实时荧光PCR检测HCMV-DNA阳性1428例;ELISA检测HCMV-IgM阳性1084例。两种方法阳性符合率为73.88%,实时荧光PCR法和ELISA法阳性检出率分别为55.24%和41.93%,差异有统计学意义(P0.01);实时荧光PCR法阳性标本的平均拷贝数为7.86×105。结论 HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,实时荧光PCR法检测敏感性要高于ELISA法检测,可以有效地提示体内活动性HCMV感染,具有良好的应用价值。     

母乳人巨细胞病毒定量检测在婴儿巨细胞病毒肝炎中的应用

目的了解母乳人巨细胞病毒（HCMV）感染状况及HCMV通过母乳对婴儿的传播情况。方法应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法分别检测156份母乳和与其配对确诊或疑诊HCMV肝炎患儿尿液中HC-MV-DNA含量。结果确诊或疑诊HCMV肝炎患儿母亲母乳HCMV-DNA阳性率为72.44%;尿HCMV-DNA阳性母乳喂养的婴儿HCMV-DNA阳性率为72.57%,明显高于HCMV-DNA阴性母乳喂养的婴儿（48.84%）（P〈0.01）。结论HCMV感染母乳是婴儿后天获得性HCMV感染的重要途径。     

尿液中的巨细胞病毒PCR快速检测方法的建立和应用

目的 探讨尿液中包涵体形成与巨细胞病毒(HCMV)DNA联合检测对HCMV感染诊断的临床应用价值。方法 采用尿液离心涂片染色后显微镜查包涵体;聚合酶链反应(PCR)检测HCMV-DNA。结果 模板含量在50～500pg之间为最佳。在36份包涵体尿中,HCMV-DNA阳性12份,阳性率为33.3％。结论 应用PCR快速检测包涵体尿液中HCMVDNA,对HCMV原发性感染的诊断和临床治疗都具有重要意义。     

不同标本巨细胞病毒DNA检测在小儿巨细胞感染中的应用

目的不同标本血液、尿液、母乳HCMV-DNA检出率比较,探讨荧光定量PCR法与ELISA法对HCMV感染的诊断价值。方法 378例疑似HCMV感染婴儿,为金乡县人民医院2014年7月至2015年6月新生儿科及儿科住院患儿,根据年龄分为两组:新生儿组(0-28天)116例,婴儿组(29天~12月)262例;其中男230例,女148例。选择未感染HCMV病毒的新生儿血清标本100例作为正常对照组。分别收集血液、尿液及母乳。分别应用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测DNA,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)比较,并进行统计学处理。结果不同标本血液、尿液、母乳HCMV-DNA检出率比较,新生儿组母乳检出率最高,血液次之尿液最低;婴儿组尿液检出率最高。荧光定量PCR法检测尿液DNA含量较酶联免疫法检测血清Ig M抗体阳性率高,两者比较有统计学意义(P0.01)。结论血液检测是有创检查,尤其是新生儿采血又很困难,通过本试验得出可以用尿液HCMV-DNA检测代替巨细胞病毒的初筛;荧光定量PCR法阳性检出率高于酶联免疫法检测血清Ig M抗体,两者比较有统计学意义,表明荧光定量PCR法在临床上对巨细胞病毒的诊断更有优势和价值。     

婴儿肝炎综合征肝脏巨细胞病毒低基质磷酸化蛋白的检测意义

目的：观察人巨细胞病毒（HCMV）低基质磷酸化蛋白（pp65）在婴儿肝炎综合征肝脏组织中的表达,为诊断婴儿巨细胞病毒性肝炎提供科学依据.方法：选择30例婴儿肝炎综合征患儿,在B超介导下进行肝组织活检,免疫组化法检测肝组织中HCMV pp65抗原,观察婴儿巨细胞病毒性肝炎特异性病理改变,同时用ELISA方法检测血清HCMV IgM水平,计算并比较两指标的阳性率.结果：30例婴儿肝炎综合征患儿肝组织HCMVpp65抗原阳性18例,血清IgM阳性6例,阳性率分别为60％、20％.两者阳性率比较差异有显著性（P＜0.01）.结论：通过免疫组织化学检测婴儿肝组织中HCMV pp65抗原表达,可用于诊断婴儿巨细胞病毒性肝炎.     

低基质磷酸化蛋白检测对婴儿肝炎综合征巨细胞病毒活动性感染的诊断价值

目的:探讨低基质磷酸化蛋白(PP65)抗原血症检测法(AA)在诊断婴儿肝炎综合征巨细胞病毒(CMV)活动性感染中的诊断价值.方法:对52例婴儿肝炎综合征患儿采用间接免疫荧光染色法检测PP65、免疫荧光定量PCR检测血浆HCMV-DNA、酶联免疫吸附法(ELISA)检测CMV-IgM等三种方法平行检测52例血标本.通过检测的结果,分析AA对婴儿肝炎综合征巨细胞病毒活动性感染的诊断价值.结果:①52例婴儿肝炎综合征患儿有39例CMV活动性感染,PP65、PCR、ELISA的阳性检出率分别为82.1%(32/39)、87.2%(34/39)和56.4%(22/39).三方法的阳性检出率存在差异(x2=11.37,P＜0.01),两两比较PP65与IgM差异具有显著性(x2=6.01,P＜0.05),与PCR相比差异无显著性(P＞0.05).②相对于PCR,PP65的敏感性与特异性为94.1%、100%.阳性预测值为100%(32/32),阴性预测值为71.4%(5/7),两者的总符合率为94.9%(37/39).结论:PP65抗原血症检测法具有高敏感性和特异性,对婴儿肝炎综合征CMV活动性感染有早期诊断的意义,可指导早期干预治疗.     

FQ—PCR法与IBT法在人巨细胞病毒检测中的价值比较

目的对荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒进行比较分析。方法分别应用FQ—PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMVDNA和血清HCMV IgM。结果42例小儿尿HCMVDNA阳性检出率为57．14％,血HCMV IgM阳性检出率为35．71％。前者的诊断阳性率高于后者（χ2=3．88,P〈0．05）,有统计学差异;42例成人尿HCMVDNA阳性检出率为14．29％,血HCMVIsM阳性检出率为71．43％。后者的诊断阳性率显著高于前者（χ2=28,P〈0．005）,有统计学差异;84例患者尿HCMVDNA阳性检出率为38．10％,血HCMVIgM阳性检出率为48．81％。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ2=1．96,P〉0．1）。结论FQ—PCR检测HCMVDNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

巨细胞病毒DNA早期抗原与巨细胞病毒-IgM、IgG滴度一致率的对比研究

目的 :正确认识巨细胞病毒 (CMV)DNA及CMV早期抗原 (EA)的病毒学意义及临床价值。方法 :检查 34例急性黄疸性肝炎患儿和 19例健康儿童的血白细胞CMV DNA、尿CMV DNA、血白细胞CMV EA ,并与其同时检测的CMV IgM、CMV IgG双份血清 (急性期 /恢复期 )滴度有 4倍以上升高 (IgG升高 )相比较。结果 :CMV DNA与CMV IgM及CMV IgG升高的一致率都低于 5 0 % ;CMV EA与CMV IgM的一致率为 6 6 .7% (肝炎患儿 )、6 8.4% (健康儿童 ) ,显著高于血CMV DNA( 37.7% ,P <0 .0 1)和 CMV DNA( 4 4.4% ,P <0 .0 5 )与CMV IgM的一致率 ,但CMV EA与CMV IgG升高无相关性 ;CMV DNA与CMV EA在肝炎患儿和健康儿童中的检出率无显著差异性。结论 :CMV DNA定性检查不适于做为CMV活动性感染的指标 ,而CMV EA更能反映CMV的活动性感染。联合开展CMV的多种抗原检查以及定量检查CMV 抗原和DNA可能是必要的     

不同年龄段患者中人巨细胞病毒的感染状况

目的 了解沈阳地区不同年龄段患者中人巨细胞病毒?(HCMV)?的感染状况.方法 选择疑似HCMV感染患者123616例,采用荧光定量PCR技术检测HCMV?DNA,化学发光免疫分析法检测血清HCMV?IgM和IgG抗体,收集患者临床诊断信息.结果 HCMV?DNA、IgM抗体、IgG抗体阳性率分别为12.48％、2.3...     

Cytomegalovirus Infection in Children's Liver Tissues

Humancytomaglovirus(HCMV)infectioninchildrenisverycommonandisoneofthecausesofinfantilehepatitissyndrome(IHS)[lj.ThedetectionofHCMVinthesamplesofurine,salivaandserumcouldnotdirectlyreflecttheHCMVinfectioninlivertissues,becauseHCMVisdemonstratedtohaveawidetissuetropism.Inthisstudy,immediateearlyantigen(IEA)andearlyantigen(EA)ofHCMVinfectioninlivertissueweredetectedin72patientsbyusingimmunoperoxidasehistochemicalstaining.1METERIALSANDMETHODS1.1SamplesOf72samplesoflivertissue,34…     

Cytomegalovirus infection in children’s liver tissues

Summary Immunoperoxidase histochemical assay with monoclonal antibody against human cytomaglovirus (HCMV) was used to detect immediate early antigen (IEA) and early antigen (EA) of HCMV infection in liver tissue of 72 pediatric cases (34 autopsies and 38 biopsies). The HCMV antigen was positive in 25 % (18/27). Among them, 12 cases were both HCMV-IEA and EA positive; 4 were HCMV-IEA positive and 2 HCMV-EA positive only. Liver HCMV infection rate in neonates, the infants with the age <1 year and >1 year was 8. 0 %, 60. 0 %, and 14. 8 %, respectively, indicating that liver HCMV infection occurred at various ages. The liver HCMV infection rate in different diseases was 50. 0 % in infantile hepatitis syndrome; 70. 0 % in extrabiliary malformation, and 12. 5 % in other hepatopathies, suggesting that infantile hepatitis syndrome and extrabiliary malformation were related with HCMV infection in liver tissues.     

贫困山区早孕期HCMV宫内感染与UL54基因突变的研究

目的:探讨贫困山区早孕期人巨细胞病毒(HCMV)宫内活动性感染与HCMVUL54基因突变的关系。方法:采用免疫组织化学(SABC)PCR-RFLP的方法检测人绒毛组织中HCMV早期抗原的存在及HCMVUL54基因密码子501是否发生突变。结果:贫困山区早孕期妇女HCMV宫内活动性感染率为18.91%;PCR-RFLP分析结果显示,在早孕期HCMV宫内感染者中UL54501密码子未发生突变。结论:贫困山区早孕期HCMV宫内感染与HCMVUL54基因密码子501突变无关,但不排除其他位点的突变或其他形式异常导致病毒致病性改变存在的可能性。     

献血者巨细胞病毒感染筛查的初步研究

目的：探讨检测人巨细胞病毒(HCMV)的低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原对健康献血巨细胞病毒感染情况的筛查。方法：对2003年2～7月收集的103份EDTA抗凝外周血标本，用免疫组化方法进行pp65抗原血症检测，同时以ELISA法检测其中的86份血清中的IgM和IgG抗体。结果：103份标本中共有10份pp65抗原阳性，阳性率为9．71％；ELISA法检测86份标本CMV—IgM抗体全部阴性，CMV—IgG抗体56例阳性，阳性率为62％(56／86)，10份pp65抗原阳性的标本中，CMV—IgG阳性9例。结论：pp65抗原是检测CMV感染的一种敏感、特异的方法，而检测CMV—IgM、CMV—IgG不能预测CMV的活动性感染，因此对需要输注全血、成分血的免疫力低下或各种移植病人，应进行CMVpp65抗原的检测。     

电镜快速诊断婴儿巨细胞病毒感染

本文报告以琼脂糖凹杯与普通滤纸组成的吸水系统浓集尿标本,以电镜快速诊断婴儿 HCMV 感染。在129例无症状和一般疾患婴儿尿液中,23例检出 HCMV 颗粒。有包膜的颗粒直径为170～185nm,核衣壳直径约100nm。在核衣壳上有排列规则的壳微体。尿液中所含的病毒颗粒在人胚肺成纤维细胞中引起胞核和胞浆内包涵体的特征性改变、鉴定为 HCMV。初步观察表明,应用电镜快速诊断婴儿 HCMV 感染是可行的。     

肾移植受者外周血循环中pp65阳性内皮细胞的新模式

目的：为了观察感染人类巨细胞病毒（Human cytomegalovirus HCMV）的1例女性肾移植外周血中膨大内皮细胞（Cytomegalic endothelial cells,CEC)的一种新模式。方法：本研究运用了HCMV pp65抗原分析法，实时PCR技术、流式细胞分析法等系列技术。结果：发现这一围绕并粘附了许多白细胞的蛋白样物质内，含有几个pp65阳性的CEC。这种蛋白质样物质的成分和功能目前还不清楚。该患者外周血中出现CEC表明其血管有损伤，而且该患者的CD4^ 及CD8^ 淋巴细胞的百分比都超出正常范围。其血浆、外周血白细胞及尿液中的HCMV-DNA都阳性，但该患者并没有明显的HCMV病症状。结论：HCMV感染和CEC形成之间的关系需进一步研究。     

巨细胞病毒感染胎盘的免疫病理观察

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染胎盘的病理变化及其在HCMV宫内传播中的意义。方法HCMV感染孕妇的胎盘组织作常规HE染色及HCMVIEA和EA免疫组织化学染色,观察其病理变化。结果HCMV感染胎盘表现不同程度的绒毛炎或正常,未见典型巨细胞包涵体。HCMV抗原阳性染色见于绒毛毛细血管内皮细胞、Hofbauer细胞、其他间质细胞和合体滋养细胞。结论HCMV在胎盘屏障细胞中的序列传播和绒毛胎血屏障的破坏可能是其宫内传播的途径。     

Rapid detection of human cytomegalovirus DNA in urine samples by polymerase chain reaction in vitro gene amplification

In the detection of human cytomegalovirus (HCMV) DNA in the urine by polymerase chain reaction (PCR). We have designed and synthesized two pairs of oligonucleotide primers (patent pending) corresponding to the specific and conserved DNA sequences of HCMV AD 169 strain. The sequences of the primers were checked that they did not have cross reaction with either normal human genomic DNA or with other herpesviruses. As less as 1fg of HCMV DNA (equal to the amount of DNA from four HCMV virions) in urine can be detected by the method A total of 47 urine specimens from infants suspected of HCMV infection was examined by PCR and conventional virus isolation simultaneously 31 samples were positive in both PCR and virus isolation; 12 samples were negative in either; 4 samples were positive in PCR but negative in virus isolation. So the samples were further examined by serology and the data showed that there was HCMV-specific IgM in all the virus isolation negative sera examined. The result suggests that HCMV in the above samples is possibly underdetected by virus isolation. Therefore the method described in the paper is a specific, sensitive, rapid conventional and non radioisotopic one for detection of HCMV in urine samples.     

婴幼儿人巨细胞病毒感染154例PCR与ELISA检测比较

目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率。方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCMV DNA的检测。结果:血和尿HCMV DNA同时检测,尿检出率明显高于血;血和尿HCMVDNA检出率明显高于血清HCMV IgM;两种方法的联合检测进一步提高阳性率。结论:两种方法同时检测可提高HCMV的检出率;尿标本HCMV DNA的检出率明显高于血标本,采用尿标本更方便,且阳性率高。