hRad17在浸润性乳腺癌中表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的 探讨乳腺癌组织中hRad17表达及其与细胞增殖、凋亡之间的关系.方法 采用免疫组化SP法检测90例乳腺浸润性癌、8例乳腺原位癌及20例乳腺良性病变组织中hRad17表达.测定90例乳腺浸润性癌组织中Ki-67、微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance proteins,MCM7)、Bcl-2、p53、ER、PR、c-erbB-2的表达.结果 hRad17蛋白在乳腺浸润性癌、乳腺原位癌和乳腺良性病变三组病例中表达差异有统计学意义(P<0.05).90例乳腺浸润性癌中,hRad17阳性表达56例(62.2%).乳腺浸润性癌的hRad17的阳性表达与乳腺癌的临床分期、组织学分级、淋巴结转移及Ki-67、MCM7、Bcl-2表达密切相关,与患者生存期呈负相关(P<0.05).hRad17的表达与患者年龄、肿块大小、组织学类型和p53、ER、PR、c-erbB-2表达均无关(P>0.05).结论 hRad17在乳腺癌中表达上调,提示在乳腺癌发生、发展中起重要作用.hRad17可成为判断乳腺癌预后新的分子标记物.     

乳腺癌细胞凋亡、增殖与相关基因表达、突变的关系

目的:研究乳腺癌细胞凋亡、细胞增殖及相关基因表达、突变的关系,为乳腺癌细胞凋亡、细胞增殖失衡的基因调控机制提供依据。方法:分别应用TUNEL法、免疫组化S-P法和PCR-SSCP法检测54例乳腺癌标本凋亡指数(AI)和增殖指数(MI),Bcl-2、p53、c-erbB-2、PCNA、Ki67、TopoⅡ蛋白表达和p53基因突变。结果:54例乳腺癌AI平均9.40±3.78,MI平均5.96±2.36,AI与MI呈显著正相关(r=0.46,P＜0.01)。Bcl-2、PCNA、Ki67、TopoⅡ表达与AI、MI均呈显著正相关(P＜0.01)。p53表达、c-erbB-2表达、p53突变与MI呈显著正相关(P＜0.01)。p53基因突变类型与AI呈显著相关(P＜0.05)。结论:乳腺癌细胞凋亡、增殖失衡与相关基因异常表达、突变有关。     

Livin基因、FHIT基因与妇科肿瘤间关系研究进展

目的:总结Livin基因、FHIT基因与妇科肿瘤的关系.方法:在Pubmed、中国知网查阅有关Livin基因、FHIT基因与妇科肿瘤关系的文献,进行汇总分析.结果:在妇科肿瘤中,Livin基因高表达、FHIT基因低表达,抑制细胞凋亡,促进肿瘤的发生.结论:通过对Livin基因、FHIT基因的深入研究,为妇科肿瘤的治疗提供新靶点.     

睾丸性不育症中Livin、Bim蛋白表达与凋亡的关系

目的探讨睾丸性不育症中Livin、Bim蛋白表达及其与凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法检测Livin和Bim蛋白在睾丸性不育症组织中的表达;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,TUNEL)技术检测凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果睾丸性不育症生精细胞中Livin蛋白表达明显低于正常睾丸组织(P<0.05);Bim蛋白表达和AI明显高于正常睾丸组织(P<0.05)。Livin与Bim和AI呈负相关(r=-0.427,r=-0.399,P均<0.05),Bim与AI呈正相关(r=0.414,P<0.05)。结论人睾丸组织表达Livin蛋白,Livin和Bim蛋白参与了精子形成过程。AI与生精障碍程度相关。     

显色原位杂交和免疫组织化学检测乳腺癌HER2/neu基因状况和蛋白表达的对照性研究

目的探讨显色原位杂交（CISH）在检测乳腺癌中HER2／neu基因扩增上的作用。方法挑选乳腺浸润性导管癌患者组织石蜡蜡块（回顾性255例,前瞻性271例）,进行免疫组织化学（IHC）、CISH检测。15例回顾性标本送往德国HERA检测中心进行FISH检测。结果（1）回顾性病例中IHC阳性3＋者CISH基因扩增率为91．6％（120／131）,IHC2＋者CISH基因扩增率为56．5％（39／69）,IHC与CISH检测结果符合率为81．2％（207／255）,两者明显相关（P〈0．01）。（2）前瞻性病例中IHC蛋白过表达率31．7％．CISH基因扩增率27．3％。IHC3＋者CISH基因扩增率为91．4％（53／58）,IHC2＋者CISH基因扩增率为46．4％（13／28）,IHC与CISH检测结果符合率为89．7％（243／271）,两者明显相关（P〈0．01）。（3）经德国检测中心荧光原位杂交（FISH）检测的15例中14例和CISH结果完全一致,1例检测失败,而CISH为无扩增。（4）CISH检测基因扩增与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达明显负相关（P值均〈0．01）。结论CISH检测HER2基因扩增结果与IHC检测蛋白过表达及FISH结果高度一致,CISH是检测HER2基因扩增的一项新技术。     

乳腺癌和非癌组织中DLC1基因及蛋白表达与Ki-67的关系

目的探讨乳腺癌和非癌组织中DLC1表达及其与Ki-67的相互关系。方法应用原位杂交技术和免疫组织化学En-Vision两步法,检测52例乳腺浸润性导管癌和42例非癌组织(包括癌旁乳腺组织20例和乳腺纤维腺瘤22例)中DLC1-mR-NA、DLC1和Ki-67的表达。结果DLC1-mRNA和蛋白在乳腺癌中的阳性率(50%和57.7%)低于非癌乳腺组织(90.5%和92.9%),差异有统计学意义(χ2=17.518和10.729,P0.01)。DLC1-mRNA与蛋白的表达呈正相关(rs=0.379,P0.01)。Ki-67在乳腺癌中的阳性率为61.5%,而在非癌组织中均呈阴性表达,两者差异有显著统计学意义(χ2=39.186,P0.01)。乳腺癌中DLC1与Ki-67的表达呈负相关(rs=-0.507,P0.01)。结论DLC1-mRNA和蛋白在乳腺癌中呈低表达或缺失,提示其与乳腺癌的发生、发展有关,DLC1有抑制乳腺癌细胞增殖的功能,可作为乳腺癌新的分子标记物。联合检测DLC1和Ki-67在乳腺癌中的表达,有望成为估价乳腺癌生物学行为的参考指标。     

凋亡抑制蛋白Livin、细胞凋亡与肿瘤治疗

Livin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,主要通过抑制Caspases蛋白发挥抑制细胞凋亡的作用,主要在胎盘组织中表达,同时在一些肿瘤组织中呈高表达,尤其是在黑色素瘤细胞系表达水平最高.研究表明,Livin与肿瘤的发生、发展关系密切,是一个有潜在价值的肿瘤标志物,此外,反义Livin以及Livin活性抑制物的研究有望成为肿瘤治疗的新靶点.     

显色原位杂交检测乳腺癌HER2基因扩增的应用价值

目的评估显色原位杂交（CISH）技术在检测乳腺癌标本中HER2基因扩增的应用价值。方法分别采用免疫组织化学（IHC）EnVision和CISH两种方法,检测165例乳腺癌中HER2蛋白表达及HER2基因扩增的情况。结果（1）IHC检测HER2蛋白表达阴性者107例,表达阳性1＋者24例,CISH均未检测到HER2基因扩增;（2）IHC检测HER2表达3＋者22例,CISH检测中21例呈现HER2基因的高倍扩增,仅1例呈低倍扩增,HER2基因高倍扩增及其蛋白表达之间的符合率为95．5％;（3）IHC检测HER2表达2＋者12例,CISH检测有3例HER2基因呈高倍扩增,6例呈低倍扩增,3例无扩增。结论CISH在检测HER2基因扩增与IHC检测的结果具有较高的一致性和敏感性,可以作为一种检测乳腺癌HER2基因状况的方法。     

乳腺癌HER2蛋白表达阳性者的基因状态分析

目的探索中国大陆女性乳腺癌HER2蛋白过表达人群中HER2基因状态、蛋白表达与基因扩增的一致性、17号染色体非整体性的发生情况及其意义。方法采用PathVysion^TM探针试剂盒,以荧光原位杂交（FISH）方法,分析经免疫组织化学（IHC）方法（HercepTest^TM试剂盒）确认的120例HER2蛋白表达阳性（IHC2＋者42例,IHC3＋者78例）的乳腺癌石蜡切片标本的HER2基因状态和17号染色体非整体性的发生率。结果HER2表达IHC2＋的标本中,基因扩增率76．19％（32／42）,其中低度扩增（比值2～4）26．19％（11／42）,中度扩增（比值4—10）41．62％（20／42）,高度扩增（比值〉10）2．38％（1／42）;IHC3＋的标本中,基因扩增率91．03％（71／78）,其中低度扩增11．54％（9／78）,中度扩增61．54％（48／78）,高度扩增17．95％（14／78）。全部病例中具有17号染色体非整体性者69．17％（83／120）,包括亚二体性（17号染色体平均数≤1．75）11．67％（14／120）、低多体性（17号染色体平均数2．26～3．75）43．33％（52／120）和高多体性（17号染色体平均数≥3.76）14．17％（17／120）。IHC2＋病例中17号染色体非整体性59．52％（25／42）,包括亚二体性7．14％（3／42）、低多体性42．86％（18／42）和高多体性9．52％（4／42）;IHC3＋病例中17号染色体非整体性74．36％（58／78）,包括亚二体性14．10％（11／78）、低多体性43．59％（34／78）和高多体性16．67％（13／78）。IHC2＋者FISH阳性以HER2基因中、低度扩增为主,而IHC3＋者则呈中、高度基因扩增的趋势,两者差异有统计学意义（P=0．0003）。IHC3＋中,7例FISH阴性中6例有17号染色体非整体性;IHC2＋中,10例FISH阴性中5例有17号染色体非整体性。结论在本组中国大陆女性乳腺癌人群中,IHC3＋与FISH阳性的一致性较高;IHC2＋者FISH阳性率高于国外研究者的数据;HER2蛋白阳性乳腺癌中17号染色体非整体性发生比例较高;IHC2＋和3＋者都具亚二体性、低多体性和高多体性特征,且两者均以低多体性为常见;IHC2＋者的HER2基因扩增多为中、低度扩增,而IHC3＋中FISH阳性者则以高比值者居多。IHC3＋而FISH阴性的主要原因为17号染色体非整体性。     

前列腺癌中EZH2 mRNA及蛋白表达与细胞增殖的关系

目的 探讨EZH2 mRNA和蛋白在前列腺癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系.方法 通过组织芯片技术,应用原位杂交和免疫组化方法检测48例前列腺癌中EZH2 mRNA和蛋白的表达以及Ki-67增殖指数,同时检测15例良性前列腺增生组织(BPH)和12例高级别上皮内瘤变(HGPIN)中EZH2 mRNA和蛋白的表达.结果 前列腺癌组织中EZH2蛋白和mRNA阳性率分别为87.50%和81.25%,均高于BPH和HGPIN,差异有显著性(P<0.05).EZH2蛋白与mRNA表达之间差异无统计学意义(P>0.05).EZH2蛋白的表达与Gleason分级、TNM分期相关(P<0.05),与患者年龄和术前血清前列腺特异抗原(PSA)水平无关(P>0.05).EZH2 mRNA的表达与TNM分期相关(P<0.05),与患者年龄、术前PSA水平及Gleason分级无关(P>0.05).EZH2蛋白表达程度与Ki-67细胞增殖指数呈明显正相关(r=0.746,P<0.05).结论 EZH2 mRNA及其蛋白在前列腺癌中表达上调,通过促进肿瘤细胞增殖使得肿瘤发生、发展,有望成为预测前列腺癌恶性程度进程的参考指标.     

乳腺癌中郑氏植物蛋白的表达及其与Her-2基因扩增的关系

目的检测郑氏植物蛋白片段(Zheng’s plant protein segment,ZPPS)在乳腺癌中的表达,探讨其临床病理联系及其与Her-2基因表达的相关性。方法应用免疫组化SP法检测51例乳腺癌与23例正常乳腺组织中ZPPS的表达;应用FISH技术检测Her-2基因在乳腺癌中的表达。结果正常乳腺组织中,8例ZPPS呈阳性表达,阳性率为34.78%;乳腺癌组织中,38例ZPPS呈阳性表达,阳性率为74.51%,二者表达差异有统计学意义(P<0.05)。51例乳腺癌中Her-2基因扩增率为39.22%,ZPPS阳性表达与FISH检测Her-2基因扩增呈负相关(P<0.05)。ZPPS的表达与淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。结论标记ZPPS对乳腺癌的诊断及判定淋巴结转移具有实用价值。因在乳腺癌中ZPPS的表达与Her-2基因扩增呈负相关,所以临床病理工作中可选择ZPPS阴性病例进行FISH检测,从而减少盲目进行FISH基因扩增和Herceptin分子靶向治疗的病例。     

乳腺癌及乳腺良性病变中BCL-6 mRNA和蛋白表达及生物学意义

目的研究BCL-6在人乳腺癌及乳腺良性病变组织中的表达情况,探讨BCL-6的表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系及其在乳腺癌中的生物学意义。方法采用免疫组化MaxVision两步法检测127例乳腺癌中BCL-6蛋白的表达,另随机选取其中74例采用原位分子杂交(in situ hybridizationI,SH)法检测BCL-6 mRNA的表达。同时分别检测50例乳腺良性病变组织中BCL-6 mRNA和蛋白的表达。结果 BCL-6 mRNA和蛋白在乳腺癌组织中的阳性率分别为54.1%(40/74)和32.3%(41/127),两者呈正相关;50例乳腺良性病变组织中分别有3例和5例的少数腺上皮细胞(<10%)呈BCL-6蛋白和BCL-6mRNA弱阳性。BCL-6蛋白的表达与乳腺癌组织学分级、肿瘤大小及TNM分期均相关(P<0.01),但与患者年龄和腋窝淋巴结转移无关。结论 BCL-6蛋白可能成为乳腺癌中一个新的有价值的分子标记物。     

MTSS1基因在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究MTSS1基因在膀胱癌中组织的表达及其对膀胱癌EJ138细胞增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测41例膀胱癌及相应癌旁正常组织中MTSS1基因的表达。将MTSS1基因特异性的siRNA转染EJ138细胞。转染后,Western Blot检测转染后MTSS1蛋白的表达,MTT法测定细胞生长抑制率,流式细胞法检测细胞凋亡率。结果与癌旁正常组织相比,MTSS1 mRNA在膀胱癌组织中表达明显下调。RNA干扰能够显著抑制EJ138细胞中MTSS1蛋白的表达;MTSS1基因表达降低后,EJ138细胞的生长抑制率明显降低,细胞增殖活力明显增加,而且凋亡率明显降低。结论 MTSS1基因在膀胱癌低表达,促进膀胱癌细胞增殖并抑制细胞凋亡。     

Epidermal growth factor receptor gene amplification and protein overexpression in basal-like carcinoma of the breast

Shao M‐M, Zhang F, Meng G, Wang X‐X, Xu H, Yu X‐W, Chen L‐Y & Tse G M
(2011) Histopathology 59 , 264–273 Epidermal growth factor receptor gene amplification and protein overexpression in basal‐like carcinoma of the breast Aims: Epidermal growth factor receptor (EGFR) is frequently expressed in basal‐like breast cancer (BLBC). The aim of this study was to evaluate their correlation as detected by immunohistochemistry (IHC) or fluorescence in‐situ hybridization (FISH). Methods and results: IHC for oestrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), human epidermal growth factor receptor (HER) 2, cytokeratin (CK) 5/6 and EGFR, and FISH for EGFR amplification, were performed in 59 cases of BLBC. EGFR IHC results were scored semiquantitatively, and compared with its gene amplification status. ER, PR and HER2 were negative in all cases, whereas 35 and 55 cases were positive for CK5/6 and EGFR. For EGFR IHC, 20, 11, 11 and 17 cases showed a negative, a low, an intermediate or a high staining level, respectively, and seven cases showed gene amplification by FISH, with two, 19, 11 and 20 cases showing balanced monosony, disomy, trisomy, and polysomy respectively. Immunohistochemical expression in gene‐amplified tumours was significantly higher than in those without amplification, including balanced polysomy tumours. EGFR immunohistochemical expression also correlated with the EGFR/chromosome 7 ratio. High sensitivity (86%) and negative predictive value (98%) were achieved with high‐level immunohistochemical expression as a cut‐off to predict gene amplification. Conclusions: High‐level EGFR immunohistochemical expression correlated with and predicted EGFR amplification, and may be used as a screening method to exclude gene amplification.     

原位杂交法检测BP1基因在乳腺癌组织中表达

目的探讨BP1同源盒基因在乳腺癌中的表达及其与临床病理指标的关系。方法收集165例乳腺癌临床和病理资料,采用原位杂交法检测BP1的表达,同时用二步法进行ER、p53、PCNA、bcl2、cerbB2免疫组化染色。结果BP1基因表达率为67.88%,免疫组化:ER70.30%、p5349.09%、PCNA74.55%、bcl253.33%、cerbB275.52%。BP1与bcl2具有相关性(P<0.01),且均与ER相关(P<0.05),与p53呈负相关(P<0.05)。BP1与PCNA、cerbB2、患者年龄、组织学类型、淋巴结转移等无相关性。结论BP1可能通过某种非依赖p53基因调控机制,与bcl2、ER协同抑制肿瘤细胞的凋亡而参与乳腺癌的发生。     

bcl—2／bax对不同乳腺癌细胞凋亡的调节作用

目的：了解bcl-2/bax在乳腺癌细胞的p53依赖性凋亡和p53非依赖性凋亡中的作用。方法：用原位杂交的方法检测化疗药物VM-26诱导入乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S凋亡前后bcl-2和bax的mRNA表达情况。结果：与MDA-MB-435S细胞相比,MCF-7细胞的bcl-2 mRNA水平较高。两株细胞均能在VM-26的作用下发生凋亡。药物诱导后,MCF-7细胞的bcl-2 mRNA表达下降,bax mRNA表达增加;MDA-MB-435S细胞bax mRNA表达增加,bcl-2、mRNA无明显变化。结论：wt p53可在转录水平调节bcl-2/bax的表达,从而介导凋亡作用;bax在p53非依赖性凋亡中也发挥一定作用;bcl-2的高表达可能与肿瘤耐药性有关。     

Osthole inhibits proliferation of human breast cancer cells by inducing cell cycle arrest and apoptosis

Recent studies have revealed that osthole,an active constituent isolated from the fruit of Cnidium monnieri(L.) Cusson,a traditional Chinese medicine,possesses anticancer activity.However,its effect on breast cancer cells so far has not been elucidated clearly.In the present study,we evaluated the effects of osthole on the proliferation,cell cycle and apoptosis of human breast cancer cells MDA-MB 435.We demonstrated that osthole is effective in inhibiting the proliferation of MDA-MB 435 cells,The mitochondrion-mediated apoptotic pathway was involved in apoptosis induced by osthole,as indicated by activation of caspase-9 and caspase-3 followed by PARP degradation.The mechanism underlying its effect on the induction of G1 phase arrest was due to the up-regulation of p53 and p21 and down-regulation of Cdk2 and cyclin D1 expression.Were observed taken together,these findings suggest that the anticancer efficacy of osthole is mediated via induction of cell cycle arrest and apoptosis in human breast cancer cells and osthole may be a potential chemotherapeutic agent against human breast cancer.     

肺鳞状细胞癌中死亡相关蛋白激酶的表达

目的　检测肺鳞状细胞癌中死亡相关蛋白激酶 (DAP K)mRNA表达及细胞凋亡 ,探讨DAP K与细胞凋亡的关系及其在肺鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法　用原位分子杂交法检测 6 0例肺鳞状细胞癌、9例癌旁肺组织DAP KmRNA表达 ;用原位末端标记TUNEL法检测相应组织中细胞凋亡 ,计算凋亡指数 (AI)。结果　肺鳞状细胞癌的DAP KmRNA阳性表达率为 4 6 7% ,癌旁肺组织为 6 7 7% ,其阳性率高于肿瘤组织 (P <0 0 1 )。在肺鳞状细胞癌中 ,高分化癌DAP KmRNA阳性率为 70 % ,低分化癌为 2 3 3% ,高分化癌的DAP KmRNA阳性率高于低分化癌 (P <0 0 1 )。肺鳞状细胞癌的细胞AI为(0 6 72 8± 0 4 2 6 1 ) % ,癌旁肺组织中支气管肺泡上皮细胞AI为 (1 0 2 89± 0 2 4 33) % ,癌旁肺组织的AI高于肿瘤组织 (P<0 0 1 )。在肺鳞状细胞癌中 ,高分化癌的AI为 (0 5 82 3± 0 1 92 2 ) % ,低分化癌为 (0 4 4 6 0± 0 1 92 5 ) % ,高分化癌的AI高于低分化癌 (P <0 0 1 )。DAP KmRNA呈阳性表达的肺癌 ,其AI为 (0 5 31 7± 0 2 0 97) % ;DAP KmRNA呈阴性者 ,其AI为 (0 4 872± 0 1 91 8) % ,两组间差异有显著性 (P <0 0 5 )。在连续切片上 ,DAP KmRNA阳性细胞的分布区域与凋亡阳性细胞的分布相似。DAP KmRNA呈阳性表达