应用逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒感染

为建立一种能检测出临床上绝大多数肠道病毒（ＥＶ）感染的快速、敏感、特异的逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，通过对ＥＶ基因组的序列分析，在其５′端非编码区设计一对引物，用该引物建立的ＲＴ－ＰＣＲ方法对３１种ＥＶ标准毒株和３４例无菌性脑膜炎及１１例无菌性脑炎患儿的脑脊液（ＣＳＦ）分别进行扩增，其产物做琼脂糖凝胶电泳及斑点杂交检测。研究表明，３１种ＥＶ标准毒株斑点杂交的敏感度达１０－２～１０－３５０％组织培养感染量（ＴＣＩＤ５０）。３４例无菌性脑膜炎中２１例阳性（６１．８％），１１例无菌性脑炎中８例阳性（７２．７％）；阳性患儿恢复期ＣＳＦ，２例无菌性脑膜炎和１例无菌性脑炎仍为阳性。提示用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＥＶ感染是值得推广的。     

中枢神经系统感染患儿脑脊液中IL-6的测定及其意义

近年来 ,细胞因子在中枢神经系统感染性疾病的发病和病变进展中的作用倍受重视 ,有关中枢神经系统感染患儿脑脊液 (ＣＳＦ)中白细胞介素 6 (ＩＬ 6 )的变化国内报道尚少。我们检测了 5 0例初诊为中枢神经系统感染患儿ＣＳＦ中ＩＬ 6的水平 ,现报告如下。对象和方法中枢神经系统感染患儿共 5 0例 ,男 2 9例 ,女 2 1例 ;年龄2个月～ 13岁。其中化脓性脑膜炎 (ＰＭ) 18例 ,经ＣＳＦ常规、生化、细菌学检查及抗生素治疗有效而确诊。病毒性脑膜炎(ＶＭ)或脑炎 (ＶＥ) 32例 ,根据ＣＳＦ常规、生化检查及临床表现作出临床诊断。对照组 12例 ,男 9…     

逆转录多聚酶链反应对肠道病毒性脑膜炎、脑炎诊断价值探讨

目的探讨中枢神经系统感染的病原体及其检测方法。方法应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测６４例无菌性脑膜炎及２７例无菌性脑炎患儿脑脊液（ＣＳＦ）中肠道病毒（ＥＶ）ＲＮＡ。结果急性期ＣＳＦ中ＥＶＲＮＡ阳性检出率为：无菌性脑膜炎６０９％,脑炎４８１％;阳性患儿恢复期ＣＳＦ仅个别阳性;对照组全部阴性。起病５天以内阳性率明显高于５天以后（Ｐ＜００５）;５～１０月份较１１～４月份发病率高（Ｐ＜００５）。２５例病毒分离阳性者中２４例ＲＴ－ＰＣＲ阳性,５３例病毒分离阴性者中１９例ＲＴ－ＰＣＲ阳性,ＲＴ－ＰＣＲ敏感性显著高于病毒分离的敏感性（Ｐ＜００１）。结论ＥＶ是引起中枢神经系统感染的重要病原体,ＲＴ－ＰＣＲ技术是诊断ＥＶ感染的有效方法。     

急性感染时血清粒细胞集落刺激因子的检测

目的探讨急性感染时血清粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）水平的变化规律，为急性感染的诊断提供依据。方法肺部感染、消化道感染及全身感染患者共７０例，入院当天均作血清Ｇ－ＣＳＦ血培、养及血常规检测。Ｇ－ＣＳＦ的测定采用双抗体夹心酶联免疫法。对测定结果进行统计学处理。结果７０例急性感染患者，Ｇ－ＣＳＦ阳性者４４例，阳性率为６２．８５％，细菌培养３４例阳性，阳性率为４８．５７％。肺部感染、消化道感染及全身感染，Ｇ－ＣＳＦ的阳性率分别为３０％、６９％、８３％。７０例患者血培养阳性者１８例（２５．７％）。与Ｇ－ＣＳＦ阳性率相比，差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。４４例Ｇ－ＣＳＦ阳性患者抗感染治疗前后中性粒细胞绝对值（ＡＮＣ）分别为（８．３８±３．３９）×１０９／Ｌ和（４．１２±１．４７）×１０９／Ｌ（ｔ＝７．６１，Ｐ＜０．００１）。结论急性感染患者血清中Ｇ－ＣＳＦ水平显著升高。测定血清Ｇ－ＣＳＦ可作为判断细菌感染的敏感指标，与血培养及血常规检查相比，其敏感度、阳性率高，但特异性较差。     

中枢神经系统感染患儿脑脊液补体C3、C4检测的临床意义

细菌性脑膜炎(ＢＭ)是一种危重但可治疗的疾病,而病毒性脑炎(ＶＥ)常可自然消退,因此中枢神经系统(ＣＮＳ)感染时病因诊断非常重要。有研究表明,补体系统参与ＢＭ的鞘内炎症形成[1,2]。为此,1996年10月～1998年4月我们检测了ＢＭ、ＶＥ及非ＣＮＳ感染患儿ＣＳＦ中补体Ｃ3、Ｃ4(简称Ｃ3、Ｃ4)的含量。现报告如下。对象和方法1对象:(1)ＶＥ组65例,男41例,女24例;年龄11个月～13岁。根据流行病学、临床表现、脑脊液(ＣＳＦ)常规、生化改变及细菌学检查确定诊断,其中11例为腮腺炎脑炎。(2)ＢＭ组27例,男16例,女11例;年龄70ｄ～12岁。根据临床表…     

下呼吸道重度RSV感染在HIV-1感染和未感染儿童中的不同表现

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染能使免疫缺陷儿童的发病率和病死率上升,该文通过对不同研究对象的分析,观察下呼吸道重度ＲＳＶ感染在免疫缺陷和免疫正常儿童中的不同表现。 对象与方法　前瞻性研究１９９７年３月～１９９９年３月南非某医院下呼吸道ＲＳＶ感染的患儿。人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染的筛查采用第三代酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）,阳性结果又通过ＥＬＩＳＡ 确证实验。ＲＳＶ通过鼠抗－ＲＳＶ单克隆荧光抗体检测,其亚群通过逆转录聚合酶链反应检测。对受检儿童还进行血培养、Ｃ反应蛋白测定、白细胞计数、胸部Ｘ线片…     

下呼吸道感染患儿外周血单个核细胞呼吸道合胞病毒感染的研究

为探讨呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）对外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的感染情况及感染后细胞免疫的变化，采用免疫组化法对１８例ＲＳＶ性急性下呼吸道感染患儿ＰＢＭＣ内ＲＳＶ及其Ａ、Ｂ亚型抗原进行了检测；采用ＡＰＡＡＰ法、ＭＴＴ比色法和ＥＬＩＳＡ法对Ｔ细胞亚群及Ｔ细胞表面白细胞介素２受体表达、ＰＢＭＣ培养上清液白细胞介素２（ＩＬ－２）活性和可溶性ＩＬ－２受体水平进行了测定。结果显示：１８例ＲＳＶ感染患儿中７例ＰＢＭＣ内可检测到ＲＳＶ抗原；１１例ＲＳＶＡ亚型感染者５例ＰＢＭＣ内均为ＲＳＶＡ亚型阳性，７例ＲＳＶＢ型感染者２例Ｂ亚型阳性；７例恢复期和１０例对照组患儿均为阴性；发病３天以内ＰＢＭＣ中ＲＳＶ抗原阳性者多于３天以后（Ｐ＜０．０５）。ＲＳＶ感染组ＰＢＭＣ内ＲＳＶ抗原阳性者，ＣＤ４细胞比率和ＩＬ－２水平均低于阴性者（ｔ＝２．３８，２．４０，Ｐ值均＜０．０５）。提示：ＲＳＶ性急性下呼吸道感染患儿ＰＢＭＣ可被ＲＳＶ感染，可能由此加重免疫活性细胞损害，导致细胞免疫功能紊乱。     

逆转录—多聚酶链反应检测柯萨奇B组病毒

研究目的用分子生物学方法对柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）进行检测并探讨与临床症病的关系。研究方法对我院２９８例疑似ＣＢＶ感染的患儿，采用特异性引物进行逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＣＢＶ。结果检出ＣＢＶ阳性１２７人，阳性率４２．６％。感染与年龄有关，夏秋季多见。８０例健康儿童中，阳性５人，占６．２５％。２０例ＲＴ－ＰＣＲ检测阳性标本用ＥＬＩＳＡ法检测，１７例阳性。结论ＲＴ－ＰＣＲ可快速、敏感、准确地检出标本中的ＣＢＶ。此病毒可侵犯多种器官，引起各种临床症病，有较强的传染性。     

肠道病毒感染与儿童Ⅰ型糖尿病关系的研究

目的 探讨儿童Ⅰ型糖尿病与肠道病毒（ＥＶ）感染,特别是柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）感染的关系。方法 采用ＲＴ－ＰＣＲ方法,对４５例糖尿病患儿血中ＥＶ－ＲＮＡ进行检测,用微量中和试验方法,对糖尿病患儿正常小儿血清中抗ＣＶＢ中和抗体水平进行测定,同时用ＥＬＩＳＡ方法,测定ＣＶＢ特异性ＩｇＭ。结果（１）糖尿病线４５例患和中ＥＶ－ＲＮＡ阳性者为１７例,（３９％）,对照组５１名儿童中了性者为３名（６％）。（２）     

31例散发性脑炎的病原学诊断及临床分析

经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测３１例散发性脑炎患儿血清和脑脊液（ＣＳＦ）中的单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型（ＨＳＶ－Ｉ，ＨＳＶ－Ⅱ）ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体；用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＣＳＦ中ＨＳＶ－ＤＮＡ。结果１５例确诊为单纯疤疹脑炎（ＨＳＥ），１６例为非单纯疱疹脑炎（ＮＨＳＳＥ）。在ＨＳＥ的临床表现中，意识障碍发生率显著高于ＮＨＳＳＥ；实验室脑脊液常规检测，ＨＳＥ多见红细胞；脑电图及ＣＴ检查额，颞部位有特征性改变。提示ＨＳＥ的病原学诊断对于早期诊断及指导临床治疗具有重要意义．     

早产儿视网膜病的危险因素分析及随访调查

研究早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity,ROP)的发生率、高危因素、治疗与随访情况。方法对2005年7月-2007年12月温州医学院附属第一医院NICU收治的符合ROP筛查标准的早产儿,于生后2周开始由资深眼科医师开始行间接眼底镜检查眼底,并进行随访。结果434例早产儿中ROP的发生率为5.5%(24/434例),24例ROP中Ⅰ期19例,Ⅱ期3例,Ⅲ期2例。Ⅲ期阈值病变者行激光光凝治疗,全部患儿均恢复正常。对434例早产儿行单因素分析得出,胎龄、出生体重、住院时间、吸氧、吸氧浓度、吸氧时间、呼吸暂停、新生儿肺透明膜病(RDS)、肺表面活性剂(PS)的应用、机械通气、输血、光疗时间、感染与ROP的发生有相关性(P<0.05)。Logistic回归分析显示胎龄、出生体重、胎数、吸氧时间、光疗时间、代谢性酸中毒、母亲妊高症、颅内出血是影响ROP发生的主要因素。结论早产是ROP的根本原因,防治各种并发症、合理的氧疗是预防ROP的关键。建立完善有效的ROP筛查制度,早期发现、早期治疗ROP,可改善ROP的预后。     

Range of Motion of the Joints of the Lower Extremities of Newborns

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