自身免疫性溶血性贫血患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平及临床意义。方法采用流式细胞仪对25例AIHA患者治疗前后和15例正常对照者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比例进行了检测。结果25例AIHA患者治疗前CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋细胞的比例与正常对照组比较明显降低,（4．47±2．11）％VS（9．82土2．98）％（P〈0．001）,治疗后CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例与治疗前比较显著升高,（7．60±2．50）％VS（4．47±2．11）％（P〈0．001）,但仍低于正常人,（7．60±2．50）％VS（9．82±2．98）％（P〈0．05）。治疗后完全缓解患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^-T细胞的比例与治疗无效组比较明显升高,（9．55±2．36）％VS（5．68±2．67）％（P〈0．05）,无效组患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^-T细胞的比例与正常时照组比较仍然降低,（5．68±2．67）％vs（9．82±2．98）％（P〈0．01）。结论AIHA患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例较正常对照明显降低,有效治疗后得到恢复,提示CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能参与了疾病的发生。     

肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布及临床意义

目的检测肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布，探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测45例肺癌患者和30例健康对照者外周血中的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化，并通过体外淋巴细胞增殖实验对肺癌患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞进行鉴定。结果（1）肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞比例明显增高（P〈0．05），但治疗后其比例明显下降（P〈0．05）；（2）肺癌患者CD4^＋CD25^＋T细胞能抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖和干扰素γ的分泌。结论肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例明显增高，其动态监测有助于肺癌患者免疫状态及疗效评价。     

CD4^＋CD25^highT细胞在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用

本研究探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）治疗前后患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞（CD25-PE染色阳性〉10^2为CD4^＋CD25^highT细胞）的表达情况及其可能的作用机制。应用免疫荧光标记和流式细胞术检测20例治疗前ITP患者、20例治疗后患者及14名正常人外周血中CD4^＋CD25^highT细胞的表达。结果表明：ITP患者治疗前外周血T细胞表面CD4^＋CD25^highT细胞表达水平明显低于治疗后组及正常对照组（P均〈0．01）；ITP治疗后患者组与正常对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：ITP治疗前患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞水平较正常对照组明显降低，而在治疗有效后有所升高。外周血CD4^＋CD25^highT细胞表达率与血小板数量呈正相关。CD4^＋CD25^highT细胞水平的检测可作为对ITP患者预后判断的一个有效指标，并可以作为免疫治疗的靶点进行进一步研究。     

CD4^＋CD25^highT细胞在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用

本研究探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）治疗前后患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞（CD25-PE染色阳性〉10^2为CD4^＋CD25^highT细胞）的表达情况及其可能的作用机制。应用免疫荧光标记和流式细胞术检测20例治疗前ITP患者、20例治疗后患者及14名正常人外周血中CD4^＋CD25^highT细胞的表达。结果表明：ITP患者治疗前外周血T细胞表面CD4^＋CD25^highT细胞表达水平明显低于治疗后组及正常对照组（P均〈0．01）；ITP治疗后患者组与正常对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：ITP治疗前患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞水平较正常对照组明显降低，而在治疗有效后有所升高。外周血CD4^＋CD25^highT细胞表达率与血小板数量呈正相关。CD4^＋CD25^highT细胞水平的检测可作为对ITP患者预后判断的一个有效指标，并可以作为免疫治疗的靶点进行进一步研究。     

哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的测定及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在哮喘患者外周血的变化及意义。方法采用流式细胞术检测60例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达量,同时测定20例急性发作期哮喘患者的肺功能。结果哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的百分比明显低于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;急性发作期哮喘患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞明显低于非急性发作期患者,差异也有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与了哮喘的发生。     

肺癌患者外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞的变化及意义

目的：探讨肺癌患者外周血中CD4＋ CD25＋调节性T细胞的变化及意义。方法：采用流式细胞术检测肺癌患者60例、良性肺部疾病者20例、健康体检者20例的外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞水平,同时用电化学发光法检测癌胚抗原、细胞角蛋白19片断-1和神经元特异性烯醇化酶水平。结果：肺癌组外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞比例（20.93±4.47）%,明显高于良性肺病组（15.14±4.79）%和健康对照组（15.42±3.44）%,差异有统计学意义（P〈0.01）。外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞水平与肺癌病理类型、临床分期无明显相关性,但外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞水平较低者比增高者预后好。外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞比例对肺癌的预测价值与癌胚抗原、细胞角蛋白19片断-1相似。结论：肺癌患者外周血中CD4＋ CD25＋调节性T细胞水平明显增高,有可能成为肺癌预测及免疫治疗的靶点。     

CCL20抑制小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋天然调节性T细胞的发育

本研究探讨趋化因子CCL20对小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋双阳性调节性T细胞发育的影响,为天然调节性T细胞调控的研究提供基础数据。采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4^＋CD25^＋细胞的改变,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果表明：体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量的变化趋势与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞的比例、细胞数量的变化趋势相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25^＋T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%,这一发育趋势与体内结果具有一致性。在4μg/ml的CCL20干预下,胸腺体外培养的第3、6天CD4^＋CD25^＋胸腺细胞分别从3.24±0.18、3.96±0.24下降至1.27±0.11、1.76±0.22（p值均〈0.001）。结论：体外培养的CD4^＋CD25^＋双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,CCL20明显下调胸腺CD4^＋CD25^＋的表达,这将为天然调节性T细胞的调控研究提供有效的参考依据。     

沙利度胺对多发性骨髓瘤患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞作用的临床研究

本研究探讨沙利度胺治疗前后多发性骨髓瘤（MM）患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例及变化规律，为有效的免疫治疗提供理论依据。采用流式细胞术检测MM患者外周血CD3、CD4、CD8、NK及CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例；采用成组设计的两样本均数比较的t检验进行统计学分析，以P〈0．05为检验水准。结果表明：MM患者治疗前CD4^＋CD25^＋highT比例较正常人明显升高（P〉0．01），沙利度胺治疗有效患者的CD4^＋CD25^＋highT比例较治疗前明显降低（P〈0．01），治疗无效者Treg比例无显著变化（P〉0．05）。16例经化疗完全缓解，CD4^＋CD25^＋highT比例为6．91±1．12％，较治疗前升高，但无显著性差异（P〉0．05）。沙利度胺治疗有效者CD3^＋T、CD4^＋T、NK细胞比例及CD4／CD8比值较治疗前明显升高（P〉0．05或0．01），CD8^＋T治疗前后无显著变化（P〉0．05）。结论：CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制作用可能是MM免疫逃逸的重要机制，下调MM患者CD4^＋CD25^＋Treg可能是沙利度胺治疗MM有效的机制之一。     

大肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-调节性T细胞的含量及临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-调节性T细胞（Treg）的变化及意义。方法流式细胞术检测36例大肠癌患者及30例健康人外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg的变化；ELISA检测同一标本血清中转化生长因子β（TGF—β）的表达水平。结果36例大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg占CD4^＋、淋巴细胞的比例为（6．92±1．31）％，与正常对照组（4．91±1，24）％相比差异有显著性（P〈0．05）。20例腺癌、7例黏液癌、9例未分化癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例分别为（6．81±1．52）％、（6.99±1．21）％、（7．08±1．17）％，各组间比较差异无显著性（P〉0．05），均高于对照组的（4．91±1．24）％，差异有显著性（P〈0，05）。IV期大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg高于Ⅱ期大肠癌患者（P〈0．05）。大肠癌组外周血清中TGF—β水平显著高于正常对照组，随着TGF—β水平增加，CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例逐渐增高，两者呈正相关。结论大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg表达增高，与临床分期相关，但与组织学分类无关，导致机体免疫抑制，可能参与大肠癌发生。     

重组人源性白介素-2对耐多药结核病人外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞及TGF-β的影响

目的：探讨重组人源性白介素-2（recombinant human IL-2,rhIL-2）对耐多药结核（multidrug-resistant TB, MDR-TB）病人外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞及转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）含量的影响。方法选择MDR-TB病人40例,20例化疗,20例化疗＋rhIL-2皮下注射,流式细胞仪检测病人外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞含量,ELISA试剂盒检测外周血TGF-β的表达。结果 MDR-TB病人外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞与TGF-β含量显著相关,治疗后化疗＋rhIL-2组外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞及TGF-β含量分别下降（1.55±0.29）%和（18.97±2.11）%,与化疗组的（0.83±0.13）%和（10.98±1.04）%相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞及TGF-β在MDR-TB的发病中起重要作用,应用rhIL-2能够降低外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞及TGF-β的含量。     

恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

【目的】研究恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞水平的变化及其临床意义。【方法】采用流式细胞仪对40例恶性肿瘤患者及40例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测。【结果】病例组与正常对照组比较,CD3^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋比值及CDl6^＋／56^＋-NK细胞百分比均明显降低（P〈0．05）;CD8^＋T淋巴细胞和CD19^＋B淋巴细胞百分比明显高于正常对照组（P〈0．01）。与对照组相比较,恶性肿瘤患者外周血CD4^＋、CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋曲调节性T细胞均明显升高（P〈0．05）。【结论】恶性肿瘤患者细胞免疫功能明显异常;CD4^＋CD25^＋曲调节性T细胞增多可能是肿瘤患者免疫功能受抑的重要原因之一。淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价肿瘤患者疗效及判断预后方面具有一定的临床价值。     

扁桃体摘除术对IgA肾病患者外周血CD4^＋CD25^＋细胞数及病情的影响

【目的】观察扁桃体摘除对IgA肾病（IgAN）患者外周血CD4^＋CD25^＋细胞数的影响。【方法】研究对象包括37例IgAN病人（A组）及37例非肾炎慢性扁桃体炎病人（B组）,10例正常人（C组）。对A、B两组实施扁桃体摘除术,观察手术前及摘除后1、3个月外周血CD4^＋CD23^＋细胞比例。收集IgAN病人的尿液,检测24h尿蛋白,尿红细胞。【结果】A组CD4^＋CD25^＋细胞数显著低于B、C两组（P均〈0．05）,后两组之间无显著差异（P〉0．05）;A组术后1个月为1．32％±0．313％,3月为3．01％±0．310％,术后1个月与B组及C组有明显差剐（P均〈0．05）,术后3个月与B组及C组无显著差别（P均〉0．05）。A组术后1个月及3个月,血尿及蛋白尿均较术前明显减少;随着血尿、蛋白尿逐渐减少而外周血CD4^＋CD25^＋细胞数逐渐恢复正常水平。【结论】扁桃体切除术可改善IgAN患者免疫功能。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞的定量及其功能分析

目的检测原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者外周血CD4^＋CD25^＋免疫调节性T细胞（Tregs）数量及其对T效应细胞（Treps）增殖的抑制作用。方法流式细胞仪定量检测PBC患者及对照组外周血中Tregs细胞百分比。统计无症状期、症状期、肝硬化期3组患者Tregs细胞百分比。免疫磁珠分离Tregs，检测CD62L、T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（GITR）的表达。体外细胞培养，^3H-胸腺嘧啶掺入法测定Tregs对Treps的免疫抑制功能。结果PBC患者外周血CD4^＋T细胞中的Tregs[3．63±0．92）％]明显低于健康对照组[（7．42±1．09）％，P〈0．01）]。无症状期、症状期、肝硬化期各组Tregs细胞分别为（3．93±0．71）％、（3．64±0．83）％、（3．52±0．95）％，均明显低于健康对照组，但3组之间差异无统计学意义。Tregs细胞高表达CD62L、CTLA-4、GITR分子。PBC患者Treps的体外增殖可以被自身Tregs所抑制，1：1、1：2、1：4、0：1的比例平均抑制率分别为（78．2±4．9）％、（51．6±7．1）％、（21．7±5．6）％、0，健康对照分别为（75．1±5．3）％、（54．5±6．4）％、（27．6±6．3）％、0，两组相比差异无统计学意义。结论PBC患者Tregs数量的降低可能是PBC的致病机制之一。     

CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞水平在胃癌患者外周血中的变化

目的探讨T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值水平在胃癌患者外周血中的表达及意义。方法采用血液分析仪技术,检测40例胃癌手术前患者(按临床分期为Ⅰ～Ⅱ级组18例,Ⅲ～Ⅳ级组22例)及25名正常对照组外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平。结果胃癌患者外周血CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值分别为0.78%±0.35%、0.37%±0.21%、0.61%±0.42%,明显低于正常对照组(P<0.05);胃癌Ⅲ～Ⅳ级组CD3+、CD4+细胞CD4+/CD8+比值分别为0.42%±0.27%、0.21%±0.17%、0.29%±0.25%,明显低于Ⅰ～Ⅱ级组(0.95%±0.35%、0.45%±0.19%、0.76%±0.30%,P<0.05)。结论检测胃癌患者手术前外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平,可以初步评估胃癌患者机体免疫状态,也为肿瘤的免疫增强治疗提供了理论依据。     

哮喘患儿外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及其与过敏体质和IgE水平的关系

目的探讨哮喘患儿外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr）的变化及其与过敏体质和IgE水平的关系。方法应用流式细胞术检测70例哮喘患儿的Tr细胞数变化,采用酶联免疫法（ELISA）检测血清中IgE含量。结果急性发作期组患儿外周血Tr水平[（6．17±1．72）％]明显低于缓解期组患儿[（7．56±1．48）％]和对照组儿童[（7．13±1．48）％]（均P〈0．05）;而缓解期患儿外周血Tr水平与对照组儿童比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。有过敏体质患儿外周血Tr水平[（5．53±1．18）％]明显低于无过敏体质患儿[（6．40±2．00）％]（P〈0．05）。哮喘组患儿外周血Tr水平[（6．17±1．72）％]与其外周血IgE水平[（144．86±14．74）IU／ml]呈负相关（rP=-0．435,P〈0．05）。结论外周血Tr水平在哮喘患儿发作期显著降低,而在有过敏体质的患儿更低,并与外周血IgE水平呈显著的负相关性。     

胃癌外周血调节性T细胞表达与预后的关系

目的：探讨胃癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋、CD4^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞的表达状态与临床病理特征及预后关系。方法：采用流式细胞术检测35例胃癌患者及17例健康对照者外周血中CD4^＋CD25^＋、CD4^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比率及细胞数目;收集胃癌患者临床病理资料并进行术后随访,分析调节性T细胞表达状态与临床病理特征及无瘤生存率之间的关系。结果：胃癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋、CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比率与健康对照者间有显著差异（P〈0.01）,CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞数目与健康对照间差异有统计意义（P〈0.05）。CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比率[（2.57±1.50）%]高于对照组[（0.68±0.67）%],并与TNM分期及肿瘤大小有明显相关（P〈0.01）。CD4^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比率与无瘤生存率相关,有显著差异（P〈0.01）,CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞数目与无瘤生存率相关,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞可能在胃癌免疫耐受中发挥重要作用,检测其比率及数目对于判断胃癌的病期及预后有一定价值。     

急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

CD28／CD152：CD80／CD86分子在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞上的表达

目的探讨共刺激分子CD28／CD152：CD80／CD86在强直性脊柱炎（AS）患者外周血淋巴细胞上的表达及与免疫功能的关系。方法流式细胞仪检测AS患者及健康体检者T细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达及CD28／CD152和CD80／CD86在外周血T、B淋巴细胞上的表达水平；采用速率散射比浊法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果CD3^＋CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显高于健康对照组（P〈0．05），而CD3^＋CD8^＋T细胞则明显低于健康对照组（P〈0．05）；CD4^＋和CD8^_T细胞上CD28和CD19^＋B细胞上CD80、CD86的表达均较健康对照组增高（P〈0．05），而CD152在CD4^＋T淋巴细胞上的表达也比健康对照组显著增加，但在CD8%＋T淋巴细胞上的表达却显著降低（P〈0.05）；血清IgG、IgA及CRP、IL-6水平均较健康对照组显著增高（P〈0．05）。结论AS患者外周血淋巴细胞CD28／CD152：CD80／CD86分子的异常表达与其免疫功能紊乱有密切关系。