深低温储皮后其抗原性改变的免疫学研究

以人皮和豚鼠皮新鲜及-196℃冷冻皮片匀浆做为抗原,研制出免抗人和豚鼠的新鲜及-196℃冷冻皮片匀浆的可溶性蛋白高效价的免疫血清,并通过免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫火箭扩散电泳及单相免疫扩散电泳等不同免疫学电泳的检测,分别对新鲜皮片及-196℃冷冻皮片抗原性改变的这一现象进行探讨与研究。结果表明:人皮、豚鼠皮其新鲜皮片的抗原成份、抗原决定簇及抗原量均显著高于相应的-196℃冷冻组皮片,因而证实了通过深低温冷冻的皮片其抗原性低于新鲜皮片的论断。     

深低温储皮后期抗原性改变的免疫学研究

以人皮和豚鼠皮新鲜及－１９６℃冷冻皮片匀浆做为抗原，研制出兔抗人和豚鼠的新鲜及－１９６℃冷冻皮片匀浆的可溶性蛋白高效价的免疫血清，并通过免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫火箭扩散电泳及单相免疫扩散电泳等不同免疫学电泳的检测，分别对新鲜皮片及－１９６℃冷冻片抗原性改变的这一现象进行探讨与研究。结果表明：人皮、豚鼠皮其新鲜皮片的抗原成份、抗原决定簇及抗原量均显著高于相应的－１９６℃冷冻组皮片，因而证实了通过     

不同冷冻温度储存皮片活力与抗原性改变的免疫学研究

以组织氧耗量与琥珀酸脱氢酶为指标,并采用火箭免疫电泳及单相免疫扩散抗原性免疫学检测方法,旨在探讨人、豚鼠新鲜皮肤与不同冷冻温度下皮肤活力及抗原性的变化。结果表明:用这两种指标百分比与平均活力百分比进行比较中,以-196℃速冻组平均活力%最高(70.8%,61%),与其它三个温度组比较有显著或非常显著意义(P<0.05,或0.01)。检测皮片抗原性的结果显示:新鲜皮片匀浆抗原性(量)>-196℃处理组>-80℃处理组>-20℃处理组>4℃处理组。由此可见,经各种低温处理的皮片匀浆抗原性(量)均有不同程度的降低,且温度越高,抗原性越低,即抗原性低的组织失活就越重。     

不同冷冻温度储存皮片活力与抗原性改变的免疫学研究

以组织氧耗量与琥珀酸脱氢酶为指标，并采用火箭免疫电泳及单相免疫扩散抗原性免疫学检测方法，旨在探讨人、豚鼠新鲜皮肤与不同冷冻温度下皮肤活力及抗原性的变化。结果表明：用这两种指标百分比与平均活力百分比进行比较中，以－１９６℃速冻组平均活力％最高（７０．８％，６１％），与其它三个温度组比较有显著或非常显著意义（Ｐ＜０．０５，或０．０１）。检测皮片抗原性的结果显示：新鲜皮片匀浆抗原性（量）＞－１９６℃处理组＞－８０℃处理组＞－２０℃处理组＞４℃处理组。由此可见，经各种低温处理的皮片匀浆抗原性（量）均有不同程度的降低，且温度越高，抗原性越低，即抗原性低的组织失活就越重。     

不同冷冻温度储存皮片活力与抗原性改变的免疫学研究

以组织氧耗量与琥珀酸脱氢酶为指标，并采用火箭免疫电泳及单相免疫扩散抗原性免疫学检测方法，旨在探讨人、豚鼠新鲜皮肤与不同冷冻温度下皮肤活力及抗原性的变化。结果表明：用这两种指标百分比与平均活力分比进行比较中，以－１９６℃（速冻组平均活力％最高（７０．８％，６１％），与其它三个温度组比较有显著或非常显著意义（Ｐ＜０．０５，或０．０１）。检测皮片抗原性的结果显示：新鲜皮片均浆抗原性（量）＞－１９６℃处理     

骨库骨的抗原性比较研究

目的研究冷冻、冻干、脱钙同种异体骨和无机骨等骨库骨的抗原性.方法应用皮肤移植对比分析法,将骨库骨分为5组,每组10例,与皮肤移植结果相比较,测定其抗原性.结果新鲜同种骨移植组平均皮肤脱落时间为8.7±1.1天,与对照组相比显著延长(P＜0.05).冷冻同种骨、冻干同种骨、脱钙同种骨和无机同种骨移植组平均皮肤脱落时间分别为10.8±1.0,10.7±1.4,11.7±0.7和13.8±1.5天,与新鲜骨相比延长,具有统计学意义(P＜0.05).结论经上述处理后骨的抗原性降低,但除无机骨外,均不及一次移植皮肤的13.9±1.1天(P＜0.05).无机骨不具有抗原性.无机骨的无抗原性是其作为载体的先决条件.     

深低温冷冻技术对带血管同种异体骨移植抗原性作用的实验研究

[目的]探讨深低温冷冻技术对带血管同种异体骨移植物抗原性的影响,观察移植骨的吻合血管通畅率和骨连接情况,了解免疫抑制剂的用量。[方法]健康成年新西兰白兔48只,随机取16只作供体,32只作受体,分为5组。A组:8只,深低温冷存的带肱血管的异体桡骨段移植,手术后4周加用CsA(每天10 mg/kg);B组:8只,深低温冷存的带肱血管的异体桡骨段移植,手术后4周加用CsA(每天5 mg/kg);C组:8只,深低温冷存的带肱血管的异体桡骨段移植,手术后4周加用CsA(每天2 mg/kg);D组:8只,深低温冷存的带肱血管的异体桡骨段移植;E组:16只供体兔取移植骨段后继续喂养4周,作为免疫学检测,无移植对照组。术后观察吻合血管通畅率,术后7 d血清IFN-γ水平检测,术后2、4、8、12周各组动物X线检测,术后12周移植骨组织学检查。[结果]A、B组之间血清IFN-γ水平无显著差异,A、B组血清IFN-γ水平低于C组。[结论]深低温冷冻技术降低了带血管同种异体骨移植物的抗原性,移植后显著降低器官的移植排斥反应,保证吻合血管的通畅,移植骨的存活,加快骨连接,减少免疫抑制剂的用量。     

大块冷冻同种异体骨移植后免疫学改变

目的 探讨大块冷冻同种异体骨移植后免疫功能改变。方法 本组 21例,男 9例,女 12例;年龄 19～ 59岁,平均 30.5岁。 15例分别于术前 4 d及术后 14、 28 d检测其空腹外周血各项免疫学指标,其中 7例及另外 3例分别于术后 3、 6、 9、 12、 24、 36、 48个月进行同位素骨扫描检查,结合 3例组织学检查综合观察 21例大块冷冻同种异体骨移植后的免疫反应。结果 (1)外周血 T淋巴细胞亚群 (OKT3＋ ,OKT4＋ ,OKT8＋ )及血清补体 (C3,C4)和循环免疫复合物 (CiC)手术前后比较,差异无显著性意义 (P > 0.05)。 (2)同位素骨扫描显示 :术后 3～ 6个月移植的异体骨两端及髓腔内同位素浓集明显低于正常骨,而异体骨两端所对应的自体骨端同位素浓集明显于高于正常骨,此过程于植入后 9个月开始减弱,可达数年。以宿主受区大量 T淋巴细胞为主的炎性细胞浸润为其组织学特征。结论 (1)大段冷冻异体骨移植后宿主全身免疫机能改变不明显,其反应是以局部炎症为主的细胞免疫过程。 (2)异体骨可作为修复大块骨缺损的良好材料。     

异种骨基质明胶(BMG)的抗原性研究

目的探讨异种骨基质明胶(BMG)的抗原性。方法临床植入异种BMG167例。对异种BMG抗原性行组织切片观察、扫描电镜观测及免疫组化检测;20例检测术前、术后1周、术后2周血清中与免疫应答相关的细胞因子,包括白介素2、4、6、10、12、转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α。结果所有病例术后体温均在38.5℃以下,除1例外伤口均甲级愈合。组织切片示BMG成骨与正常骨结构一致;扫描电镜示BMG哈佛氏管和骨陷窝内未见血管内皮组织和骨细胞;免疫组化染色示BMG内没有可检出的抗原。细胞因子术前与术后比较,差异无显著意义(P>0.05)。结论异种BMG的抗原性极弱。     

深低温冷冻保存气管的实验研究

二甲基亚砜或合用二甲基亚砜和蔗糖是目前常用的冷冻保护剂 ,也是最常用于气管冻储的冷冻保护剂[1] 。海藻糖是近年来发现并开始应用的一种非穿透性冷冻保护剂。我们将二甲基亚砜和海藻糖合用作为气管的冷冻保护剂 ,探讨其是否优于其他冷冻保护剂。一、方法1.材料 :冷冻保护液浓度见表 1;实验分组 :将新鲜犬气管碎片分为实验组和对照组。实验组按冷冻保护剂不同又分为Ａ、Ｂ和Ｃ 3小组 ,每小组 6 4块碎片(表 1)。以新鲜未冷冻 32块碎片作为对照组。2 气管标本的冻存和复温 :实验组标本盛放于装有冷冻保护液的液氮保存管中 ,先于 4℃冰箱中…     

皮肤移植免疫研究

Skin grafting has been one of the most important approaches for covering burn wounds, however long-term survival of allogeneie or xenogeneic skin graft is currently not successful. How to induce immune tolerance for life-time survival of allogeneic or xenogeneie skin graft is still remote objective to be solved. However, clinicians and scientists in China have worked very hard and made great contribution to this field during the past 50 years, no matter how diffieult it is. They are the re spected pioneers in the understanding of immunological change in "Chinese Method" skin grafting, its local immune tolerance, immunology of pre-treatment of skin graft, etc. Herein, the most outstanding and impressive progresses in immunological responses after skin grafting in the past 50 years in China have been re viewed and presented for memory, for future and for extanding a salute.     

扩张皮肤移植后生物学转归的实验研究

目的 研究扩张皮肤移植后的远期生物学转归。方法 于狗扩张皮肤移植时和移植后3，6周及3，6个月分别观测其面积、组织学、电镜、胶原含量、皮肤力学、和免疫组化染色等项的变化。结果 各项指标在3－6个月时均恢复至对照组水平，接近正常。结论 扩张皮肤的生物学变化在移植后3个月依然存在，3－6个月逐渐恢复正常，表现为一个创伤愈合过程。     

三种皮片匀浆上清蛋白的免疫生化分析

利用紫外吸收光谱、ＰＡＧＥ垂直板ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及快速染色盘状ＰＡＧＥ酯酶电泳技术，对人、豚鼠的三种不同皮片的匀浆上清液蛋白成份含量及酯酶同工酶进行了比较分析，旨在为临床上应用新生皮片储皮移植提供理论依据。结果表明，豚鼠皮及人皮皮片匀浆上清液中的蛋白含量、光谱分析、ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及酯酶同工酶电泳，均是新生皮组的变化显著低于其它两组，而－１９６℃处理组与成年新鲜皮片组存在着较小差别，因此上述免疫生化学指标的判定结果为：新生皮＜（差于）－１９６℃处理成年皮＜（差于）新鲜成年皮。     

三种皮片匀浆上清蛋白的免疫生化分析

利用紫外吸收光谱、PAGE 垂直板 SDS—PAGE 及快速染色盘状 PAGE 酯酶电泳技术,对人、豚鼠的三种不同皮片的匀浆上清液蛋白成份含量及酯酶同工酶进行了比较分析,旨在为临床上应用新生皮片储皮移植提供理论依据。结果表明,豚鼠皮及人皮皮片匀浆上清液中的蛋白含量、光谱分析、PAGE、SDS-PAGE 及酯酶同工酶电泳,均是新生皮组的变化显著低于其它两组,而-196℃处理组与成年新鲜皮片组存在着较小差别,因此上述免疫生化学指标的判定结果为:新生皮<(差于)-196℃处理成年皮<(差于)新鲜成年皮。     

Predictors of sperm recovery after cryopreservation in testicular cancer

Our objective was to identify predictors of improved postthaw semen quality in men with testicular cancer banking sperm for fertility preservation. We reviewed 173 individual semen samples provided by 67 men with testicular germ cell tumor (TGCT) who cryopreserved sperm before gonadotoxic treatment between 1994 and 2010 at our tertiary university medical center. Our main outcomes measures were independent predictors for the greater postthaw total motile count (TMC) in men with TGCT. Men with NSGCT were more likely to be younger (P < 0.01) and had high cancer stage (II or III, P < 0.01) compared with men with seminoma. In our multiple regression model, NSGCT histology, use of density gradient purification, and fresh TMC > median fresh TMC each had increased odds of a postthaw TMC greater than median postthaw TMC. Interestingly, age, advanced cancer stage (II or III), rapid freezing protocol, and motility enhancer did not show increased odds of improved postthaw TMC in our models. In conclusion, men with TGCT or poor fresh TMC should consider preserving additional vials (at least 15 vials) before oncologic treatment. Density gradient purification should be routinely used to optimize postthaw TMC in men with TGCT. Larger, randomized studies evaluating cancer stage and various cryopreservation techniques are needed to assist in counseling men with TGCT regarding fertility preservation and optimizing cryosurvival.     

小鼠人白细胞抗原异基因皮肤移植后的机体免疫应答

目的 探讨人白细胞抗原(HLA)致敏后机体免疫应答,为寻找有效手段阻断抗体介导排斥反应(AMR)提供实验依据.方法 以转HLA-A2.1基因小鼠为供体,野生型小鼠为受体行2次皮肤移植建立HLA致敏小鼠模型,观察致敏小鼠体内各种免疫应答变化.结果 皮肤移植致敏后小鼠体内IgG显著升高,28 d达高峰[(14.10±0.47μg/L,酶联免疫吸附试验(ELISA)],以IgG2a为主[(449.4±113.5)μg/L,莱姆德抗原板法],伴外周血、脾脏及骨髓中各种淋巴细胞组成的变化;2次移植皮肤存活天数较第1次显著缩短[(3.0±0.7)d比(10.0±1.3)d];HLA-A2单一抗原致敏可诱导产生多种抗体,并对表达HLA-A2靶细胞具细胞毒作用.结论 HLA-A2致敏可诱导受体产生高水平IgG2a,与多种Ⅰ类HLA存在交叉反应,伴有B及T淋巴细胞的激活,导致移植后受体发生AMR.

Abstract：

Objective To understand the immune response changes in human leukocyte antigens (HLA) sensitized individuals in order to find out effective treatment for antibody-mediated rejection (AMR). Methods A HLA sensitized mouse model was established by skin graft using HLA-A2. 1 transgenic mice as donors and wild type mice as recipients. Different immune responses were studied in the sensitized recipients. Results Sensitizing mice with skin grafts from HLA-A2. 1 transgenic mice resulted in robust production of anti-HLA IgG, peak in 28 d[( 14. 10 ±0. 47) μg/L, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)], mainly IgG2a[(449. 4 ± 113.5) μg/L, LATM120], accompanied by changes in the constitution of different B and T lymphocytes in peripheral blood, spleen, and bone marrow, also accelerated rejection of a secondary skin allograft[2nd graft survival day (3.0 ± 0. 7 ) d vs 1 st graft survival day ( 10. 0 ± 1.3 ) d]. Sensitization of recepients with single HLA-A2 induced antibodies which had cross reaction with a panel of class Ⅰ HLA. These antibodies had cytotoxic effect targeting HLA-A2 expressing cells.Conclusion HLA-A2 sensitization resulted in abundant production of IgG2a accompanied by activation and proliferation of different B and T lymphocytes. These antibodies cross-reacted with a panel of class Ⅰ HLA, and may be the cause of AMR after allogenic skin graft.     

皮肤伸展术对皮肤生物力学性质的影响

目的：观察皮肤伸展术对皮肤生物力学性质的影响。方法：将动物随机分为实验和对照两组，实验组3.5kg拉力持续牵拉伸展7d，对照组不予皮肤伸展，实验后1、2、3、4、6、8周两组分别切取蝶型皮肤标本，用WDW－100型Testing测力机测试其生物力学性质变化。结果：实验组平均破坏应力及延伸率1周时明显下降（断裂负荷开始即高），此后三者逐渐升高，4周时达高峰，此后逐渐恢复，6周时仍高于对照组和正常值（P＜0．01），实验组皮肤最大刚度1周时明显增高（P＜0．01），然后逐渐下降，8周时仍高于对照组和正常值。结论：伸展术后皮肤的韧性逐渐增强，皮肤的弹性降低，皮肤伸展术早期能引起生物力学特性的变化，但随后即逐渐恢复正常。