葛根素对大鼠缺血性脑损伤的保护作用

［摘要］目的: 观察葛根素对大鼠全脑缺血/再灌注后神经元的保护作用,并探讨其可能的机制。方法： 采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型, 缺血15 min后再灌注。将50只大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、给药组(细分为高、低剂量组)和对照组。给药方式为静脉注射。使用蛋白质印迹、焦油紫染色法及TUNEL法检测神经型一氧化氮合酶（neuronal NO synthase, nNOS)表达、nNOS活化水平及神经元细胞的存活情况。结果： 给药组大鼠海马CA1区细胞的存活数量较缺血/再灌注组明显增加(P<0.05),TUNEL法检测结果与其一致;给药组nNOS(Ser847)磷酸化水平较缺血/再灌注组明显增强(P<0.05),而其表达量没有明显变化。结论： 葛根素通过负向调节nNOS催化活性,减少NO生成,降低其神经毒性,对大鼠缺血性脑损伤有保护作用。     

左旋肉碱对大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用

目的 观察左旋肉碱(L-carnitine,LC)对大鼠早期缺血性脑损伤和低氧低糖诱导神经细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型.TTC染色法观察脑梗死面积的改变.采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)合并低糖培养基培养PC12细胞,建立体外细胞低氧低糖模型;MTT法检测细胞活力的改变;SYTOX、PI、TUNEL染色观察细胞的坏死与凋亡;检测各组细胞SOD、ATP酶活性和MDA含量.结果 LC预处理组大鼠脑梗死灶面积较模型组无明显减小(P＞0.05).LC预处理可使低氧低糖诱导的细胞活力增加,坏死与凋亡减少,细胞内SOD、ATP酶活性增高,MDA含量降低(P＜0.05).结论 短期急性注射LC对大鼠缺血性脑损伤保护作用不明显,对体外低氧低糖诱导的PC12细胞损伤具有明显保护作用,其机制可能与增强细胞抗氧化能力、抑制脂质过氧化反应、减少细胞凋亡与坏死有关.     

海风藤提取物对老龄大鼠缺血性脑损伤保护作用研究

目的 探讨海风藤提取物在老龄大鼠局灶脑缺血后可能的脑保护作用。方法 建立光化学导的老龄大鼠避灶性脑缺血模型,利用ＴＴＣ染色、ＨＥ染色原位末端标记第风藤提取物地缺血灶大小、血脑屏障、缺血灶周围坏死细胞、凋亡细胞的影响,结果 海风藤提取物可显著减轻局灶性脑缺血后血脑屏障的破坏,减少缺血灶周围坏死细胞、凋亡细胞数量,并具有减少梗死灶直径的趋势。结论海风藤具有抵御缺血后脑屏障破坏,减少缺血灶周围神经细胞坏     

别嘌呤醇对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的　探讨别嘌呤醇 (ALLO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的影响。方法　将新生 7日龄SD大鼠 14 3只随机分为别嘌呤醇治疗组、缺氧缺血对照组和假手术组 ,缺氧缺血后即刻、2 4和 4 8h分别腹腔注射ALLO或生理盐水 ,然后观察ALLO对HIBD模型鼠缺氧缺血 (HI)后 4 2h脑含水量、72h脑神经元凋亡(TUNEL法 )及超微结构改变、14d体质量增长率、脑病理改变 (海马神经元死亡率 )、30d学习分辨能力和记忆保持能力 (三臂迷宫试验 )等的影响。结果　脑含水量 :治疗组缺血侧 [( 84 .75± 4 .5 2 ) % ]含水量较对照组[( 92 .32± 3.75 ) % ]明显减少 (P <0 .0 1) ;TUNEL染色结果 :HI后 72h缺血侧脑组织可见较多凋亡细胞。治疗组缺血侧皮质凋亡细胞数明显低于对照组 [分别为 ( 93.6± 10 .8)和 ( 110 .5± 16 .9)个 / 30 0 0个细胞 ,P <0 .0 1],治疗组缺血侧海马凋亡细胞数明显低于对照组 [分别为 ( 83.2± 11.5 )和 ( 94 .2± 12 .3)个 / 30 0 0个细胞 ,P <0 .0 5 ];超微结构改变 :对照组凋亡细胞数为 18%左右 (计数 30个视野 ) ,而治疗组为 6 %左右 ,治疗组细胞坏死、丢失也较对照组减轻 ;HI后 14d体质量增长百分率 (WIP) :治疗组 [( 16 7.0± 33.6 ) % ]较对照组 [( 135 .6±4 7.5 ) % ]无显著性差异 (P >0 .0 5     

白芍总苷对缺血性脑损伤大鼠脑保护作用的研究

目的 研究白芍总苷(TGP)预处理对缺血性脑损伤大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法 240只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平(NMP)10mg/(kg·d)组和TGP 50、100、200mg/(kg·d)组,每组40只;采用线栓阻断大脑右侧中动脉的方法制备缺血性脑损伤大鼠模型,造模手术前7天开始1次/天灌胃给药。24h后,Zausinger六分法评估神经功能,伊文思蓝渗透法测定血-脑脊液屏障(BBB)通透性,干湿比重法测定脑组织含水量,HE染色法行脑组织病理学检查,TUNEL法观察神经细胞凋亡状况,生化分析法测定脑组织抗氧化酶活性和MDA含量。结果 与模型组比较,TGP 100、200mg/(kg·d)和NMP 10 mg/(kg·d)组大鼠Zausinger评分升高,伊文思蓝含量和含水量降低,脑组织病理性改变和神经细胞凋亡状况明显改善,凋亡指数(AI)降低,SOD、CAT活性升高且MDA含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与NMP 10mg/(kg·d)组比较,TGP 200mg/(kg·d)组Zausinger评分升高,伊文思蓝含量降低,脑组织病理性改变明显改善,AI降低,SOD活性升高且MDA含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGP对缺血性脑损伤大鼠脑组织具有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激、保护BBB通透性、抑制脑水肿有关。     

麻醉剂量异丙酚对缺血性脑损伤大鼠的神经保护作用研究

目的探讨麻醉剂量异丙酚对缺血性脑损伤大鼠的神经保护作用。方法将40只体重在250～300g的大鼠随机分为治疗组与对照组每组各20例,两组均采用改良Longa法制作缺血性脑损伤模型。对照组于造模缺血前10分钟腹腔注入生理盐水,治疗组于造模缺血前10分钟腹腔注入麻醉剂量的异丙酚。两组大鼠术后24小时,分别以Longa 5级评分标准评定各组大鼠神经损伤,并测定血清乳酸脱氢酶(LDH)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量。结果治疗组Longa0级大鼠数量少于对照组,差异具有显著性(P<0.05);治疗组LDH与NSE含量均低于对照组,差异具有显著性(P<0.05)。结论麻醉剂量异丙酚可降低缺血性脑损伤大鼠的神经功能缺损,降低神经损伤因子的表达,具有明确的神经保护作用。     

益母草对缺血性脑损伤的保护作用

根据中医理论,益母草(Herba Leonuri)是活血化瘀(invigorating blood circulation and eliminating blood stasis)药物之一,并作为利尿剂用于治疗肾性水肿。最近益母草正用于治疗冠心病,并取得了较好的疗效,但尚未见到用于治疗脑梗塞的报道。已经知道,脑缺血时脑内单胺类神经介质发生异常,提示单胺类神经介质参于了缺血性     

Blipam对缺血性脑损伤的保护作用

目的研究Blipam对脑缺血损伤的保护作用。方法采用小鼠断头法、耐缺氧法观察Blipam对缺血性脑损伤的影响；建立大鼠局灶性（MCAO）脑缺血模型，观察Blipam对大鼠行为学、脑梗塞重量的影响，并测定缺血侧脑组织中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量及乳酸脱氢酶（LDH）活性。结果Blipam能显著延长小鼠断头后喘息持续时间和耐缺氧时间；Blipam减轻MCAO大鼠脑组织梗塞重量，抑制MCAO大鼠异常神经症状的产生，同时降低脑组织中MDA含量，提高脑组织中NO水平，升高脑组织中LDH的活性。结论Blipam对缺血缺氧性脑损伤具有显著保护作用，其机理可能与提高脑组织中NO含量、抑制脂质过氧化有关。     

雌激素对成年SD大鼠缺血性脑损伤的认知保护作用

目的 探讨雌激素对成年SD大鼠缺血性脑损伤的认知保护作用及可能机制.方法 成年SD大鼠72只,随机分为雌激素处理组(A组)、安慰剂处理组(B组)、假手术组(C组)和正常对照组(D组),每组18只♀♂各半.除C、D组外其余大鼠均采用线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注模型(MCAO),缺血2 h、再灌注22 h后观察神经功能评...     

美金胺对缺血性脑损伤保护作用的研究

目的 观察美金胺对SD雄性大鼠全脑缺血/再灌注后海马CA1区锥体细胞的保护作用,并研究其可能的机制.方法 采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型,缺血15 min后分别灌注6 h或5天.大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、缺血/再灌注给药组和缺血/再灌注溶剂对照组.缺血/再灌注给药组腹腔注射20mg/kg美金胺.使用免疫印迹、免疫沉淀和焦油紫染色法等技术检测相关信号蛋白的表达、活化水平及神经元细胞的死亡.结果 大鼠缺血/再灌注5天后,缺血/再灌注给药组海马CA1区细胞的存活数量较缺血/再灌注组和缺血/再灌注溶剂对照组明显增加;缺血/再灌注6 h,缺血/再灌注给药组N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体亚基2A(NR2A)、突触后密集区蛋白95(PSD-95)、非受体型蛋白酪氨酸激酶(Src)三者间免疫沉淀的蛋白量及NR2A的酪氨酸磷酸化水平较缺血/再灌注组和缺血/再灌注溶剂对照组明显降低,而三者的表达量没有明显变化.结论 美金胺通过抑制NR2A、PSD-95、Src三者结合及Src介导的NR2A的酪氨酸磷酸化抑制了缺血后NMDA受体功能的增强,从而对大鼠缺血性脑损伤有保护作用.     

白芍总苷预处理对缺血性脑损伤大鼠血脑屏障保护作用的研究

目的探讨白芍总苷（TGP）预处理对缺血性脑损伤大鼠血脑屏障的保护作用及其机制。方法采用随机数字表法将180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平（NMP）10mg/（kg·d）预处理组和TGP50、100、200mg/（kg·d）预处理组,每组30只;采用阻断大脑右侧中动脉的方法制备缺血性脑损伤大鼠模型。造模前7d开始,TGP50、100、200mg/（kg·d）预处理组分别1次/d灌胃给予浓度为10、20、40mg/ml的TGP溶液（5ml/kg）,NMP10mg/（kg·d）预处理组同步灌胃给予2mg/ml的NMP溶液（5ml/kg）,假手术组和模型组同步给予0.9%氯化钠溶液（5ml/kg）。造模术后24h行各指标检测：伊文思蓝渗透法测定血脑屏障通透性,干湿比重法计算脑组织含水量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性,高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶（CAT）活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量,ELISA法测定TNF-α、IL-1β含量,Westernblot法检测脑组织闭合蛋白（Occludin）、闭锁连接蛋白-1（ZO-1）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9蛋白表达水平。结果与模型组比较,经TGP100、200mg/（kg·d）或NMP10mg/（kg·d）预处理能够明显抑制缺血性脑损伤大鼠脑组织伊文思蓝含量和含水量升高,抑制SOD、CAT活性降低和MDA、TNF-α、IL-1β含量升高,抑制Occludin、ZO-1蛋白表达下调和MMP-2、MMP-9蛋白表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与NMP10mg/（kg·d）预处理组比较,经TGP200mg/（kg·d）预处理能够抑制脑组织伊文思蓝含量升高,抑制SOD活性降低和MDA、TNF-α含量升高,抑制Occludin、ZO-1蛋白表达下调和MMP-2蛋白表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论TGP预处理对缺血性脑损伤大鼠血脑屏障具有一定的保护作用,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应、抑制Occludin、ZO-1蛋白表达下调和MMP-2、MMP-9蛋白表达上调有关。     

去铁胺对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的　研究去铁胺对新生大鼠缺氧缺血性脑病 (HIE)模型脑损伤的保护作用。方法　将 60只新生大鼠建立HIE模型 ,并随机分成两组 ,即HIE模型组和去铁胺治疗组 ,各 3 0只。在缺氧缺血前 2 4h两组分别单次腹腔内注射生理盐水或 2 0 0mg/kg去铁胺。另用正常新生大鼠 3 0只作为假手术组。观察缺氧缺血早期 (缺氧缺血后 2d)脑组织含水量、病理改变及后期 (缺氧缺血后 14d)脑萎缩程度。结果　去铁胺治疗显著减轻缺氧缺血侧 (左侧 )大脑半球水肿 ,左大脑半球含水量降至 ( 88 2± 0 9) %,显著低于HIE模型组 ( 89 3± 1 0 ) %( P <0 0 1)。去铁胺治疗显著减轻缺氧缺血侧脑组织病理学改变和大脑半球萎缩程度 ,治疗组左脑组织萎缩比 ( 8 8± 4 6) %显著低于模型组 ( 2 5 6± 6 2 ) %(P <0 0 1)。结论　去铁胺对缺氧缺血性脑损伤具有保护作用     

妥泰对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的探讨

目的 :探讨新型抗癫痫药妥泰是否对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。方法 :将 5 6只 7日龄Wister大鼠随机分为正常对照组 (14只 )、缺氧缺血组 (18只 )、妥泰短期治疗组 (18只 )、妥泰长期治疗组 (6只 )。缺氧缺血后即刻经胃管注入妥泰或生理盐水 ,2 4h后检测各组脑含水量及脑组织钠、钙含量 ,2 8d后观察组织学改变。结果 :缺氧缺血组脑含水量及钠、钙含量明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;妥泰短期治疗组脑含水量、钠含量明显低于缺氧缺血组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;长期治疗组组织学检查明显优于缺氧缺血组和短期治疗组。结论 :妥泰能减轻缺氧缺血后脑组织中钠蓄积 ,减轻脑水肿 ,减少神经元死亡 ,具有神经保护作用。     

依达拉奉对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的:探讨依达拉奉(Edaravone)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法:7日龄新生SD大鼠122只随机分为缺氧缺血组(HI组)、大剂量治疗组、小剂量治疗组和假手术对照组,制成HIBD动物模型,在缺氧缺血(hypoxia-is-chemia,HI)后即刻分别腹腔注射依达拉奉或生理盐水,连续注射5天。HI后24、48、72h各时间点检测脑组织匀浆MDA和SOD含量;电镜观察海马超微结构变化;TUNEL法检测HI后72h各组脑皮层神经细胞凋亡;Morris水迷宫实验评价35天学习和记忆能力变化。结果:HI后24、48、72h各时间点,大剂量治疗组与HI组MDA和SOD含量相比差异有极其显著性(P<0.01),小剂量治疗组与HI组相比差异无显著性(P>0.05);TUNEL染色结果示HI后72h各组缺血侧脑皮层凋亡细胞数,大剂量治疗组[(206.83±21.94)个/2500个细胞]较HI组[(317.67±24.27)个/2500个细胞]明显减少,差异有显著性(P<0.01),而小剂量治疗组[(301.30±17.61)个/2500个细胞]较HI组也减少,但差异无显著性(P>0.05)。结论:缺氧缺血后腹腔注射大剂量依达拉奉对新生鼠HIBD有明显保护作用。     

脑活素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：探讨脑活素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用。方法：建立性大鼠缺氧缺血性脑损伤模型，观察脑活素对脑细胞及脑凋亡细胞的影响。结果：脑活素干预组脑水肿和神经细胞变性均较模型对照组轻，而且凋亡细胞的比例也明显低于模型对照组。结论：脑活素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有一定的保护作用。     

二甲亚砜对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：探讨二甲亚砜（DMSO）对新生大鼠缺血缺血性脑损伤的保护作用及其可能机制。方法：7d Wistar大鼠缺氧缺血（HI）后2h和12h侧脑室内注射DMSO（n=39)或安慰剂（PBS）(n=39)；缺氧缺血后24h，DMSO组和安慰剂组各6只，正常对照组6只，取脑分离左右瘵球进行匀浆，用于微管相关蛋白2（MAP－2）和胞衬蛋白（fo-drin)Wistar印迹检测，缺氧缺血后72h，DMSO和安慰剂组各33只，正常对照组6只，经心脏灌注固定取脑，用MAP－2免疫组化和HE染色，计算脑梗死体积和脑损伤积分。结果：DMSO组大脑各部位梗死体积和脑损伤积分均低于PBS组，其中以大脑皮层的变化最明显；DMSO组MAP－2和胞衬蛋白和降解产物均少于安慰剂组，其中以Mr为150000／145000降解产物减少最明显。结论：DMSO具有脑保护作用，其机制可能与抑制钙依赖蛋白酶有关。     

亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的远期保护作用

目的：研究亚低温对缺氧缺血性脑损伤的远期保护作用。方法：Wistar 7d龄新生大鼠，随机分为缺氧缺血后24h亚低温干预组、48h亚低温干预组、72h亚低温干预组、常温（37℃）恢复组、正常对照组（假结扎组）。亚低温组每组12只动物，各取2只作为探针动物。其余每组10只动物。制造缺氧缺血性脑损伤模型，于亚低温干预后35d，用迷宫实验检测其学习和记忆能力，然后断头处死，制作脑组织病理切片，作微管关联蛋白－2免疫组织化学染色，染色结果经计算机图像分析系统处理，计算脑梗死面积。结果：亚低温干预各组第1d和第2d迷宫实验达标所需反应次数明显少于常温恢复组（P＜0．05），正确反应率明显高于常温恢复组（P＜0．05）。随着亚低温干预持续时间的延长，所需反应次数逐渐减少，正确反应率逐渐提高。亚低温干预各组脑梗死面积比常温恢复组显著减少（P＜0．05）。且随着亚低温干预持续时间的延长，梗死面积逐渐减少。结论：亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有远期保护作用，且随着亚低温干预持续时间的延长，保护作用增强。     

不同亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的探讨不同亚低温干预对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用.方法Wistar 7 d龄新生大鼠,随机分为缺氧缺血后29 ℃干预组、31 ℃干预组、34 ℃干预组、常温(37 ℃)恢复组、正常对照组(假结扎组).各组取20只动物于缺氧缺血后78 h处死,测定脑组织含水量及微管相关蛋白-2免疫组化染色;10只于生后42 d用迷宫实验检测其学习和记忆能力.结果与常温恢复组相比亚低温干预各组大鼠脑组织含水量及脑损伤程度显著降低,且随着温度的降低,脑组织含水量及脑损伤程度逐渐降低(P<0.05).亚低温干预各组大鼠学习和记忆能力显著高于常温恢复组(P<0.05),且随着温度的降低逐渐提高(P<0.05).结论亚低温干预可减轻新生大鼠HIBD,且随着温度的降低,效果越好,29 ℃亚低温干预短期效果优于31 ℃、34 ℃低温干预.     

阿魏酸钠对缺血性脑损伤保护作用的研究进展

缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)是目前严重威胁人类健康的疾病之一,其损伤机制的研究正逐步深入,除兴奋性毒性、细胞内钙超载外,还包括细胞凋亡、炎症、自由基以及一氧化氮的损伤等.阿魏酸钠(sodium ferulate,SF,当归素)是阿魏酸(ferulic acid)的钠盐,化学名称为3-甲氧基-4-羟基丙烯酸钠盐.阿魏酸是传统活血化瘀中药当归和川芎共有的有效单体成分,近年来SF在缺血性脑损伤中的保护作用的研究取得了一定的进展,现就SF对缺血性脑损伤机制作一综述.     

清脑方对缺血性眩晕大鼠脑损伤的保护作用

目的初步研究清脑方(Qingnaofang,QNF)对缺血性眩晕大鼠脑损伤的保护作用及其作用机制。方法采用手术结扎右侧颈总动脉和锁骨下动脉致大鼠右侧半脑不完全脑缺血建立缺血性眩晕大鼠模型。分为模型组,QNF 1.04、0.52、0.26 g/kg组,盐酸地芬尼多15 mg/kg组,银杏叶片5.76 mg/kg组以及假手术组,观察QNF对旋转刺激缺血性眩晕大鼠跳台逃避潜伏期的影响,取材并测定动物缺血侧组织Lac、LDH、SOD、MDA、NO及NOS的含量或活性。结果 (1)与模型组相比,QNF 1.04、0.52、0.26 g/kg组大鼠跳台逃避电击潜伏期分别缩短53.6%(P0.01)、33.8%(P0.05)、56.5%(P0.01)。(2)QNF 1.04、0.52、0.26 g/kg均可显著降低缺血侧脑组织中Lac的含量以及LDH的活力(P0.05,P0.01),降低其TNOS及iNOS活力(P0.01);QNF 0.52 g/kg剂量能够明显降低缺血侧脑组织中SOD活力;QNF 0.52、0.26 g/kg剂量可显著降低其MDA和NO的含量(P0.05,P0.01)。结论 QNF对缺血性眩晕大鼠脑损伤有一定的保护作用,能够减轻模型动物的眩晕症状,其脑保护作用机制可能与改善缺血脑组织能量代谢,减少氧化应激和炎性损伤有关。