微RNA-21在胃癌中的表达研究

目的探讨微RNA（miRNA）-21在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测胃癌组织和配对的正常胃黏膜组织中miRNA-21的表达。并分析miRNA一21表达水平与淋巴结转移及胃癌临床分期（TNM）之间的关系。结果68例胃癌组织标本中56例（82_35％）miRNA-21高表达。高于正常配对组织13例（19．11％）,差异有统计学意义（X2=54．37,P〈O．05）;在淋巴结转移阳性的胃癌组织中,miR—NA-21高表达（高于正常对照2倍）的发生率明显大于淋巴结转移阴性的胃癌组织,差异有统计学意义（X2=7．16,P〈O．05）;且T3～T4期miRNA-21高表达的发生率越高明显大于T1～T2期,差异有统计学意义（X2=4．64,P〈0．05）。结论miRNA-21在胃癌组织表达增高,与淋巴结转移及TNM分期有关,可能是胃癌诊断及治疗的分子靶标。     

乙肝肝硬化致肝癌患者癌组织miRNA-145的表达及其与预后的关系

【目的】探析乙肝肝硬化致肝癌患者癌组织miRNA-145的表达情况及与预后的关系。【方法】选取本院2009年1月至2012年1月共收治的74例乙肝肝硬化致肝癌患者作为研究对象,均于术中留取癌组织标本,进行癌组织中miRNA-145表达的检测及实时定量RT-PCR、细胞增殖检测及侵袭试验,根据miRNA-145浓度分为50nmol／L、100nmol／L、150nmol／L,对照组为体脂质体处理。结合临床探讨乙肝肝硬化致肝癌患者的miR—NA-145表达、miRNA-145对肿瘤细胞增殖能力、侵袭与转移能力的影响及与患者预后的关系。【结果】肝癌组织与人肝癌HepG2细胞株的miRNA-145表达水平均高于正常组织,差异有统计学意义（P〈0．05）。24h时各组细胞相对增殖（D490）的差异无统计学意义（P〉0．05）;48h与72h时,miRNA-145转染不同浓度组的细胞相对增殖（D490）均低于脂质体处理组,差异有统计学意义（P〈0．05）。试验组相对穿出小室膜的肿瘤细胞数为（0．29±0．05）个,低于脂质体处理组的（0．36±0．12）个,差异有统计学意义（P〈0．05）。miRNA-145高表达患者的生存期长于低表达组,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】miRNA-145的表达可抑制肿瘤增殖、控制肿瘤进展,并减弱肿瘤细胞的侵袭与转移能力、促进肿瘤细胞凋亡,从而延长肝癌患者生存期,值得临床深入研究。     

miRNA-155在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨miRNA-155在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法收集30例行胃癌手术切除治疗患者的临床资料及胃癌组织,采用基于SYBRGreenI染料荧光分析的茎环real—timeRT—PCR检测胃癌组织及其对应的癌旁组织中miRNA-155的表达水平（以U6作为内参）。结果miRNA-155在胃癌组织中表达量为（O．87±0．28）,显著高于其在配对癌旁组织中（0．33±0．15）的表达量（P〈0．05）;miRNA-155在有淋巴结转移的胃癌组织中表达更为显著（P〈0．05）。结论miRNA-155在胃癌组织中表达较癌旁组织明显上调。miRNA-155与胃癌的增殖、侵袭及转移密切相关,其可能成为胃癌的早期诊断及预后判断的新的生物学标记物。     

胃癌中PTEN、cyclin E蛋白表达及临床意义

目的探讨第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因（PTEN）及cyclin E蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法选择70例胃癌及相应距癌组织5cm外的正常胃黏膜组织，采用免疫组织En Vision两步法检测癌及癌旁组织中PTEN、cyclinE蛋白的表达情况。结果PTEN及cyclin E在胃癌组织中阳性率，与癌旁组织组比较，差异均有统计学意义（X^2分别=32．46、4．83，P均〈0．05）；PTEN及cyclin E在高分化、中分化、低分化腺癌比较，差异均有统计学意义（X^2分别=20．59、5．47，P均〈0．05）；PTEN、Cyclin E在胃癌TNM分期中Ⅰ-Ⅱ期的阳性率与Ⅲ-Ⅳ期的阳性率比较，差异有统计学意义（X^2分别=6．57、4．02，P均〈0．05）：同样在淋巴结有转移的胃癌组织中阳性率与无淋巴结转移的胃癌组织中阳性率比较，差异也均有统计学意义（X^2分别=7．46、5．16，P均〈0．05）。结论PTEN及cyclin E蛋白表达与胃癌的发生、发展及生物学行为有关。     

胃癌彩色多普勒血流分级与微血管密度、血管内皮生长因子的表达及其相关性研究

目的探讨彩色多普勒超声检测胃癌血流分级与病理微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的临床病理关系。方法术前测定60例各期胃癌患者肿瘤区域和正常胃壁的彩色多普勒血流显像（CDFI）,根据血流显示情况进行血流分级;术后免疫组化技术检测相对应标本内MVD、VEGF的表达。结果随着胃癌病灶区域内血流信号增多,血流分级增高,病理MVD计数和VEGF表达呈上升趋势（P=0．000）;胃癌癌组织血流分级和MVD计数均高于癌旁正常组织（P〈0．05）,进展期高于早期（P〈0．05）;VEGF表达水平癌组织则低于癌旁正常组织（P=0．000）,进展期高于早期（P=0．000）;MVD值同VEGF表达密切相关（P〈0．05）,而胃癌癌旁正常组织进展期与早期血流分级、MVD值和VEGF表达比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论彩色多普勒超声所检测的胃癌内血流信号与病理MVD测值和VEGF表达有较好的相关性,胃癌术前CDFI血流检测可间接评价肿瘤组织内的血管生成状态,为胃癌的预后评估提供有益的信息。     

COX-2和VEGF在胃癌组织中的表达及与血管发生的关系

目的探讨COX-2、VEGF在胃癌中的表达及与血管发生的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测56例胃癌和28例正常胃黏膜组织中COX-2、VEGF的表达，计算MVD值，并进行统计学分析。结果56例胃癌中COX-2、VEGF的阳性率分别为67．86％（38／56）和69．64％（39／56），与正常胃黏膜表达相比有统计学差异（P〈0．05）。胃癌中MVD的表达量（51．04±13．26）高于正常胃黏膜表达量（18．34±8．26），有统计学差异（P〈0．05）。胃癌中COX-2、VEGF的表达在不同临床分期、淋巴结转移状态有统计学差异（P〈0．05）。COX-2、VEGF与MVD表达呈正相关（r=0．763，P〈0．01；r=0．825，P〈0．01），COX-2与VEGF的表达也呈正相关（r=0．621，P〈0．01）。结论COX-2、VEGF在胃癌的发生、发展中起着重要作用，对胃癌的血管新生和发生发展有促进作用     

miR-124在胃癌中的表达及其临床意义

【目的】探讨miR-124（Homo sapiens miR-124）在胃癌组织中的表达及临床意义。【方法】收集胃癌患者手术标本176例（研究组）,以相应癌旁组织作为正常对照（对照组）,制成组织芯片,运用原位杂交检测胃癌及癌旁组织中miR-124的表达,分析其与胃癌临床病理参数之间的关系。【结果】研究组miR-124阳性表达率18．18％显著低于癌旁对照组86．36％,差异有统计学意义（P〈0．01）;miR-124的表达随着胃癌临床分期演进和浸润深度的增加而下调,各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;miR-124的表达与胃癌的分化程度相关,分化越差其表达越低,各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;且有淋巴结转移的miR-124的表达显著低于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】miR-124的表达下调可能是胃黏膜恶性转变及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志。     

miRNA-29c表达水平与胃癌生物学特征的关系

目的：探讨微小RNA-29c（miRNA-29c）表达水平与胃癌生物学特征的关系。方法采取实时定量聚合酶链反应检测胃癌组织、正常胃上皮组织、正常胃上皮细胞系GES-1、胃癌细胞系 SGC-7901与BGC-823中miRNA-29c的表达水平。结果 miRNA-29c在胃癌组织、正常胃上皮组织相对表达量分别为（0．71±0．32）、（1．21±0．34）,比较差异有统计学意义（P＜0．05）;miRNA-29c在GES-1、SGC-7901、BGC-823细胞系的相对表达量分别为（1．03±0．07）、（0．62±0．11）、（0．32±0．12）。miRNA-29c表达水平与肿瘤直径、Ming分型、TNM 分期、淋巴结转移密切相关（P＜0．05）,与患者性别、年龄和肿瘤组织分化程度、侵润程度无关（P＞0．05）。转染miRNA-29c模拟物可抑制BGC-823细胞的增殖,增加细胞凋亡率;减少G0/G1期细胞,增加S期细胞。结论 miRNA-29c表达水平与胃癌生物学特征具有密切的联系,可能参与了胃癌的侵润与转移。miRNA检测在胃癌患者预后判断方面具有一定的应用价值。     

胃癌组织FAT10 mRNA表达与临床病理特征的关系

目的研究FAT10 mRNA在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理学间的关系。方法用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测FAT10 mRNA在48例胃癌组织、癌旁组织及正常组织的表达水平，并观察它与临床病理特征的关系。结果48例胃癌组织、癌旁组织及正常组织的FAT10 mRNA阳性率分别为37．50％、10．42％和8．33％，差异具有统计学意义（P〈0．05）。胃癌组织FAT10 mRNA阳性表达率在大体类型、肿瘤长径≥5cm和〈5cm、发生部位以及分化程度之间比较，差异无统计学意义（P〉0．05），而在有无淋巴结及远处转移之间的差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论FAT10 mRNA在胃癌组织中的表达明显上调，在胃的正常黏膜组织也有少量表达，胃癌组织中FAT10 mRNA的阳性表达可能与肿瘤转移相关。     

胃癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白-2的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白-2（IGFBP-2）的表达及与细胞增殖的关系。方法 采用免疫组化EnVision法检测97例胃癌组织和30例正常胃黏膜中的IGFBP-2表达，同时用Ki-67标记细胞增殖。结果 胃癌组织中IGFBP-2的表达明显高于正常组织（P〈0．05）。IGFBP-2在高级别癌中表达高于低级别癌，但差异不显著（P〉0．05）。中晚期胃癌中IGFBP-2的表达明显高于早期胃癌，有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者，随着肿瘤临床分期增高，IGFBP-2的表达明显升高，差异显著（P〈0．05）。胃癌组织中IGFBP-2的表达与Ki-67呈正相关（P〈0．05）。结论 IGFBP-2可能通过促进细胞增殖参与了胃癌的发生、发展。     

MicroRNA-25在非小细胞肺癌患者中的异常表达及其临床意义

目的 探讨miRNA-25在非小细胞肺癌组织中的表达及其与临床病理因素和预后之间的关系.方法 用实时定量PCR检测60例非小细胞肺癌组织及其配对的癌旁组织中miRNA-25的相对表达水平,分析miRNA-25的表达与肺癌临床病理特征和预后的关系.结果 miRNA-25在肺癌及癌旁组织中表达的Ct值分别为28.35±1.78和31.60±3.28,其在肺癌组织中的相对表达量（2-△△Ct）为2.743,该结果表明miRNA-25在肺癌组织中的表达显著高于配对的癌旁组织（t=6.756,P＜0.05）.此外,miRNA-25在有淋巴结转移的肺癌组织中的相对表达量高于无淋巴结转移的肺癌组织（x2=13.436,P＜0.001）;miRNA-25在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期肺癌组织中的相对表达量高于I～Ⅱ期（x2=12.245,P＜0.001）,而其表达与年龄、性别、吸烟史、肿瘤病理类型、大小、分化程度均无相关性（x2=0.012～2.143,P＞0.05）;生存曲线显示,miRNA-25相对高表达组生存时间较低表达组明显缩短（P＜0.001）.结论 miRNA-25在肺癌组织中高表达,其与肺癌的临床病理分期、淋巴结转移及预后密切相关,可能成为肺癌诊断、预后判断标志及治疗的新的靶标.     

胃癌组织中p73表达与血管生成的关系研究

目的探讨胃癌组织中p73的表达及其与血管内皮生长因子（VEGF）的关系。方法应用免疫组织化学PV法检测66例胃癌组织及其癌旁正常胃组织中p73的表达情况,观察其与胃癌病理学特点及VEGF之间的关系。结果①p73及VEGF在胃癌中的阳性表达率显著高于其癌旁正常胃组织（P〈0.05）。②p73在胃癌组织中的表达与肿瘤直径、性别、年龄、病理类型、浸润深度无关（P〉0.05）;与淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0.05）。③胃癌组织VEGF表达与肿瘤直径、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）;与年龄、性别及病理类型无关（P〉0.05）。④p73与VEGF在胃癌组织中的表达呈正相关（r=0.684,P〈0.05）。结论p73蛋白及VGEF在胃癌发展过程中可能起着重要的作用。     

Tiam-1和PTEN在胃癌组织中表达的相关性及意义

目的探讨胃癌组织中Tiam-1和PTEN蛋白表达的相关性及临床病理意义。方法应用免疫组织化学法检测57例胃癌患者手术切除的胃癌及其癌旁组织中Tiam-1和PTEN的蛋白表达水平。结果 Tiam-1蛋白在胃癌组织中表达阳性率（77.2%）高于癌旁组织（7.0%）（χ2=57.576,P=0.000）;PTEN蛋白在胃癌组织中表达阳性率（64.9%）低于癌旁组织（98.2%）（χ2=21.072,P=0.000）;Tiam-1表达水平与胃癌组织分化程度低、TNM分期高以及淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）;PTEN表达水平与胃癌组织分化程度低、TNM分期高及淋巴结转移呈负相关（P〈0.05）;二者表达与年龄、性别及肿瘤直径均无相关性（P〉0.05）;Tiam-1与PTEN的表达呈明显负相关（r=-0.312,P=0.018）。结论联合检测Tiam-1和PTEN对胃癌侵袭、转移及预后评估有一定价值。     

PPARγ、PTEN、Akt在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系

目的：检测人胃癌组织中过氧化物酶增殖激活受体γ（PPARγ）、10号染色体缺失张力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）mRNA表达,探讨其与胃癌生物学行为的关系。方法应用逆转录PCR法检测60例人胃癌组织及相应癌旁组织,20名正常胃组织中PPARγ、PTEN、Akt mRNA的表达情况,并分析三者与胃癌分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、浸润深度和临床分期及患者性别、年龄之间的关系,同时分析三者的相关性。结果胃癌组织中PPARγ及Akt mRNA表达水平高于癌旁组织及正常胃组织（P＜0.05）,而PTEN mRNA 表达水平明显较癌旁组织及正常胃组织低（P＜0.05）,在癌旁组织与正常胃组织间PPARγ、PTEN、Akt mR-NA的表达水平均无明显差异。胃癌组织中PPARγ、PTEN、Akt mRNA表达量与患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关,而与胃癌的 TNM分期、侵犯浆膜、淋巴结转移及远处转移相关（P＜0.05）。PPARγ与PTEN 的表达呈负相关（rs ＝-0.492,P＜0.05）,与 Akt 表达呈正相关（rs ＝0.623,P＜0.05）,PTEN与Akt表达呈负相关（rs ＝-0.565,P＜0.05）。结论 PPARγ、Akt在胃癌中高表达而PTEN呈低表达,三者中存在明显相关,联合检测可作为判断胃癌恶性程度和预后的指标。     

MMP-2，TIMP-2，MMP-9的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的检测胃癌组织以及癌旁胃组织中MMP．2、TIMP．2、MMP．9的表达差异,并分析其对胃癌侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法将97例胃癌组织以及89例癌旁胃组织制作成组织芯片,用免疫组织化学半定量的方法检测MMP-2、TIMP-2、MMP-9在胃癌组织及癌旁胃组织中的表达程度并分析其与临床病理参数的关系。结果MMP-2、TIMP-2、MMP-9在89例胃癌组织和配对的癌旁胃组织中的表达均有显著差异（P〈O．01）,其中MMP-2在胃癌组织的表达大于其在癌旁非肿瘤胃组织,而TIMP．2、MMP．9在胃癌组织的表达小于其在癌旁非肿瘤胃组织。MMP-2的高表达率与胃癌组织的临床分期,浸润深度,淋巴结转移显著正相关（P〈0．01）;TIMP．2与胃癌组织的临床分期,浸润深度（P〈0．01）,淋巴结转移（P〈0．05）显著负相关。MMP．9在肠型胃癌的表达要显著高于弥漫型胃癌（P〈O．05）。MMP-2的高表达与TIMP-2的高表达显著负相关（P〈O．01）。结论MMP-2可促进胃癌的侵袭转移,在胃癌组织高表达;TIMP-2抑制胃癌的侵袭转移,在胃癌组织低表达;MMP-2的表达与TIMP-2的表达显著负相关。MMP-9在胃癌组织表达低,．在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型胃癌,与TIMP-2的表达无显著相关性。     

miRNA-21在结直肠癌中的表达研究

目的 检测MicroRNA-21（miRNA-21）在正常人和结直肠癌患者血清,以及结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中的表达,探讨其与结直肠癌临床病理参数的关系.方法 采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测正常人和结直肠癌患者血清,以及结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中的表达,分析miRNA-21的表达与结直肠癌临床病理参数的关系.结果 miRNA-21在结直肠癌患者血清中表达水平显著高于正常人血清（P＜0.05）;结直肠癌组织中miRNA-21表达水平明显高于癌旁组织;中晚期（Ⅲ期和Ⅳ期）结直肠癌组织中miRNA-21表达水平明显高于早期（Ⅰ期和Ⅱ期）结直肠癌（P＜0.05）;低分化肿瘤组织中miRNA-21表达水平明显高于中高分化者;有淋巴结转移的结直肠癌组织中miRNA-21表达水平明显高于无淋巴结转移者.结论 miRNA-21在结直肠癌患者血清及肿瘤组织中呈高表达,可能与结直肠癌的发生发展有关.     

生存素和基质金属蛋白酶11在胃癌中的表达及意义

目的探讨生存素(Survivin)和基质金属蛋白酶11(MMP-11)在胃癌中表达的意义及其与肿瘤浸润转移的关系。方法通过检测20例正常胃黏膜、60例胃癌中Survivin、MMP-11表达情况,分析其表达与胃癌临床病理学特征的关系。结果胃癌组织及淋巴结胃癌转移灶中Survivin与MMP-11的表达较正常组显著增高(P<0.05)。Survivin表达与胃癌患者的性别、年龄、分化程度无关,Survivin阳性表达与淋巴结转移、TNM分期较高有关,差异具有统计学意义(P<0.05);MMP-11的表达与胃癌患者的性别、年龄无关,与分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。Survivin表达阳性的胃癌中MMP-11阳性率86.84%高于Survivin阴性组的50.00%。结论 Survivin与MMP-11在胃癌中表达增高与胃癌进展的临床病理指标存在相关性;Survivin与MMP-11的表达有关,推测Survivin可能通过MMP-11促进胃癌的浸润转移,从而参与并影响了胃癌的进展。     

外周血microRNA-23b作为胃癌筛查分子标志物的价值和应用研究

目的观察和分析外周血microRNA-23b作为胃癌筛查分子标志物的应用价值。方法选取100例接受胃镜病理活检者作为研究对象,根据检查结果将其分为三组,确诊为胃癌者列为胃癌组,共纳入46例;确诊为胃癌前病变者列为癌前病变组,共纳入28例;胃粘膜检查结果基本正常者列为对照组,共纳入26例。应用定量real time PCR检测技术对三组研究对象外周血样本中的miRNA-23b表达水平进行检测和比较。结果对照组研究对象的外周血样本的Log2△Ct值显著高于癌前病变组（P〈0.05）,而且癌前病变组的Log2△Ct值显著高于胃癌组（P〈0.05）;胃癌组、癌前病变组和对照组研究对象外周血样本中的miRNA-23b表达阳性率分别为71.7%、32.1%和3.8%,胃癌组的阳性率显著高于癌前病变组（P〈0.05）,癌前病变组显著高于对照组（P〈0.05）。与胃镜活检结果对比,其阳性预测值为76.7%,阴性预测值为77.2%。结论胃癌患者外周血中miRNA-23b表达水平可反映患者病情的进展程度,且其诊断效率较高,有望成为用于胃癌早期筛查的新型分子标志物。