第九节 军团菌肺炎

军团菌病是由嗜肺军团杆菌引起的一种以肺炎为主要表现的全身性疾病，1976年才被确认。嗜肺军团杆菌是革兰染色阴性的杆菌，存在于水和土壤中，可经供水系统、空调或雾化吸入呼吸道而引起感染。年老体弱，慢性心、肺、肾疾病，糖尿病，恶性肿瘤，血液病，艾滋病或接受免疫抑制剂治疗者，易患本病。     

实用临床诊疗规范--呼吸系统疾病(二)第九节 军团菌肺炎

1概述 军团菌病是由嗜肺军团杆菌引起的一种以肺炎为主要表现的全身性疾病,1976年才被确认.嗜肺军团杆菌是革兰染色阴性的杆菌,存在于水和土壤中,可经供水系统、空调或雾化吸入呼吸道而引起感染.年老体弱,慢性心、肺、肾疾病,糖尿病,恶性肿瘤,血液病,艾滋病或接受免疫抑制剂治疗者,易患本病.     

利用荧光素原位分子杂交检验水样中嗜肺军团菌的研究

目的：利用针对嗜肺军团菌种特异性16SrRNA和军团菌致病基因-巨噬细胞感染增强因子（mip）序列探针原位分子杂交建立嗜肺军团菌的快速、特异性检验方法。方法：设计特异性针对嗜肺军团菌种特异性16SrRNA和mip探针，采用荧光素标记探针对采自西安市8家宾馆中央空调冷凝水、贮水池水各8份进行原位分子杂交，并且结合细菌分离、生化鉴定技术检验水样中嗜肺军团菌。结果：细菌分离鉴定表明2份冷凝水、5份贮水池水分离到可疑菌落，抗体凝集实验证实嗜肺军团菌血清Ⅰ型3份、Ⅴ、Ⅵ型各1份，2份阴性。实验周期约10～12d；原位分子杂交显示16SrRNA、mip的探针杂交信号成堆分布于原虫细胞内，形如杆菌状，16SrRNA与mip的杂交信号存在完全双标记，但有少数mip的杂交信号不与16SrRNA共存，5株鉴定为嗜肺军团菌Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ型的水样原虫中，经16SrRNA、mip探针杂交均为阳性，对2株非嗜肺军团菌水样原虫进行16SrRNA、mip的杂交结果均为阴性。实验周期约20h。结论：结果表明该方法适用于对存在于原虫内致病性嗜肺军团菌进行检验，是种快速、特异性的致病性嗜肺军团菌检验方法。     

PCR方法捕获环境水样中嗜肺军团菌DNA

嗜肺军团菌是军团病的主要病原体，它所导致的军团病病例占临床病例的80％以上，多数军团病暴发由嗜肺军团菌所引起。通过针对嗜肺军团菌种保守基因（mipgene）设计的引物，我们建立了一种多聚酶链反应（PCR）检测方法，可以准确捕获环境标本中的嗜肺军团菌，同时具有很好的特异性，其最低可检出18cfu／ml的细菌。该方法的建立为嗜肺军团菌病的诊断以及在军团病流行病学调查中嗜肺军团菌病原的追踪提供了一条便捷、准确、可靠的途径。     

深圳市公共场所中军团菌污染状况

目的调查深圳市公共场所中军团菌的污染状况。方法采集公共场所中水、土壤、风管积尘和气溶胶样本,按照＂卫生行业专项任务工作方案＂检测军团菌和嗜肺军团菌。结果军团菌阳性率水样为43.3%、气溶胶为3.85%、积尘为0.90%、土壤为0;嗜肺军团菌阳性率水样为36.8%、气溶胶为0%、积尘为0.90%、土壤为0。深圳市公共场所中分离的76株嗜肺军团菌有7种血清型,优势血清型为LP1和LP3,分别占57.9%和25.0%。部分水样存在着多种菌型共生的现象。结论深圳公共场所水环境中嗜肺军团菌污染严重,综合性医院空气中军团菌阳性率较高,公共场所存在军团菌病暴发的隐患。     

广东新会地区公共环境冷却塔水系军团菌污染状况调查

目的查明广东新会地区公共环境冷却塔水系军团菌分布状况,为预防和控制军团菌病暴发流行提供依据。方法自2004-2006年8～10月,在新会区各大宾馆、饭店、学校、医院和公共娱乐场所共采集中央空调冷却塔水样112份,进行军团菌分离培养和PCR快速鉴定。结果在新会区采集的112份公共环境中央空调冷却塔水样中分离培养检出嗜肺军团菌26株,检出率23.2%;PCR直接检测嗜肺军团菌(LP-DNA)阳性57份,阳性率50.9%。结论在广东新会地区环境水源中嗜肺军团菌污染具有普遍性,PCR检测嗜肺军团菌是一种快速、敏感、特异性良好的检测法。     

嗜肺性军团菌的遗传学

嗜肺性军团菌是人类呼吸道疾病一军团病的致病菌。本菌为需氧性革兰氏阴性杆菌,广泛分布于水环境中。嗜肺性军团菌对人的致病性是由于本菌能进入肺泡巨噬细胞和单核细胞内,并且可以繁殖的缘故。由于嗜肺性军团菌也可以在实验室人工培养基上生长,故将其分类为兼性细胞内致病菌。对嗜肺性军团菌和人单核吞噬细胞间的相互作用已做过十分详细的检查。嗜肺性军     

广东新会环境水源军团菌分布类型研究

目的对广东新会公共环境水源中军团菌进行分离培养及种属鉴定，了解其分布状况，为军团菌病的预防控制提供依据。方法2007年8月在广东新会两个天然湖泊及6家宾馆的内湖和空调冷凝塔中共采集水样23份，作军团菌分离培养，用生化试验和PCR等方法进行初步鉴定，最后根据16srRNA和mip基因测序，最终确定菌种。结果23份水样中检出军团菌20份，检出率高达86．9％；检出军团菌30株，其中嗜肺军团菌21株，非嗜肺军团菌9株，包括戈尔曼军团菌5株，菲氏军团菌2株，长滩军团菌2株；同时发现同一水样中有多种军团菌共存现象。结论在广东矫会环境水源中军团菌普遍存在，且有多种军团菌共存状况，应引起相关部门的重视．以防军团病的暴发流行。     

公共场所集中空调通风系统军团菌污染情况调查

目的 了解阳江市公共场所内集中空调系统冷却水嗜肺军团菌检出情况及菌型,分析和评价公共场所内发生军团菌病暴发流行的风险.方法 采集阳江市公共场所集中空调冷却水42 份,对水样进行预处理后,应用GVPC、BCYE、BCYE-cys 培养基进行嗜肺军团菌分离培养,然后进行血清分型和鉴定.结果 42 份空调冷却水中嗜肺军团菌检出率为35.7%,血清型以LP1 为主,检出率在不同季度有显著性差异,在不同类型公共场所间无明显差异.结论 阳江市公共场所集中空调冷却水中存在嗜肺军团菌,对人群构成潜在健康危害,应加强预防控制工作.     

贵阳市某医院疑似嗜肺军团菌合并流感病毒感染暴发疫情的调查报告

目的分析医院感染暴发疫情特点,探讨疫情发生原因。方法采集医院感染病例咽拭子、血清标本和病房外空调循环水、房间的沐浴水、医生办公室以及屋顶空调系统循环水,对咽拭子和血清标本检测嗜肺军团菌IgM和流感病毒核酸,采集的水样培养嗜肺军团菌。采用血清间接免疫荧光法检测嗜肺军团菌IgM定性和细菌培养定量;逆转录聚合酶链反应检测流感病毒核酸及分型等。结果本次疫情病例均发生在医院内分泌科,累计报告10例患者,以呼吸道症状为主,疫情持续9 d,患者年龄在71～87岁,主要为住院病人,共6例;医护人员发病4例,年龄在24～37岁。患者血清嗜肺军团菌IgM抗体(+)7例;冷凝水、循环水和咽试子标本嗜肺军团菌培养均为阴性;流感病毒核酸阳性5例(甲型H_3N_2)。结论此次事件可能是由嗜肺军团菌合并普通季节性流感病毒感染引起的医院感染暴发疫情。     

公共场所水环境军团菌污染及其从业人员军团菌感染状况分析

目的分析公共场所水环境中军团菌污染及其从业人员军团菌感染状况方法以公共场所为研究对象,采集集中空调冷却塔水、淋浴水和自来水进行军团菌分离培养,同时对从业人员进行军团菌血清抗体和尿抗原检测。结果公共场所中空调冷却塔水、淋浴水和自来水军团菌阳性率分别为75%(111/148)、27%(27/100)和44%(22/50),以嗜肺军团菌污染为主,其中LP1为优势菌性,其他LP2-8、LP10、L.micdadei、L.bozemanii均有检出。公共场所从业人员军团菌血清抗体阳性率66.0%(369/559),抗LP1-14有检出,以抗LP12(45.9%)、抗LP4(43.4%)为优势血清型,抗LP1阳性率8.8%。公共场所从业人员LP1尿抗原阳性率0.0%(0/202)。结论公共场所冷却塔水、淋浴水和自来水军团菌尤其是嗜肺军团菌污染严重,从业人员普遍存在军团菌既往感染,公共场所存在发生社区获得性军团菌病暴发的安全隐患。     

多重PCR快速检测空调冷却塔水中军团菌

目的 传统的方法分离培养军团菌，时间长，价格贵，培养较困难，本文建立多重PCR方法，快速检测空调冷却塔水中军团菌属和嗜肺军团菌种。方法 利用军团菌属保守基因片段16SrRNA和嗜肺军团型菌巨噬细胞感染增强因子（mip）基因序列的特异性引物，对空调冷却塔水样中分离的疑似军团菌株进行特异性扩增，并且为了增强敏感性，运用递减温度PCR扩增。结果：PCR扩增的阳性结果与生化培养和血清学鉴定为军团菌的菌株结果—致。结论：与传统的分离培养方法相比，多重PCR方法检测军团菌，快速敏感，成本低，具有较好的特异性。     

淋浴龙头和热水龙头造成的气溶胶中含有嗜肺军团杆菌

以往的研究认为军团病与吸入空气中含有嗜肺军团杆菌的气溶胶有关,但没有能在淋浴龙头及热水盆龙头造成的气溶胶中直接检出嗜肺军团杆菌。本文通过现场检测,研究污染的淋浴龙头和热水盆龙头所造成的气溶胶与嗜肺军团杆菌的关系。水样采集是将淋浴龙头或热水盆龙头打     

2011—2013年北京市朝阳区公共场所集中空调嗜肺军团菌污染状况

目的了解北京市朝阳区公共场所内集中空调嗜肺军团菌污染状况。方法 2011—2013年采集该区集中空调冷却水和冷凝水进行嗜肺军团菌检测。结果 2011—2013年冷却水合格率呈现上升趋势,但低于冷凝水;嗜肺军团菌以LP-1型为主,占88.2%;不同类型公共场所冷却水检测结果显示,写字楼冷却水合格率高于宾馆和商场超市。结论北京市朝阳区集中空调装置存在一定程度的嗜肺军团菌污染,应加强集中空调的监管力度,做好清洗和消毒工作,以降低人群感染嗜肺军团菌病的风险,预防军团菌病的暴发流行。     

嗜肺军团菌荧光定量PCR法的建立和初步应用

目的建立嗜肺军团菌特异、快速检测方法,探讨南京地区公共场所环境水样嗜肺军团菌污染状况。方法根据嗜肺军团菌的mip基因保守序列设计引物和探针,通过对嗜肺军团菌标准株ATCC33152、嗜肺军团菌南京分离株及大肠埃希菌ATCC25922、鼠伤寒沙门菌ATCC14028、福氏2a志贺菌ATCC12022进行检测,验证该方法的特异性。并应用该法对南京地区某商场、宾馆、办公楼、医院共计13家的中央空调系统的冷却水、淋浴水和景观水共计88份环境水样进行了PCR检测及军团菌的分离培养。结果该法对嗜肺军团菌有特异性扩增曲线,而对其他细菌无阳性扩增曲线。88份水样中荧光定量PCR方法检测出28份阳性,阳性率为31.8%;传统培养方法分离出17株军团菌,分离率为19.3%。结论本文建立的荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,可用于环境水中军团菌污染状况调查。南京地区中央空调冷却水中检出率最高,存在发生军团菌病的可能,应引起足够重视。     

2006—2013年广州地铁集中空调系统嗜肺军团菌的污染状况

目的调查广州地铁集中空调系统冷却水和冷凝水中嗜肺军团菌的污染状况。方法对2006—2011年和2013年采集的广州地铁集中空调冷却水和冷凝水的水样,进行嗜肺军团菌的检测和血清分型,并对其中19株嗜肺军团菌分离株做PFGE分型鉴定,用BioNumerics软件进行聚类分析。结果共计采集水样609份,嗜肺军团菌的平均检出率为17.73%（108/609）,其中冷却水的检出率为23.01%（101/439）,冷凝水检出率为4.12%（7/170）。有采集检测样品的年份均检出嗜肺军团菌,检出率在11.83%～22.73%,其中2013年检出率为最高,达22.73%（10/44）。在108份阳性水样中,共计分离到120株嗜肺军团菌,有12份水样在同一份样品中同时分离出2种不同血清型的嗜肺军团菌;从血清型分布来看,以LP1为主占55.00%（66/120）,其次为LP14占29.17%（35/120）。19株嗜肺军团菌分离株PFGE分型相似性在79.9%～100.0%,可分为3个聚类群10个PFGE型。结论广州地铁集中空调系统存在一定程度嗜肺军团菌污染。应加强广州地区地铁集中空调系统的监测力度,制定定期清洗和消毒计划,防止人群感染。     

两种简易嗜肺军团菌琼脂培养基

嗜肺军团菌是军团菌病的病原菌,为革兰氏阴性杆菌,属于一种机会性致病菌,能够引起人类肺炎、全身性或亚临床感染。     

上海金山区宾馆淋浴水和公共浴室水中嗜肺军团菌MALDI-TOF MS快速检测及聚类分析

目的 研究上海市金山区宾馆及公共浴室水环境中嗜肺军团菌污染情况，并逐步建立本区嗜肺军团菌蛋白指纹图谱数据库。方法 2021年11月—12月对辖区8家宾馆和4家公共浴室采集淋浴水及相关环境样本，利用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法对嗜肺军团菌进行快速鉴定及聚类分析。结果 宾馆淋浴水、淋浴水相关环境、公共浴室水样中，嗜肺军团菌检出率分别为35.00%(7/20)、25.00%(5/20)、30.00%(6/20),差异无统计学意义(P>0.05),检出嗜肺军团菌以LP3型为主，宾馆和公共浴室水环境细菌谱差异较大，宾馆淋浴水样中以常见的单胞菌和肠杆菌为主，公共浴室水样中以不动杆菌为主。嗜肺军团菌蛋白图谱聚类分析发现分为2个明显的分支。结论 辖区内宾馆及公共浴室水环境中存在明显的嗜肺军团菌污染，并且血清型种类多样，存在同一场所多种血清型共存的情况，需要引起重视，建议对相关场所进行定期监测并指导消毒，预防呼吸道感染的发生。利用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法检测嗜肺军团菌可以大大缩短检测周期，提高检测准确度，还能对其进行聚类分析，建立蛋白指纹图谱数据库，为溯源提供依据。     

广东部分地区空调冷却塔水军团菌污染状况调查

目的了解广东省部分地区军团菌污染情况,为军团菌病的预防控制提供依据。方法对2004-2005年广东省部分地区各种场所空调冷却塔水共116份进行军团菌分离培养与鉴定。结果116份水样中共分离出军团菌73株,水样总阳性率为62.9%。检测出的军团菌以嗜肺军团菌(LP)为主,其中LP1型占42.50%。结论广东省部分地区空调冷却塔水中军团菌污染情况较为严重,需引起重视以防止军团菌病的暴发流行。     

深圳市集中空调系统军团菌污染状况分析

目的了解深圳市地铁和部分宾馆集中空调系统军团菌污染状况。方法按照《公共场所集中空调通风系统卫生规范》要求,检测未经消毒处理的宾馆水样8份、专业消毒公司处理过的水样78份,未开通运营的地铁空调系统水样53份,用传统细菌分离培养法分离鉴定,用PCR法加以验证。结果 78份消毒处理过的水样和53份地铁空调系统水样未检出军团菌;8份未经消毒处理的水样中检出1株嗜肺军团菌LP6型,3株LP1型,总阳性率为3.10%。结论深圳市未经消毒处理的宾馆集中空调系统中嗜肺军团菌阳性率较高,专业消毒公司处理后的水样未检出嗜肺军团菌,建议有关部门加强对空调系统的监管,以降低嗜肺军团菌感染的隐患。