时间分辨免疫荧光法测定乙肝病毒血清标志物的结果分析

[目的]探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)在测定乙型肝炎血清标志物(HBV-M)中的应用价值。[方法]分别采用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)检测。对比研究了TRFIA和ELISA两种方法的灵敏度、特异性和结果符合率。[结果]TRFIA法测定HBsAg、HBsAb、HbeAg均有较高的灵敏度、特异性及符合率,对HbeAb测定的符合率为90.9%,灵敏度为97.40%,但易出现假阴性,特异性仅为86.7%,故测定特异性还有待提高。HBcAb测定结果符合率只有55.8%,特异性为27.0%。ELISA法检测HBV-M五项指标也有较高的灵敏度,其中以HBsAg最为理想,灵敏度为95.24%、特异性为96.55%、符合率为96.15%,HBcAb和HBeAg次之,HBeAb灵敏度最低。[结论采用TRFIA检测乙型肝炎血清标志物的灵敏度、特异性及符合率优于传统ELISA法,同时可以根据血清标志物表达量的多少评估患者的病情及传染性,较传统ELISA法更准确和更可靠,值得临床推广应用。     

乙肝病毒血清学标志物 TRFIA与 RIA定量检测结果

目的以微粒子酶免疫分析(MEIA)为金标准,比较时间分辨荧光免疫(TRFIA)法、放射免疫分析(RIA)技术在定量检测乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)5项乙肝病毒血清学标志物(HBV—M)的临床应用价值。方法对210例随机样本同时采用MEIA、TRFIA及RIA3种方法进行HBV-M5项指标测定,分别计算TRFIA、RIA法与标准MEIA检测结果的相对灵敏度、相对特异性和总符合率。结果TRFIA法检测HBV-M结果的相对灵敏度、相对特异性和总符合率均优于RIA法。结论TRFIA法与RIA法比较,在临床检测HBV-M5项指标具有相对灵敏度、相对特异性和总符合率较高的优势,且无放射污染,易于自动化。     

荧光酶免定量测定甲胎蛋白的临床评价

目的分析荧光酶免定量测定甲胎蛋白的临床价值。方法将混合的血清用TRFIA,FEIA和ELISA方法检测AFP,记录数据并分析精密度。其余45份血清分别用TRFIA,FEIA和ELISA方法检测AFP。选择高值血清,进行倍比稀释,重复测定3次,分析实际值的线性程度。结果 TRFIA与FEIA、ELISA的r值为0.937和0.978,差异无统计学意义(P>0.05)。TRFIA检测精密度优于FEIA,优于ELISA。TRFIA法检测线性范围为1.2-1200ng/ml,FEIA法为0.6-480ng/ml,ELISA法为5-200ng/ml。结论 TRFIA与FEIA、ELISA法均可用于临床实验室检测AFP。     

三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的比较与分析

目的:比较时间分辨荧光免疫法(TRFIA)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的效果。方法:对我院收集的采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测的HBsAg为1.0≤S/C0≤3.0的300份血清标本和164例ECLIA检测的HBsAg阴性标本分别进行TRFIA、CMIA和ELISA检测,以ECLIA为标准,比较三种检测方法的特异度和敏感度。结果:TRFIA阳性率最高,ELISA最低;TRFIA特异度最高,ELISA最低;TRFIA和ELISA敏感度高于CMIA,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:TRFIA和CMIA检测低浓度HBsAg准确性、敏感度和特异度均较高。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与其血清标志物及DNA的关系分析

目的 探讨HBV前S1抗原(Pre-S1)与HBV血清标志物(HBV-M)及HBV DNA的关系.方法 采用ELISA法检测880例乙型肝炎患者血清Pre-S1和HBV-M,采用荧光定量PCR法检测HBV DNA载量,并分析三者间的相关性.结果 在880例乙型肝炎患者中,前S1抗原和HBeAg的阳性率分别为56.25％...     

两种方法测定乙型肝炎血清学标志物的结果分析

目的 探讨酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙型肝炎表面抗体HBsAb)的结果并进行对比分析.方法 218份样本每份均用ELISA和TRFIA两种方法进行HbsAb定量和定性检测,操作步骤均严格按照《全国临床检验操作规程》和试剂盒各自附带的说明书的要求进行;并对结果进行判断分析.结果 218份标本应用TRFIA法和ELISA法检测结果比较,HBsAg、HBeAg、抗-HBe结果符合率较高均＞ 90.00％,差异无统计学意义,而抗-HBs、抗-HBc结果符合率均为88.99％,差异有统计学意义P＜0.05).结论 采用TRFIA法检测乙型肝炎血清标志物优于传统ELISA法,有利于提高乙型肝炎的诊断率,同时可以根据血清标志物表达量的改变来评估患者的病情发展及传染性的强弱;较传统ELISA法更准确、可靠,值得临床推广.     

化学发光免疫分析与酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒标志物比较分析

目的 采用酶联免疫吸附分析法(ELISA)和化学发光免疫分析法(CLIA)对乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)进行检测,并分析比较两种方法的临床应用优势.方法 选取2011年3月--2013年2来我院就诊和住院患者的血清标本310份,使用酶联免吸附妇分析法(ELISA)和化学发光免疫分析法(CLIA)分别对样本的乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)进行检测,收集记录结果,分析比较运用两种检测方法得到的结果.结果 310份患者血清样本经ELISA、CLIA检测HBV-M后比较其结果,发现两种方法得到的检测结果之间无明显差异,这种差异不具有统计学意义(P>0.05).结论 ELISA、CLIA两种方法检测HBV-M后,检测结果高度一致,但是与ELISA相比,CLIA的检测结果结果稳定性更强,检测方法更准确、灵敏.     

HBV-DNA与乙型肝炎血清标志物的相关性分析

目的 探讨乙型肝炎患者HBV-DNA定量与血清标志物(HBV-M)的关系及应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量-PCR(FQ-PCR)法对688例乙肝患者进行HBV-M以及HBV-DNA定量检测.结果 在HBsAg( )HBeAg( ) 血清中HBV-DNA阳性率和含量最高,血清中HBeAg与HBV-DNA 含量密切相关,但部分HBeAg阴性或HBeAb阳性患者也有较高的HBV-DNA 阳性率及含量.结论 单凭血清免疫标志物模式难以准确判断HBV的复制程度及传染性的强弱,定量检测HBV-DNA能真实反映HBV的复制情况,对诊断、治疗乙肝患者及疗效观察具有重要的临床意义.     

HBV-DNA定量与乙肝标志物结果分析对比

目的 探讨血清中HBV-DNA定量与乙肝标志物(HBV-M)之间的关系及临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)和ELISA法分别检测1478例患者血清中的HBV-DNA含量和HBV-M,并对结果 进行分析对比.结果 HBeAg(+)模式下的HBV-DNA阳性率和定量值高,HBeAg(-)模式下HBV-DNA阳性率和定量值较低,二者差异有统计学意义;HBsAg(-)模式下亦可检出HBV-DNA.结论 同时检测血清乙肝标志物和HBV-DNA对临床HBV感染、复制及传染性的判断具有重要意义.     

乙型肝炎表面抗原弱阳性结果探讨

目的探讨乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性的临床意义。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析系统(TRFIA)分别对40例乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性标本进行检测。结果ELISA法测定40例弱阳性标本,经TRFIA法定量检测均为阳性。结论当检测HBsAg为弱阳性时,应进行复查确认。     

TRFIA与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物的分析与比较

目的比较分析时间分辨荧光免疫法（TRFIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）对乙型肝炎病毒感染血清学标志物（HBV—M）的检测结果。方法采用TRFIA和ELISA法对182例肝病就诊患者同时进行HBV-M检测,两者结果不符合者双孔复查。结果TRFIA法测定乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（HBeAb）灵敏度高于ELISA法,结果符合率分别为98．9％、96．7％、99．5％、90．7％、88。5％。经配对卡方检验．两种方法测定HBsAg,HBeAg,HBeAb的结果比较无显著性差异（P〉0．05）,而测定乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝核心抗体（HbcAb）的结果比较有显著性差异（P〈0．05）。乙肝病毒血清学标志物的医学模式比较中,HBsAb与HBsAb、HBcAb阳性模式有显著性差异（P〈0．05）,其它医学模式无显著性差异。结论TRFIA法测定HBV—M是一种灵敏度高,结果符合率高的定量检测技术,对提高临床检测水平、指导临床治疗、监测方面有实用价值。     

乙型肝炎病毒敏感性指标检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(PreS1)、HBV-DNA、乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)在临床中的应用价值及PreS1与病毒复制的关系。方法对583例乙型肝炎患者血清标本,采用酶联免疫法(ELISA)检测前S1抗原和乙型肝炎两对半(HBV-M),荧光PCR探针检测HBV-DNA。结果在190例HBsAg、HBeAg阳性的标本中,前S1抗原阳性为166例,HBV-DNA阳性为173例,阳性率分别为87.36%和91.05%,两种阳性率比较,差异无统计学意义;393例HBsAg阳性、HBeAg阴性的标本中,前S1抗原阳性为195例,HBV-DNA阳性为212例。阳性率分别为49.62%和53.94%,两种阳性率比较,差异无统计学意义。结论乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA有较高的符合率,可作为判断乙型肝炎病毒早期感染、复制的敏感性指标;三者联合检测互相补充,更有助于临床疾病的诊治。     

A new serological technique, time-resolved fluoroimmunoassay (TRFIA), for the immunological diagnosis of urinary schistosomiasis

The application of a new serological method, time-resolved fluoroimmunoassay (TRFIA), is described for the diagnosis of urinary schistosomiasis. A chelate of lanthanides (europium) with a long fluorescent life-time is used as label. The intensity of fluorescence is measured after a delay selected to eliminate almost completely the background fluorescence, which decays rapidly. TRFIA was compared with an established method, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Using sera from proven cases of Schistosoma haematobium infection, 98.1% of the samples were positive by TRFIA and 86.5% by ELISA. Sera from patients infected with helminths other than schistosomes produced only 1.5% of false positives with TRFIA, compared with 12.3% by ELISA. TRFIA is more sensitive and specific than ELISA.     

HBV-LP与HBV-DNA检测法在HBeAg阴性乙肝患者及正常人中的比较

目的:通过检测餐饮从业人员、学生等公共卫生体检人员中乙肝病毒大蛋白(hepatitis B virus large proteins,HBV-LP)的情况,探讨HBV-LP与HBV-DNA检测法在HBeAg阴性HBV患者和正常人中检测效果的异同。方法:采用酶联免疫法(ELISA)测定乙肝两对半(HBV M)以及乙型肝炎病毒大蛋白(HBV-LP);采用Real-time PCR法检测HBV-DNA,对各类体检人员的709份血清标本和200份正常人的血清标本分别进行检测。结果:(1)在489份HBeAg阴性乙肝患者的标本中,HBV-LP与HBV-DNA检测法的检测结果差别无统计学意义(χ2=0.58,P>0.05)。(2)HBV-LP S/CO值与HBV DNA拷贝数呈正相关(r=0.951,P<0.05)。(3)在乙肝二对半(HBV-M)均阴性200份餐饮从业人员的标本中,两种方法的检测结果差别亦无统计学意义(χ2=0.40,P>0.05)。结论:乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)像HBV-DNA一样能够有效、真实地反映HBV病毒复制情况,该方法可以在体检领域推广使用。     

HBV-DNA与乙型肝炎血清学标志物的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）与乙肝病毒血清标志物（HBV-M）之间的相关性。方法将临床筛查的600例HBsAg阳性血清标本用ELISA法检测HBV-M,同时用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,按不同的HBV-M模式分组进行分析。结果 HBsAg和HBeAg同时阳性的标本,检测HBV-DNA阳性率为100%,明显高于HBeAg阴性模式的阳性率,亦高于HBsAg阳性的其它模式。差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 HBV-DNA检测在各种模式的HBV-M阳性血清中检出率差异有统计学意义,HBeAg阳性者HBV-DNA检出阳性率最高（100%）,检测乙肝患者HBV-M的同时检测HBV-DNA,对于早期诊断、判断患者传染性程度、疗效观察和预后判断具有重要的临床意义。     

时间分辨荧光免疫法检测脑脊液结核分枝杆菌特异性抗原的诊断价值

目的 建立时间分辨荧光免疫分析法检测脑脊液中结核分枝杆菌(MTU)特异性抗原培养滤液蛋白10(CFP10)和6000-早期分泌性抗原靶(ESAT-6),并对该方法的性能进行评价,提高该抗原在结核性脑膜炎中的诊断价值.方法 收集70例患者的脑脊液,其中23例为结核性脑膜炎,47例为非结核性脑膜炎,建立时间分辨荧光免疫分析法检测脑脊液中ESAT-6-CFP10抗原,并与酶联免疫吸附法等检测MTU或菌体物质进行比较分析.结果 时间分辨荧光免疫分析法检测ESAT-6-CFP10抗原的检测限为0.7 ng/ml；批内和批间CV分别平均为3.2％和4.7％,平均回收率为97.4％,临界值取12.2 ng/ml时,敏感度为91.3％,特异度为95.7％；该方法的敏感度和(或)特异度要高于酶联免疫吸附法、抗酸染色、MTU培养等.结论 应用时间分辨荧光免疫分析法,检测脑脊液中ESAT-6-CFP10抗原对诊断结核性脑膜炎有很高的敏感度和特异度,提高了MTU特异性抗原用于临床结核病诊断的敏感性.     

乙型肝炎表面抗原阴性、核心抗体阳性样本的临床意义

[目的]探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)表面抗原阴性而核心抗体筛查阳性与乙型肝炎病毒DNA含量及乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1-Ag)的关系及临床意义。[方法]采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测乙型肝炎病毒标志物(HBV-M),其中核心抗体阳性的标本采用酶联免疫吸附试验检测Pre-S1-Ag和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定乙型肝炎病毒DNA含量,对检测结果进行比较分析。[结果]290例乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)阳性标本中单独抗-HBc阳性28例,占9.7%;乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)、抗-HBc两项阳性54例(18.6%);乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)、抗-HBc阳性78例(26.9%);抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性130例(44.8%)。前S1抗原有2例阳性,占0.7%。HBV-DNA阳性3例,占1.0%。抗-HBc阳性血液中,单独抗-HBc阳性的血液中检出1例HBV DNA及前S1抗原阳性的血液,占单独抗-HBc阳性血液的3.6%。HBeAb、HBcAb同时阳性的血液中检出2例HBV DNA阳性及1例前S1抗原阳性,分别占其2.6%、1.3%。在所有抗-HBc阳性血液中检出3例HBV DNA阳性及2例前S1抗原阳性,阳性率分别为1.0%、0.7%。[结论]虽然在HBsAg阴性、抗-HBc阳性血液中HBV-DNA阳性率并不高,但是对于受血者来说,输注这种血液将会有很高的感染风险,如果在献血者检查中加入抗-HBc和前S1抗原检测,既不用增加太多成本,同时操作比较容易,这样就能筛选出绝大部分的HBV-DNA阳性标本,从而减少输血感染HBV的风险。     

A chemiluminescence immunoassay for precise automatic quality control of glycoprotein in human rabies vaccine

Currently, quality control of glycoprotein in the human rabies vaccine is based on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). However, ELISA does not match the needs of a modernised quality control system. For a long time, human rabies virus vaccine manufacturers have been devoted to seeking a detection platform that is sensitive, accurate, automatic, and feasible for practical applications. Therefore, our team invested major efforts into establishing a fully automated micromagnetic particle (MMP)-based chemiluminescence immunoassay (CLIA) platform. For vaccine quality control, MMP-coupled rabies virus glycoprotein monoclonal antibodies (S037) were used to capture the rabies virus. Another rabies virus glycoprotein antibody (S053) labelled with acridinium ester was added as a signal tracer. After pretreating the vaccine sample, the entire analysis was performed using a fully automated machine, which had a limited detection time (only 30 min) and eliminated manual error. Multiple experiments have identified the optimal conditions allowing valid and reliable assessment of vaccine potency. The CLIA platform has exhibited merits in terms of speed, robustness, high sensitivity (with a minimum detection value of 0.45 mIU/mL), considerable accuracy, and a wide linear range of detection (9.4–1200 mIU/mL). Furthermore, the results showed that the CLIA platform is consistent with the National Institutes of Health test and time-resolved fluorescent immunoassay (TRFIA) in quantitative analysis, and had a better analytic performance than TRFIA. Therefore, the CLIA platform presented here may be important for application in modern vaccine quality control.