草乌多糖的分离纯化和组成性质研究

 目的 从草乌中分离草乌多糖,并研究其组成性质。方法 采用DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析和凝胶柱层析分离纯化草乌多糖,气相色谱法和薄层层析法测定其多糖组成,凝胶过滤法测定其相对分子质量,红外光谱测定其苷键类型,比色法测定其糖含量。结果 分离得到的草乌多糖(Aconitum kusnezoffii Reichb.,AK)含有鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,它们的摩尔比为1∶1.7∶203∶1.7∶59.7∶3.5。其糖含量88%。AK的平均相对分子质量为2.8×10 ⁴。它的红外光谱中有典型的多糖吸收峰,并具有α-型糖苷键,紫外扫描无核酸和蛋白特征吸收峰。结论 AK首次从草乌块根中提取获得,为草乌多糖的主要成分。     

淮山药多糖的研究

目的:从淮山药中提取粗多糖RDP,进行纯化分离,得到均一的多糖RP,并初步研究其组成和结构。方法:依次经水浸提、乙醇沉淀、十六烷基三甲基溴胺盐脱蛋白、微晶纤维素柱色谱、Sephadex G-100色谱分离纯化得白色粉末状多糖RP。Sephadex G-200柱层析进行纯度鉴定。纸层析分析多糖酸水解产物;凝胶色谱法测定其相对分子质量;用红外光谱分析鉴定RP。结果:纯度鉴定证明其为均一组分;红外光谱分析其具有β-糖苷键;PC分析其单糖组成为葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖。结论:本实验对为该多糖的进一步开发利用提供一定的理论依据。     

北青龙衣多糖的提取、分离纯化及分析

对北青龙衣中总多糖进行分离纯化,获得分子量均一多糖,并对其进行结构分析。北青龙衣药材经沸水提取,浓缩醇沉,木瓜蛋白酶脱蛋白,D101大孔树脂柱纯化脱色,再经DEAE Cellulose 52离子交换柱层析、Sephacryl S-300凝胶柱层析得到纯化多糖组分。采用高效凝胶渗透色谱-蒸发光检测器对其进行纯度鉴定、分子量测定。气-质联用、红外光谱分析其单糖组成与结构。北青龙衣多糖经分离得到两个均一组分PJP-1a、PJP-3a,其分子量分别为:1.34×103Da、1.70×107Da。气-质联用分析PJP-3a是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,单糖摩尔比为:4.56∶7.53∶1∶2.48∶41.4∶17.94。红外光谱提示PJP-1a、PJP-3a可能均具有吡喃环结构,糖苷键的连接方式均为β型,PJP-1a存在乙酰氨基结构。     

枸杞多糖分离纯化及其结构光谱分析与显微学观察

目的提取枸杞多糖并分析其结构性质和显微学形态,为枸杞的进一步开发利用提供参考。方法采用水提醇沉法得到枸杞多糖,Sephadex G-150凝胶色谱柱纯化得LBP3-I,应用傅里叶变换光谱、气相色谱对LBP3-I进行组成结构分析,通过环境扫描电镜和原子力显微镜观察该组分的显微学形态。结果 LBP3-I是一种含有结合蛋白的多糖复合物。其单糖组成为鼠李糖基、阿拉伯糖基、木糖基、甘露糖基、葡萄糖基、半乳糖基,且摩尔比率为2.07∶2.38∶3.11∶1.00∶1.12∶2.86。红外光谱结果显示LBP3-I具有明显的糖类物质特征吸收峰且含有吡喃环;环境扫描电镜下LBP3-I呈现高分支结构,主要呈链状,且糖链间多相互缠绕聚集成环状。结论 LBP3-I是一种含有结合蛋白的多糖复合物,具有分支结构,主要成链状。     

北沙参多糖成分的研究

经乙醇提取后的北沙参用热水抽提,乙醇分步沉淀,对水透析得总多糖GLP。GLP经DEAE-纤维素柱层析为GL100,GL-103,GL-120与GL-122四个多糖组分。经超离心与Sephadex G-200凝胶过滤柱层析分析,证明GL-100与GL-103均为均一的多糖组分,平均分子量分别为79,000与70,000。经过碘酸氧化、Smith降解、红外光谱以及~1H与~(13)C-核磁共振谱测定,证明GL-100与GL-103均为主要以α(1→4)糖甙键联结的直链葡聚糖。     

中药白术免疫活性成分多糖的研究

 白术醇提后的药渣用水提醇析后，经硼酸型DE-52分离得到甘露聚糖AM-3。SephadexG-200凝胶柱层析，玻璃纤维紙电泳证明AM-3为单一多糖。AM-3的分子量为12000。红外光谱示 AM-3为构型糖苷鍵，且有甘露糖的特征峰。多糖水解物经薄层层析及气相层析，其组成成分为甘 露糖。     

玉郎伞多糖的分离纯化和组成性质研究

目的 从玉郎伞(YLS)中分离出玉郎伞多糖,并对其化学组成进行研究.方法 YLS经醇提后的药渣用热水提取,乙醇沉淀,Sevag试剂脱蛋白,采用DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析分离纯化,气相色谱和薄层色谱分析其组成.结果 分离得到的YLS多糖经Sephadex-75凝胶柱层析,硫酸-苯酚法以及高效凝胶渗透色谱法(HPGPC) 证实为单一多糖,紫外扫描显示无核酸和蛋白特征吸收峰,薄层色谱和气相色谱表明由葡萄糖和阿拉伯糖组成.结论 YLS多糖首次从YLS中提取获得,为YLS主要成分之一.     

肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定

目的 分离、纯化和鉴定壮阳中药肉苁蓉Cistanche deserticola中的多糖成分。方法 经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白得到的粗多糖，再经DEAE－Sephadex A-50离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶柱层析得到纯净的肉苁蓉多糖（CDPS），用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖。结果 红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰，紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰。结论 本实验所提取的肉苁蓉多糖为单一、纯净的多糖。     

红石耳多糖的研究

红石耳用热水提取、乙醇沉淀，精制得UMH多糖，经SephadexG－150柱层析证明为均一性多糖。糖的含量为90．4％，气相色谱检测由葡萄糖（Glc）、甘露糖（Man）。葡萄糖醛酸（GlcA）组成，克分子比为45：1：9，平均分子最为40×104。经高碘酸氧化，Smith降解，红外光谱分析，UMH多糖主要由α（1→6），（1→4）甙键聚合而成的酸性杂多糖。     

茜草多糖QA2的分离纯化及组成分析

从东北茜草提取得到的粗多糖经离子交换、DEAE-纤维素和SephadexG－50柱层析得到多糖QA2。QA2经HPLC的LonpakS803柱层析为单一对称峰，证明为均一多糖，并测得其分子量为5000。TLC和GC分析表明QA2由Rha、Ara、Xyl、Man、Glc和Gal组成，其单糖摩尔比为1．0：2.5：1．4：22．8：277：15．3。红外光谱分析含β型糖甙键。药理实验结果表明QA2具有较强的清除自由基的作用，清除率为94.59％。     

荔枝草中高车前苷的提取分离和光谱色谱特征图谱的建立

目的对荔枝草中高车前苷提取分离,并对其进行纯度测定及结构鉴定。方法利用硅胶柱色谱方法分离纯化样品并用高效液相色谱测定样品纯度,用理化性质及光谱学方法对其进行结构鉴定。结果荔枝草体积分数70%乙醇提取物用乙酸乙酯萃取并经硅胶柱色谱分离纯化,得到跟高车前苷Rf值相同的化合物,其纯度达98.2%,经红外光谱、核磁共振波谱、氢谱、质谱鉴定为5,4′-二羟基-6-甲氧基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,即高车前苷(homoplantaginin)。结论本文建立了分离纯化高车前苷的方法,并建立了完整的高车前苷理化鉴别方法及光谱色谱特征图谱。     

玉竹中酸性多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:对玉竹粗多糖进行分离纯化,并对所得均一多糖进行定性分析.方法:采用热水提取玉竹粗多糖,乙醇分级沉淀,收集乙醇体积分数为80％条件下析出的多糖沉淀物.再经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100分子筛色谱得到玉竹酸性多糖(POAPS0).应用紫外光谱、凝胶柱色谱、纸色谱分析POAP80的纯度,红外光谱和PMP柱前衍生化高效液相色谱分析其结构和单糖组成.结果:从玉竹粗多糖中分离纯化了1种酸性多糖POAP80,主要含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、半乳糖4种单糖,其摩尔比为0.93∶2.65∶ 29.38∶3.47.结论:POAP80为玉竹中新发现的均一组分多糖,上述方法提供了玉竹POAP80的一些结构信息,为进一步研究其结构和功能提供参考.     

紫荆花总黄酮的分离纯化与光谱分析

目的:从紫荆花中分离、纯化总黄酮,对其黄酮成分及含量进行光谱分析。方法:以55%乙醇于100℃水浴回流提取紫荆花中的总黄酮,用聚酰胺树脂柱层析进行分离纯化,以芦丁、槲皮素、山柰酚为对照品,在200~600nm波长范围内进行紫外-可见吸收光谱扫描及含量测定,用KB r压片法在400~4000 cm-1范围内进行红外光谱扫描。结果:粗黄酮平均得率为7.32%,纯化后的生药中总黄酮得率为2.20%;紫外-可见吸收及红外扫描光谱结果显示,紫荆花总黄酮纯品中含有芦丁、槲皮素、山柰酚3种黄酮甙元,含量分别为0.8271、0.2169、0.3007 mg/ml。结论:经聚酰胺树脂柱层析纯化的紫荆花黄酮纯品中的总黄酮甙含量为24.30%。总黄酮含量为0.5346%。     

复合酶法提取远志总皂苷的工艺研究

目的：研究酶法结合传统回流法提取远志总皂苷工艺条件。方法：利用可见分光光度法测定远志总皂苷含量;考察植物复合酶的酶解时间、酶解温度对传统提取工艺的强化效果;通过显微结构图和红外光谱图说明了复合酶法强化传统提取法的作用方式及提取物的结构。结果：酶用量为0．4％时,适宜酶解温度为55％,最优酶解时间为0．5h。结论：复合酶法结合传统回流提取后,可提高远志总皂苷提取率、缩短提取时间、减少乙醇使用量,对于远志流浸膏的高效提取具有一定指导意义。     

大枣环磷酸腺苷(cAMP)提取工艺的研究

目的:应用天津市静海县盛产的大枣生产cAMP,确定生产工艺,实现产业化。方法:应用水提、离子交换分离和硅胶G柱层析纯化。结果:提取物与对照品cAMP薄层色谱(TLC)的R f值一致(R f=0.75);提取物的紫外光谱(UV)与对照品cAMP在260 nm波长左右都有一个最大吸收峰,而在230 nm波长左右都有一个最小吸收值;提取物的红外光谱(IR)与对照品cAMP的标准红外光谱〔1〕一致;高效液相色谱(HPLC)测定提取物的保留时间为5.237分钟,未出现杂质峰,含量为97%,对照品cAMP的保留时间为5.350分钟,二者保留时间存在微小差异。结论:这一物质的化学结构与对照品cAMP相同。     

沙棘叶水溶性多糖的分离纯化及体外清除自由基活性研究

通过采用热水提取、乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为三个级分SJ1、SJ2和SJ3,将对自由基有初步清除作用的SJ2脱蛋白后经DEAE-SephdexA-25进行分离纯化得SJ22。SJ22经纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和SephroseCL-4B柱层析纯度鉴定表明:SJ22为分子量均一的纯多糖。分子量为7万。纸层析显示SJ22单糖组成为Xy1、Ara、G lc、Gal、GalA。抗衰老活性研究结果表明,SJ22能有效清除.OH、O2-.自由基,对脂质自由基.R效果不明显。     

刺桐胰蛋白酶抑制剂的色谱复性研究

 目的　研究在大肠杆菌中表达的刺桐胰蛋白酶抑制剂 (Erythrina trypsin inhibitor,ETI)的色谱复性。方法　使用透析、阴离子交换和凝胶色谱法对ETI复性进行研究 ,比较 3种复性方法的相对复性率及蛋白质回收率。结果 3种复性方法的复性率分别为 20.1%,32.1%和 50.8%,蛋白质回收率分别为16.6%,15.1%和 55.2%。结论　凝胶色谱复性优于其他两种方法。色谱复性使蛋白质的复性与纯化同步进行,简化了操作程序,提高了产品的回收率。     

细茎石斛多糖DMP2a-1的结构分析

 目的研究从细茎石斛[Dendrobium moniliforme(L)Sw]中分离纯化得到的一种相对分子质量为60×10³的多糖DMP2a1的化学结构。方法应用紫外、红外、高碘酸氧化、甲基化分析、质谱及¹H,¹³CNMR等化学和光谱方法研究该多糖的结构特征。结果多糖DMP2a-1主链由1,4连接的α-D-吡喃葡萄糖基组成,β-D-甘露糖以端基糖的形式位于1,4α-D-吡喃葡萄糖基的O6位上,每6个1,4连接的葡萄糖残基上有1个O6位发生了取代。结论细茎石斛多糖DMP2a-1是一新结构多糖,为首次从该植物中分离得到。     

枸杞芽叶高纯度有效成分的制备及抗氧化活性研究

目的:以宁夏天然枸杞芽叶为原料进行有效成分的制备及抗氧化活性研究。方法:通过单因素考察和响应面试验优化枸杞芽叶有效成分的提取与纯化工艺条件;采用高效液相色谱法(HPLC)分离收集芦丁组分流出液,经重结晶制备得到芦丁纯品,再经红外光谱、质谱、氢谱和碳谱进行结构鉴定;采用铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP)对枸杞芽叶高纯度有效成分进行体外抗氧化活性检测。结果:采用78%乙醇加热回流提取枸杞芽叶,获得枸杞芽叶粗提液,再经HP-20型大孔树脂吸附与60%乙醇洗脱分离纯化,获得含黄酮高达97%的枸杞芽叶高纯度有效成分,其中芦丁质量分数高达3%。体外抗氧化活性检测结果表明,枸杞芽叶高纯度有效成分具有显著的体外抗氧化活性。结论:经优化工艺提取的枸杞芽叶高纯度有效成分具有显著的体外抗氧化活性,可以用于食品添加剂、保健品和药品的开发与利用。     

露峰房抗炎蛋白中多肽成分的分离、纯化及性质研究

 目的:从药用露峰房(Nidus vespae)筛选出的具有较好的抗炎、免疫活性蛋白粗品——NV₃中分离纯化,得到一多肽类化合物,命名为NV-PP-1,并检测其理化性质?方法:以离子交换层析、排阻层析、HPLC等进行分离纯化,并以高效凝胶排阻色谱(HPSEC)、高效毛细管等电聚焦电泳(IEF-HPCE)、亲水性分子排阻液相Protein-Pak^TM60柱、氨基酸分析、DNS-Cl法的N-末端测定检测其理化性质。结果:高效凝胶排阻色谱(HPSEC)及高效毛细管等电聚焦电泳(IEF-HPCE)检测其皆为单峰。亲水性分子排阻液相Protein-Pak^TM60柱测得其分子量为7.079kD。IEF-HPCE确定其PI值为4.08。紫外吸收最高峰为274nm。氨基酸分析表明其含有近56个氨基酸残基,其中谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸较多,还有天冬氨酸等,是一酸性多肽。末端测定表明其N-末端封闭。结论:酸性多肽NV-PP-1是从药用露蜂房抗炎蛋白粗品中首次分离得到的成分。