邻苯二甲醛-柱后衍生-高效液相色谱荧光法测定功能型饮料中的牛磺酸

目的建立功能型饮料中牛磺酸的柱后衍生-高效液相色谱荧光法。方法样品稀释后直接进样,柱后OPA衍生,荧光检测器检测,外标法定量。色谱条件:流动相:乙腈-水(20∶80,V/V);柱后衍生反应温度:55℃;荧光检测器激发波长:330 nm;发射波长:450 nm。结果牛磺酸的浓度为0μg/L~80μg/L时,标准曲线线性关系良好,线性相关系数(r)为0.999 9,检出限为1μg/L,相对标准偏差(RSD)为0.2%~1.0%,加标回收率为97.2%~102.8%,精密度和准确度符合检测要求。结论本方法具有选择性好、精密度高和准确度好等优点,而且由于采用荧光检测器,大大提高了灵敏度,可采取大体积稀释,更易排除其他组分的干扰,更简便,更快捷,适用于日常的检测工作中。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定人尿中硫氰酸盐

目的建立以五氟苄基溴作为柱前衍生试剂,高效液相色谱法测定人尿中硫氰酸盐的方法。方法尿样中硫氰酸盐与五氟苄基溴衍生后,经多孔层120EC-C18色谱柱分离,以乙腈:去离子水(60:40,V/V)为流动相,经高效液相色谱-紫外检测器检测,检测波长为212 nm。结果尿中硫氰酸盐质量浓度为0.05~10.32 mg/L时线性关系良好,线性相关系数为0.999;检出限为6.31μg/L,最低检出浓度为63.10μg/L(以尿样体积0.1 mL计);加标回收率为95.1%~102.9%;批内相对标准偏差(RSD)为0.9%~1.0%,批间RSD为0.9%~2.1%;在4℃样品可保存7 d。结论本法灵敏度高、特异性好、样品前处理简单,可用于职业人群尿中硫氰酸盐的测定。     

高效液相色谱-荧光法测定葡萄酒中氨基甲酸乙酯的含量

目的建立葡萄酒中氨基甲酸乙酯(EC)含量的高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FLD)测定方法。方法葡萄酒样品经9-羟基吨衍生后,采用高效液相色谱-荧光法测定,以Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)分离,乙腈-0.02mol/L乙酸钠溶液为流动相,梯度洗脱,荧光检测器的激发波长为233 nm,发射波长为600 nm,衍生化反应时间30 min,外标法计算含量,并与GC-MS方法比较,评价HPLC-FLD方法可靠性。结果 EC在10~500μg/L范围内呈良好的线性关系,平均加标回收率为93.7%~106.0%,相对标准偏差为1.4%~2.8%,定量限为15μg/L。HPLC-FLD和GC-MS两种方法对葡萄酒的EC含量测定结果无明显差异。结论HPLC-FLD适合于葡萄酒中EC含量的快速测定。     

人血清中环境雌激素的柱前荧光衍生-高效液相色谱测定法

目的建立对硝基苯甲酰氯柱前荧光衍生-高效液相色谱法同时测定人血清中环境雌激素双酚A、壬基酚、17α-乙炔基雌二醇以及内源性雌激素雌三醇、17α-雌二醇和17β-雌二醇的方法。方法血清样品经乙腈沉淀蛋白后,用乙醚萃取游离态雌激素,N2气流挥干、在无水条件下,雌激素与对硝基苯甲酰氯反应生成荧光产物,用高效液相色谱法定量。结果该法线性范围上限可达1.0×104μg/L,检测限为2.7~8.3μg/L,加标回收率范围为72.6%~98.6%。方法精密度为1.29%~4.52%。结论应用该法对10份血清样进行了测定,结果满意,该方法有应用推广价值。     

超高效液相色谱法测定水中的2,4-二氨基甲苯和2,6-二氨基甲苯

目的建立水中2,4-二氨基甲苯、2,6-二氨基甲苯的超高效液相色谱(UPLC)测定法。方法水样直接过滤或稀释后,用Agilent RRHD SB-C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm)超高效液相色谱柱,二极管阵列检测器,以甲醇-0.020 mol/L乙酸铵溶液为流动相,检测波长为210 nm,参比波长为360 nm进样,测定二氨基甲苯的含量。结果 2,6-二氨基甲苯和2,4-二氨基甲苯在0μg/ml~10.0μg/ml时,线性关系良好(r=0.999 9),方法检出限分别为0.010μg/ml和0.015μg/ml。水中2,6-二氨基甲苯的测定值为为0.20μg/ml~5.00μg/ml,RSD为0.29%~1.6%;2,4-二氨基甲苯的测定值0.20μg/ml~5.00μg/ml,RSD为1.5%~3.1%;样品加标量为0.50μg/ml~5.00μg/ml,回收率为94.0%~105%。结论采用超高效液相色谱法测定水中2,6-二氨基甲苯、2,4-二氨基甲苯的含量,简便、快速、经济、环保、灵敏、精密、准确,适合基层检测单位推广和使用。     

免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-HPLC法检测茶叶中黄曲霉毒素

目的建立免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定茶叶中黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检测方法。方法样品经甲醇-水(7∶3,V/V)提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过免疫亲和色谱柱纯化,以甲醇-水(45∶55,V/V)为流动相洗脱,Cloversil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,采用光化学衍生器衍生,荧光检测器在激发波长360 nm、发射波长440 nm处测定。结果 AFB1、AFG1在0.50μg/L~20μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.50μg/kg,AFB2、AFG2在0.15μg/L~6.0μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.20μg/kg,其相关系数均0.999 2,回收率为82.6%~94.4%,相对标准偏差10%。结论该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,适用于测定茶叶中的黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2。     

超高效液相色谱-荧光法测定婴幼儿乳粉中胆碱含量

目的建立超高效液相色谱-荧光法(UPLC-FLD)测定婴幼儿乳粉中胆碱含量的方法。方法利用1-萘基异氰酸酯与胆碱反应生成稳定的、具有荧光的阳离子芳香族化合物,用超高效液相色谱-荧光法分离测定。乳粉样品经盐酸水解,无水硫酸钠脱水后与1-萘基异氰酸酯进行衍生反应,经ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱分离,用流动相四甲基氢氧化铵-羟基乙酸-乙腈-水溶液进行洗脱,然后通过荧光检测器(FLD)进行检测,激发波长和发射波长分别为220 nm和350 nm。结果胆碱的浓度(以胆碱阳离子计)在0.90μg/ml~13.5μg/ml时线性关系良好(相关系数r=0.999 7),回收率为89.0%~92.5%,仪器的检出限为0.052μg/ml。结论该方法具有成本低、灵敏度高、快速、简便等优点。     

柱前衍生HPLC-FLD法测定水产品中3种麻痹性贝类毒素

目的建立水产品中3种麻痹性贝类毒素成分(GTX2,3、dcSTX和STX)的柱前荧光衍生高效液相色谱(HPLC-FLD)检测方法。方法样品用1%乙酸提取,C18固相萃取柱净化,2%H2O2荧光衍生,以Symmetry?C18柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱分离,以乙腈和0.1mol/L甲酸铵(595)作为流动相,流速1.0mL/min,荧光检测器激发波长340nm,发射波长395nm。结果该法在10~500μg/L范围内线性关系良好,平均加标回收率为72.5%~88.6%,RSD为2.8%~4.7%。方法的检出限分别为dcSTX 3μg/kg、STX 10μg/kg和GTX2,34μg/kg。结论本方法灵敏度高、结果可靠,为检测水产品贝类麻痹性毒素的含量提供了一种高效便捷的方法。     

人尿中N-乙酰-S-(N-甲基甲氨酰)半胱氨酸的高效液相色谱测定法

目的 建立简便快速的测定人尿中N-乙酰-S-(N-甲基甲氨酰)半胱氨酸(AMCC,二甲基甲酰胺代谢产物之一)高效液相色谱方法.方法 尿样经SPE柱萃取,2%磷酸、20%甲醇洗脱后,以5%乙睛水溶液为流动相,流速1 mL/min,波长196 nm,C18柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm)分离.结果 AMCC在1.0～100.0 mg/L之间呈良好线性关系,相关系数为0.9999,最低检出限为0.4 mg/L.相对标准偏差小于4.3%(n=6),样品加标回收率为93%～97%.结论 该方法可用于尿样中AMCC的测定.     

高效液相色谱法测定尿中N-乙酰-S-(N-甲基甲氨酰)半胱氨酸的含量

目的:建立简便有效的测定尿中N-乙酰-S-(N-甲基甲氨酰)半胱氨酸(AMCC)的高效液相色谱方法。方法:尿样经固相萃取后用高效液相色谱法分析,采用C18柱,以5%乙腈水溶液为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长为196 nm。结果:尿中AMCC在1.00 mg/L～50.00 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为1.0000。方法精密度为2.8%～4.0%,检出限为0.1 mg/L,加样回收率为86.2%～96.1%。结论:该方法各项性能指标均符合职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法中相关要求,可用于测定二甲基甲酰胺(DMF)暴露工人尿中的AMCC含量。     

微波辅助-液相色谱-原子荧光光谱法对水产品中汞的形态分析

目的建立微波辅助-液相色谱-原子荧光光谱联用分析方法(HPLC-AFS)测定水产品中的无机汞、甲基汞、乙基汞、二苯基汞,并且研究了水产品的样品前处理方法。方法样品经提取液6 mol/L盐酸+0.10 mol/L氯化钠+0.2%L-半胱氨酸5 ml微波萃取后,调节p H值,提取液净化后,注入HPLC-AFS分析。结果无机汞、甲基汞、乙基汞的浓度为0.5μg/L~100μg/L时,线性关系良好,相关系数(r)均为0.999 9,检出限分别为2.08μg/kg、1.41μg/kg、1.36μg/kg。二苯基汞在盐酸介质中发生了分解。方法的日内精密度为3.65%,日间精密度为5.14%。采用BCR-463金枪鱼、GBW10024扇贝、GBW08573黄鱼标准物质对测定方法的准确度进行验证,结果都在给定的参考值范围内。结论本方法操作简便、快速、灵敏、准确,可满足鲜活水产中无机汞、甲基汞、乙基汞的测定,不适用样品中二苯基汞的提取检测。     

茶叶中草甘膦的柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱荧光测定法

目的建立快速、准确的茶叶中草甘膦的柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱荧光测定方法。方法茶叶提取液样经衍生后经固相萃取,在C_(18)色谱柱上,以甲醇/水(70+30,体积分数)为流动相,流速1.0 ml/min,荧光检测激发波长为265 nm,发射波长为315 nm。结果草甘膦的加标回收率在89.4%~98.9%之间,其相对标准偏差在4.26%~13.63%之间,在0.5~20.0 ng/ml范围内呈现良好的线性,其回归系数0.999,最低定量检出限(LOQ)为0.02 mg/kg。结论该方法回收率高,净化效果好,杂质干扰少,可满足茶叶中痕量草甘膦的残留检测要求。     

HPLC法测定血清肉碱的研究

目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定血清中肉碱浓度的方法。方法:血清样品用乙腈、甲醇沉淀蛋白,加入肉碱衍生剂,60℃恒温水浴2h后进样10μl。色谱柱为AtlantisC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇∶异丙醇∶乙腈(35∶45∶20,v/v),流速1.0ml/min,紫外检测波长260nm。结果:在上述色谱条件下,血清肉碱分离良好,回归方程为Y=8490X-48200,r=0.9999,线性范围为12.5~400μmol/L。最低检测浓度为12.5μmol/L。日内精密度1.6%~13.2%,日间精密度(%)1.8%~12.1%,回收率98.5%。结论:通过加入肉碱衍生剂,建立了HPLC法测定血清中肉碱浓度的方法。此法操作简单,耗时少,有良好的准确度,适用于临床检测。     

微波辅助萃取-液相色谱-原子荧光光谱法分析汞接触人群尿液中汞的形态

目的建立汞接触人群尿液中无机汞(Hg)、甲基汞(Me Hg)和乙基汞(Et Hg)的微波辅助萃取-液相色谱-原子荧光光谱测定方法。方法取尿液样品5.0 ml,加入1.0 ml的6 mol/L盐酸后室温微波提取30 min,在冷水浴中用氨水调p H值至4.0,用流动相定容至10.0 ml,经0.45μm滤膜过滤,以5%甲醇溶液+3.8 g/L乙酸铵+1.0 g/L L-半胱氨酸作液相色谱流动相,经HG-C18柱分离,紫外消解后原子荧光光谱仪测定。结果无机汞、甲基汞和乙基汞在1.0μg/L~50.0μg/L呈良好的线性关系,相关系数r均0.999,检出限分别为0.4μg/L、0.3μg/L、0.4μg/L,相对标准偏差RSD为1.50%~3.66%(n=6),回收率为91.3%~101.5%,样品在4℃可保存5 d。结论该方法分析速度快、灵敏度高、准确性好,适用于汞接触人群尿液中无机汞、甲基汞和乙基汞的同时测定。     

甲酯化衍生-液液萃取-气相色谱法测定尿中三氯乙酸

目的建立甲酯衍生化液液萃取-气相色谱法测定尿液中三氯乙酸的方法。方法在浓H_2SO_4催化下,尿液中的三氯乙酸与甲醇发生酯化反应,酯化产物通过正己烷液液萃取,离心,吸取有机相经无水硫酸钠干燥后注入气相色谱仪,经HP-INNOWAX毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm,0.15μm)分离,采用氢火焰离子化检测器(FID)检测,以保留时间定性,峰面积定量。结果三氯乙酸在5.0 mg/L~500.0 mg/L呈线性关系,相关系数为0.999 6,以3倍噪音值估算方法的检出限为1.2 mg/L。在浓度为10.0 mg/L~400.0 mg/L低、中、高3个添加水平下,样品的加标回收率为95.2%~98.8%;批内精密度为1.24%~2.69%(n=6),批间精密度为1.52%~2.22%(n=6)。结论本法简单实用,重现性好,灵敏度高,可以满足尿样中三氯乙酸检测的要求。     

保健食品中5-氨基乙酰丙酸磷酸盐的离子对高效液相色谱法及稳定性试验

目的采用离子对色谱法对保健食品中5-氨基乙酰丙酸磷酸盐含量进行分析并考察其稳定性。方法采用Agilent ZORBAX plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-辛烷磺酸钠离子对缓冲溶液(18∶82,V/V,p H=2.5)为流动相洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测波长为264 nm。根据保留时间定性,外标峰面积法定量。结果 5-氨基乙酰丙酸磷酸盐的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数(r)=0.999 9,方法的检出限为6.25μg/ml,相对标准偏差(RSD)为0.53%(n=9);2种浓度水平的样品加标回收率为97.4%~99.6%;样品经3个月的加速破坏性试验,其5-氨基乙酰丙酸磷酸盐的含量下降比率为1.66%。结论本方法具有操作简便快速、分离效果好,精密度和准确性高的特点,可为5-氨基乙酰丙酸盐类保健食品的质量控制提供方法参考。样品中5-氨基乙酰丙酸磷酸盐具有良好的稳定性。     

高效液相色谱-荧光检测法分析血浆中ALA的含量

目的建立血浆中δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)含量的高效液相色谱-荧光检测方法。方法将血浆样品与乙酰丙酮工作液(乙酰丙酮-乙醇-水,15∶10∶75,V/V)和10%甲醛溶液在沸水浴中反应10 min后,置于冰水浴中充分冷却。经微孔滤膜过滤后以C18柱为分析柱进行高效液相色谱测定。色谱分析以甲醇-水-乙酸(1 000∶1 000∶2,V/V)为流动相,流速为0.6 ml/min;荧光检测器的激发波长为370 nm,发射波长为460 nm,柱温为40℃。结果 ALA浓度为5μg/L~100μg/L时,与色谱峰面积之间呈良好的线性关系。本方法的最低检出限为0.5μg/L,定量限为2.0μg/L,多次重复测定结果的RSD为0.35%(n=6),不同浓度的平均加标回收率为86.56%~100.09%。结论所建立的血浆中ALA含量的高效液相色谱-荧光检测法,简便、准确,可用于血浆中ALA含量的测定,为生物样品中ALA低浓度水平的检测提供了新的途径。     

免疫亲和柱净化-液相色谱柱后衍生荧光法测定人尿液和血浆中河豚毒素

目的建立液相色谱柱后衍生荧光检测法测定尿液和血浆中河豚毒素(TTX)的分析方法。方法样品经免疫亲和柱净化浓缩10倍后进样分析,色谱柱为Zorbax Bonus RP柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为含10 mmol/L庚烷磺酸钠的60 mmol/L乙酸铵水溶液(pH5.0),4 mol/L NaOH 120℃柱后衍生,荧光检测器于激发波长385 nm,发射波长505 nm处进行检测。结果尿液和血浆中TTX的线性范围均为1.0~400 ng/ml,相关系数优于0.999,样品的检出限(S/N=3)均为0.3ng/ml,定量限(S/N=10)为1.0 ng/ml,4个浓度水平加标的平均回收率分别在94%~98%和92%~95%之间,相对标准偏差为1.2%~5.5%和2.0%~6.8%(n=5)。结论方法准确、灵敏、选择性强,适用于尿液和血浆样品中河豚毒素的中毒检测,已应用于实际样品的测定,取得满意结果。     

柱前衍生高效液相色谱法测定饮用水中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸

目的建立柱前衍生-固相萃取-液相色谱-荧光法测定饮用水中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的方法。方法样品经衍生和固相萃取后,采用Waters Atlantis T3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵水溶液(50∶50,V/V),流速1.0 ml/min,荧光检测激发波长为266 nm,发射波长为315 nm,进样体积为10μl。结果 3种目标物质在0.01~1.0 mg/L范围内线性良好,线性相关系数(r)均在0.9994~0.9998之间。通过对自来水样进行3个加标水平的添加回收试验(n=6),草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的平均回收率分别为84.4%~92.0%、86.5%~93.8%和87.8%~96.8%,相对标准偏差(RSD)分别为1.12%~4.22%、1.05%~4.04%和1.08%~3.95%,方法的检出限分别为0.0021、0.0025和0.0032mg/L。结论该方法准确灵敏,适用于饮用水中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸3种物质的同时分析。     

尿液中亚硝酸盐2,3-二氨基萘衍生化-GC-MS联用法测定

目的建立快捷准确测定尿液中亚硝酸盐含量的气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法。方法通过优化衍生化过程中温度、时间和p H值等反应参数,建立2,3-二氨基萘(2,3-DAN)衍生化-GC-MS联用方法;采用亚硝酸盐阳性(NIT+阳性)尿液进行方法验证。结果尿液中NO-2经2,3-DAN衍生化后,色谱图分离度好、灵敏度高、峰形尖锐;线性方程为y=0.2071x+0.006,相关系数R2=0.999;本方法测定尿中亚硝酸盐的检测限为0.001μg/m L,线性范围0.01~20μg/m L,日内精密度(n=4)为3.19%~4.06%,日间精密度(n=5)为3.92%~5.16%,回收率为90.31%~113.5%;与现有方法比较,GC-M S联用方法具有检测限低、回收率、精密度高以及耗时短等优点。结论成功建立尿液中亚硝酸盐含量的GC-MS联用检测方法,该方法适用于法医鉴定及预防医学研究领域生物样品中亚硝酸盐痕量检测。