BRAF免疫细胞化学染色在甲状腺乳头状癌术前诊断中的应用

<正>甲状腺细针穿刺(fine needle aspiration,FNA)是目前术前评估甲状腺结节良恶性最有效的方法^[1]。但仍有20%～30%的病例被归为不确定类别,这些不确定的诊断给临床治疗造成困惑。BRAF基因V600E突变是甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中最常见的分子变异,近年来学者发现BRAF突变蛋白(VE1)免疫组织化学染色法是检测PTC标本BRAFV600E基因突变的可靠方法^[2],因此,本实验将采用FNA下VE1免疫细胞化学染色联合苏木精-伊红(HE)染色的方法,探讨该方法在FNA细胞学PTC术前诊断的应用价值。     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E突变及超声特征与颈部淋巴结转移的相关性研究

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)患者鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B(v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B, BRAF) V600E基因突变及超声特征与颈部淋巴结转移的关系。方法 PTC患者34例,其中有颈部淋巴结转移11例,无颈部淋巴结转移23例;患者术前均行超声检查,记录肿瘤直径、边缘、纵横比、有无钙化等特征;取手术切除的PTC组织和癌旁组织各34份,采用DNA测序法检测BRAF V600E基因突变情况。比较有、无颈部淋巴结患者BRAF V600E基因突变率及超声声像特征。结果 PTC组织BRAF V600E基因突变率(52.94%)高于癌旁组织(0)(P0.05);有颈部淋巴结转移者超声声像示肿瘤钙化比率(81.82%)高于无颈部淋巴结转移者(43.48%)(P0.05),肿瘤直径[(21.36±7.54)mm]、BRAF V600E基因突变率(45.45%)、纵横比1比率(63.64%)和肿瘤边缘不光整比率(72.73%)与无颈部淋巴结转移者[(18.29±6.93)mm、56.52%、78.26%、69.57%]比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 PTC组织BRAF V600E基因突变率较高,其与颈部淋巴结转移无明显相关性,超声声像示肿瘤钙化者可能更易出现颈部淋巴结转移。     

甲状腺乳头状癌伴桥本甲状腺炎的超声表现及其与侵袭性和BRAFV600E突变的关系

目的探讨桥本甲状腺炎(HT)是否会影响甲状腺乳头状癌(PTC)的常规超声特征表现,及其与侵袭性和BRAF~(V600E)突变的关系。方法将158例经手术证实的PTC患者分为HT组和非HT组,每组各79例,比较两组常规超声、超声造影及弹性成像特征,以及侵袭性和BRAF~(V600E)突变的差异性。应用二元Logistic回归分析超声特征与BRAF~(V600E)基因突变的相关性。结果 HT组中女性患者比例高于非HT组,差异有统计学意义(P0.05)。两组超声特征(病灶边界、纵横比、微小癌、微钙化、病灶数目、颈部淋巴结转移)、超声造影增强模式、弹性成像评分比较差异均无统计学意义。158例患者中,18例侵袭周围组织,其中HT组5例,非HT组13例;135例BRAF~(V600E)突变阳性,其中HT组63例,非HT组72例,差异均有统计学意义(均P0.05)。135例BRAF~(V600E)突变阳性病例中,两组淋巴结转移比较差异无统计学意义;侵袭周围组织情况比较差异有统计学意义(P0.05)。二元Logistic回归分析显示,158例PTC患者中,微小癌和纵横比1与BRAF~(V600E)突变阳性相关(OR=3.087、3.798,均P0.05);HT组患者中,微小癌与BRAF~(V600E)突变阳性相关(OR=3.590,P0.05)。结论 PTC合并HT好发于女性,HT不影响PTC的超声特征表现,合并HT的PTC其侵袭性及BRAF~(V600E)基因突变率均低于单纯的PTC;在PTC中,BRAF~(V600E)基因突变与微小病灶、纵横比1均相关;合并HT的PTC中BRAF~(V600E)基因突变与微小病灶相关。     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E基因突变与超声及临床特征的相关性研究

目的:探讨甲状腺乳头状癌(PTC)BRAF V600E基因突变与超声及临床特征的相关性。方法:选取2020年6月—2022年7月湖南省人民医院手术病理证实为PTC患者627例,共737个结节,分为BRAF V600E(+)组和BRAF V600E(-)组,比较两组的基线资料。采用单因素及多因素Logistic回归分析与PTC BRAF V600E基因突变相关的超声及临床特征。结果:BRAF V600E基因突变率为71.8%。BRAF V600E(+)组和BRAF V600E(-)组在中央区淋巴结转移、颈侧区淋巴结转移、包膜外浸润、超声最大径、病理直径及PTC结节的回声、形态、边缘、微钙化方面的差异有统计学意义(P <0.05)。单因素及多因素Logistic回归分析显示,颈侧区淋巴结转移、包膜外浸润、PTC结节形态及微钙化是BRAF V600E基因突变的独立危险因素。结论:颈侧区淋巴结转移、包膜外浸润、甲状腺结节形态及微钙化与PTC患者BRAF V600E基因突变相关。对PTC的超声及临床特征进行评估可为患者治疗方案的制定提供帮助。     

甲状腺癌患者BRAF V600E基因突变与民族及临床病理特征的关系

目的 探讨甲状腺癌患者BRAF V600E基因突变与民族及其临床病理特征的关系。方法 选取2021年1月至2023年1月于右江民族医学院附属医院确诊的甲状腺癌患者300例作为研究对象,收集其病理标本,并根据患者民族将其分为壮族病例150例和汉族病例150例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BRAF基因V600E位点的突变情况。结果 300例甲状腺癌患者中,突变型221例,野生型79例。壮族和汉族甲状腺癌患者BRAF V600E基因突变率比较(72.00%vs. 75.33%),差异无统计学意义(P>0.05)。相同民族不同性别甲状腺癌患者间BRAF V600E基因突变率比较,差异均有统计学意义(P<0.01);相同性别不同民族甲状腺癌患者间BRAF V600E基因突变率比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。<40岁的甲状腺癌患者BRAF V600E基因突变率为88.67%,明显高于≥40岁患者的58.67%,差异有统计学意义(P<0.05);但不同肿瘤最大径及不同淋巴结数目的甲状腺癌患者BRAF V600E基因突变率比较,差异均无统计...     

Ventana 免疫组化检测甲状腺乳头状癌BRAFV600E突变蛋白表达

目的分析免疫组化(IHC)方法检测甲状腺乳头状癌(PTC)BRAF V600E突变蛋白的特异性、敏感性及与实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测BRAF V600E突变的一致性。方法用Ventana IHC方法(VE1抗体)检测BRAF V600E突变蛋白在108例PTC组织中的表达,检测结果与同一组织的qPCR方法检测结果进行对比。使用SPSS 21.0软件进行统计学分析。结果 Ventana IHC方法检测BRAF V600E突变蛋白的灵敏度和特异度分别为97.44%(76/78)和86.67%(26/30),与qPCR方法检测BRAF V600E突变的总体一致性为94.44%。两种方法检测结果存在一致性,且一致性较好(Kappa值=0.859,P0.05)。结论 Ventana IHC方法检测BRAF V600E突变蛋白的灵敏度和特异度均较高,与qPCR方法存在一致性,且一致性较好,在PTC组织可以作为检测BRAF V600E突变的方法之一,值得推广。     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E基因突变与临床及超声特征的相关性研究

目的 探讨甲状腺乳头状癌(PTC)BRAF V600E基因突变与临床及超声特征的相关性.方法 回顾性分析术后证实为PTC的82例患者,共96个结节的临床及超声特征.分析PTC的BRAF V600E基因突变与临床、超声特征包括2017年ACR甲状腺影像报告和数据系统(TI-RADS)之间的关系.结果 96个PTC中,突变...     

甲状腺乳头状癌中BRAF~(V600E)基因突变与超声声像图的相关性研究

目的探讨甲状腺乳头状癌中BRAF~(V600E)基因与甲状腺乳头状癌声像图特征的关系。方法采用ARMS法检测91例共117个病灶的甲状腺乳头状癌(PTC)患者手术切除的甲状腺及其癌旁组织BRAF~(V600E)基因突变情况,分为BRAF~(V600E)基因突变组与野生组,比较两组超声声像图特征。结果 88个(75.2%)PTC癌组织标本发生BRAF~(V600E)基因突变,29个(24.8%)未发生突变。PTC BRAF~(V600E)基因突变组与野生组两组甲状腺声像图结节的边缘和颈部异常淋巴结差异有统计学意义(P0.05)。结论 PTC中BRAF~(V600E)基因突变率较高;BRAF~(V600E)基因突变与PTC超声声像图特征有相关,其中结节边缘不光整和有颈部异常淋巴结特征的组织中BRAF~(V600E)基因突变发生率高。     

甲状腺乳头状癌并发桥本氏甲状腺炎患者BRAF-V600E 基因表达及T 淋巴细胞亚群分析

目的 探讨甲状腺乳头状癌并发桥本氏甲状腺炎BRAF-V600E基因表达及T淋巴细胞亚群的变化。方法 选取2018年9月～2019年8月期间于重庆三峡中心医院就诊的单纯甲状腺乳头状癌患者(PTC 组)45例、单纯桥本氏甲状腺炎(HT组)患者55例、甲状腺乳头状癌并发桥本氏甲状腺炎患者(PTC-HT组)42例,以健康体检者(NC组)50例为对照。观察三组研究对象的BRAF -V600E基因表达及CD4⁺T,CD8⁺T,CD4⁺/CD8⁺的变化。结果 PTC 组患者BRAF- V600E突变率48.15%,HT组1.81%,PTC-HT组66.67%,NC组未见BRAF-V600E突变; 三个观察组CD8⁺T均比NC组显著升高,CD4⁺均比NC组显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05),但PTC组患者CD4⁺显著低于HT组和PTC-HT组,PTC-HT组CD8⁺又显著低于HT组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。三个观察组CD4⁺/CD8⁺均比NC组显著升高显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 与PTC组相比,BRAF- V600E在PTC-HT组患者表达率更高,PTC,PTC-HT和HT患者T淋巴细胞亚群均分化异常,机体存在免疫功能障碍,尤以PTC为甚。     

BRAF V600E基因蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及潜在的诊断价值

目的通过免疫组化方法检测丝/苏氨酸特异性激酶基因V600E蛋白突变特异性抗体(即BRAF V600E)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达,及其与临床病理特征、预后之间的关系。方法采用En Vision免疫组化法检测BRAF V600E在315例样本中的表达(包括151例PTC)。结果 (1)BRAF V600E在PTC中阳性率为36.4%,显著高于甲状腺对照组(15.8%,P0.05)及其他病变组(6.3%,P0.05),且高于甲状腺对照组中的结节性甲状腺组(18%,P0.05)和滤泡型肿瘤组(7.1%、Fisher's精确值=0.0359),与乳腺病变组(18.5%)差异无统计学意义(P0.05);(2)BRAF V600E在PTC中表达与有无甲状腺被膜外侵、有无淋巴结转移2个临床指标差异有统计学意义:有被膜外侵组(71.5%)显著高于无被膜外侵组(28.5%),有淋巴结转移组(90%)显著高于无淋巴结转移组(28.2%),与组织学类型、年龄、性别、肿瘤大小、是否多发肿块无关;(3)BRAF V600E在PTC伴随桥本组阳性率(59.1%)高于PTC无伴随病变组(30.7%,P0.05),PTC伴随结节性甲状腺肿组、或滤泡型腺瘤组、或钙化组与PTC无伴随病变组差异无统计学意义。结论 BRAF V600E基因蛋白在PTC中高表达与患者的预后相关,提示BRAF V600E基因蛋白可能在PTC的发生、发展中发挥重要作用。     

BRAFV600E基因突变检测在甲状腺乳头状癌诊断中的应用价值

目的分析鼠类肉瘤滤过性毒素菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600E(BRAF~(V600E))突变检测在甲状腺乳头状癌(PTC)诊断中的应用价值。方法选择82例PTC患者为研究组,另选取同期80例甲状腺良性结节患者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测2组患者术前穿刺活检组织中的BRAF~(V600E)基因突变情况。分析研究组患者的年龄、性别、甲状腺微小乳头状癌(PTMC)情况、病灶数、甲状腺外浸润、淋巴结转移、TNM分期等临床病理特征。结果研究组和对照组分别有57例和4例患者的活检组织中检出BRAF~(V600E)基因突变,阳性率分别为69.51%和5.00%,差异有统计学意义(P 0.01)。研究组中,BRAF~(V600E)基因突变阳性患者PTMC比率、出现N3淋巴结转移比率、TMNⅡ～Ⅳ期比率显著高于BRAF~(V600E)基因突变阴性患者(P 0.05)。术前穿刺活检组织BRAF~(V600E)基因突变检测在PTC与良性结节的鉴别诊断、PTMC诊断及PTC临床分期诊断中的曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.797、0.759,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论 PTC组织具有较高的BRAF~(V600E)基因突变阳性率,术前通过穿刺活检对病灶组织中BRAF~(V600E)基因突变进行检测,在PTC的鉴别诊断、临床分期诊断、病理诊断等方面具有一定的应用价值,可用于PTC的辅助诊断和病情评价。     

甲状腺乳头状癌石蜡标本BRAF V600E基因突变检测方法的比较研究

目的分析、比较聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法、微滴式数字聚合酶链反应(ddPCR)法、MassARRAY核酸质谱法和Sanger测序法检测甲状腺乳头状癌患者石蜡标本中BRAF V600E基因突变阳性率。方法收集35例2013年手术切除的甲状腺乳头状癌石蜡标本(已知新鲜组织用PCR-荧光探针法检测BRAF V600E基因突变全阳性),分别采用PCR-荧光探针法、ddPCR法、MassARRAY核酸质谱法和Sanger测序法检测甲状腺乳头状癌石蜡标本中BRAF V600E基因突变情况。结果 35例甲状腺乳头状癌石蜡标本PCR-荧光探针法、ddPCR法、MassARRAY核酸质谱法和Sanger测序法检测BRAF V600E基因突变阳性率分别为80.0%(28/35)、94.3%(33/35)、74.3%(26/35)和60.0%(21/35)。结论对于需要进行回顾性分析的甲状腺乳头状癌石蜡标本,ddPCR法更适用于BRAF V600E基因突变的检测。     

二代测序技术检测442例甲状腺乳头状癌基因突变及其临床病理学特征

目的 探讨甲状腺乳头状癌(PTC)基因改变及其与临床病理学特征的关系。方法 通过二代测序技术对442例PTC患者进行基因检测,同时收集患者的临床病理学资料。结果 (1)442例PTC患者中,423例患者检出基因突变,其中BRAF(385例)、RET(24例)、KRAS(5例)、NTRK3(3例)、NTRK1(3例);(2)BRAF基因突变仅与肿瘤最大径相关(P=0.006);(3)V600E突变丰度与性别、肿瘤最大径、肿瘤单/双侧、腺外侵犯、淋巴结转移、组织学亚型(P均<0.05)相关;(4)V600E不同突变丰度与肿瘤最大径、癌灶分布、腺外侵犯、淋巴结转移、组织学亚型(P均<0.05)相关。结论 应用NGS技术可以明确PTC各驱动基因变异的独特特征,此外BRAF基因V600E突变与多项高危的临床病理学特征相关。     

甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎的超声造影与BRAF~(V600E)突变分析

目的探讨合并桥本甲状腺炎(HT)对甲状腺乳头状癌(PTC)超声造影(CEUS)与BRAF~(V600E)突变的影响。方法收集我院手术病理证实为PTC患者122例。按照是否合并HT分为HT组和非HT组。比较两组间年龄、性别、病灶最大径、超声表现、CEUS以及BRAF~(V600E)突变率等差异。结果 HT组50例,非HT组72例,两组间发生BRAF~(V600E)突变率差异有统计学意义(P=0.003);两组间女性患者例数差异有统计学意义(P=0.007);两组间患者年龄(P=0.219)、病灶最大径(P=0.096)、超声表现、CEUS特征及PI (P=0.664)、△PI (P=0.176)等参数差异均无统计学意义。结论 PTC合并HT更常见于女性;合并HT者BRAF~(V600E)突变率低于不合并HT者;是否合并HT对PTC的血流灌注无影响。     

广东梅州客家人群甲状腺癌BRAF基因V600E突变特点分析——附316例单中心研究

目的 探讨广东梅州客家人群甲状腺癌鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1 （BRAF）基因V600E突变特点。方法 收集316例广东梅州客家地区的甲状腺癌患者的临床资料及BRAF基因V600E突变检测结果,对BRAF基因V600E突变与肿瘤特征的关系进行单因素分析和多因素Logistic回归分析。结果 316例患者BRAF基因V600E总体突变率为75.3% （238/316）,其中乳头状癌突变率为77.0%（238/309）。单因素分析显示BRAF基因V600E突变型患者肿瘤径线较小,纵横比大于1、微钙化比例较高,Ⅵ区和颈侧区淋巴结转移比例较低（P均< 0.05）;多因素Logistic回归分析提示BRAF V600E突变与Ⅵ区淋巴结转移（OR = 2.289, 95% CI = 1.283 ~ 4.081, P = 0.005）、超声回声（OR = 0.419, 95% CI = 0.209 ~ 0.841, P = 0.014）及粗大钙化（OR = 3.673, 95% CI = 1.395 ~ 9.668, P = 0.008）有关。结论 广东梅州客家地区人群甲状腺癌BRAF基因V600E突变率较高,BRAF基因V600E突变者易发生Ⅵ区淋巴结转移。     

BRAF~(V600E)免疫组化在甲状腺乳头状癌中的表达及与临床病理特征的相关性研究

<正>近年来,甲状腺癌的发病率逐年升高,超声及影像学技术的广泛应用和细针抽吸活检的普及是导致这一发病率上升的部分原因。其中甲状腺乳头状癌约占甲状腺癌的85%[1],是最常见的内分泌肿瘤,腺叶切除术或甲状腺全切除术加I131治疗是常规的治疗方式,但大约10%的PTC患者存在复发、淋巴结或远处转移,因此需要进一步干预。BRAF基因突变是近年来PTC诊断的主要发展方向。人们对BRAF基因突变认识的深入得益于聚合酶链反应     

伴BRAF V600E突变的甲状腺乳头状癌超声图像特征及其淋巴结转移风险分析

目的 分析BRAF V600E突变的甲状腺乳头状癌（PTC）患者的超声图像特征，探讨其淋巴结转移风险。方法 选取我院经穿刺或手术病理组织学检查确诊的PTC患者417例，分析不同病理组织学分型PTC的BRAF V600E突变阳性率、淋巴结转移率及其超声图像特征的差异；采用多因素Logistic回归分析BRAF V600E突变与不同亚型PTC超声图像特征的关系。结果 417例PTC患者中共检出BRAF V600E突变阳性327例，其中经典亚型、滤泡亚型及高细胞亚型PTC患者中BRAF V600E突变阳性率分别为73.53%、66.67%及86.96%，高细胞亚型BRAF V600E突变阳性率高于经典亚型和滤泡亚型，差异均有统计学意义（均P<0.05）。BRAF V600E突变阳性的PTC患者中，经典亚型、滤泡亚型及高细胞亚型的颈部淋巴结转移率、结节钙化类型及边缘贴近被膜占比比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）；各亚型BRAF V600E突变阳性患者颈部淋巴结转移率均高于突变阴性患者，差异均有统计学意义（均P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示，BRAF ...     

伴BRAF V600E突变PTC患者超声特征及与淋巴结转移的关系研究

【摘要】目的:探讨伴鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1（v-raf murine sarcoma viral oncogene homologue B1,BRAF）突变甲状腺乳头状癌（Papillary carcinoma of thyroid,PTC）患者超声特征及与淋巴结转移的关系。方法：本次研究纳入绵阳市第三人民医院2015年1月-2022年1月收治PTC患者共417例,均经穿刺或手术病理组织学检查确诊,分析不同亚型患者BRAF V600E突变阳性率和淋巴结转移情况关系,采用Logistic回归模型评价BRAF V600E突变对不同亚型患者超声图像特征的影响。结果：①高细胞亚型BRAF V600E突变阳性率显著高于经典亚型、滤泡亚型（P<0.05）;②BRAF V600E突变阳性人群不同亚型颈部淋巴结转移率比较差异有统计学意义（P<0.05）;不同亚型BRAF V600E突变阳性患者颈部淋巴结转移率显著高于BRAF阴性者（P<0.05）;③合并BRAF V600E突变不同亚型患者钙化类型和是否贴近被膜比例比较差异有统计学意义（P<0.05）;④多因素分析结果显示,BRAF V600E突变与经典亚型/高细胞亚型患者钙化特征独立相关（P<0.05）。结论：合并BRAF V600E突变PTC患者出现颈部淋巴结转移几率更高;BRAF V600E突变存在可影响经典亚型/高细胞亚型PTC患者超声图像钙化类型。     

BRAF基因突变在甲状腺乳头状癌中的临床意义

目的:探讨BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的临床相关性。方法:采用PCR技术和直接测序法,对63例甲状腺乳头状癌患者和45例其他类型甲状腺疾病患者石蜡组织BRAF V600E基因突变进行检测。结果:甲状腺乳头状癌组中32例存在突变;而在其他类型甲状腺疾病组中未发现突变。BRAF V600E基因突变在甲状腺乳头状癌不同肿瘤直径组之间的比较差异以及在有无区域淋巴结转移组之间的比较差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的发生、肿瘤的大小和区域淋巴结的转移有关。     

甲状腺乳头状癌超声图像特征及BRAF V600E突变与颈部淋巴结转移的关系

目的 分析甲状腺乳头状癌（PTC）超声图像特征及BRAF V600E突变与颈部淋巴结转移的关系。方法 选取于我院行甲状腺癌根治术患者316例,根据甲状腺癌术后病理分期（pTNM）结果,将pN0（无颈部淋巴结转移）者归为未转移组（160例）,pN1（有颈部淋巴结转移）者归为转移组（156例）,比较两组超声图像特征、临床资料、BRAF V600E突变情况的差异。采用多因素Logistic回归分析PTC超声图像特征、BRAF V600E突变及各临床资料与颈部淋巴结转移的关系。结果 转移组98例（62.8%）发生BRAF V600E突变,未转移组121例（75.6%）发生BRAF V600E突变,两组BRAF V600E突变占比比较,差异有统计学意义（P<0.05）。转移组与未转移组年龄及病灶数目、大小、沙粒样钙化、纵横比、边缘、与被膜关系、累及腺叶比较,差异均有统计学意义（均P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,病灶大小、纵横比、与被膜关系、累及腺叶均为颈部淋巴结转移的危险因素（OR=3.606、4.061、2.149、8.578,均P<0.05）,年龄、沙粒...