中性粒细胞胞外诱捕网蛋白质的免疫原性

中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）由DNA和抗菌蛋白质组成。在活细胞内,这些组分分布于亚细胞并发挥不同的功能。但是,在NETosis期,这些组分重新分布并从中性粒细胞内挤压出来。NETosis过分强盛和NETs清除受损,与自身免疫性疾病的器官损害有关,如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、Felty’s综合征（Fs）和小血管炎（SVV）等。NETs可能是体内新抗原的重要来源,蛋白质翻译后的修饰与水解,或药物诱导NETs构象异常能促进自身免疫性疾病患者产生自身抗体。总之,NETs可能提供了一个独特的具有破坏正常免疫耐受,引起自身免疫性的微环境。     

游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是先天抗微生物免疫的重要部分。NETs由中性粒细胞DNA、组蛋白和细胞质蛋白质构成。它对微生物是一种有效的防御机制,当缺乏有效抗衡调节时,它又能损伤组织。越来越多的证据表明NETs的动态水平是随着炎性过程,而不是随着组织损伤而变化。一种快速定量游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA（cf-DNA／NETs）的方法已经建立,cf-DNA／NETs可能是用于诊断与预测炎症性疾病的新标志物。     

中性粒细胞胞外诱捕网在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化作为一种炎症反应性疾病,已成为心脑血管病领域的共识。而参与动脉粥样硬化炎症反应的细胞成分多种多样,包括单核-巨噬细胞、树突状细胞、T淋巴细胞及中性粒细胞等。中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞活化时释放的网状物质,它具有抗炎、促炎、促凝等多种生物活性,并参与多种疾病的病理进程。研究发现:中性粒细胞可以在某些刺激因子作用下活化并释放出NETs,而NETs具有细胞毒性和血栓形成效应,并且能够与巨噬细胞产生交互作用,它作为将炎症和血栓形成联系起来的桥梁,在动脉粥样硬化的病理进程中发挥了重要作用。     

抗中性粒细胞胞外诱捕网的细菌毒力因子

中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)作为人体先天免疫系统的组成部分,具有捕杀病原体的作用.最近已经明确,几种细菌毒力因子有利于细菌逃避NETs的作用.本文讨论5种毒力因子,包括核酸酶、多糖荚膜、丙氨酰脂磷壁酸、唾液酸化聚糖分子模拟物、β-羟基丁酸.     

中性粒细胞胞外诱捕网与肝癌关系的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网（NET）是由解聚的染色质和颗粒蛋白组成的网状结构。NET的形成过程被称为中性粒细胞炎性凋亡（NETosis）,它被认为是从垂死的中性粒细胞中排出以捕获和杀死病原微生物。NET与肝癌、胃癌、肠癌、肺癌等多种恶性肿瘤密切相关。近年来,大量研究表明,在癌症患者和动物模型中都存在NET。NET促进了肿瘤的生长、侵袭、转移以及癌症相关血栓的形成。阻断或破坏NET的形成可抑制肿瘤进展和癌症相关血栓的形成。因此,靶向NET可能是一种新的抗肿瘤治疗方法。该文重点阐述了NET的形成机制及其在肝癌中的作用。深入了解NET在肝癌中的发病机制,为肝癌治疗提供新思路和新方法。     

中性粒细胞胞外诱捕网在血栓形成中发挥重要作用

中性粒细胞胞外诱捕网(NET)是中性粒细胞经过感染或其他因素的刺激后产生的由胞外DNA骨架,组蛋白以及中性粒细胞弹性蛋白酶,髓过氧化物酶等组成的网状结构.在脓毒症,癌症等疾病中,NET有明显促进血栓形成的作用.NET还与免疫性血栓形成密切相关.NET主要通过黏附血小板、激活Ⅻ因子、抑制组织因子途径抑制物(TFPI)的活...     

中性粒细胞胞外诱捕网与肠屏障功能障碍的研究进展

<正>肠屏障系统是维持胃肠道稳态的前提条件,也是抵御肠道病原体入侵的第一道防线。该系统由机械屏障、免疫屏障、生物屏障及化学屏障共同构成,上述任一结构的损伤及功能障碍都会影响肠屏障系统功能(intestinal barrier function,IBF)[1]。当肠屏障损伤时,肠黏膜通透性发生改变,肠道内毒性物质及病原体趁势入侵,干扰组织内环境稳定,诱发炎症反应及免疫反应,进而产生一系列的临床结局,如肠源性休克、脓毒症甚至多器官功能衰竭等[2]。近年来,随着中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)的发现以及研究的深入,发现NETs对     

中性粒细胞外诱捕网与血栓性疾病

中性粒细胞外诱捕网（NETs）是指由颗粒衍生蛋白修饰的DNA支架组成的中性粒细胞胞外网状结构,其形成过程伴随着剧烈的细胞形态变化,以染色质解聚和核颗粒物质释放为主要特征。NETs 在介导炎性损伤和凝血紊乱过程中扮演关键角色,兼具生物标志物和潜在治疗靶点双重角色,与急性冠脉综合征、缺血性中风、静脉血栓形成以及肿瘤相关血栓发生发展密切相关。该文就NETs的生物学功能及其在上述疾病中的病理生理机制做一综述。     

中性粒细胞与淋巴细胞比值和中性粒细胞胞外诱捕网与脓毒症肝损伤的临床研究

Objective To explore the clinical value of peripheral blood neutrophil-to-lymphocyte ratio (NLR) combined with neutrophil extracellular traps (NETs) in predicting liver injury in patients with sepsis. Methods A prospective observational study was conducted. The patients who met the diagnostic criteria for sepsis 3.0 admitted to the Department of Intensive Care Unit in Wuxi People's Hospital Affiliated to Nanjing Medical University from March 2019 to June 2020 were selected as the research objects. The basic informations of the patients were recorded. NLR based on blood routine at admission was calculated. PicoGreen fluorescence quantitative detection kit was used to detect the quantitative level of free DNA (cf-DNA/NETs) in the peripheral plasma of patients at admission. According to whether liver injury occurred, the patients were divided into the sepsis without liver injury group and sepsis with liver injury group. Binary Logistics regression analysis was used to predict the risk factors of sepsis with liver injury. The receiver operating characteristic (ROC) curve was drawn. The value of NLR, NETs, NLR combined with NETs in predicting liver injury in patients with sepsis was analyzed. Results A total of 122 patients with sepsis were enrolled, of which 45 patients suffered from septic liver injury, with an incidence rate of 36.89%. The NLR of the sepsis wth liver injury group was (21.63 ± 4.71), the NLR of the sepsis without injury injury group was (15.03 ± 4.71), and the NETs level of the sepsis with liver injury group was (505.86 ± 250.05) ug/L, the level of NETs in the sepsis without liver injury group was (179.27 ± 67.20) ug/L, and the differences between the two groups were statistically significant (all P<0.05). Binary logistic regression analysis found that NLR (Oi?=1.470, 95% CI: 1.121-1.926, P<0.05) and NETs (OR=1.O18, 95% CI: 1.005-1.030, P<0.05) at admission were the independent risk factors for liver injury in patients with sepsis. The best cut-off value of NLR was 16.68, and the best cut-off value of NETs was 317 ug/L. The sensitivity of combined application of NLR and NETs to predict liver injury in patients with sepsis was 77.78%, specificity was 98.70%, the area under the curve was 0.930, and the Youden Index was 0.765. Conclusions The peripheral blood NLR and NETs levels are independent risk factors for liver injury in patients with sepsis. The combined application of NLR and NETs has a certain predictive value for liver injury in patients with sepsis. Taking NLR of 16.68 and NETs of 317 ug/L as the cut-off values, they can be used as early warning indicators to predict liver injury in patients with sepsis. © 2021 Chinese Medical Association. All rights reserved.     

中性粒细胞胞外诱捕网在小鼠静脉血栓栓塞形成中的作用及机制

目的探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)与静脉血栓栓塞(VTE)的关系及糖皮质激素(GC)的调节作用。方法将40只KM小鼠随机分为对照组(n=20)和实验组(n=20)。实验组小鼠通过神经血管钳钳夹联合结扎下腔静脉建立小鼠VTE模型,对照组采用假手术法处理。术后7 d,处死小鼠,取肺组织进行病理切片观察,取眼眶静脉血,石蜡切片HE染色检测肺组织病理变化;采用免疫荧光染色法观察肺组织瓜氨酸化的组蛋白H3(Cit H3)与细胞核共定位情况。检测血浆中游离DNA含量,及小鼠外周血髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、重组人B细胞活化因子(BAFF)的含量。分离并观察外周血中性粒细胞集落形成能力及对体外NETs形成的影响。检测细胞因子白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)及TNF-α的表达及分泌变化,检测细胞活性氧产生情况、脂质过氧化产物产生情况及细胞内NF-κB信号转导激活改变。结果VTE术后,对照组小鼠的肺组织无明显的病理学变化,实验组小鼠的肺组织改变明显。实验组的血浆游离DNA水平较对照组水平明显升高,ELISA检测MPO可见实验组的血浆MPO水平较对照组水平明显升高。免疫荧光标记Cit H3发现对照组小鼠中,Cit H3的阳性信号较少,而在VTE造模实验组的小鼠肺组织中,Cit H3的阳性信号显著增多。实验组的血清TNF-α水平及IL-1β水平较对照组水平明显升高,但是IFN-γ、IL-4和BAFF无显著差异。结论中性粒细胞胞外诱捕网与血栓形成密切相关,其可激活巨噬细胞促进血栓形成。     

针灸对大鼠呼吸机相关性肺炎中性粒细胞归巢及胞外诱捕网的影响

目的探讨中性粒细胞归巢及胞外诱捕网在大鼠呼吸机相关性肺炎（VAP）中的发病机制及针灸治疗作用。 方法将30只Sprague-Dawley大鼠分为对照组、模型组、针灸组、针灸+ CXCR4抑制剂组、针灸+中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）抑制剂组,每组6只。对照组大鼠仅予气管暴露,保留自主呼吸;模型组大鼠麻醉后暴露气管并向气管中注入肺炎克雷伯杆菌;72 h后行经口气管插管接小动物呼吸机,每30分钟行2 ~ 3次大潮气量通气,每天连续通气5 h,持续2 d;针灸组大鼠于造模成功30 min后行针灸治疗;针灸+ CXCR4抑制剂组大鼠于第1天注射菌液前0.5 h按体质量以2.5 mg/kg的剂量腹腔注射CXCR4抑制剂;针灸+ NETs抑制剂组大鼠于机械通气前0.5 ~ 1.0 h按体质量0.8 μM/290 ~ 340 g的剂量鞘内注射NETs抑制剂。采用流式细胞术检测大鼠肺组织中性粒细胞变化趋势,苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理变化,免疫组织化学染色法检测肺组织瓜氨酸化组蛋白H3（Cit-H3）、髓过氧化物酶（MPO）表达水平。 结果对照组、模型组、针灸组和针灸+ CXCR4抑制剂组大鼠CD11b + CD62L表达水平比较,差异有统计学意义（F = 25.150,P<0.001）。进一步两两比较发现,与对照组比较,模型组CD62L + CD11b表达水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,针灸+ CXCR4抑制剂组表达水平显著下降（P<0.05）。HE染色结果显示,对照组大鼠肺组织未见明显充血、出血、水肿及中性粒细胞浸润;模型组肺组织明显水肿,充血及出血明显,大量炎症细胞浸润;针灸组肺泡及气道黏膜充血、水肿减轻,炎症细胞浸润减少;针灸+ NETs抑制剂组肺泡及气道黏膜充血、水肿明显减轻,炎症细胞浸润明显减少。对照组、模型组、针灸组和针灸+ NETs抑制剂组大鼠肺损伤评分、Cit-H3和MPO表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 51.723、227.370、570.097,P均<0.001）。进一步两两比较发现,与对照组比较,模型组Cit-H3、MPO表达水平均显著升高,肺组织炎症浸润更严重（P均<0.05）;与模型组比较,针灸组、针灸+ NETs抑制剂组中Cit-H3、MPO表达水平均显著降低,肺组织炎症浸润明显减轻且针灸+ NETs抑制剂组更为显著（P均<0.05）。 结论VAP大鼠模型中存在中性粒细胞归巢及NETs过度形成的现象;针灸对中性粒细胞归巢的抑制不明显,但可通过调控Cit-H3及MPO的表达抑制NETs的过度形成从而改善炎症反应;同时,针灸联用CXCR4抑制剂可明显改善中性粒细胞归巢,联用NETs抑制剂对NETs的调控效果更为显著,对肺组织炎症反应改善作用更强。     

中性粒细胞胞外诱捕网标志物游离DNA水平与脓毒症血小板活化的相关性

目的研究中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）标志物游离DNA（cfDNA）水平与血小板（PLT）活化之间的相关性。 方法根据纳入标准、排除标准将2018年9至12月中国医科大学附属第一医院ICU收治的51例患者分为脓毒症组（29例）和对照组（22例）。用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测患者外周血浆的cfDNA、血小板因子4（PF4）、P-选择素浓度。采用SPSS 25.0进行统计学分析,比较2组患者入ICU 24 h内生化指标、急性生理学与慢性健康状况（APACHEⅡ）评分、序贯器官衰竭评估（SOFA）评分、国际血栓与止血委员会（ISTH）评分、日本危重病协会（JAAM）评分、cfDNA以及PLT标志物（PF4、P-选择素）的差异性。同时将脓毒症组cfDNA和PLT、PLT标志物（PF4、P-选择素）、炎症指标［中性粒细胞计数（NE）、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）］、凝血指标［凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、D-二聚体（D-D）、抗凝血酶Ⅲ活性（AT-Ⅲ）］、疾病严重程度（APACHEⅡ评分、SOFA评分、ISTH评分、JAAM评分）等分别进行相关性分析。 结果脓毒症组患者cfDNA水平明显高于对照组,差异有统计学意义［（174.499±76.596）ng/ml vs （114.354±19.319）ng/ml,P＜0.05］,但2组P-选择素、PF4水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。脓毒症组中cfDNA水平与P-选择素/PLT、D-D、CRP、APACHEⅡ评分、JAAM评分之间具有相关性（r=0.3849、0.3872、0.6211、0.4542、0.4451,P＜0.05）;与NE、PLT计数、PLT标志物（PF4、P-选择素）、ISTH评分等无明显相关性（P＞0.05）。 结论脓毒症组患者cfDNA明显升高。脓毒症组中cfDNA与D-D之间具有明显正相关性,提示NETs可能与继发性纤溶过程关系更加密切。尽管脓毒症组中cfDNA与P-选择素/PLT之间有正相关性,但因为P-选择素并不是特异性的PLT活化标志物,所以NETs与脓毒症PLT活化的关系仍需进一步探究。     

监测外周血中性粒细胞胞外诱捕网含量对食管癌远处转移的预测价值

目的 评价中性粒细胞胞外诱捕网（NET）生成对食管癌远处转移的预测价值。方法 前瞻性纳入食管癌患者（远处转移25例、非远处转移35例）和30名健康志愿者,检测其外周血NET含量并进行分析。结果 食管癌远处转移者外周血NET含量高于非远处转移者和健康志愿者。外周血NET含量升高是食管癌远处转移的独立危险因素（OR=1049.592, 95%CI:24.313～45310.558）。监测NET含量可预测食管癌的远处转移（AUC=0.37, 95%CI:0.737～0.937）,其预测价值高于中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）;NET联合NLR可以提高NET预测食管癌远处转移的灵敏度和特异度。结论 NET生成是食管癌远处转移的高危因素,监测外周血NET的含量可预测食管癌远处转移,NET联合NLR能够提高NET的预测价值。     

异丙酚对脓毒症小鼠中性粒细胞胞外诱捕网生成和炎症因子表达的影响

目的 明确异丙酚对脓毒症小鼠模型中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)生成和炎症因子表达的影响.方法 雄性8～10周龄C57BL/6小鼠40只,按照随机数字表法分为对照组、脂多糖(LPS)组、异丙酚组和脱氧核糖核酸酶(DNase)组,每组各10只.腹腔注射LPS建立脓毒症模型;异丙酚组小鼠腹腔注射异丙酚全身麻醉1 h;DNa...     

血清中性粒细胞胞外诱捕网水平与脓毒性休克患者病情以及预后的相关性分析

目的:探讨血清中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)水平与脓毒性休克患者病情以及预后的相关性.方法:选择2019年1月-2020年12月期间我院收治的157例脓毒性休克患者,根据APACHEⅡ评分将患者分为0～10分组(46例)、11～20分组(69例)和＞20分组(42例),根据SOFA评分分为0～5分组(53例)、6～1...     

腰椎后路手术血液回收过程中中性粒细胞胞外诱捕网的产生与洗涤效果评价

目的探讨腰椎后路手术术中血液回收(IBS)过程中是否存在中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)及NETs相关成分DNA、组蛋白和核小体的生成,以及自体血清洗程序是否可以清除NETs成分。方法回顾性选取2017年1～6月于首都医科大学附属北京友谊医院行腰椎后路手术患者20例,术中使用自体血液回收。抽取术前外周静脉血(0期)、自体血回收罐中血(1期)和洗涤后回输前的自体血(2期)的血液样本。检测样本中NETs相关成分DNA、核小体、髓过氧化物酶(MPO)含量。结果与术前外周静脉血(DNA:21. 92±24. 87 ng/ml,核小体0. 03±0. 02,MPO 5. 41±2. 48 ng/ml)相比,自体血回收罐中血液NETs及其相关成分含量明显增高(DNA:3 256. 56±1 952. 04 ng/ml,核小体:3. 06±0. 34,MPO 493. 23±232. 33 ng/ml),经过洗涤后,回收血液的上述成分明显降低(DNA:146. 62±123. 82,核小体:1. 59±0. 48,MPO:64. 73±38. 49 ng/ml),但仍高于术前水平,差异均有显著性(P 0. 05)。结论腰椎后路手术血液回收过程中存在中性粒细胞激活产生NETs,血液洗涤可以使NETs水平降低,但仍高于术前水平。