ICU患者感染泛耐药鲍氏不动杆菌携带OXA酶与AmpC酶的研究

目的了解ICU患者感染泛耐药鲍氏不动杆菌携带碳青霉烯酶基因、头孢菌素酶(AmpC酶)基因,从而分析其耐药机制。方法常规细菌培养方法分离细菌,用VITEK-2全自动微生物鉴定/药敏测试系统进行菌种鉴定及体外敏感测定;采用多重PCR检测25株鲍氏不动杆菌携带的碳青霉烯酶、AmpC酶相关耐药基因(16S rRNA、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、ADC、DHA、ISAba1),并对耐药基因扩增的阳性产物进行DNA序列分析。结果 ICU患者感染泛耐药鲍氏不动杆菌均携带OXA-23、OXA-51、ADC基因,21株携带插入序列ISAba1;DNA序列分析结果显示,OXA-23、OXA-51、ADC分别与NCBI的序列同源性均为99.0%。结论产OXA-23型碳青霉烯酶可能是ICU患者感染鲍氏不动杆菌对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药的主要原因,且为同一克隆株传播。     

耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因型及插入序列ISAba1研究

目的了解耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌的临床分布及耐药特征,探讨插入序列ISAba1和碳青霉烯酶与其耐药的关系。方法收集270株耐碳青霉烯类药物的鲍氏不动杆菌,K-B法检测菌株的药物敏感性;改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;双纸片协同试验检测金属酶;多重PCR检测OXA-51、OXA-23、OXA-58、OXA-24、IMP、VIM、SIM,PCR检测ISAbal-OXA-23、ISAbal-OXA-51基因并进行测序分析;采用WHONET 5.6软件对菌株药敏结果进行统计分析。结果在检测的18种药物中,14种药物耐药率超过90.0%,哌拉西林耐药率最高为100.0%,头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为48.9%;改良Hodge试验阳性156株,阳性率57.8%;金属酶表型检测均为阴性;270株菌均检测到了OXA-51基因,267株菌检测到OXA-23基因,1株检测到OXA-58基因,未检测到OXA-24、IMP、VIM、SIM基因;267株菌的OXA-23基因上游均检测到插入序列ISAbal,所有OXA-51基因上游均未检测到ISAbal。结论耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌耐药十分严重;OXA-51和OXA-23型碳青霉烯酶是本地区鲍氏不动杆菌的主要碳青霉烯酶;ISAba1常在OXA-23基因上游出现,ISAbalOXA-23是鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制。     

多重PCR检测心血管内科ICU患者分离耐碳青霉烯酶类鲍氏不动杆菌OXA基因研究

目的调查医院心血管内科ICU患者鲍氏不动杆菌临床分离株OXA基因的分布以及与鲍氏不动杆菌耐药谱的关系,并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用。方法收集心血管内科ICU患者2009年1月-2010年12月分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌50株和碳青霉烯敏感鲍氏不动杆菌,采用多重PCR对其进行OXA基因检测,统计并分析耐药组和敏感组基因型的差别,分析基因型和耐药性之间的关系。结果根据多重PCR产物片段大小分析,50株心血管内科ICU分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌中均携带有OXA基因,其中OXA-51+OXA-58基因阳性有20株,5株仅OXA-51基因阳性,3株OXA-23基因阳性;碳青霉烯类耐药株同时携带OXA-51/OXA-58基因阳性率显著高于碳青霉烯类敏感株(t=5.97,P<0.05);但碳青霉烯类耐药株携带OXA-51基因阳性率与碳青霉烯类敏感株之间差异无统计学意义。结论医院心血管内科ICU患者鲍氏不动杆菌耐药率高,大部分携带有OXA基因,主要携带有OXA-51/OXA-58基因,且其与碳青霉烯类耐药之间存在着一定的相关性。     

某院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性和碳青霉烯酶耐药基因分析

目的分析某院重症监护室(ICU)多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的耐药性和碳青霉烯酶耐药基因。方法8株MDRAB在同一时期分离自ICU患者痰标本、环境物品表面。用VITEK 2 COMPACT进行抗菌药物敏感试验(MIC),同时用PCR技术分析其产碳青霉烯酶相关耐药基因类型。结果对左氟沙星的耐药率为75.0%,对其余18种抗菌药物的耐药率为100.0%。8株菌均检出OXA-51、OXA-23基因,未检出OXA-24、OXA-58、IMP和VIM耐药基因。结论该院ICU分离的MDRAB对临床常用的抗生素耐药性严重,携带OXA-23基因可能是其耐碳青霉烯类抗生素的主要原因。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的研究云南省昆明地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集2009年10月-2010年10月云南省昆明地区临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌215株。应用改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型,随机扩增多态性技术(RAPD)分析菌株的同源性。结果 215株多重耐药鲍曼不动杆菌中,190株(88.4%)检出OXA-51基因;150株(69.8%)检测出OXA-23基因,其中140株OXA-23表达菌在改良Hodge试验中为阳性;12株(5.6%)检出VIM基因且EDTA协同实验均为阳性。RAPD技术将215株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分为7个基因型,其中A型为主要克隆。结论 OXA-23和OXA-51是本地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要基因型,已出现VIM型碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,且多重耐药鲍曼不动杆菌存在院内感染的现象。     

广泛耐药鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶基因型和表型分析

目的分析临床分离的鲍曼不动杆菌耐药谱和产碳青霉烯酶表型和基因型。方法应用全自动细菌鉴定仪对从本地三级医院收集的93株鲍曼不动杆菌进行菌株鉴定和药敏试验,用碳青霉烯酶抑制法(carbapenem inactivation method,CIM)检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌耐药表型;PCR法确定产碳青霉烯酶菌株耐药基因型。结果93株鲍曼不动杆菌,广泛耐药株47株(耐药率为50.5%),耐碳青霉烯类56株(耐药率为60.2%)。以亚胺培南为底物的碳青霉烯酶抑制法检出产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌55株,检出率为98.1%(55/56)。在56株碳青霉烯类耐药株中,TEM-1基因、PER-1基因、OXA-23基因、Ⅰ型整合子基因、adeB基因阳性率分别为75.0%、42.9%、80.4%、73.2%、64.3%,其余耐药基因均未检出。结论碳青霉烯酶抑制法快速、简便,可以作为常规检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌的表型检测方法;目前本地OXA-23和TEM-1型碳青霉烯酶以及Ⅰ型整合子是导致鲍曼不动杆菌广泛耐药和对碳青霉烯酶类耐药的主要原因。     

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及基因分析

目的：通过研究本院21株鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药基因和耐药情况,为临床用药提供依据。方法：用珠海迪尔DL-96微生物鉴定系统进行细菌鉴定及K-B法进行药敏试验,并用碳青霉烯酶4种基因的特异性引物对其进行聚合酶链反应（PCR）扩增和基因型分析,通过网上GemBank进行比对,以确定编码酶基因的类型。结果：21株鲍曼不动杆菌对左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、多粘菌素B的耐药率分别为50%、25%、10%。其他抗生素的耐药率均在80%以上。携带D类碳青霉烯酶OXA-23基因有17株（81%）,携带OXA-51基因有15株（60%）,OXA-24、OXA-58基因引物PCR扩增为阴性,OXA-23基因阳性株进行测序后通过在网上GemBank比对与OXA-23标准株99%同源,OXA-51基因阳性株与OXA-51标准株98%同源。结论：鲍曼不动杆菌对多粘菌素的耐药率最低,其次是丁胺卡那霉素和左旋氧氟沙星,其中以携带OXA-23型碳青霉烯酶基因为主,应严格监测其耐药情况,针对性地选用抗生素,对防止其流行和多重耐药性的产生有着重要意义。     

ICU泛耐药鲍曼不动杆菌整合子及D类碳青霉烯酶分子流行病学特征

目的 了解重病监护病房(ICU)泛耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶分子流行病学特征,为控制耐药菌株的传播提供科学依据.方法 菌株的鉴定采用梅里埃公司API鉴定板条,药物敏感试验采用K-B纸片方法,整合子及碳青霉烯酶基因检测采用聚合酶链反应(PCR).结果 10株泛耐药鲍曼不动杆菌表现对除多粘菌素外所有测试的药物耐药;基因检测结果显示10株鲍曼不动杆菌菌携带aacA4-catB8-aadA1同一种整合子类型,其所携带的碳青霉烯酶基因为OXA-23基因亚群.结论 ICU泛耐药菌株对碳青霉烯类药物耐药机制是由可转移质粒所携带的OXA-23基因亚群介导,临床应引起足够重视.     

碳青霉烯类抗菌药物耐药鲍氏不动杆菌分布和耐药基因检测

目的分析医院耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍氏不动杆菌(CRAB)的临床分布和耐药基因,指导临床合理用药,防止产碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的发生及传播。方法收集2013年9月-2015年9月台州市中心医院住院患者送检标本中分离132株CRAB,统计CRAB临床分布,并进行耐药性分析;采用法国生物梅里埃公司Vitek-2compact全自动细菌鉴定/药敏分析仪进行体外药敏试验;采用PCR方法扩增碳青霉烯酶基因,分析耐药机制。结果 132株非重复性CRAB菌株中,临床科室分布排前4位依次为ICU、脑外科、急诊ICU和呼吸内科,分别占50.8%、12.9%、11.4%和6.8%;132株CRAB除对阿米卡星、替加环素、左氧氟沙星有一定的敏感性外,对其余抗菌药物耐药率均很高;所有菌株OXA-51-like基因阳性,120株OXA-23-like基因阳性,未发现OXA-24-like和OXA-58-like基因阳性菌株;金属酶基因IMP、VIM检测为阴性。结论 CRAB主要分布在ICU和脑外科等科室;OXA-51和OXA-23基因是鲍氏不动杆菌最主要的碳青霉烯酶基因型。     

ICU分离鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制研究

目的调查医院重症监护病房(ICU)分离鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制,为ICU鲍氏不动杆菌感染治疗的抗菌药物选择提供理论依据。方法收集2010年1月-2014年1月ICU住院患者分离到的135株非重复鲍氏不动杆菌,采用VITEK-2Compact全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏分析,采用PCR法检测blaVIM、blaNDM、blaOXA-23/24、blaIMP、blaKPC及blaOXA-51/58等碳青霉烯酶耐药基因,采用PCR检测ISAba1基因并与碳青霉烯酶基因连锁检测。结果 4年ICU分离出鲍氏不动杆菌135株,年龄60岁患者分离的鲍氏不动杆菌最多52株,占38.52%;ICU患者痰液标本中检出鲍氏不动杆菌最多79株占58.52%,其次为分泌物及尿液,分别占20.00%及11.11%;鲍氏不动杆菌对氨苄西林耐药率最高为94.81%,对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为32.95%和34.07%;对选取的46株碳青霉烯类耐药菌进行基因检测显示,46株均携带有blaOXA-51-like基因,46株菌携带ISAba1基因;40株携带blaOXA-23-like基因,对blaOXA-23-like基因测序,进行比对后确定为blaOXA-23基因,并同时检出ISAba1-blaOXA-23连锁基因;未检出blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA-58-like、blaOXA-24-like及blaNDM基因。结论 ICU患者分离的鲍氏不动杆菌耐药性严重,以老年患者居多,主要分离自痰液标本,其中碳青霉烯耐药株常携带有OXA-23型碳青霉烯酶基因,并与ISAba1连锁携带。     

鲍氏不动杆菌耐药性及相关耐药基因检测分析

目的检测分析鲍氏不动杆菌耐药性及相关耐药基因。方法采用K-B法(CLSI 2008年标准)测定鲍氏不动杆菌临床分离株耐药性;PCR方法检测TEM、SHV、CTX-M、I MP、VI M、OXA-23、OXA-24耐药基因以及Ⅰ、Ⅱ类整合酶。结果 130株鲍氏不动杆菌,除阿米卡星和碳青霉烯类外,对其他抗菌药物耐药率非常高,TEM、SHV、CTX-M、Int1、Int2基因阳性率分别为68.5%、10.8%、17.7%、75.4%、0;51株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌中I MP、VI M、OXA-23、OXA-24基因阳性率分别为25.5%、19.6%、72.5%、0。结论鲍氏不动杆菌耐药性较高,携带TEM型β-内酰胺酶、OXA-23、I MP和VI M型碳青霉烯酶基因和Ⅰ类整合酶;产生OXA-23型碳青霉烯酶和金属酶是医院鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类耐药的主要机制。     

耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因检测研究

目的对南充地区耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌(CRAB)的碳青霉烯酶耐药基因进行检测分析,初步了解该地区CRAB耐药机制。方法收集南充市两所三甲医院临床感染患者送检标本检出的90株非重复CRAB,采用改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶,PCR扩增技术检测OXA-23 like、OXA-24 like、OXA-51 like、OXA-58 like、IMP、VIM型碳青霉烯酶基因以及NDM-1"超级细菌"耐药基因。结果改良Hodge试验阳性共72株,阳性率80.0%;全部菌株携带OXA-51-like基因,79株携带OXA-23-like基因,检出率为87.8%,其余基因扩增均为阴性。结论该地区CRAB的耐药机制与产OXA-23型碳青霉烯酶有关,未发现其他碳青霉烯酶耐药基因参与。     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌的碳青霉烯酶研究

目的了解医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶携带情况,对临床预防其感染及抗菌药物应用提供参考依据。方法收集2008年9月-2010年12月耐亚胺培南鲍氏不动杆菌65株,K-B纸片法测定其对抗菌药物的敏感性,琼脂稀释法测定其对多黏菌素B的MIC;改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,EDTA纸片协同试验检测金属酶表型;PCR检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM编码基因。结果 65株鲍氏不动杆菌对米诺环素敏感率为19.0%,对其他11种抗菌药物敏感率均10.0%;对多黏菌素B的MIC均≤2μg/ml;改良Hodge阳性率为52.3%,所有菌株OXA-51均阳性,OXA-23阳性率为93.85%,OXA-24、OXA-58均阴性,未检测到金属酶基因。结论耐亚胺培南鲍氏不动杆菌主要携带OXA-23型碳青霉烯酶。     

重症监护病房耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌耐药性及基因同源性分析

目的研究绍兴市中心医院ICU住院患者临床分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药性和基因分型。方法收集2016年绍兴市中心医院ICU住院患者临床分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌60株。微量稀释法进行常规药敏试验。采用多重PCR技术检测菌株携带的耐药基因,PFGE分型技术对鲍氏不动杆菌进行基因同源性分析。结果抗菌药物敏感性试验显示所有菌株具有多药耐药性,对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟耐药率>90%,对阿米卡星的敏感率较高为62.4%,其次为头孢哌酮/舒巴坦和左氧氟沙星;PCR检出60株鲍氏不动杆菌均为OXA-23型和OXA-51型。PFGE分型均为同一型别。结论绍兴市中心医院ICU分离的耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌的耐药基因为OXA-23型和OXA-51型,为同一来源,考虑为医院感染所致,因此应采取有效措施来控制该耐药株的传播。     

ICU耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌bla_(OXA)基因型分析

目的对2015年1月-4月滨州市人民医院ICU病房检出的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌基因型进行分析,为本院ICU合理使用抗菌药物和控制感染提供依据。方法采用BD PHOENIX-100全自动微生物分析鉴定系统进行菌株鉴定和药敏试验,结果判定依据NCCLS颁布的标准;聚合酶链反应即PCR法扩增blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58、blaOXA-60、blaOXA-64、blaIMP-1、blaVIM-2和blaVIM-7基因并对部分阳性菌株进行测序。结果 2015年1月-4月本院ICU共检出14株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌,其对米诺环素耐药率20%;对碳氢酶烯类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类药物均耐药,并呈现泛耐药趋势。PCR检测出这14株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌blaOXA-23、blaOXA-51、blaOXA-64基因阳性率为100%(14/14),1株携带blaOXA-58基因,未检出blaOXA-24、blaOXA-60、blaIMP-1、blaVIM-2和blaVIM-7基因。结论本院ICU病房检出的14株耐碳氢酶烯类鲍曼不动杆菌均携带blaOXA-23、blaOXA-51和blaOXA-64基因,并且有1株同时携带blaOXA-58基因,与以往研究不同,应引起临床重视。     

黑龙江东部地区流行鲍曼不动杆菌OXA及AmpC酶基因型分析

目的了解本院鲍曼不动杆菌苯唑西林酶(OXA)和头孢菌素酶(Amp C)相关耐药基因的情况,为临床抗菌药物的合理选择提供依据。方法收集2013年9月-2014年9月本院临床分离鲍曼不动杆菌(AB)标本,VITEK-Ⅱ全自动微生物鉴定/药敏测试系统筛选并进行16S rRNA鉴定;多重PCR检测鲍曼不动杆菌携带的碳青霉烯酶相关耐药基因blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58、blaADC、blaDHA,对阳性产物DNA序列进行同源性分析。结果 66株(95.7%)携带blaOXA-51基因,32株(46.4%)携带blaOXA-23基因,18株(26.1%)携带blaOXA-24基因,6株(8.7%)携带blaOXA-58基因,53株(76.8%)携带blaADC基因。26株碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌中,25株(96.2%)携带balOXA-51基因,24株(92.3%)携带blaADC基因,22株(84.6%)携带blaOXA-23基因,6株(23.1%)携带blaOXA-24基因,3株(11.5%)同时携带blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51及blaADC基因。结论产blaOXA-51、blaOXA-23、blaADC型β-内酰胺酶可能是本院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药的主要原因,另外本院存在blaOXA-24型耐药基因鲍曼不动杆菌的区域性流行。     

鲍氏不动杆菌的耐药性分析及β-内酰胺类耐药基因的初步研究

目的分析临床分离的鲍氏不动杆菌耐药性,研究耐亚胺培南菌株的碳青霉烯酶基因型。方法利用VITEK-2系统检测85株鲍氏不动杆菌的药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)技术检测耐亚胺培南菌株的碳青霉烯酶基因型。结果 85株鲍氏不动杆菌对氨苄西林的耐药率最高,为94.1%,对亚胺培南的耐药率为64.7%;亚胺培南的耐药的菌株中携带OXA-23基因有46株,占83.6%,携带OXA-64-like基因有32株,占58.2%,携带OXA-58基因有13株,占23.6%,以上阳性产物经测序比对与GenBank提供的标准序列99.0%同源;其余OXA-20、OXA-24、OXA-48基因型检测结果均为阴性。结论医院检测的鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类耐药严重,并以携带OXA-23基因型碳青霉烯酶为主。     

OXA-23基因阳性耐亚胺培南鲍曼不动杆菌感染暴发调查研究

目的了解某院神经内科重症监护室(ICU)暴发流行耐亚胺培南鲍曼不动杆菌感染的基因型及耐药机制。方法以API20NE鉴定菌株,纸片扩散法测定分离菌株对常用抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应(PCR)扩增3种酶基因(OXA、IMP、VIM),并对产物进行测序。结果患者痰标本分离的7株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均携带OXA-23基因,未检出IMP、VIM基因。结论此次暴发流行中,耐碳青霉烯类药物的鲍曼不动杆菌携带的耐药基因为OXA-23基因。     

对亚胺培南不敏感菌株的产碳青霉烯酶的情况分析

目的:探讨对亚胺培南不敏感的革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的分布与变迁情况,为临床合理诊治提供指导。方法:收集2005年5月-2009年8月间临床分离的革兰阴性杆菌,用K-B法筛选对亚胺培南不敏感的菌株;改良Hodge试验检测革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的情况;核酸扩增碳青霉烯酶相关基因NDM-1、KPC、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58。结果:铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌是碳青霉烯类药物不敏感的主要病原菌,54株亚胺培南不敏感的菌株中Hodge试验阳性5株,阳性率为9.3%。携带耐药基因包括IMP 2株,VIM 2株,OXA23 3株,OXA51 2株,OXA65 1株。其中有2株同时携带两种耐药基因。结论:我院亚胺培南不敏感分离株与产碳青霉烯酶IMP、VIM、OXA51、OXA23、OXA65耐药基因有关。     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶表型与基因型研究

目的研究某综合医院临床分离耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因型携带状况,为临床合理用药及医院感染控制提供依据。方法对2008年1月-2009年10月临床分离的100株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌,应用聚合酶链反应检测其金属β-内酰胺酶的耐药基因:blaIMP、blaVIM、blaSIM-1和OXA型碳青霉烯酶的耐药基因:blaOXA-23、blaOXA-24。结果所有受试验菌株均未检测到金属β-内酰胺酶耐药基因blaIMP、blaVIM、blaSIM-1和OXA-24型碳青霉烯酶的耐药基因,PCR检测到79株菌携带blaOXA-23,在阳性菌株中随机选取2株测序,在网上与NCBI在线数据库的已知产OXA-23碳青霉烯酶鲍氏不动杆菌进行比对,与登录号EF534259.1的同源性为100.0%。结论某综合医院临床分离耐亚胺培南鲍氏不动杆菌未产金属β-内酰胺酶,主要耐药机制是产OXA-23型碳青霉烯酶。