高糖刺激大鼠肾间质成纤维细胞TGF-β、CTGF及α-SMA作用研究

目的探讨高糖对大鼠肾间质成纤维细胞株NRK49f转化生长因子-β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法将处于对数生长期的大鼠肾间质成纤维细胞株NRK49f用无血清高糖DMEM培养12h、24h及48h,同时设空白对照组,用Western Blot及实时定量RT-PCR法检测并分析各组细胞TGF-β、CTGF及α-SMA表达情况。结果高糖DMEM作用于NRK49f12h即可见TGF-β、CTGF蛋白表达均有增加趋势,与正常对照组比较,高糖刺激24h及48h组TGF-β相对表达量均明显增加,差异有统计学意义(P0.05),且与高糖12h组比较,二者相对表达量变化明显增加(P0.05);高糖DMEM作用于NRK49f12h即可见TGF-β、CTGF mRNA表达均增加,至高糖刺激培养细胞24h及48h时,二者相对表达量均明显高于对照组及高糖培养12h组,差异均有统计学意义(P0.05);高糖DMEM作用于NRK49f24h时可见α-SMA表达条带,至高糖DMEM培养48h时,α-SMA相对表达量最高。结论高糖可刺激体外培养的肾间质成纤维细胞表达TGF-β和CTGF的转录和翻译,并可刺激其表达α-SMA。     

结缔组织生长因子在IgA肾病肾间质纤维化中的表达及意义

目的检测结缔组织生长因子（CTGF）在IgA肾病（IgAN）肾小管间质中的表达，观察CTGF在肾脏纤维化中的作用。方法以10例肾小球微小病变型（MCD）作为对照，选择原发性IgAN 42例，根据小管间质病变分组，应用免疫组化方法检测各组中C-3GF、转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，并将CTGF、TGF-β1、α-SMA的表达，间质纤维化程度和患者血肌酐（Scr）水平进行比较。结果CTGF主要表达于肾小管上皮细胞和一些肾间质细胞胞浆，CTGF表达量与肾小管间质病变程度成正比。CTGF与TGF-β1、α-SMA的表达量成正相关，与患者Scr升高水平成正比。结论随着慢性肾小管间质病变程度加莺，CTGF蛋白质分子、TGF-β1、α-SMA的表达量明显增加。CTGF作为TGF-β1的下游因子，可能通过促进间质肌成纤维细胞（MyoF）的形成而参与间质纤维化过程。     

银杏叶提取物抑制肾间质纤维化作用研究

目的以单侧输尿管结扎法(UUO)复制大鼠肾间质纤维化模型,探讨银杏叶提取物(GBE)防治肾间质纤维化效果及机制。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶治疗组及贝那普利治疗组,以碱水解法测定各组大鼠羟脯氨酸含量;免疫组化法和实时定量RT-PCR法检测各组大鼠肾脏组织TGF-β1和CTGF表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织羟脯氨酸含量均明显增高,差异有统计学意义(P0.05),银杏叶治疗组及贝那普利治疗组大鼠肾组织羟脯氨酸含量比较,差异无显著性,但均明显低于模型组大鼠,差异有统计学意义(P0.05);模型组大鼠左侧肾间质TGF-β1和CTGF表达量均明显升高,与假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05),而二者在银杏叶治疗组及贝那普利治疗组大鼠肾间质表达量差异无显著性,但均明显低于模型组大鼠,差异有统计学意义(P0.05)。结论 GBE延缓肾间质纤维化的机制与其抑制TGF-β1/CTGF通路有关,这可能是GBE的治疗靶点之一。     

维甲酸对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其可能机制.方法采用单侧输尿管结扎(UUO)大鼠模型.将40只SD大鼠随机分为5组:假手术组(A组)、UUO组(B组)、UUO 苯那普利组(C组)、UUO 维甲酸小剂量组(D组)、UUO 维甲酸大剂量组(E组).于造模前1d分别给C、D、E组苯那普利10mg/(kg·d)、全反式维甲酸10mg/(kg·d)和20mg/(kg·d).A、B组给予同等剂量的生理盐水.于术后第14d取术侧肾组织行HE、Masson染色评定各组肾小管间质损害程度,免疫组织化学半定量检测各组肾间质CTGF、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原(colⅢ)的表达.结果各造模组CTGF、TGF-β1、α-SMA及colⅢ的表达及肾小管间质损伤指数明显高于A组(P＜0.05),而全反式维甲酸或苯那普利均能明显抑制此变化.结论维甲酸及苯那普利可能通过下调CTGF而减轻肾间质纤维化.     

银杏叶提取物对体外培养大鼠肾成纤维细胞作用的实验研究

目的观察银杏叶提取物（ginkgobiobaextract,GBE）对大鼠肾问贡成纤维细胞增殖能力的影响,及其对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导肾间质成纤维细胞表达转化生长因子β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的抑制作用。方法取sD大鼠肾间质成纤维细胞进行体外培养并鉴定,以未处理细胞作为正常对照组（C）,将AngⅡ作为刺激因素,分别加入终浓度为0,25,50,100和200mg·L-1的GBE,采用MTT法检测GBE对各组细胞增殖能力的影响,RT-PCR检测各组细胞TGF-β1。和C3GFmRNA表达。结果与正常对照组比较,AngⅡ刺激后使细胞增殖能力明显增强（P〈0．05）,AngⅡ的这种作用可被含GBE的培养液所抑制,且与GBE的浓度和培养时间有关;RT-PCR结果显示,AngⅡ组细胞TGF-β1及CIGF mRNA表达量明显高于正常对照组（P〈0．01）,GBE则可以抑制AngU诱导的TGF-β1及CIGFmRNA表达量的上调（P〈0．05,P〈0．01）。结论银杏叶提取物能抑制大鼠肾成纤维细胞增殖,并且下调AngⅡ诱导的TGF-β1及C3GFmRNA的过表达,这可能是银杏叶提取物防治肾纤维化的作用机制之一。     

GBE抑制UⅡ介导的大鼠心肌成纤维细胞ECM合成和分泌作用

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对尾加压素Ⅱ(UⅡ)介导的成纤维细胞(CFs)过度合成和分泌ECM的抑制作用。方法以UⅡ刺激原代培养的新生大鼠心肌CFs,同时加入GBE进行干预,以比色法测定培养上清中的羟脯氨酸含量,以ELISA法测定培养细胞中Ⅰ型胶原(ColⅠ)含量,以Real-time PCR法测定各组细胞中TGF-β和CTGF mRNA表达。结果与正常对照组比较,UⅡ处理组细胞培养上清中羟脯氨酸及Col I含量显著增加(P0.05);与UⅡ处理组比较,GBE高、中剂量组培养上清中羟脯氨酸及Col I含量均显著降低(P0.05),GBE低剂量组羟脯氨酸含量亦较UⅡ处理组明显降低(P0.05);Real-time PCR结果显示,与正常对照组比较,UⅡ处理组细胞TGF-β及CTGF mRNA表达显著增加(P0.05);与UⅡ处理组比较,GBE高、中、低3个剂量组TGF-β表达量均下降(P0.05),而对CTGF,仅高剂量组有明显统计学意义(P0.05)。结论 GBE抑制CFs胶原过度合成和分泌作用可能是通过其抑制TGF-β、CTGF途径实现的。     

绞股蓝总皂甙对单侧输尿管结扎大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究绞股蓝总皂甙(GPs)对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达及肾间质纤维化的影响。方法:采用UUO大鼠模型,将大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、GPs组、缬沙坦组。假手术组和模型组仅给予标准饲料30g,GPs组和缬沙坦组于术前3d至术后9d每天分别给予GPs200mg/(kg·d)、缬沙坦24mg/(kg·d)灌胃,第9天处死各组大鼠。免疫组化法检测各组肾组织CTGF、转换生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;RT-PCR方法检测各组CTGFmRNA含量;Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果:模型组CTGF、TGF-β1、α-SMA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组(P<0.01),而GPs组和缬沙坦组各项指标明显低于模型组(P<0.01);GPs组与缬沙坦组差异无显著性(P>0.05)。各项指标作相关分析,CTGF与肾小管间质损伤指数(r=0.756,P<0.01)、TGF-β1(r=0.879,P<0.01)、α-SMA(r=0.892,P<0.01)为正相关关系。结论:GPs可以抑制肾纤维化时CTGF表达,从而...     

活性维生素D_3对大鼠肾小管间质纤维化的影响及其机制研究

目的:观察活性维生素D_3对大鼠肾小管间质纤维化的影响及其可能机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、UUO+低剂量活性维生素D_3组(LV组)、UUO+大剂量活性维生素D_3组(HV组),每组10只。采用单侧(左)输尿管结扎法建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型。Sham组只游离左侧输尿管而不结扎。LV组与HV组分别予以0.03μg/(kg·d)、0.06μg/(kg·d)活性维生素D_3(溶于花生油)腹腔注射,Sham组和UUO组均予以等体积花生油腹腔注射。术后14 d处死大鼠,采集血、肾脏标本,并检测血清钙、磷、肌酐(SCr)、甲状旁腺激素(PTH)。制作肾脏病理组织切片,行H-E、Masson染色,在光镜下观察肾小管间质损伤及纤维化情况。采用免疫组织化学法检测肾小管间质中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)与转化生长因子β(TGF-β)的表达。结果:与UUO组相比,LV组和HV组SCr水平[(39.0±1.83)μmol/L、(36.0±2.11)μmol/L比(43.1±5.55)μmol/L]、肾小管间质纤维化指数(2.00±0.12、1.70±0.10比2.80±0.11)、α-SMA表达(0.22±0.02、0.20±0.03比0.24±0.02)、TGF-β表达(0.26±0.03、0.25±0.03比0.32±0.04)均显著下降(P0.05),E-cadherin表达(0.30±0.08、0.34±0.11比0.22±0.07)明显升高。与LV组相比,HV组SCr水平肾间质纤维化指数、肾间质损伤指数、α-SMA表达、TGF-β表达明显下降(P0.05),E-cadherin表达上升(P0.05)。相关性分析显示,TGF-β、α-SMA表达与肾间质纤维化指数正相关,E-cadherin表达与肾间质纤维化指数负相关;TGF-β表达与α-SMA表达正相关,E-cadherin与TGF-β负相关;α-SMA表达与E-cadherin表达负相关。结论:活性维生素D_3可改善UUO大鼠肾小管间质纤维化,大剂量活性维生素D_3改善作用优于小剂量,其机制可能是:通过抑制TGF-β的过度表达从而抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化进而改善肾小管间质纤维化。     

银杏叶提取物减轻糖基化终末产物对大鼠肾脏TGF-β及CTGF表达的影响

目的观察银杏叶提取物对糖基化终末产物（AGEs）引起的大鼠肾脏TGF-β及CTGF过表达的影响。方法每日给正常大鼠尾静脉注射AGE-修饰大鼠血清蛋白（AGEs组）,部分大鼠同时灌胃给予银杏叶提取物（GBE组）,注射天然大鼠血清蛋白（RSP组）和不施加处理的正常大鼠（空白对照组）作为对照。Elisa法检测肾皮质TGF-β及CTGF蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β及CTGF mRNA的表达。结果与RSP组及空白对照组比较,AGEs组大鼠尿蛋白含量明显增加（P〈0.05）,TGF-β及CTGF蛋白、mRNA的表达均增高（P〈0.01）,给予GBE后尿蛋白含量明显降低（P〈0.01）,TGF-β及CTGF蛋白含量及mRNA表达均明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论 GBE改善AGEs引起的肾功能变化,减轻AGEs诱导的大鼠肾皮质TGF-β及CTGF过表达。提示GBE可通过抑制AGEs引起的TGF-β及CTGF过表达而在糖尿病中起到肾脏保护作用。     

糖尿病大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化及氯沙坦对其的影响

【目的】观察糖尿病大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)及氯沙坦干预对其的影响。【方法】雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组;后者经STZ诱导糖尿病模型成功后再随机分为糖尿病组和氯沙坦干预组[氯沙坦20mg/(kg·d)]。分别于第8周和第16周时每组各处死5只大鼠。测定24h尿蛋白排泄量、血肌酐;留取肾组织作HE和Masson染色,观察肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积;免疫组织化学法检测肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达,并作半定量分析。【结果】①与对照组相比,糖尿病模型组大鼠肾小管间质损伤指数和肾间质胶原面积明显增加(P<0.01);②糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞α-SMA、Vimentin和TGF-β1阳性表达均显著高于对照组,α-SMA表达和TGF-β1表达呈正相关(rs=0.810,P<0.01)。③氯沙坦组尿蛋白排泄量、肾小管间质损伤和间质纤维化程度较糖尿病组减轻,肾小管上皮细胞α-SMA、Vimentin与TGF-β1表达强度较糖尿病组显著下调(P<0.01)。【结论】①糖尿病大鼠肾脏病理进程中存在TEMT;②氯沙坦可下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、Vimentin、α-SMA表达,阻抑糖尿病肾小管上皮细胞发生TEMT而发挥肾脏保护作用。     

肾康注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的研究肾康注射液对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用。方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)作为阳性对照,将大鼠随机分为:模型组(UUO)、肾康组、缬沙坦组,术后第14天处死大鼠,收集血清测定肌酐、尿素氮水平,肾组织用HE染色及免疫组化半定量检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果肾康组、缬沙坦组的肾小管间质TGF-β1、α-SMA的表达均明显低于UUO组;两治疗组组间比较,肾康组对TGF-β1、α-SMA表达的抑制作用同于缬沙坦组。结论中药肾康可减轻肾间质纤维化。     

冬虫夏草对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞ILK表达的影响

[目的]观察糖尿病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶(ILK)的表达及冬虫夏草对其表达的影响.[方法]雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(N组,n=12)、糖尿病模型组(D组,n=12)、糖尿病冬虫夏草干预组[C组,n=12,冬虫夏草1000 mg/(kg·d)灌胃].成模后第8周末及16周末各组分别处死6只大鼠,测定24 h尿蛋白排泄量、血肌酐;HE及MASSON染色法观察肾脏病理改变;免疫组织化学法检测ILK、E钙粘蛋白(E-cad)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达.[结果]①与N组比较,D组大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积明显增加(P<0.01).②D组大鼠肾小管上皮细胞E-cad阳性表达显著低于N组,TGF-β1、ILK和α-SMA阳性表达均显著高于N组;E-cad表达和TGF-β1表达呈负相关(rs=-0.60,P<0.05);ILK、α-SMA表达和TGF-β1表达呈正相关(rs=0.88,P<0.01;rs=0.91,P<0.05).③C组大鼠肾小管间质损伤指数、肾闻质胶原面积较D组明显减弱,其肾小管上皮细胞的E-cad的表达较D组明显增加,TGF-β1、ILK和α-SMA表达较D组均明显减弱(P<0.01).[结论]冬虫夏草能通过下调ILK表达发挥肾脏保护作用.     

延肾口服液对肾间质纤维化大鼠肾组织转化生长因子-β和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 探讨延肾口服液对肾间质纤维化(RIF)大鼠的影响及可能的作用机制.方法 将75只SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组和模型组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)复制RIF模型,成模大鼠再随机分为模型组、贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组,每组15只.术前1 d治疗组开始灌胃贝那普利3.5 ml/d及延肾口服液2.8 ml/d、1.4 ml/d;假手术组、模型组给予等量生理盐水.术后8周留取血、尿标本,行血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)及尿肌酐(UCr)、尿尿素氮(UUN)和24 h尿蛋白定量测定;处死大鼠取肾组织,苏木素-伊红(HE)染色观察各组RIF程度;用免疫组化二步法和半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白和mRNA表达.结果 ①光镜下观察,模型组肾小管上皮细胞呈现不同程度的萎缩、变性及坏死,小管周围肾间质间隙增宽;贝那普利组和延肾口服液高、低剂量组部分肾小管轻度扩张,病变程度轻于模型组.②与假手术组比较,模型组UUN、UCr、BUN及TGF-β、α-SMA的蛋白和mRNA表达均明显升高(均P＜0.01);与模型组比较,贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组TGF-β、α-SMA蛋白和mRNA[吸光度(A)值]表达均显著减少,以延肾口服液高剂量组减少更显著(TGF-β蛋白:0.72±0.24比1.78±0.33,α-SMA蛋白:0.87±0.55比1.59±0.44;TGF-β mRNA:1.68±0.53比3.14±0.44,α-SMA mRNA:1.66±0.14比3.41±0.10,均P＜0.01);贝那普利组和延肾口服液高、低剂量组UUN(mmol/L)、UCr(μmol/L)、BUN(mmol/L)均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),以延肾口服液高剂量组降低更显著(UUN:0.56±0.19比1.34±0.22,UCr:2788.00±178.98比3652.75±188.26,BUN:7.25±0.47比16.30±0.47,均P＜0.01),延肾口服液高剂量组与贝那普利组相比差异无统计学意义(均P＞0.05),SCr及24 h尿蛋白定量在各组间比较差异均无统计学意义 (均P＞0.05).结论 延肾口服液延缓UUO 模型大鼠RIF的作用与其抑制TGF-β和α-SMA表达有关,其疗效与贝那普利组相似,并表现出明显的量效关系.     

辛伐他汀对大鼠肾间质成纤维细胞增殖及α5整合素表达的影响

目的研究辛伐他汀对培养的大鼠肾间质成纤维细胞TGF-β1激活后细胞增殖及表面α5整合素表达的影响。方法不同浓度辛伐他汀加入到含有TGF-β1培养液培养的大鼠肾间质成纤维细胞,分别采用MTT法及细胞流式仪检测细胞的增殖,RT-PCR法检测大鼠肾间质成纤维细胞表面α5整合素的表达。结果辛伐他汀能抑制由TGF-β1所引起的大鼠肾间质成纤维细胞的增殖,阻止细胞由G1期进入S期。辛伐他汀能显著抑制TGF-β1对大鼠肾间质成纤维细胞表面α5整合素的表达促进作用,同时随着辛伐他汀浓度的增加,抑制作用明显增强。结论辛伐他汀能抑制由TGF-β1所引起的大鼠肾间质成纤维细胞的增殖及细胞表面α5整合素的表达。     

肾间质纤维化中结缔组织生长因子（CTGF）与肾小管上皮细胞表型转化的关系

目的研究肾间质纤维化过程中CleF与肾小管上皮细胞表型转化的关系方法采用免疫组化方法,检测各组肾活检标本CTGF和α-SMA的表达。结果CTGF主要表达于肾小管上皮细胞和一些肾间质细胞胞浆,并且随间质病变的加重,表达量增加,范围增大;α-SMA在病变肾间质区域表达增强,一些管腔破坏和萎缩的肾小管上皮细胞也可见表达,阳性分布区域与CTGF相似。肾小管间质中CTGF、α-SMA表达量之间呈正相关,CTGF和α-SMA表达量与肾间质纤维化病变程度呈正相关关系。结论CTGF可能通过促进间质中肌成纤维细胞的形成而参与肾间质纤维化的形成,CTGF的表达上调对肾脏疾病有预后价值。     

环氧合酶-2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对梗阻性肾病大鼠模型肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响及机制。方法：采用单侧输尿管结扎(UUO)建立梗阻性肾病模型,并随机分为模型组和治疗组,另设假手术组作对照。治疗组每日给予塞来昔布100mg／kg,模型组、假手术组每日给予等体积的生理盐水于造模前1d至造模后14d灌胃,分别于UUO后3d、7d、14d分批处死,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1、CTGF的基因表达,免疫组化技术检测TGF-β1、CTGF、α-SMA、FN的蛋白表达,放免法检测组织内cAMP的水平。结果：与假手术组相比,模型组TGF-β1、CTGF的基因表达显著上调,cAMP的水平下降(P<0．001)。塞来昔布对梗阻肾TGF-β1的表达无显著改变,但能升高组织内cAMP水平,抑制CTGF的表达,纤维化程度减轻。结论：在梗阻性肾病大鼠中TGF-β1、CTGF的表达均显著升高,选择性COX-2抑制剂通过升高组织内cAMP的水平来抑制TGF-β1的下游因子——CTGF的表达延缓肾间质纤维化。     

雷公藤甲素对T2DM大鼠肾小管-间质损伤的保护作用

目的：观察雷公藤甲素（Triptolide,TP）对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾小管-间质骨形态发生蛋白-7（BMP-7）、结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响及保护作用。方法：Wistar大鼠50只,随机分为正常组（NC组）、模型组（DM组）和观察组（TP组）。DM及TP组大鼠均采用高脂高糖联合小剂量STZ建立T2DM模型。模型成功后,TP组大鼠给予TP 200μg.kg-1.d-1灌胃。结果：治疗8周后,与NC组比较,DM组及TP组大鼠肾重/体重（KW/BW）、空腹血糖（FBG）、尿白蛋白（UAL）及CTGF、TGF-β1mRNA蛋白的表达、ED-1阳性细胞数均明显增多（P〈0.05,0.01）,TP组低于DM组（P〈0.05,0.01）;肾组织BMP-7mRNA及蛋白表达下调（P〈0.01）,TP组高于DM组（P〈0.05）。相关分析表明,尿蛋白与BMP-7 mRNA存在负相关,与CTGF、TGF-β1mRNA存在正相关;肾小管-间质内ED-1阳性细胞数与TGF-β1的表达明显相关;TGF-β1与CTGF的表达呈正相关,而与BMP-7存在负相关（均P〈0.01）;萎缩肾小管比例及间质纤维化均与TGF-β1、CTGF表达明显正相关,与BMP-7负相关（均P〈0.05）。结论：TP对T2DM大鼠肾小管-间质损害具有明显的保护作用,其机制可能与下调CTGF、TGF-β1及部分恢复BMP-7的表达有关。     

TGF-β1 mRNA和CTGF mRNA在大鼠原代培养肺成纤维细胞中的表达

目的检测原代培养大鼠肺纤维化的成纤维细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)m RNA和结缔组织生长因子(CTGF)m RNA的表达。方法 12只Wistar大鼠,随机分为28 d正常组(生理盐水组)和28 d模型组(博莱霉素A2组),于实验第28天将大鼠处死,行HE和VG染色。分离大鼠肺组织用于体外原代培养成纤维细胞,传代后的成纤维细胞通过细胞爬片核酸原位杂交检测TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA的表达情况。结果 HE染色显示28 d模型组肺泡结构破坏并伴有成纤维细胞灶形成,VG染色示28 d模型组肺间质可见大量红色的胶原纤维沉积。波形蛋白(vimentin)免疫组化鉴定所培养细胞为成纤维细胞。TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA细胞爬片原位杂交结果显示,28 d模型组大鼠肺成纤维细胞胞质中可见棕黄色颗粒,两种因子均呈阳性表达,28 d正常组胞质内几乎未见黄色颗粒,两种因子均呈阴性表达。结论原代培养大鼠肺成纤维细胞中TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA均在28 d模型组呈阳性表达,提示TGF-β1和CTGF参与了肺纤维化的发病过程。     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的研究

目的:探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用。方法:采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。将24只大鼠随机均分为假手术组、模型组和姜黄素组。从制模后2 d起,姜黄素组给予100 mg.kg-1.d-1姜黄素腹腔注射。术后4周心脏穿刺抽血,测定各组大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)值。处死大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组化方法检测肾组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达部位及表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BUN水平显著增加(P<0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P<0.01),肾组织内TGF-β1、α-SMA和Vimentin的蛋白表达均显著上调(P均<0.01)。姜黄素干预后,上述上调指标都被显著抑制(P<0.05或P<0.01)。结论:姜黄素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化而减轻肾间质纤维化。     

纤维细胞生长因子1对转化生长因子β1诱导的人肾成纤维细胞活化纤维化的保护作用

目的:探讨纤维细胞生长因子1(fibroblast growth factor 1,FGF1)对转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)诱导的人肾成纤维细胞活化纤维化的保护作用及机制。方法:将NRK-49F细胞过表达FGF1后,用2 ng/mL TG F-β1刺激诱导肾纤维化模型。24h后观察细胞密度及BrdU阳性率;MTT法测定细胞活力;细胞免疫荧光和蛋白质印迹法检测NRK-49F细胞中α-SMA和FN蛋白表达水平;细胞免疫荧光和蛋白质印迹法检测NRK-49F细胞中p-S6,p-Akt(Ser473),β-caten in和p-Smad 3 (Ser 423/425)蛋白的表达和分布的变化。结果:外源性TGF-β1促进肾成纤维细胞体外增殖,而过表达FGF1可以降低TGF-β1诱导的肾成纤维细胞增殖,减轻由TGF-β1处理刺激的肾成纤维细胞活化;FGF1过表达可以抑制TGF-β1诱导的Akt/β-catenin改变,但不抑制Smad信号转导。结论:FGF1可能是通过Akt/β-catenin通路实现对TGF-β1诱导的人肾成纤维细胞活化纤维化的保护作用。