血液透析患者血流感染CRKP耐药性及耐药基因型

目的 分析血液透析患者血流感染碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药情况及耐药基因型。方法 收集2017年11月-2020年5月于湖州市中心医院血液净化中心治疗的血液透析患者血液标本分离的200株肺炎克雷伯菌,对分离的CRKP菌株进行药敏试验,采用聚合酶链式反应(PCR)检测耐药基因、血清荚膜分型以及毒力基因,并采用多位点序列分型(MLST)分析CRKP分型。结果 200株血流感染肺炎克雷伯菌中CRKP菌株为53株(26.50%),53株CRKP对几乎所有碳青霉烯类和其他β-内酰胺类抗菌药物耐药,对氨基糖苷类抗菌药物耐药率>45.00%; 53株CRKP共检出48株携带KPC-2、NDM-1、CTM-M9基因菌株,未检出携带碳青霉烯酶基因菌株5株;53株CRKP仅检测到4株K1型菌株,共有58.49%(31/53)CRKP携带毒力基因,rmpA2、iutA为两种主要的毒力基因;53株CRKP中50株为ST11型,ST550、ST1517、ST2230各1株。结论 血液透析患者血流感染CRKP耐药现象较为严峻,其主要耐药机制是携带耐药基因KPC-2,主要毒力基因为rmpA2、iu...     

ICU患者感染CRKP与CSKP的耐药基因和毒力基因

目的 分析重症监护病房(ICU)患者感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)与碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的耐药基因及毒力基因。方法 选择2015年11月-2019年11月浙江大学附属第一医院ICU收治的感染肺炎克雷伯菌患者297例,根据其感染菌株是否耐碳青霉烯类分为CRKP组86例和CSKP组211例,采用全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,采用多位点序列分型(MLST)分析CRKP与CSKP菌株基因分型和同源性,采用黏液丝试验检测毒力表型,采用聚合酶链式反应(PCR)检测荚膜血清型及毒力基因。结果297株肺炎克雷伯菌共检出CRKP菌株86株和CSKP菌株211株,CRKP菌株对常用抗菌药物的耐药率高于CSKP菌株(P<0.05);86株CRKP菌株共检测到6个ST型,以ST11型(59.30%)为主,211株CSKP菌株共检测到12个ST型,以ST405型(21.33%)为主;86株CRKP菌株检出K5型4株(4.66%),K1型3株(3.49%),211株CSKP菌株共检出74株(35.07%)高毒力荚膜血清型;CSKP组magA、ybt、kfu基因阳性率高...     

临床分离碳青霉烯类耐药与非耐药肺炎克雷伯菌株的血清荚膜类型特征及毒力基因分布研究

目的分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)和碳青霉烯类非耐药肺炎克雷伯菌(non-CR KP)的荚膜血清型和携带毒力基因的情况。方法选取医院临床微生物室2015年3月-10月保留的各种临床标本分离出的79株肺炎克雷伯菌,采用改良Hodge试验进行耐药表型筛查,黏液丝试验确定菌株的高黏液(HM)表型,采用PCR和基因测序检测耐药基因、荚膜血清型及毒力基因,通过ERIC-PCR分析菌株间的同源性。结果从所有样本中分离到CRKP31株,non-CR KP 48株,改良Hodge阳性21株,HM表型阳性率为16.5%(13/79),其中5株为CRKP,荚膜血清型以K1型为主;荚膜血清型中以K1、K2型为主,K5、K20、K54和K57阳性率较低,各只检测出一株;CRKP中检测到有一株携带KPC耐药基因的K1型肺炎克雷伯菌;毒力基因rmpA,aerobactin和iroN三者分布具有高度一致性,且在CRKP和non-CR KP肺炎克雷伯菌中的检出率差异明显(P0.05);毒力分数柱状图和ERIC-PCR图谱分别显示CRKP呈明显集中趋势,菌株间同源性高,而non-CR KP呈离散趋势,无明显同源性。结论 CRKP在携带毒力基因和高毒力荚膜血清型阳性率上比non-CR KP低;CRKP间以克隆为主要传播方式,non-CR KP间以非克隆为主要传播方式。     

合肥某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及毒力因子分析

目的探讨合肥地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制及毒力因子的特点。方法收集2015年1月-2017年1月合肥市第一人民医院南区分离的38株CRKP,采用全自动微生物系统、改良Hodge试验和EDTA协同试验、基因测序、膜蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对其药敏、耐药表型、耐药基因、毒力位点、膜蛋白突变进行检验。结果 38株CRKP仅替加环素、阿米卡星、左氧氟沙星和环丙沙星仍保持>60.0%的敏感性,其余均高度耐药。检出32株(84.21%)菌株携带了碳青霉烯酶耐药基因,其中肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶Ⅱ型(KPC-2)26株(68.4%),新德里β-内酰胺酶Ⅰ型(NDM-1)12株(31.58%);同时携带KPC-2和NDM-1 6株(15.8%);31株(81.58%)携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;25株(65.79%)存在膜孔蛋白基因缺失;选取2株膜孔蛋白缺失和2株膜孔蛋白不缺失的菌株进行菌株膜蛋白SDS-PAGE验证与基因检测结果一致。共检出荚膜K1型5株,K57型1株,其他32株属于尚未分型。黏液表型调控基因(rmpA)阳性16株,气杆菌属编码基因(aerobaction)阳性12株,其中10株两者均阳性。所有菌株Ⅰ型菌毛黏附蛋白编码基因(FimH-1)均阳性。结论本次分离的合肥地区CRKP以KPC和NDM型为主,同时检出了携带KPC的K1荚膜型高毒力菌株,应引起重视。     

儿童血流感染肺炎克雷伯菌毒力与耐药基因分析

目的探讨儿童血流感染肺炎克雷伯菌毒力和耐药情况。方法收集苏州大学附属儿童医院2017年1月-2019年12月从血流感染患儿血液标本中分离的63株肺炎克雷伯菌作为研究对象,采用全自动质谱仪鉴定菌株,纸片扩散法和全自动细菌鉴定药敏分析仪进行药敏分析,聚合酶链反应(PCR)检测菌株荚膜血清型、毒力基因和β-内酰胺类耐药基因。结果儿童血流感染肺炎克雷伯菌中K57为主要高毒力荚膜血清型,且所有菌株均检出毒力基因,其中53株占比84.13%携带高毒力基因,主要为iroB;其他毒力基因主要为mrkD、wabG、fimH、ycfM和Uge。药敏结果显示,血流感染肺炎克雷伯菌整体耐药率不高,但均检出β-内酰胺类耐药基因,其中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶基因携带率较高,而碳青霉烯酶基因携带率较低。此外,本研究中有1株为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),其携带多个β-内酰胺类耐药基因。同时,此CRKP荚膜血清型为K57,且携带高毒力基因iroB,因此为高毒力高耐药肺炎克雷伯菌(CR-HVKP)。结论苏州地区儿童血流感染肺炎克雷伯菌均携带毒力基因,主要为mrkD、wabG、fimH、ycfM、Uge和高毒力基因iroB,其β-内酰胺类抗菌药物耐药机制主要是携带SHV-11、FOX-1、ACT-1等基因。临床分离出1株血流感染CR-HVKP,应引起重视。     

2018-2020年江西省高毒力耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学特征

目的 分析江西地区高毒力耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR-hvKP)的流行病学和分子生物学特征。方法收集2018-2020年江西省11个地级市医院分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)菌株，对其进行药物敏感试验、耐药基因、荚膜血清型、毒力基因及多位点序列分型(MLST)分析。结果 共检出CRKP 749株，其中CR-hvKP 126株(16.82%);126株CR-hvKP主要分离于痰液(n=60,47.62%)和血液(n=41,32.54%);主要来自于重症监护室(ICU)(n=81,64.29%);药敏结果显示除阿米卡星和替加环素外，菌株对其他抗菌药物耐药率均较高；耐药基因检测结果显示，肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(bla_KPC)基因携带率最高(n=102,80.95%);荚膜血清型和毒力基因检测显示，K64型CR-hvKP检出最多(n=111,88.10%);ST分型提示，所检测引起脓肿的CR-hvKP均为产KPC酶的ST11菌株。结论 江西省CR-hvKP检出率较高，对绝大多数抗菌药物耐药，提示临床需合理使用抗菌药物。耐药基因和毒性基因携带率均较高，应进...     

高毒力和碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌血流感染临床及分子流行病学特征

目的 探讨高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)和碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)血流感染临床及分子流行病学特征。方法 收集2020年1月-2022年6月广东省人民医院经临床检验血培养确诊的由肺炎克雷伯菌所致血流感染患者的病历资料及相关菌株，共32株纳入研究，包括hvKp 16株、CR-hvKp 1株，共17株定义为hvKp; CRKP 15株。采用全基因组测序方法，分析菌株耐药基因、毒力基因分布特征及荚膜血清型。运用多位点序列分型(MLST)技术分析菌株序列型(ST)。结果 血流感染患者均伴有多种基础疾病，CRKP感染患者侵入性操作较多、病死率较高(P<0.05),患者主要分布于重症监护室(ICU)、感染科、儿科等科室。测序结果分析显示：CRKP主要携带bla_KPC-1、bla_NDM-1耐药基因，毒力基因以entA、entB、entE、fepA、fepC、fepG、ompA、xcpR、yagV/ecpE、ykgK/ecpR等为主，荚膜血清型以K14、K64为主，MLST分型结果以ST11为主。而hvKp主要携带的毒力基因以entA、ent...     

临床分离CRKP耐药和毒力基因检测及分子进化分析

 目的 了解临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药和毒力基因携带情况,为临床防治提供依据。方法 收集某院2020年3月—2021年3月临床标本分离的CRKP 36株,对菌株进行药敏鉴定,采用聚合酶链反应(PCR)扩增检测耐药基因、荚膜血清型基因、毒力基因,采用多位点序列分型(MLST)方法对菌株进行序列分型(ST分型),基于wzi测序结果进行血清型分型和分子进化分析。结果 36株CRKP均检出bla_KPC基因,未检出bla_IMP、bla_VIM、bla_OXA-48基因。黏液丝试验均为阴性,未检出K1、K2、K5、K20、K57五种常见荚膜血清型,36株CRKP rmpA2、wcaG、ybtS、aerobactin、iutA、iroN、ycf、mrkD、mrkA、silS、uge、Plvpk、fimH、wzi基因检出率为100%;TerW为86.11%;fimA、magA均为阴性。MLST结果分析显示,36株均为ST11型。仅32株成功测序wzi基因,wzi分型结果为K14.K64 96.88%(31/32),K24 3.12%(1/32)。基于测序结果构建分子进化树,结果显示32株菌中31株100%同源,1株与浙江菌株KP18069 99%同源。结论 该院CRKP对碳青霉烯类耐药的主要机制是携带bla_KPC基因,优势ST分型为ST11,wzi分型以K14.K64为主,且携带了大量的毒力基因。分子进化树提示存在同源性感染,怀疑有输入性传播,应及时采取防控措施,防止耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌医院传播。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学研究

目的分析武汉两所医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床分离株产碳青霉烯酶的情况,以及分子流行病学特征。方法收集武汉两所医院2018年1—10月临床分离的42株非重复CRKP,采用Carba NP试验方法对菌株产碳青霉烯酶情况进行初筛,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因携带情况,采用质粒接合试验分析耐药基因的水平转移情况,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行亲缘关系分析。结果 42株CRKP菌株中14株Carba NP试验阳性,其中有10株扩增出NDM-1基因,3株扩增出KPC-2基因。共13株CRKP碳青霉烯基因检测阳性,其中12株质粒接合试验成功。PFGE分析结果显示,携带NDM-1基因的CRKP菌株共分成6型,无明显优势型;携带KPC-2基因的CRKP菌株为同一型别。结论检出产NDM-1和KPC-2的CRKP菌株,质粒接合试验提示质粒介导的水平传播在碳青霉烯酶基因的播散过程中可能起重要作用。     

NICU耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药及多位点序列分析

目的分析NICU耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药及同源性,为临床防控CRKP提供实验依据。方法收集2016年1-12月某教学医院NICU首次分离的CRKP,使用PCR方法检测常见ESBLs基因(SHV、TEM、CTX-M1、CTX-M2、CTX-M8、CTX-M9)、AmpC酶基因(HAD、CMY)、碳青霉烯酶基因(KPC、NDM、SME、GES、VIM、IMP、OXA-48)和多粘菌素耐药基因MCR-1等,并采用多位点序列分析(MLST)方法分析同源性。结果共收集44株CRKP,KPC-2基因携带率为100%,DHA-1携带率为70.5%,CTX-M基因携带率为68.2%,MLST共有4类分型,ST11型35株,ST48型6株,ST134型1株,未分型4株。结论 NICU病区分离CRKP均为多重耐药,NICU以携带KPC-2基因的ST11型菌株流行为主,应规范抗菌药物使用,加强消毒隔离措施,控制流行传播。     

重症耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌肺部感染影响因素及分子流行病学

目的分析重症耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)肺部感染影响因素及分子流行病学特点。方法选取海南西部中心医院及三亚市人民医院肺炎克雷伯菌培养阳性的375例重症肺部感染患者,根据临床标本中是否分离出CRKP分为CRKP组、碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)组。分析重症肺部感染患者CRKP感染危险因素,以改良Hodge试验初筛CRKP碳青霉烯酶表型,聚合酶链反应(PCR)、质粒接合试验测定碳青霉烯基因携带与耐药基因水平转移,以脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析克隆相关性。结果 375例患者中共分离出非重复CRKP 105株,合并2种以上慢性病、感染前住院时间≥3周、留置插管2种、应用碳青霉烯类药物≥1周、近3个月应用三代/四代头孢菌素为CRKP感染的独立危险因素(P0.05);105株CRKP中,91株改良Hodge试验阳性(86.67%);91株改良Hodge试验阳性的CRKP菌株中79株携带bla_(KPC-2)基因(86.81%),33株携带bla_(NDM-1)基因(36.26%),3株携带bla_(IMP-4)基因(3.30%),未发现bla_(VIM)、bla_(OXA)基因;91株CRKP菌株血清型均为阴性,但携带毒力基因uge 87株、mrk D88株、ybtS 84株、kpn 86株、ent B91株,91株CRKP质粒接合试验成功;PFGE聚类结果显示91株CRKP可分为7个克隆型(ST),ST11为主要ST型(58株,63.74%)。结论引起医院重症肺部感染患者CRKP感染的因素较多,而携带bla_(KPC-2)及bla_(NDM-1)基因是主要机制,ST11是其主要克隆型,需尽早制定防控措施。     

CRKP碳青霉烯酶基因检测及同源性分析

目的 了解某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）碳青霉烯酶基因携带状况,以及菌株间的同源性,为预防和控制CRKP的克隆传播提供实验室依据。方法 收集2017年1-12月该院分离自临床各科室的CRKP 22株（K1~K22）,用药敏纸片扩散法和微量肉汤稀释法对药敏结果进行复核,采用改良Hodge试验和Carba NP试验检测菌株是否产碳青霉烯酶,应用PCR技术扩增产酶菌株常见的碳青霉烯酶基因并测序,运用多位点序列分型（MLST）和肠杆菌科基因间一致重复序列PCR（ERIC-PCR）进行同源性分析。结果 22株CRKP对厄他培南、亚胺培南、美罗培南的耐药率均为100%,对临床其他常见抗菌药物也高度耐药;13株改良Hodge试验阳性,14株Carba NP试验阳性。14株产酶菌株均携带KPC-2基因,K12菌株同时携带NDM-1基因。按MLST法可分为ST11（14株）、ST875（6株）、ST1964和ST571（各1株）,按ERIC-PCR法分型可分为A型（15株）、B型（6株）及C型（1株）。分型结果相同的菌株中K1~K6同属ICU,K7~K10同属脑血管外科,K15~K21同属新生儿科,对应患者有共同住院时间,且患者存在转科情况（K2、K8患者均由脑血管外科转入ICU,K13、K14分别从ICU转入血液内科、肾内科）。结论 该院2017年存在ST11型和ST875型CRKP的克隆流行,需加强医院感染预防与控制措施。     

重症监护病房耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学研究

 目的 分析重症监护病房(ICU)临床来源耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的分子特征及流行情况,为感染控制及药物治疗提供实验室数据。方法 收集2018年7月-2020年7月某院ICU分离的51株CRKP,采用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度,多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳分析菌株同源性,检测菌株耐药和毒力基因,接合试验验证质粒的转移性。结果 药敏试验显示,CRKP对头孢他啶/阿维巴坦全部敏感,对替加环素耐药率最低(3.9%),其次是阿米卡星(49.0%)、多粘菌素(64.7%),对亚胺培南(96.1%)、美罗培南(98.0%)、左氧氟沙星(98.0%)和头孢他啶(100.0%)均高度耐药。51株CRKP中,mCIM试验阳性菌株49株(96.1%),eCIM试验阳性菌株1株(2.0%)。碳青霉烯酶基因bla_KPC-2阳性菌株占96.1%。所有分离株中,高黏液表型阳性4株(7.8%),毒力基因阳性情况分别为:uge 100.0%,mrkD 94.1%,kpn 94.1%,fim-H 72.5%,aero 2.0%,rmpA 2.0%。ST11 CRKP在ICU中占98.0%(50/51),ST1373占2.0%(1/50)。检出1株ST1373的高毒力肺炎克雷伯菌。携带bla_KPC-2基因菌株的接合试验成功率为12.2%。结论 ICU存在产KPC-2的ST11 CRKP单克隆传播,同时携带一定的毒力基因。携带bla_KPC-2基因的质粒可通过接合水平传播。头孢他啶/阿维巴坦对CRKP有较高的敏感性,可供临床治疗选择使用。     

耐碳青霉烯类大肠埃希菌耐药基因型检测与同源性分析

目的探讨医院感染耐碳青霉烯类大肠埃希菌的耐药传播机制及克隆流行,为临床治疗提供参考依据。方法收集2011年1月-2012年6月医院临床分离的19株耐碳青霉烯类大肠埃希菌,采用PCR及序列比对等方法检测耐药基因的分布;脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型进行菌株同源性分析,数据采用SPSS 17.0进行统计分析。结果共19株耐碳青霉烯类大肠埃希菌,检出科室以EICU检出最多,共8株占42.11%;共检出产KPC-2型碳青霉烯酶菌株17株;11株细菌同时编码ESBLs基因,包括携带blaKPC-2、blaCTX-M-14和blaTEM-13种β-内酰胺酶基因;脉冲场凝胶电泳证实有9个克隆株,其中A克隆共8株细菌,是主要流行的克隆;多位点序列分型结果显示3株产KPC-2菌株均为ST131型。结论产KPC酶大肠埃希菌同时携带有其他耐药基因,CTX-M型超广谱β-内酰胺酶最为常见;ST131型产KPC-2大肠埃希菌在中国出现,同时也扩大了其在世界流行范围。     

耐亚胺培南肺炎克雷伯菌耐药基因检测与分子流行病学研究

目的对耐亚胺培南肺炎克雷伯菌的耐药基因携带情况及分子流行病学特征进行研究,以降低耐药率。方法对2013年10月-2014年5月临床分离的15株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌,采用Hodge试验检测碳青霉烯酶表型;采用PCR法检测碳青霉烯酶、AmpC酶和ESBLs耐药基因及整合子,进行测序及网上比对确定基因型;采用肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)和多位点序列分型(MLST)对菌株进行同源性和遗传相关性研究。结果 15株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌均检出KPC-2、TEM-1、SHV和CTX-M型基因,SHV12和CTX-M-24为主要基因亚型;未检测到IMP、VIM、OXA和NDM碳青霉烯酶基因和AmpC酶基因;各带有Ⅰ类整合子,整合的主要耐药基因为aadA2;同源性和遗传相关性分析,15株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌可分为A、B、C 3种ERIC类别,12株A菌为ST11型,2株B菌为ST290和ST147,1株C菌为ST967;15株肺炎克雷伯菌呈多药耐药或泛耐药,仅磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的敏感率50.0%。结论 15株肺炎克雷伯菌的多药耐药或泛耐药与菌株携带KPC-2碳青霉烯酶、CTX-M型ESBLs和其他β-内酰胺酶及整合子有关;产KPC-2肺炎克雷伯菌在神经外科病区呈克隆传播,ST11型菌株为此次流行的主要株;发现ST290和ST967型产KPC-2肺炎克雷伯菌。     

KL47型和KL64型ST11碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学特征

目的 探究KL47型和KL64型ST11碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)分子流行病学特征。方法 收集2018年12月-2019年6月徐州医科大学附属医院87株非重复CRKP菌株，通过多位点序列分型技术确定菌株分型，最终纳入62株ST11型CRKP进行研究。基于wzi基因测序将62株CRKP分为KL47和KL64两组。PCR检测5种常见的碳青霉烯酶基因(KPC、NDM、VIM、IMP、OXA-48)、6种超广谱β内酰胺酶基因(ESBL)(SHV、TEM、CTX-M1、CTX-M2、CTX-M8、CTX-M9)和8个毒力基因(rmpA、rmpA2、iucA、iroN、entB、ybtS、fimH、mrkD),统计分析比较ST11-KL47型菌株和ST11-KL64型菌株在耐药和毒力基因携带模式上的差别。结果 38株为ST11-KL47型菌株，24株为ST11-KL64型菌株。所有菌株均为多药耐药菌，对β内酰胺类、喹诺酮类抗菌药物表现为100.00%耐药，对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和阿米卡星耐药率均高于50%,对多黏菌素和替加环素完全敏感。两组菌株药敏结果无统计学差异。ST11型菌株均产KPC-2酶，携带的ESBL基因均以bla_(TEM-1)检出率最高。对于基因bla_(SHV),ST11-KL47型菌株以携带bla_(SHV-11)为主，ST11-KL64型菌株主要携带bla_(SHV-12)。ST11-KL64型菌株rmpA的检出率高于ST11-KL47菌株(P<0.05)。结论 本地区CRKP多为ST11型多药耐药菌，且ST11-KL64型肺炎克雷伯菌相比ST11-KL47型肺炎克雷伯菌携带更多的毒力基因和耐药基因，应合理使用抗菌药物并加强医院感染防控措施。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌产酶耐药机制及同源性分析

目的探讨肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要产酶机制及同源性。方法收集长沙市第一医院2016年12月-2017年12月临床分离的非重复碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)检测碳青霉烯酶,聚合酶链反应(PCR)法检测常见耐药编码基因。脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)分析同源性。结果共收集到57株CRKP,mCIM试验阳性率为91.23%(52/57)。PCR共检出6种耐药基因,包括blaSHV、blaCTX-M-9群、blaKPC-2、blaTEM、blaCTX-M-1群和blaNDM-1,检出率分别为94.74%、68.42%、68.42%、56.14%、3.51%和1.75%,其中2株携带blaCTX-M-1群的菌株经测序证实为blaCTX-M-80和blaCTX-M-123,blaCTX-M-9群中1株为blaCTX-M-27,2株为blaCTX-M-14,其余均为blaCTX-M-65。PFGE结果显示,57株CRKP可分为A~H共8种不同的型别,以A型为主,占76.79%,其中A6亚型占32.56%。MLST结果显示,共检出ST11和ST29两种型别,以ST11为主,占75.00%。结论该院临床分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的重要机制为产KPC-2型碳青霉烯酶,且同时携带多种超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因。PFGE和MLST结果表明:该院临床分离的CRKP存在克隆传播,需加强流行病学监控。     

中国2017—2019年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及流行克隆特征

 目的 探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）在我国流行的克隆及分子流行病学特征,为临床追踪、实时监控CRKP医院感染及防控提供实际数据支持。方法 通过文献检索收集2017—2019年全国CRKP菌株相关文献,纳入可提供菌株采集地,采用聚合酶链反应（PCR）方法检测耐药基因和多位点序列分型（MLST）分析得出ST型别的文献进行回顾分析,并使用BioNumerics创建最小生成树。结果 最终纳入40篇文献,共2 094株CRKP菌株,分布在全国6个地区（东北、华北、华东、华南、华中、西南）共15个省市,其中1 631株（77.89%） CRKP携带产KPC酶耐药基因,检出亚型主要为KPC-2型（1 014株,62.17%）。2 094株CRKP共检出12种耐药基因,其中KPC耐药基因在6个地区的检出占比均超过50%。859株CRKP经MLST,主要优势序列型别为ST11型（659/859,76.72%）,且在全国6个地区均有分布。产KPC-2酶的ST11型菌株（581/659,88.16%）为我国流行的最主要类型。结论 携带耐药基因的CRKP菌株在全国散播流行迅速,目前已遍布全国6个地区,应建立应对CRKP的综合防控措施,避免CRKP在医院内暴发流行。     

碳青霉烯类耐药高黏液型肺炎克雷伯菌分子流行病学和患者临床特征研究

目的 探讨高黏液型肺炎克雷伯菌(hypermucoviscous Klebsiella pneumoniae, HMKP)在碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant hypermucoviscous Klebsiella pneumoniae, CRKP)中的流行情况以及碳青霉烯类耐药高黏液型肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant hypermucoviscous Klebsiella pneumoniae, CR-HMKP)的分子生物学特征和患者临床特征。方法 收集浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院2019年1—12月间临床分离的不重复CRKP菌株228株,采用拉丝试验进行高黏液表型鉴定。测定所有菌株对不同抗菌药物敏感性,同时对CR-HMKP进行多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST), PCR法检测荚膜血清型、毒力相关基因和碳青霉烯酶基因, 并结合患者临床特征进行分析。 结果 228株CRKP中分离得CR-HMKP菌株10株(4.39%),碳青霉烯类耐药经典肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant classical Klebsiella pneumoniae, CR-cKP)菌株218株(95.61%)。10株(100.00%)CR-HMKP菌株为仅携带KPC-2基因ST11型,荚膜血清型以K57型(30.00%,3/10)为主。毒力基因rmpA, uge, wabG, fimH, iutA, iroN, entB, allS在10株CR-HMKP菌株中均存在, kfu基因在9株(90.00%)CR-HMKP中发现,未发现magA基因。较CR-cKP菌株,CR-HMKP菌株对阿米卡星、庆大霉素敏感性高;较CR-cKP患者,CR-HMKP感染更易发生多部位感染,更容易侵袭血液、无菌体液和呼吸道,且血清降钙素原、入院后前24 hSOFA评分和死亡率(60%,6/10)更高,差异均有统计学意义。 结论 该院CR-HMKP菌株均为携带bla_KPC-2基因的ST11型。CR-HMKP感染侵袭性更强,更容易侵袭血液,易导致多脏器功能障碍,它与死亡率增加密切相关,控制医院感染至关重要。特别是对于ST11 CR-HMKP菌株,在全球范围内的流行应引起关注。     

烧伤患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的环境追踪研究

 目的 研究烧伤患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）感染与环境菌株的同源关系,为烧伤患者CRKP感染的防治提供科学依据。方法 前瞻性监测某院烧伤科重症监护病房（ICU）2020年6-12月的CRKP感染患者,进行临床标本与环境标本采样,通过Compact VITEK 2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药物敏感试验。采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分型（MLST）进行菌株同源性分析,并检测毒力基因、荚膜血清型基因携带情况。结果 共有4例烧伤患者发生CRKP感染,2株分离自创面分泌物,2株分离自血。采集环境标本152份,经细菌鉴定和药物敏感试验,获得CRKP菌株共15株。通过PFGE分析,经聚类分析获得结果为A~G 7个聚类组,1号患者的血标本、2号患者的血标本及外环境标本及3号患者的创面分泌物及外环境标本具有同源性,为同一型别A型。将A~G型别的菌株进行MLST分析,结果分别得到A~G型为ST11、ST35、ST1、ST37、ST2929、ST23、ST17。对15株CRKP菌株进行毒力基因检测,5株K57型,ST型别为ST35、ST37和ST17。结论 烧伤患者环境CRKP检出率高,通过对环境标本追踪发现与临床标本分离菌株具有同源性,说明有效控制环境污染有助于防控感染传播扩散。CRKP出现局部克隆株流行,可能合并高毒力,下一步应开展更大范围的监测。