IL-27调控JAK/STAT通路在博来霉素诱导肺纤维化中的作用

目的探讨白细胞介素(IL)-27是否通过酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活子(STAT)信号通路抑制肺纤维化。方法将40只雄性C57/BL6小鼠随机分为空白对照组(A组)、博来霉素(BLM)组(B组)、BLM+IL-27组(C组)和BLM+IL-27抗体组(D组),每组10只。于造模后第7、28天每组各处死5只小鼠,取右肺组织用Western印迹方法检测JAK2、STAT1、STAT3、STAT5及SOCS3蛋白的表达。结果 BLM诱导肺纤维化模型中,7、28 d肺组织均有p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5表达量升高,IL-27治疗后降低SOCS3的表达;D组p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5表达量在造模后7、28 d均最高,C组在造模后7 d表达量少于B组。结论外源性IL-27可能通过抑制JAK/STAT通路相关蛋白的磷酸化减轻肺纤维化。     

姜黄素对大鼠脑缺血后Janus蛋白酪氨酸激酶2信号转导和转录激活子3信号通路的影响

目的探讨姜黄素对大鼠脑缺血损伤后Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路的影响。方法将68只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血组、姜黄素组(尾静脉注射姜黄素40mg/kg)和对照组(注射等量生理盐水),每组17只,后3组建立大鼠局灶性脑缺血模型,观察各组大鼠神经行为学变化,ELISA检测大鼠脑组织TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达,Western blot检测大鼠脑组织JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达。结果与脑缺血组比较,姜黄素组大鼠神经行为学评分减低[(1.53±0.62)分vs(2.94±0.87)分,P0.05];与脑缺血组比较,对照组TNF-α、IL-1β和IL-6无明显变化(P0.05),姜黄素组大鼠TNF-α[(57.63±10.27)ng/L vs(99.35±8.97)ng/L]、IL-1β[(33.67±9.10)ng/L vs(58.43±7.22)ng/L]和IL-6[(31.97±6.91)ng/L vs(49.23±6.28)ng/L]表达降低(P0.01),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3相对含量及HMGB1表达降低(P0.05,P0.01)。结论姜黄素可保护大鼠缺血后脑损伤,其机制可能是通过抑制JAK2/STAT3信号通路,减少HMGB1表达,减轻炎性反应。     

抑制JAK/STAT信号通路对缺血再灌注大鼠心肌的影响

目的探讨抑制JAK/STAT信号通路对缺血再灌注大鼠心肌的影响。方法以穿线法结扎左冠状动脉制备心肌缺血再灌注模型。健康Wistar大鼠24只随机分为4组,假手术组(C)、缺血再灌注组(I/R)、AG490组(I/R+AG490)、RMP组(I/R+RMP),每组6只。以Western印迹法检测大鼠心肌JAK2、STAT1、STAT3的表达。以原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞的凋亡。结果缺血再灌注后p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3的表达明显增加,且p-STAT1的表达较p-STAT3多,凋亡心肌细胞数增多,应用抑制剂AG490后p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3的表达减少,凋亡的心肌细胞数也明显减少,应用雷帕霉素后p-JAK2、p-STAT1的表达无改变,p-STAT3的表达减少,凋亡细胞数较再灌注组略有增多,但无统计学意义。结论 JAK/STAT信号通路参与了心肌缺血再灌注损伤,应用AG490可减轻心肌细胞损伤,减少心肌细胞凋亡。     

JAK/STAT信号途径在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的观察JAK/STAT信号途径对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),分别给予高糖和JAK抑制剂AG490干预,Western印迹检测α-SMA、E-Cadherin及STAT1、STAT3、p-STAT1和p-STAT3的表达;ELISA法测定上清液中TGF-β1、I型胶原的分泌,RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。结果与低糖组比较,高糖培养的HKC中α-SMA、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达明显上调;E-Cadherin表达明显下调;TGF-β1mRNA表达增加;上清液中TGF-β1、Ⅰ型胶原增加。AG490明显抑制α-SMA表达升高,减轻E-Cadherin表达;降低TGF-β1mRNA表达及TGF-β1、Ⅰ型胶原的分泌。结论JAK/STAT信号途径可能参与高糖诱导HKC转分化。     

JAK2/STAT3信号通路在柴胡皂苷D调控非小细胞肺癌H460细胞增殖、凋亡过程中的作用研究

目的 观察柴胡皂苷D对非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞增殖、凋亡的影响，并探讨可能机制。方法 取对数期H460细胞，随机分为对照组，实验A、B、C组，对照组常规培养，实验A组加入柴胡皂苷D(20μmol/L),实验B组加入colivelin[Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活子3(STAT3)通路激活剂](0.5μmol/L),实验C组加入柴胡皂苷D(20μmol/L)与colivelin(0.5μmol/L)。MTT法检测细胞增殖能力；双染法检测细胞凋亡率；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)mRNA表达量；Western blotting法检测细胞p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白表达量。结果 与对照组比较，实验A组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-10 mRNA表达量、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低，细胞凋亡率、IL-2 mRNA表达量升高(P<0.05),实验B组24、48、72 h MTT实验吸光度值、细胞IL-1...     

雷公藤多苷通过JAK2/STAT3信号通路减轻溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞凋亡及炎症的实验研究

目的研究雷公藤多苷(TG)通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜细胞凋亡及炎症的调节作用。方法将SD大鼠分为对照组、UC组、TG组、AG490组,UC组、TG组、AG490组采用三硝基苯磺酸/乙醇灌肠的方式建立UC模型,TG组给予TG灌胃干预,AG490组给予JAK2/STAT3抑制剂AG490干预。检测肠黏膜细胞凋亡率、凋亡基因及JAK2/STAT3表达、炎症细胞因子含量。结果 UC大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显高于对照组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显低于对照组(P 0. 05); TG组大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显低于UC组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显高于UC组(P 0. 05)。AG490组大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9及Caspase-3的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显低于UC组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显高于UC组(P 0. 05)。结论 TG能够通过JAK2/STAT3信号通路减轻UC大鼠肠黏膜细胞的凋亡及炎症。     

STAT3加重TGF-β1诱导的肝癌细胞上皮-间质转化的发生

目的探讨IL-6/JAK/STAT3和Smad3/TGF-β1信号通路在肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)发生过程中的作用。方法分别予TGF-β1、IL-6、AG490刺激人肝癌细胞株(HepG2、Bel7402、MHCC97H、HCCLM3)后,qPCR检测Snail、STAT3的mRNA表达水平,蛋白质免疫检测p-STAT3/STAT3、p-Smad3/Smad3、TGF-β1以及EMT相关分子标志物Snail、E-Cadherin、Vimentin的蛋白表达水平。结果 TGF-β1可以诱导HepG2细胞EMT的发生,下调E-Cadherin的表达,上调Vimentin、Snai的表达。IL-6在肝癌细胞中通过刺激STAT3,激活Smad3/TGF-β1通路,进而上调EMT相关分子标志物Snail、Vimentin的表达。AG490(一种JAK2的特异性抑制剂)抑制p-STAT3/STAT3、p-Smad3及EMT相关分子标志物Snail的表达。结论STAT3在TGF-β1诱导的肝癌细胞EMT发生过程中作为一个正向调控因子,IL6/JAK/STAT3和Snail/Smad3/TGF-β1信号通路协同促进肝癌细胞EMT的发生。     

温阳通脉方通过JAK2/STAT3信号通路保护大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探讨温阳通脉方是否通过Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号转导通路,调节水通道蛋白(AQP)的表达,发挥对缺血再灌注心肌组织的保护作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分为5组,每组6只:假手术组、模型组及温阳通脉方低剂量治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。将大鼠灌胃给药14天后,结扎心脏左冠状动脉前降支,按缺血30 min再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型。全自动生化分析仪检测各组大鼠的血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH);心电图检测大鼠ST段抬高情况;HE染色观察心脏组织病理形态学变化;免疫组织化学染色检测心肌组织中AQP1、AQP4蛋白的表达;Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、AQP1、AQP4的蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清中的CK-MB、LDH含量显著上升(P0.01),缺血30 min与再灌注120 min后心电图的ST段显著抬高(P0.01),HE染色显示模型组的心肌细胞损伤严重,AQP1、AQP4免疫组织化学表达明显增多(P0.01),JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、AQP1、AQP4的蛋白表达均明显升高(P0.01)。与模型组相比,给药大鼠CK-MB、LDH水平明显降低(P0.01),缺血30 min与再灌注120 min后的ST段均降低(P0.01),心肌细胞损伤均可见不同程度减轻,AQP1、AQP4免疫组织化学表达明显减少,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3整体的表达呈升高趋势,尤其是p-JAK2和p-STAT3的表达(P0.01),AQP1、AQP4的水平均有不同程度降低(P0.01)。结论温阳通脉方的心肌保护作用可能与激活JAK2/STAT3信号通路,下调AQP1和AQP4的表达有关。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症反应的抑制作用

目的探讨血管紧张素(Ang)Ⅱ受体拮抗剂(氯沙坦)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症反应的抑制作用。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,氯沙坦低、中、高剂量组(5、10、20 mg/kg)。模型组及氯沙坦组均采用反复烟熏联合气管内两次滴入脂多糖(LPS)复制COPD大鼠模型。对大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞进行分类并计数,苏木素-伊红(HE)染色检测肺组织病理形态,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ、IL-4、IL-6、IL-10、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP抑制剂(TIMP)-1含量,Western印迹检测Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)信号通路激活情况。结果与正常组比较,模型组肺泡断裂,大量炎性细胞浸润,白细胞总数、中性粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞数目均显著提高,IL-4、IL-10及TIMP-1含量显著降低,IL-1β、IFN-γ、IL-6及MMP-9含量显著升高,JAK2及p-STAT3表达量显著上调(均P0.01);与模型组比较,氯沙坦低、中、高剂量组肺泡结构完整,少量炎性细胞浸润,白细胞总数、中性粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞数目均显著降低,IL-4、IL-10及TIMP-1含量显著升高,IL-1β、IFN-γ、IL-6及MMP-9含量显著降低,p-STAT3表达量显著下调,氯沙坦中、高剂量组JAK2表达量显著下调(均P0.01)。结论氯沙坦可能通过阻断JAK2/STAT3信号通路抑制COPD大鼠炎症。     

七氟醚麻醉对肺癌大鼠JAK/STAT信号通路及脑神经损伤的影响

目的探讨七氟醚麻醉对肺癌大鼠JAK/STAT信号通路的影响及脑神经损伤作用。 方法24只健康雄性SD大鼠采用尾静脉注射Walker-256癌细胞悬液法建立大鼠肺癌模型,造模完成后将大鼠随机分为4组,每组6只,分别为模型组、七氟醚A组、七氟醚B组、七氟醚C组;然后七氟醚A、B、C组吸入3%七氟醚+2 ml/min氧气,吸入持续时间分别为4、6、8 h,模型组吸入空气,持续吸入时间6 h,麻醉结束24 h后,测定大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平,利用Morris水迷宫考察大鼠学习及记忆能力,实时定量PCR检测大鼠海马组织caspase-3和caspase-12 mRNA水平,Western blot检测大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-JAK2及p-STAT3水平。 结果肺癌大鼠持续吸入不同时间的七氟醚进行麻醉后,与模型组相比,七氟醚各麻醉组肺癌大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平均显著升高(P<0.05),肺癌大鼠逃避潜伏期及首次穿过平台时间均显著延长(P<0.05),90 s内穿过平台的次数显著减少(P<0.05),海马组织caspase-3、caspase-12 mRNA水平均显著升高(P<0.05),肺组织JAK2、STAT3水平均显著升高(P<0.05), JAK2及STAT3磷酸化比例显著增加(P<0.05)。 结论七氟醚麻醉能够激活肺癌大鼠JAK/STAT信号通路,并可能通过促进肺癌大鼠海马体凋亡基因的表达引起大鼠脑神经损伤,影响肺癌大鼠学习及记忆能力。     

硫化氢对大鼠糖尿病心肌病心肌间质纤维化及JAK2/STAT3通路的影响

目的:观察硫化氢(H_2S)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌组织纤维化、JAK2/STAT3通路及炎性因子表达的影响,探讨H_2S对DCM的作用及其机制。方法:运用糖尿病饮食联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立SD大鼠2型糖尿病模型,选取随机血糖16.7 mmol/L的大鼠20只随机分成DCM+0.9%氯化钠组(DCM+saline)、DCM+硫化氢组(DCM+NaHS),每组10只。另选20只正常大鼠随机分成正常对照组(Con trol+saline)、正常对照+硫化氢组(Control+NaHs),每组10只。从造模成功后第8周起,DCM+NaHS组和Control+NaHS组大鼠腹腔注射NaHS溶液100μmol·kg~(-1)·d~(-1),Control+saline组和DCM+saline组腹腔注射等量0.9%氯化钠。第12周未处死大鼠,取左心室心肌组织提取蛋白和制作常规石蜡切片。运用Masson染色观察大鼠心肌间质纤维化并计算心肌间质胶原容积分数(CVF);运用Western blot技术检测大鼠心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原;磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平;运用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果:与Control+Saline组相比,DCM+Saline组大鼠CVF明显增加,同时心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达水平明显升高,pJAK2、p-STAT3蛋白的表达水平明显升高,IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平也明显升高(均P0.05)。与DCM+Saline组相比,DCM+NAHS组大鼠CVF明显降低,心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、p-JAK2、p-STAT3和IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平明显降低(均P0.05)。与Control+Saline组相比,Control+NaHS组各检测指标无明显差异。结论:H_2S对正常大鼠心肌间质纤维化无明显影响,但给予外源性H_2S干预可改善DCM大鼠心肌间质纤维化程度,其机制可能与下调JAK2/STAT3通路的活化有关。     

尼古丁通过抑制JAK/STAT通路对HUVECs增殖和凋亡的影响研究

目的探究尼古丁通过抑制JAK/STAT通路促进人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的作用机制。方法将HUVECs分为4组,即对照组、尼古丁1组、尼古丁2组、尼古丁3组,分别在培养基中加入终浓度为0、10-8、10-7、10-6 mol/L的尼古丁培养24 h。显微镜观察细胞形态。CCK-8和流式细胞术分别用于检测细胞活力和凋亡。Western blot和PCR分别用于检测蛋白和mRNA的表达水平。结果显微镜观察尼古丁会使HUVECs呈现萎缩状态。尼古丁可剂量依赖性的抑制HUVECs活力,并且剂量依赖性的促进HUVECs凋亡。尼古丁可显著的抑制p-JAK/t-JAK和p-STAT/t-STAT的水平。尼古丁可显著的提高Caspase-3和Bax mRNA的水平,抑制Bcl-2 mRNA的水平。结论尼古丁可能通过下调JAK/STAT通路调节凋亡相关蛋白的表达,抑制HUVECs活力并促进其凋亡。     

白细胞介素-6抑制剂对银屑病模型大鼠背部皮肤组织的影响及作用机制

目的研究白细胞介素(IL)-6抑制剂对银屑病模型大鼠背部皮肤组织的影响及作用机制。方法选取30只SD健康大鼠,随机分为空白对照组、银屑病组和IL-6抑制剂组各10只,建立银屑病模型,建模成功后,IL-6抑制剂组大鼠腹腔注射5 mg/kg IL-6抑制剂,空白对照组、银屑病组腹腔注射等剂量的生理盐水。在对大鼠最后一次给药后2 d观察大鼠变化,采集大鼠背部皮肤组织行苏木素-伊红(HE)染色、背部皮损表皮厚度检测、Baker病理评分、炎性细胞计数及检测背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6受体/Janus激酶/信号转导和转录激活因子(IL-6R/JAK/STAT3)通路因子mRNA表达量。结果银屑病组、IL-6抑制剂组大鼠Baker评分、炎症细胞浸润数、表皮厚度、背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6R、JAK1、STAT3、CD80、CCL5mRNA表达量均显著高于空白对照组(P<0.05);IL-6抑制剂组大鼠Baker评分、炎症细胞浸润数、表皮厚度、背部皮肤组织中IL-17、IL-22、IL-23表达水平、IL-6R、JAK1、STAT3、CD80、CCL5mRNA表达量均显著低于银屑病组(P<0.05)。结论 IL-6抑制剂可有效抑制银屑病大鼠背部皮肤组织角质增殖、炎症反应,其作用机制可能与调控IL-6R/JAK/STAT3通路转导因子有关。     

JAK2/STAT3信号通路介导小鼠骨性关节炎中软骨细胞代谢和抗氧化应激的研究

目的 在小鼠骨性关节炎（OA）模型中观察Janus酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子与转录激活子蛋白3（JAK2/STAT3）信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用。方法 将10只C57BL/6小鼠随机分为两组,选择其中一组小鼠建立OA模型,3周后取材,培养软骨细胞作为实验组,其余小鼠正常培养细胞作为对照组。在对照组和实验组中分别加入JAK2/STAT3信号通路激动剂SC-39100,运用蛋白印迹法（Western blotting）检测各组细胞p-JAK2、p-STAT3、B淋巴细胞瘤?2（Bcl-2）蛋白和Bax蛋白的表达,同时检测各组线粒体氧化应激指标琥珀酸脱氢酶（SDH）、细胞色素c氧化酶（COX）、丙二醛（MDA）改变。结果 与对照组相比,OA模型组软骨细胞p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2蛋白的表达偏低（P＜0.05）、Bax蛋白的表达水平偏高（P＜0.05）,且OA模型组软骨细胞SDH和COX的表达水平均偏低（P＜0.05）、MDA的含量偏高（P＜0.05）;当OA模型组加入SC-39100后,p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达均较OA模型组升高（P＜0.05）、Bax蛋白表达下降（P＜0.05）,SDH和COX的表达水平均较OA模型组升高（P＜0.05）,MDA的含量较OA模型组降低（P＜0.05）;对照组中加入SC-39100后的各指标与加入SC-39100前比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;OA模型加入SC-39100组后的各指标与对照组加入SC-39100比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 JAK2/STAT3信号通路和OA中软骨细胞变化密切相关,JAK2/STAT3信号通路激活后可抑制软骨细胞的凋亡;当激活的JAK2/STAT3信号通路活化时会增加软骨细胞线粒体抗氧化应激能力。     

西地那非通过STAT3和Akt/GSK-3β途径对哮喘小鼠气道炎症和重塑的作用研究

目的探究西地那非在哮喘中的作用及其可能的作用机制。方法 40只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、西地那非低剂量组、西地那非高剂量组和阳性对照组,每组各8只。采用卵清蛋白(OVA)诱导建立小鼠哮喘模型,西地那非低、高剂量组小鼠腹腔注射西地那非12.5mg/kg和25mg/kg,阳性对照组腹腔注射地塞米松2mg/kg,其余组注射生理盐水。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并进行细胞计数;ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-13、IgE和OVA特异性LgE水平;HE染色检测肺组织病理学变化;PAS染色检测杯状细胞增生;Masson染色检测胶原纤维沉积;免疫组化检测α-SMA的表达;Western blot检测α-SMA蛋白和STAT3、Akt/GSK-3β途径相关蛋白的表达。结果与对照组相比,哮喘组小鼠BALF总细胞数、嗜酸性粒细胞数、炎症评分、PAS阳性细胞数、胶原纤维面积、α-SMA表达和p-STAT3/STAT3的比值明显升高(P0.05),TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-13、IgE和OVA特异性LgE水平明显升高(P0.05),p-Akt/Akt和p-GSK-3β/GSK-3β的比值明显降低(P0.05);与哮喘组相比,西地那非低、高剂量组和阳性对照组小鼠BALF总细胞数、嗜酸性粒细胞数、炎症评分、PAS阳性细胞数、胶原纤维面积、α-SMA表达和p-STAT3/STAT3的比值明显降低(P0.05),TNF-α、IL-1β、IL-4和IL-13、IgE和OVA特异性LgE水平明显降低(P0.05),p-Akt/Akt和p-GSK-3β/GSK-3β的比值明显升高(P0.05)。结论西地那非可能通过调控STAT3和Akt/GSK-3β途径抑制哮喘小鼠气道炎症和重塑。     

铁皮石斛多糖对缺血性脑卒中大鼠脑组织JAK/STAT3信号通路的影响

[目的]探讨铁皮石斛多糖(DOP)对缺血性脑卒中大鼠脑组织Janus激酶(JAK)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路的影响。[方法]以线栓法建立大脑中动脉闭塞大鼠模型。SD大鼠随机分为模型组、DOP低剂量(25μg/g)组、DOP中剂量(50μg/g)组、DOP高剂量(100μg/g)组、依达拉奉组,每组12只;另取12只SD大鼠设为假手术组。经药物干预后,以Longa分级法对各组大鼠进行神经功能缺损评分;通过三苯基氯化四氮唑染色检测大鼠脑梗死情况;苏木精-伊红染色观察大鼠海马神经组织病理形态变化;酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织炎性细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、环氧合酶2(COX-2)、白细胞介素6(IL-6)水平;Western blot检测大鼠脑组织JAK/STAT3信号通路相关蛋白表达水平。[结果]与假手术组相比,模型组大鼠海马神经元皱缩、变小,变性坏死,结构破损,排列紊乱,且数目明显减少,海马神经组织整体呈现明显病理损伤,神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IFN-γ、COX-2及IL-6水平、p-JAK/JAK、p-STAT3/STAT3明显升高(P<0....     

脑损伤后大鼠NPAS4与JAK2/STAT3信号通路的关系

目的 探讨神经元PAS结构域蛋白(NPAS)4与Janus激酶(JAK)2/信号传导与转录激活因子(STAT)3通路在大鼠颅脑损伤后的相关联系。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI+AG490组,建立损伤模型,利用免疫组化染色、Western印迹及实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测JAK2、STAT3、磷酸化(p)-JAK2、p-STAT3及NPAS4蛋白。结果 损伤后NPAS4蛋白可见表达升高,并在12 h时达到最高,并持续至少7 d,与p-JAK2、p-STAT3蛋白时序性表达趋势一致,相邻两时间点比较差异显著(P<0.05);且TBI+AG490组p-JAK2、p-STAT3及NPAS4蛋白表达量较TBI组均显著下降(P<0.05)。结论 NPAS4可在大鼠颅脑损伤后迅速升高并发挥神经保护作用,且其相关作用可能受到JAK2/STAT3通路的调节。     

黄芩素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用及对Janus激酶-信号转导与转录激活分子信号通路的影响

目的探讨黄芩素对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的作用及对Janus激酶(JAK)-信号转导与转录激活分子(STAT)信号通路的影响。方法 50只大鼠随机分为正常对照(C)组、假手术对照(S)组、模型(IR)组、黄芩素低剂量(L)组和高剂量(H)组,每组10只。对IR组、L组、H组采用冠脉前降支结扎释放制备I/R损伤模型,L组、H组黄芩素分别腹腔注射给药0.4和1.2 mg/(kg·d),连续给药7 d。氯化三苯基四氮唑(TTC)法评价心肌梗死率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平,实时荧光定量PCR及Western印迹分别检测心肌组织中Bcl-2、Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白相对表达水平。结果 IR组、L组、H组I/R损伤造模成功,C组和S组心肌正常。与S组相比,IR组、H组、L组均出现不同程度灰白色坏死心肌,且血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显增加,Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白表达升高,而Bcl-2基因mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与IR组比,H组、L组灰白色坏死心肌均明显减少,血清中TNF-α、IL-6水平相对降低,Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白表达相对降低,而Bcl-2基因mRNA及蛋白表达相对升高,差异均有统计学意义(均P0.05)。与L组相比, H组灰白色坏死心肌有所减少,血清中TNF-α、IL-6水平降低,Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白表达降低,而Bcl-2基因mRNA及蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论黄芩素对大鼠I/R损伤具有保护作用,其机制可能与抑制JAK-STAT信号通路有关。     

特异性抑制JAK/STAT3信号通路对大鼠肝细胞癌的影响

背景:研究表明,异常激活的JAK/STAT3信号通路可促进肝细胞癌(HCC)发生、发展;转化生长因子-β1(TGF-β1)在肿瘤进展中发挥双向调节作用。目的:探讨特异性抑制JAK/STAT3信号通路对HCC的影响以及TGF-β1信号通路在其中的可能作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为对照组、HCC组和HCC+AG490组,后两组以二乙基亚硝胺制作HCC模型,HCC+AG490组造模第1周腹腔内注射JAK特异性抑制剂AG490。第16周末处死大鼠,记录肝内肿瘤结节的最大直径,计数最大直径1 cm的肿瘤结节数,以real-time PCR、免疫组化和免疫荧光染色检测肝组织中STAT3、TGF-β1的表达和分布。结果:与对照组相比,HCC组肝组织中STAT3、TGF-β1 mRNA表达显著增高(P0.05)。磷酸化STAT3(p-STAT3)、TGF-β1蛋白在对照组肝组织中呈阴性表达,在HCC组则分别呈阳性和强阳性表达,且两者有明显的共表达区域。HCC+AG490组STAT3、TGF-β1 mRNA表达较HCC组显著降低(P0.05),p-STAT3、TGF-β1蛋白呈弱阳性表达,直径1 cm的肿瘤结节数和最大直径均显著小于HCC组[1.20±1.03和(1.14±0.18)cm对4.30±1.06和(1.78±0.27)cm,P均0.05]。结论:特异性抑制JAK/STAT3信号通路可抑制HCC发生、发展,其机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关。