阴沟肠杆菌头孢菌素酶耐药基因分析

目的通过检测本院阴沟肠杆菌临床抗生素耐药率,了解产头孢菌素酶(AmpC酶)的阴沟肠杆菌分子流行病情况。方法纸片扩散法检测本院分离的189株阴沟肠杆菌细菌耐药,选取头孢西丁耐药的菌株行经典Hodge法鉴定产Ampc酶菌株,PCR扩增阳性菌株Ampc酶基因。结果 189株阴沟肠杆菌主要来源于呼吸内科、神经内科和重症医学科等科室,药敏结果显示对头孢类抗生素具有较高的耐药率,对碳青霉烯类抗生素普遍高敏,对头孢西丁耐药率为17.46%;Hodge法确证实验表明33株可产AmpC酶,PCR扩增出DHA基因型17株,ACT-1型13株,ADC型3例,ACC型和MOX型未检出。结论阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株现象较为严重,本院大多为DHA和ACT-1基因型。     

阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因的研究

目的调查阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因的流行状况及基因型。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法,对44株临床分离的阴沟肠杆菌进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测DHA和ACT型AmpC酶基因。结果44株阴沟肠杆菌呈多重耐药;36株质粒AmpC酶基因阳性(81.8%),DHA和ACT-1基因阳性率分别为11.4%、79.5%,而且3株阴沟肠杆菌同时携带DHA和ACT-1基因。结论临床分离的阴沟肠杆菌多重耐药严重、质粒AmpC酶基因携带率高;阴沟肠杆菌中检出ACT-1基因为国内首次报道。     

鲍曼不动杆菌临床耐药情况及AmpC酶基因型分析

目的统计本院鲍曼不动杆菌耐药情况,进一步分析AmpC酶流行分布,为临床合理用药提供直接依据。方法收集259株鲍曼不动杆菌临床菌株,细菌室做常规抗生素耐药监测;改良Hodge实验筛选出产AmpC酶菌株,PCR检测AmpC酶基因。结果本院分离的鲍曼不动杆菌主要来源于重症医学科、神经内科及神经外科等科室;对头孢曲松和头孢哌酮耐药率最高,分别为81.46%和78.38%,对阿米卡星和环丙沙星耐药率较高,分别为51.35%和41.70%;对头孢西丁耐药率为21.23%;碳青霉烯类抗生素敏感性最高,高达95%以上;Hodge实验筛选出53株产AmpC酶菌株,AmpC酶基因PCR扩增阳性者49株,其中ADC基因型占比95.92%(47株),ACT-1型占比4.08%(2株),未检出DHA、VCC和MOX基因型。结论本院鲍曼不动杆菌对常规药物耐药形势较严峻,产AmpC酶的细菌基因型主要为ADC型。     

阴沟肠杆菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解某医院阴沟肠杆菌产AmpC酶情况及其对10种常用抗菌药物的耐药性,以指导临床合理选择抗菌药物。方法收集该院2007年8月-2008年7月临床分离的非重复阴沟肠杆菌98株,采用头孢西丁纸片扩散法进行AmpC酶初筛,酶提取物三维试验确证阴沟肠杆菌高产AmpC酶,聚合酶链反应检测AmpC酶基因。以K B纸片扩散法进行药敏试验。结果98株阴沟肠杆菌中有36株携带AmpC酶,检出率36.73％。在36株产AmpC酶阴沟肠杆菌中,检测到仅携带DHA基因株6株(16.67%);仅携带ACC基因株20株(55.56%);同时携带ACC和MIR基因株8株(22.22%);同时携带ACC、MIR和FOX基因株2株(5.56%)。产AmpC酶菌株对头孢西丁全部耐药,对第三代头孢菌素、联合抑酶剂、氨曲南、阿米卡星及环丙沙星均有不同程度耐药（44.44%~91.67%）;对头孢吡肟及亚胺培南较敏感,耐药率分别为27.78%、0.00%。结论阴沟肠杆菌AmpC酶携带率高,是导致其对第三代头孢菌素耐药的重要原因;治疗阴沟肠杆菌感染应以药敏检测结果为依据。     

某医院分离的肠杆菌科菌株超广谱β内酰胺酶的检测及耐药性分析

[目的 ]了解肠杆菌科菌株产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)和持续高产AmpC酶菌株的检出率及其耐药性。[方法 ]用改良三维法对白求恩国际和平医院 2 0 0 2年 2～ 12月从临床送检各类标本中分离的 2 48株肠杆菌科菌进行ESBLs和持续高产AmpC酶检测 ,用K B法检测药物敏感性。[结果 ] 2 48株肠杆菌科细菌中 ,产ESBLs的 72株 ,占 2 9 0 3 % ;产AmpC酶的 2 6株 ,占 10 48%。产ESBLs菌对 β内酰胺类抗生素的耐药率均在 85 2 9%～ 94 12 % (亚胺培南、头孢他啶和氨曲南除外 ) ;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类的交叉耐药性最高 ,分别达到 76 47%、88 2 4%、85 2 9% ;所有菌株对亚胺培南均敏感。产酶菌株耐药率明显高于非产酶菌株。 [结论 ]治疗产ESBLs菌引起的感染应首选亚胺培南。     

同产ESBLs及AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的分析儿童感染同产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌的情况及其耐药性,以指导临床合理用药。方法对2009年1月-2010年1月医院就医儿童分离肺炎克雷伯菌122株,采用PCR法检测ESBLs酶基因blaTEM,blaSHV、blaCTX-M-9群,AmpC酶基因blaDHA、blaACT/MIR;K-B纸片琼脂扩散法检测肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果 122株肺炎克雷伯菌中单纯AmpC酶基因阳性菌株7株,阳性率5.7%,单纯ESBLs基因阳性菌株37株,阳性率30.3%,ESBLs和AmpC酶基因同时阳性菌株检出率为9.0%,非产ESBLs和AmpC菌株67株,检出率55.0%;同产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌除了对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其余β-内酰胺类抗菌药物和头孢菌素类高度耐药,产酶菌株耐药率明显高于非产酶菌株。结论儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的情况已经出现,产酶菌株对常用β-内酰胺类抗菌药物耐药率较高,其主要原因是肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶;临床治疗应根据药敏指导合理使用抗菌药物。     

高产AmpC酶阴沟肠杆菌的耐药性及同源性分析

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征.方法高产AmpC酶采用表型筛选法,耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法.结果50株阴沟肠杆菌中表现高产AmpC酶株有16株(32%)、单产ESBLs菌株有8株(16%)、同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有8株(16%),未发现亚胺培南耐药株,产酶和不产酶菌株间的耐药率差异存在显著性,RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为4类.结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法.     

阴沟肠杆菌产AmpC酶与ESBLs的研究

目的 检测临床标本分离的阴沟肠杆菌,了解产AmpC酶和ESBLS的情况,分析耐药性以指导临床用药.方法 收集2007年1-12月同济医院检验科分离到的阴沟肠杆菌121株,用改良的三维试验检测AmpC酶和ESBLs.结果 121株阴沟肠杆菌中,产ESBLs的菌株有56株,占45.3%;产AmpC酶的菌株有35株,占28.9%,产AmpC酶和ESBLs的有18株,占14.9%,非产AmpC酶和ESBLs的有9株.占7.4%;体外的抗菌药物敏感试验显示,头孢噻肟、头孢吡肟、环丙沙星、亚胺培南的耐药率分别为53.8%、24.4%、32.5%、0;氨苄西林和头孢唑林的耐药率高达96.7%和94.2%.结论 2007年检测到的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,对碳青酶烯类药物敏感率最高,对氨基糖苷类和喹诺酮类及第四代头孢类药物敏感率也较高,对其他类药物敏感率较低.     

阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶的检测及耐药性分析

目的调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶阴沟肠杆菌基因型及其耐药性,以期为临床治疗提供依据。方法使用VITEK-AMS鉴定细菌;采用三维试验检测阴沟肠杆菌的ESBLs与AmpC酶表型;β-内酰胺酶耐药基因型检测采用PCR扩增技术;耐药基因水平传播采用质粒接合试验;根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)指南进行药敏试验。结果86株阴沟肠杆菌中ESBLs携带率为48.8%;CTX-M型为主要类型,其中CTX-M-3亚型为27.9%,CTX-M-9亚型为16.3%,CTX-M-14亚型为3.4%;SHV-12型为18.6%;11株同时产ESBLs与AmpC酶,占12.8%,31株单独产ESBLs(36.0%),8株单独产高产AmpC酶(9.3%);亚胺培南对ESBLs菌株的敏感率为100.0%;8株产ESBLs菌株接合试验成功。结论CTX-M型与SHV-12型是阴沟肠杆菌ESBLs的主要基因型。ESBLs可以通过质粒接合试验进行水平传播。     

呼吸重症监护室常见细菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶的检测及耐药性研究

目的了解呼吸重症监护室（RICU）分离的常见革兰阴性（G-）耐药菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药谱特征。方法采用酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株,以美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株,纸片扩散法及E test进行药物敏感性检测。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、同时产AmpC酶和ESBLs的细菌分别为28株(16.67%)、71株(42.26%)和12株(7.14%)。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高,为57.14%;ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,其次为大肠埃希菌,分别为71.70％和55.81%。单产AmpC酶菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性,耐药率分别为3.57％和28.57%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为2.82％、32.39％和25.35%;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。结论RICU常见G-耐药菌的AmpC酶和ESBLs检出率较高,该类菌对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。     

呼吸重症监护室产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及基因型

目的了解深圳地区2所三级综合医院呼吸重症监护室（RICU）分离的革兰阴性（G-）菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药性与基因型特征。方法选择分离自上述2所医院RICU的对第一、二代及1种以上第三代头孢菌素耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法及E test进行药敏试验,酶提取物三维试验检测单产AmpC酶,美国临床实验室标准化研究所 (CLSI)推荐的表型筛选和确证试验检测产ESBLs菌株,聚合酶链反应（PCR）通用引物扩增AmpC酶和ESBLs基因及其序列测定以确定基因亚型。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、合产AmpC酶和ESBLs的菌株分别为9株（9.38%）、52株（54.17%）和10株（10.42%）。单产AmpC酶菌株对头孢吡肟和亚胺培南具有较高的敏感性,耐药率分别为33.33％和0.00%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为0.00％、34.62％和19.23%;合产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。检出AmpC酶基因型为DHA 1和ACT 1,分别占76.92％和26.08%;ESBLs基因型为CTX M系列和SHV 5,分别占96.77％和3.23%。结论该2所综合医院RICU存在产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M、SHV型ESBLs的G-菌流行株,其对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感,值得临床关注。     

阴沟肠杆菌不同β-内酰胺酶基因型检测与耐药性研究

目的 了解医院感染阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶的情况,并对产不同β-内酰胺酶型菌株的耐药性进行研究.方法 采用三维试验确证试验检测AmpC酶与超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).聚合酶链反应(PCR)扩增基因,K-B法检测阴沟肠杆菌对13种抗菌药物的耐药情况.结果 80株阴沟肠杆菌中29株ESBLs编码基因结果阳性,3株含有两种不同的基因型,分别为TEM型6株、SHV-2型2株、CTX-M-2型5株、CTX-M-3型8株和CTX-M-9型11株;26株ampC基因PCR扩增呈阳性;产超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)阴沟肠杆菌对美罗培南外的12种抗菌药物的耐药率在66.7%～100.0%,无论是单一产酶株,还是SSBLs菌株,其耐药率均显著高于不产酶株.差异有统计学意义(P＜0.05);美罗堵南仍是阴沟肠杆菌耐药率最低的抗菌药物.结论 阴沟肠杆菌已呈现出多药耐药和高度耐药特征,ESBLs基因型以CTX-M型为主,三维试验与PCR检测具有良好的一致性,产AmpC酶和ESBLs酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因.     

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌KPC-2与NDM-1基因的研究

目的检测耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况以及KPC-2和NDM-1耐药基因的检出,分析耐碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制。方法采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA纸片协同试验和AmpC酶三维试验检测29株耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况;PCR法检测KPC-2及NDM-1两种碳青霉烯酶耐药基因。结果 29株分离菌中26株菌改良Hodge试验阳性,7株亚胺培南-EDTA纸片协同试验阳性,7株AmpC酶三维试验阳性,16株携带KPC-2型碳青霉烯酶耐药基因,占55.17%,未扩增出NDM-1碳青霉烯酶耐药基因。结论耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的耐药机制主要是产碳青霉烯酶。     

107株阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

目的 了解近年来临床分离的阴沟肠杆菌对常用抗菌药物的敏感性,并检测分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的情况,指导临床合理用药。 方法 收集2016年1-12月湖南中医药大学第一附属医院分离自临床标本的阴沟肠杆菌,采用Vitek-2 Compact进行常规药敏试验,采用表型确证试验检测ESBLs,采用三维试验检测AmpC酶。 结果 共收集非重复分离阴沟肠杆菌107株,主要来源于呼吸内科(26/107,24.3%)、骨伤科(21/107,19.6%)、中心ICU(20/107,18.7%)等科室,以痰液(38/107,35.5%)和伤口分泌物(29/107,27.1%)等标本为主;阴沟肠杆菌对青霉素类、三代头孢菌素和头霉素类高度耐药,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、亚胺培南耐药率分别为13.1%、22.4%、0.9%。共检测出单产ESBLs菌株30株(28.0%),单产AmpC酶的菌株35株(32.7%);同时产ESBLs和AmpC酶菌株14株(13.1%);同时产ESBLs和AmpC酶菌株对常用抗菌药物的耐药率高于不产酶株,差异均有统计学意义(均P＜0.05)。 结论 产ESBLs、AmpC酶是阴沟肠杆菌多重耐药的重要机制;阴沟肠杆菌产酶株的检测,对指导临床抗菌治疗具有重要意义。     

94株产气肠杆菌的临床分布与耐药性分析

目的 了解产气肠杆菌的临床分布及耐药性.方法 用常规方法检出可疑菌落,用法国生物梅里埃公司ID 32E条和ATB G-5条做菌种鉴定与药敏试验;分别用复合纸片表型确认试验和FOX琼脂平板试验检测ESBLs和AmpC酶.结果 临床标本主要来自痰液,占52.1％,其次为中段尿,占16.0％;临床科室中呼吸内科和肝胆外科检出最多,分别占43.6％和17.0％;亚胺培南、美罗培南对所有菌株均敏感;头孢吡肟和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率＜16.0％;产气肠杆菌对阿莫西林、头孢噻吩、头孢西丁的耐药率均＞95.0％,对其余β-内酰胺类抗菌药物均有一定程度的耐药,对氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药率较低;ESBLs和AmpC酶的检出率分别为16.0％和11.7％.结论 产气肠杆菌临床主要来自痰液标本及呼吸内科;所有菌株均对亚胺培南、美罗培南敏感,对阿莫西林、头孢噻吩、头孢西丁的耐药率最高;产ESBLs和AmpC酶菌株已占一定比例.     

耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶的检测及耐药性基因分析

目的对耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行检测及其耐药基因进行分析,探讨产AmpC酶基因对其耐药表型的影响。方法采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用双纸片确诊试验测定ESBLs,PCR扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定确定其基因型。结果 72株耐头孢西丁肺炎克雷伯菌中AmpC酶阳性有45株,阳性率为62.5%(45/72),3株为CMY-2型,43株为DHA-1型,其中在1株菌株中同时存在CMY-2和DHA-1两种基因;45株AmpC酶阳性肺炎克雷伯菌中33株检测出ESBLs,检出率为73.3%(33/45),23株携带CTX-M基因,15株携带SHV基因,19株携带TEM基因。结论 AmpC阳性肺炎克雷伯菌菌株中ESBLs检出率高,加强监测高产AmpC酶耐头孢西丁肺炎克雷伯菌,治疗相关菌感染以亚胺培南和美罗培南为首选,合并产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌比单产AmpC酶菌株对亚胺培南和美罗培南的耐药率低。     

鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药机制研究

目的研究鲍氏不动杆菌对亚胺培南的耐药机制。方法检测62株鲍氏不动杆菌的耐药性,对其中对20株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌进行耐药机制研究;检测ESBLs、AmpC酶、VIM、IMP、OXA-23和OXA-24产生及外膜蛋白表达情况,利血平协同抑制试验检测膜外排机制。结果鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药率为41%;对20株耐亚胺培南菌株中,ESBLs和AmpC酶阳性率分别50%和100%,VIMI、MP、OXA-24均阴性,OXA-23阳性率为95%;部分菌株存在22×103、29×103、33×103的外膜蛋白缺失;利血平不能降低亚胺培南对鲍氏不动杆菌的MIC值。结论产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药的重要原因,产AmpC酶合并外膜蛋白缺失与耐亚胺培南鲍氏不动杆菌有密切关系。     

产气肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的 了解医院感染产气肠杆菌在临床的分布及其耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 对近3年临床分离的138株产气肠杆菌,用K-B法检测对16种抗菌药物的耐药性,用三维试验检测AmpC酶和ESBLs.结果 菌株分离最多的临床科室是ICU、烧伤科、呼吸内科、泌尿外科和肝胆外科;检出率最高的标本是痰液、咽拭子、血液和创面;产气肠杆菌对青霉素类和三代头孢菌素的耐药率74.6％～99.3％,四代头孢菌素的耐药率也高达53.6％,未发现对亚胺培南和美罗培南耐药株,头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦耐药率仅为8.0％和25.4％;此外,喹诺酮类药物药耐率较低,为2.9％～5.1％,氨基糖苷类药物在17.4％～48.6％,磺胺甲恶唑/甲氧苄啶的耐药率为74.6％;三维试验产ESBLs菌和产AmpC的检出率分别为22.5％和29.7％,有13株菌同时产ESBLs和AmpC酶.结论 产气肠杆菌已成为医院感染重要病原菌之一,且耐药率日趋严重,对高危病区应完善和落实各项预防措施,严格无菌操作,加强对易感患者的监测.     

某医院分离的肠杆菌科菌株超广谱β内酰胺酶的检测及耐药性分析

[目的]了解肠杆菌科菌株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和持续高产AmpC酶菌株的检出率及其耐药性。[方法]用改良三维法对白求恩国际和平医院2002年2～12月从临床送检各类标本中分离的248株肠杆菌科菌进行ESBLs和持续高产AmpC酶检测，用K-B法检测药物敏感性。[结果]248株肠杆菌科细菌中，产ESBLs的72株，占29．03％；产AmpC酶的26株，占10．48％。产ESBLs菌对β内酰胺类抗生素的耐药率均在85．29％～94．12％(亚胺培南、头孢他啶和氨曲南除外)；对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类的交叉耐药性最高，分别达到76．47％、88．24％、85．29％；所有菌株对亚胺培南均敏感。产酶菌株耐药率明显高于非产酶菌株。[结论]治疗产ESBLs菌引起的感染应首选亚胺培南。     

产头孢菌素酶大肠埃希菌的随机扩增多态性DNA分型研究

目的对产头孢菌素酶大肠埃希菌的耐药现状进行分析研究,对耐药株进行基因分型流行病学研究。方法对临床分离的157株大肠埃希菌进行头孢菌素酶（AmpC）检测,采用K—B琼脂扩散法,按照美国CLSI规定判断结果,判断细菌的耐药性;对产AmpC酶菌株以随机扩增多态性DNA分型法（RAPD）进行基因分型;接合试验证实酶基因有无可转移性。结果产AmpC酶大肠埃希菌占8．9％（14／157）;14株产AmpC酶菌株经过RAPD扩增分为13型。结论本院已经发现产质粒介导AmpC酶菌株,其耐药性能够水平传播。药敏检测结果显示对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。RAPD证实他们大多来自不同的克隆株。RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法。