亚硒酸钠对树突状细胞体外增强CTL杀伤K562细胞作用的研究

目的探讨经亚硒酸钠(Na2SeO3,Se)处理、K562细胞裂解物(又称为抗原细胞裂解物:ACL)冲击致敏的外周血单个核细胞(PBMNC)衍生的树突状细胞(DCs)体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤白血病细胞的能力。方法1)DCs培养:用含3种细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的RPMI-1640(10%FBS)培养体系,培养健康人的PBMNC 4d,收获贴壁细胞;2)DCs分4组:Ⅰ组:单独DC培养组;Ⅱ组:加入0.5μmol/LSe的DC组;Ⅲ组:加入ACL的DC组;Ⅳ组:同时加入0.5μmol/LSe和ACL的DC组;3)效应细胞-CTL的诱导培养:用含细胞因子IL-2的1640(10%FBS)培养体系,将非贴壁细胞(淋巴细胞)作为效应细胞,单独或与各组DC共同孵育5d;4)CTL活性测定:用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验,靶细胞为K562细胞。结果效应细胞与K562细胞按不同效靶比混合培养时,DC-Ⅳ组、Ⅲ组及Ⅱ组刺激后的T细胞比DC-Ⅰ组刺激后的T细胞及单纯T细胞对K562细胞的杀伤作用更显著,杀伤率随效靶比的增加而增加。其中E∶T=25∶1时,T细胞组及T-DC-Ⅰ、T-DC-Ⅱ、T-DC-Ⅲ、T-DC-Ⅳ组对K562细胞的杀伤率分别为:5.9%±2.4%、15.3%±2.3%、26.3%±3.7%、28.2%±4.5%、36.2%±3.7%。T-DC-Ⅳ组杀伤活性高于其他各组(P值均<0.01)。结论用含GM-CSF、IL-4和TNF-α的体外培养体系可从健康人PBMNC获得成熟的DCs,小剂量亚硒酸钠和K562细胞裂解液负载均可诱导出特异性杀伤靶细胞的CTL,且两者具有协同作用。     

血管生长素基因转染5-氮胞苷诱导后的骨髓基质细胞移植于缺血心肌的实验研究

目的　利用编码血管生长素基因的腺病毒 (Ad .ANG)转染 5 氮胞苷 (5 aza)诱导骨髓基质细胞 (BMSC) ,移植于大鼠缺血心肌后对心功能的保护和促血管新生作用。方法　体外培养Lewis大鼠的骨髓基质细胞 ,使用 3μmol/L的 5 aza体外强化诱导 2 4h ;然后在 5 0倍的转染倍数 (病毒数 /靶细胞 )下 ,用Ad .ANG转染诱导BMSC。通过ELISA方法检测其对ANG的表达和分泌。然后将其移植于结扎了冠状动脉前降支的Lewis大鼠缺血心肌内 (组Ⅰ )。同时设置单纯细胞移植组 (组Ⅱ )和基因治疗组 (组Ⅲ ) ,以注射无血清培养基的实验动物为对照组 (组Ⅳ )。通过心脏射血分数 (EF)、左室舒张末期容积等超声指标研究其对心功能的保护作用 ;另外通过免疫组化、电镜研究细胞存活、分化和血管新生情况。结果　Ad ANG转染BMSC后 ,在培养上清中ANG大量出现 ,4～ 7d时达到表达高峰 ,15d后仍可检测到蛋白质表达。移植于缺血心肌 4周后 ,组Ⅰ和组Ⅱ缺血区的移植细胞大部分分化为心肌样细胞 ,组ⅠEF改善程度明显好于组Ⅱ (P <0 0 5 )、组Ⅲ (P <0 0 1)和组Ⅳ (P <0 0 1) ,在促血管新生方面 ,组Ⅰ也明显优于以上 3组 (组Ⅰ 36 3个 /HPF ;组Ⅱ 10 5个 /HPF ;组Ⅲ 2 3 1个 /HPF ;组Ⅳ 0 9个 /HPF)。结论　转染Ad ANG后的BMSC移植于缺     

自体半脾组织移植的实验研究

将145只小鼠随机分组,Ⅰ对照组(25只),Ⅱ半脾保留组(40只),Ⅲ脾移植组(55只)和Ⅳ全脾切除组(25只)。光镜、TEM和SEM检查显示移植脾成活。显微分光光度计测单位面积酶 光值,ACP值Ⅰ组(0.462±0.013),Ⅱ组(0.304±0.009)和Ⅲ组(0.180±0.014)顺次显著降低(P<0.05);ANAE值Ⅰ组(0.260±0.021)大于Ⅱ组(0.218±0.016)和Ⅲ组(0.210±0.022) (P<0.05),后两组无显著差异(P>0.05)。微量全血恒温法测化学发光值,有脾鼠血清调理者Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组逐渐降低(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组无差异(P>0.05);无脾鼠血清调理者Ⅰ组大于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,Ⅳ组小于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05)。结果提示,移植脾有一定的免疫吞噬功能。     

CD44v6、E-Cadherin表达与CNE-2Z-F1裸鼠移植瘤转移的关系

目的　探讨CD44v6、E -Cadherin表达与人鼻咽癌裸鼠移植瘤转移的关系。方法　分别将人鼻咽癌细胞克隆株F1在体外与鼠肺块共同孵育及胸内移植 ,然后将带瘤细胞肺块 (Ⅰ组 )和胸内瘤组织块 (Ⅱ组 )各行裸鼠皮下移植 ,并与瘤细胞悬液皮下移植瘤 (Ⅲ组 )比较 ,观察各组移植瘤转移特点。采用免疫组织化学技术检测各组移植瘤回复培养细胞CD44v6和E -Cadherin表达。结果　Ⅰ组和Ⅱ组皮下移植瘤的总转移率和淋巴结转移率均高于Ⅲ组 (其中ⅠvsⅢ ,P <0 .0 5) ;肺转移仅发生在Ⅰ组。这两组移植瘤细胞CD44v6表达水平明显增高 ,其阳性细胞数分别为 (79.7± 5.7) %、(74.1± 3.1 ) % ,第 3组为 (65.6± 4.31 ) %移植瘤转移率与CD44v6高表达密切相关 ;E -Cadherin阳性细胞分别为 (41 .7± 4.9) %、(43.8± 6.4) %和 (2 7.4± 4.9) % ,Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组之间比较 ,有显著差异 (P <0 .0 5)。结论　CD44v6的过表达和E -Cadherin功能障碍 ,可能在鼻咽癌侵袭转移中起一定作用。     

自体骨髓单个核细胞移植治疗急性心肌梗死与陈旧性心肌梗死的疗效对比研究

目的:探讨对照研究自体骨髓单个核细胞(BM-MNC s)冠脉内移植治疗急性与陈旧性心肌梗死的临床疗效。方法:选择35例NYHA心功能分级Ⅱ~Ⅲ级行择期介入治疗术的心肌梗死患者,急性心梗患者20例,陈旧性心梗患者15例。两组患者在介入治疗术结束后均通过大腔导管于梗死相关血管注入BM-MNC s。用流式细胞仪对BM-MNC s进行细胞计数及成分鉴定;术前、术后45d、90d行静息T e99m SPECT检查进行疗效判断。结果:①用F ico ll密度梯度离心法获得单个核细胞1.7×108~5.7×108(3.6±1.7×108)个,细胞活性均大于92%;CD 34+细胞2.56%±0.98%,AC 133+细胞0.56%±0.23%。②急性心梗组术前、术后45d、90d静息T e99m SPECT心肌灌注缺损区面积占总面积百分比分别为25.11%±7.26%、17.89%±5.49%、15.19%±3.95%(P<0.05);陈旧性心梗组术前、术后45d、术后90d静息T e99m SPECT心肌灌注缺损区面积占总面积百分比分别为25.28%±7.38%、21.12%±6.82%、18.86%±6.41%(P<0.05)。急性心梗组与陈旧性心梗组术后45dSPECT灌注缺损区面积较术前分别缩小28.75%和16.46%(P<0.05);急性心梗组与陈旧性心梗组术后90d SPECT灌注缺损区面积较术后45d分别缩小15.09%和10.70%(P<0.05)。结论:自体骨髓单个核细胞梗死相关冠脉内移植治疗急性心肌梗死与陈旧性心梗均有一定的疗效,但对急性心梗的疗效优于陈旧性心梗。     

抗hnRNPB1单克隆抗体结合131I对肺癌小鼠靶向治疗的实验研究

目的 观察131I-抗hnRNPB1单克隆抗体(131I-抗hnRNPB1 MAb)、抗hnRNPB1 MAb对肺癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用.方法 用常规氯胺-T法合成131I-抗hnRNPB1 MAb,30只C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞7 d后,将荷瘤鼠随机分成5组, 每组6只.分别经尾静脉注射,Ⅰ组131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠单次治疗,Ⅱ组131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠强化治疗(给药2次,每次给药间隔3 d),Ⅲ组 Na131I 11.1 MBq/鼠,Ⅳ组抗hnRNPB1 MAb 50 μg/鼠,Ⅴ组(对照组)生理盐水0.12 mL/鼠.治疗开始后每周测量1次小鼠肿瘤的长径及短径,4周后处死小鼠,分离肿瘤并称其质量,计算抑瘤率,肿瘤组织作常规HE染色检查.结果 治疗结束时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组小鼠的平均肿瘤体积分别为(3869±192) mm3、(1987±149) mm3、(6922±532) mm3、(6962±509) mm3、(6597±521) mm3,其中Ⅰ、Ⅱ组分别与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),且Ⅱ组的平均肿瘤体积小于Ⅰ组(P＜0.05),而Ⅲ、Ⅳ组治疗结束时平均肿瘤体积分别与对照组相比差异无统计学意义.Ⅰ、Ⅱ组的抑瘤率分别为67.17%和39.03%,高于Ⅲ(1.36%)、Ⅳ(0.9%)组的抑瘤率(P＜0.05),且Ⅰ、Ⅱ组间抑瘤率的差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 抗hnRNPB1 MAb结合131I对肺癌小鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,且抑制作用呈量效关系.     

CTLA4Ig转染供者DC对同种异体胰岛移植存活的影响

目的 探讨共刺激信号阻断剂CTLA-4Ig基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC)对胰岛移植存活的影响.方法 以BN、Lewis大鼠为胰岛移植供、受体;用CTLA-4Ig基因重组腺病毒转染供、受体骨髓源性DC使之表达CT-LA-4Ig;将供、受体DC于胰岛移植前24 h经股静脉分别注入受体(设为组Ⅰ、组Ⅱ),供、受体DC混合后注入受体(组Ⅲ),注射生理盐水的为空白对照组(组Ⅳ);观察各组糖尿病鼠高血糖改善情况及存活时间,术后第20天,MTT法检测受体脾细胞对供体及无关抗原刺激的反应.结果 与对照组相比,组Ⅰ和组Ⅲ血糖维持正常时间和受体存活时间显著延长[组Ⅰ:(28.75±13.60)d和(35.38±13.21)d,P＜0.01;组Ⅲ:(41.25±13.74)d和(49.50±13.87)d,P＜0.01],组Ⅱ移植胰岛存活时间无延长[(8.75±3.33)d与(7.33±1.97)d相比,P＞0.05].术后第20天,组Ⅰ、组Ⅲ脾细胞对供体抗原刺激的反应均明显低于正常对照[(0.24±0.05)和(0.21±0.05)与(0.70±0.09)相比,P＜0.01],而对无关抗原刺激的反应与正常对照无显著差异[(0.66±0.07)和(0.66±0.07)与(0.69±0.05)相比,P＞0.05].结论 CTLA-4Ig基因修饰的供体DC可以明显延长大鼠移植胰岛的存活时间,而受体DC则无此作用,但两种DC联合应用可以使移植胰岛获得更长的存活时间.     

烫伤小鼠供体皮肤特异性延长成活研究

目的：以烧伤小鼠为模型研究供体皮肤特异性延长成活的可行性。方法：C57BL/6小鼠造成20％TBSAⅢ度烧伤创面,48h后切痂,移植BALB/c或C3H/He小鼠皮肤,经60Co射线全身照射9Gy,立即注射无T淋巴细胞的C57BL/6小鼠和BALB/c小鼠的骨髓细胞。组Ⅰ为烧伤的C57BL/6小鼠移植BALB/c小鼠皮肤;组Ⅱ在组Ⅰ基础上行放射处理;组Ⅲ在组Ⅱ基础上行混合骨髓移植;组Ⅳ类似组Ⅲ,但移植的皮肤为C3H/He;组Ⅴ为C57BL/6小鼠同系皮肤移植对照组。结果：除组Ⅱ小鼠由于骨髓耗竭而全部死亡外,其他各组间动物死亡率无差异,未见移植物抗宿主病表现。异体皮平均成活时间组Ⅰ为(8.4±1.5)d;组Ⅱ(17.5±3.7)d;组Ⅳ(32.5±8.1)d;组Ⅲ为(78.2±5.6)d,与组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅳ比较P<0.05;组Ⅴ90d。结论：C57BL/6小鼠对BALB/c小鼠皮肤显示了特异性移植耐受,而排斥MHC不相关的C3H/He的小鼠皮肤。本研究也为进一步的临床基础研究奠定了基础。     

慢性B淋巴细胞白血病B细胞B7.2分子表达缺陷的研究

目的研究比较慢性B淋巴细胞白血病(BCLL)与正常人外周血中B细胞的B7.1、B7.2分子的表达水平,探讨其表达与慢性B淋巴细胞白血病发病机制的关系.方法将23例BCLL患者分为0～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期两组,并设正常对照组.乙聚蔗糖-泛影钠淋巴细胞分离液分离出BCLL患者及正常人的外周血单个核细胞,体外培养24h后,流式细胞仪检测B细胞B7.1、B7.2表达的百分率;BCLL组与对照组及0～Ⅱ期组与Ⅲ～Ⅳ期组间分别进行t检验.结果与正常对照组相比,Bell患者外周血B细胞胞.2分子的表达率(20%±13%)明显低于正常人(58%±12%,P＜0.O5),B7.1单独表达率及B7.1、B7.2同时表达率在正常人与BCLL两组比较差异无显著意义(P＞0.05);BCLL组中0～Ⅱ期组与Ⅲ～Ⅳ期组B7.2的表达率分别为25%±17%及17%±8%(P＞0.05).结论外周血B细胞B7.2分子的表达存在缺陷,这可能是此病的发病机制之一及机体不能免疫清除白血病细胞的重要原因.     

甲氨蝶呤不同治疗方案对异位妊娠的疗效观察

目的观察甲氨蝶呤(MTX)不同治疗方案对异位妊娠的疗效。方法选择192例异位妊娠药物保守治疗病例,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组:Ⅰ组采用MTX 20mg加5%葡萄糖注射液500mL静脉滴注5d;Ⅱ组采用MTX50mg/m2隔日分臀肌注2次;Ⅲ、Ⅳ组分别同Ⅰ、Ⅱ组方案的同时均加用米非司酮450mg口服。结果Ⅰ组治愈率(72.92%)低于Ⅱ组(91.66%),P<0.01;Ⅲ组治愈率(75%)低于Ⅳ组(87.5%),P<0.01。治疗7d后血β-HCG下降率在Ⅰ和Ⅱ组、Ⅲ和Ⅳ组I、和III组I、I和IV组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论使用MTX 50mg/m2隔日肌注,比分次静脉滴注方案疗效好,药物毒副反应轻,加用米非司酮并不增加疗效。     

转基因过表达肌浆网钙ATP酶基因治疗慢性心力衰竭的实验研究

目的研究肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)转基因在非缺血性和缺血性心力衰竭中的治疗价值。方法构建含SERCA2acDNA的重组腺病毒和腺相关病毒载体,制备腹主动脉缩窄和心肌梗死心力衰竭两种心衰大鼠模型,分别采用经膈将病毒液(2×1011病毒颗粒)注入心包腔,和局部心肌注射方法导入病毒,术后10~30d经颈动脉插管至左心室进行血流动力学检测。结果重组腺相关病毒rAAV2-SERCA2a导入主动脉束扎心衰大鼠心包腔后10d、30d其血流动力学与对照治疗组(rAAV2-EGFP)组相比有明显改善,30d左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt)、左室内压最大下降速率(-dp/dt)分别提高57%(94mmHgvs147mmHg)、110%(5350mmHg/svs11225mmHg/s)和99.8%(4198mmHg/svs8390mmHg/s),左室舒张末压(LVEDP)则降低60%(22mmHgvs9mmHg)。转导SERCA2a后,rAAV-SERCA2a导入组在30d时SERCA2a蛋白质表达明显高于心衰组和rAAV2-EGFP导入组,达到对照组大鼠水平。重组腺病毒rAV-SERCA2a导入心肌梗死心力衰竭心衰大鼠心肌后21d血流动力学明显优于rAAV2-EGFP导入组,LVSP、+dp/dt和-dp/dt分别提高28%(86mmHgvs110mmHg)、41%(4272mmHg/svs6026mmHg/s)和71%(2789mmHg/svs4756mmHg/s),LVEDP则降低70%(3.89mmHgvs-5.34mmHg),但未能纠正至对照组水平。结论重组腺相关病毒rAAV2-SERCA2a和腺病毒rAV-SERCA2a,介导SERCA2a在大鼠心肌过表达,可有效改善心衰大鼠模型血流动力学状况。     

Dose-dependent effects of recombinant human interleukin-11 on the systemic hemodynamic function and urination

The purpose of this study was to determine whether recombinant human interleukin-11 (rhIL-11) could dose-dependently improve the hemodynamic function. Using a swine hemorrhagic shock model, rhIL-11 was given at the beginning of resuscitation. The animals were randomized to receive a single dose of rhIL-11 (5, 20, or 50 microg/kg, group I to III for respectively) or saline (group IV). Blood, urine and both pleural and peritoneal effusion were thus obtained and analyzed. The mean arterial pressure (MAP) was higher post-resuscitation (PR) in group III (62.9+/-8.2 mmHg) than in groups I, II and IV (54.9+/-1.7, 53.9+/-4.3, 55.9+/-9.4 mmHg, respectively) (P<0.01). The urine output (I: 999+/-428, II: 1249+/-180, III: 1434+/-325, IV: 958+/-390 ml) and the cardiac output (CO) (I: 3.01+/-0.66, II: 3.30+/-0.49, III: 3.43+/-0.57, IV: 2.73+/-0.49 L/min.) increased in a dose dependent manner of rhIL-11. CO level and urine output were significantly higher in group III than in group IV (P<0.05). In addition, the volume of third space fluid loss (pleural and peritoneal effusion) of group III was significantly lower than other groups (I: 157+/-32, II: 138+/-32, III: 82+/-21, IV: 125+/-32 ml) (P<0.05). In conclusion, even a low dose of rhIL-11 improved the hemodynamic functions dose-dependently in a porcine model of hemorrhagic shock, although the relationship did not demonstrate a simple linearity.     

Clinical and gene mutation studies on a Chinese pedigree with glucocorticoid- remediable aldosteronism

Objective To report the clinical characteristics, biochemical profiles, diagnosis and treatment of one Chinese pedigree with glucocorticoid- remediable aldosteronism (GRA) and to study its molecular mechanism.Methods Plasma and urinary aldosterone, cortisol and plasma renin activities were dynamically tested and diagnostic therapy with dexamethasone was undergone in 3 affected subjects. Long- distance PCR as well as DNA sequencing were applied to detect the fusion gene in this pedigree. Results In this GRA pedigree, there were 4 affected subjects who had hypertension, hypokalemia and low basic and provoked renin activity. Three patients were given dexamethasone treatment, and had a significant decrease in plasma aldosterone concentrations (PACs) (from 192±9 ng/L to 87±7　ng/L,P&lt;0. 05) after 5 days. Among them, one patient (Ⅱ- 3) responded quite satisfactorily to the therapy, with serum K[+ rising from baseline value of 2. 5 to 2. 9, 3. 8 and 4. 15 mEq/L on the 10th, 28th and 35th days after treatment respectively. Three weeks later, his blood pressure decreased from its original level of 146. 3±10. 7/94. 6±5. 3 mm Hg to 138. 3±3. 1/87. 3±6. 1 mm Hg (P&lt;0. 05). The other 2 members (Ⅲ- 2 and Ⅲ- 4) showed modest improvement although their PACs decreased significantly. Using long- distance PCR, we found a 3. 9 kb band in all 4 affected individuals, which was absent in 5 unaffected members from this pedigree or 8 patients with aldosterone- producing adenoma (APA) or idiopathic hyperaldosteronism (IHA). By DNA sequence analysis, we found that the breakpoint of 'unequal crossing- over' is both within intron 2 of the 11β- hydroxylase gene (CYP11B1) and the aldosterone synthase gene (CYP11B2). Conclusions The excess of mineralocorticoid in patients with GRA can be inhibited by exogenous glucocorticoids. The fusion gene resulting from unequal crossing- over between the 11β- hydroxylase gene and the aldosterone synthase gene is the pathogenesis of this Chinese GRA pedigree.     

L-精氨酸调节左向右分流所致肺动脉高压大鼠胶原代谢的研究

目的　探讨L 精氨酸 (L Arg)对高肺血流量所致肺动脉高压大鼠肺动脉胶原代谢的干预作用及其机制。方法　在大鼠行腹主动脉 下腔静脉分流造成的肺动脉高压模型基础上 ,给予L Arg灌胃 (1g·kg-1·d-1,11周 )。 11周后 ,观察肺血流动力学 ,采用免疫组织化学法检测大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达 ,以原位杂交法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白α1(Ⅰ )mRNA、α1(Ⅲ )mRNA、基质金属蛋白酶 1(MMP 1)mRNA、抑制胶原降解作用的中性蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)mRNA的表达。结果　分流 11周后 ,肺动脉高压形成。分流组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原、α1(Ⅰ )、α1(Ⅲ )前胶原mRNA表达与对照组比较明显增加 ,同时TIMP 1mRNA、MMP 1mRNA表达、TIMP 1/MMP 1比值明显高于对照组 (P <0 .0 1)。然而 ,L Arg明显缓解了分流组大鼠肺动脉高压。分流 +L Arg组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原、α1(Ⅰ )、α1(Ⅲ )前胶原mRNA表达较分流组明显降低 ,且TIMP 1mRNA、MMP 1mRNA表达、TIMP 1/MMP 1比值较分流组显著降低 (P值均 <0 .0 5 )。结论　L Arg通过减少细胞外基质 胶原的堆积 ,增加其降解 ,从而对高肺血流量所致肺动脉高压及肺动脉血管结构重建的形成有重要的调节作用。     

皮下移植心钠素基因表达细胞胶囊对高血压大鼠的降血压效应

目的　研究微孔胶囊介导的心钠素基因表达细胞的皮下移植对幼龄自发性高血压大鼠(SHR)血压的影响。方法　借助于逆转录病毒载体及其包装细胞系的作用 ,将人心钠素基因的逆转录病毒表达重组体和未携带目的基因的逆转录病毒空载体pLNCX分别导入SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中 ,制备可从孔中排出心钠素多肽的微孔胶囊 ,并将表达和不表达人心钠素的新生鼠皮肤成纤维细胞分别装入不同的胶囊中 ,封闭后分别植于实验组和对照组幼龄SHR(各 1 0只 )的皮下。移植后每周测定大鼠血浆心钠素水平、血压、尿量、尿液钾、钠浓度和体重 ,连续 7周。结果　在逆转录病毒载体的介导下 ,人心钠素基因既可在逆转录病毒载体的包装细胞系中表达 [(5 84± 0 0 7)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ] ,也可在SHR新生鼠的皮肤成纤维细胞中表达 [(1 3 37± 2 36)ng·1 0 - 6 细胞·2 4h 1 ]。皮下移植胶囊后第 1周 ,实验组大鼠血浆中的心钠素浓度 (1 31pg/ml± 8pg/ml)明显高于对照组 (1 0 4pg/ml± 7pg/ml,t=8 62 ,P <0 0 1 )。 7周观察期间 ,两组大鼠的血压均随个体发育而逐渐升高 ,但实验组血压[(1 2 9± 9)～ (1 69± 9)mmHg]却始终明显低于对照组 [(1 4 5± 1 0 )～ (1 81± 9)mmHg ,P <0 0 5～0 0 1 ) ] ,其中第 2周时的血压差异达     

自体静脉移植与胰岛素样生长因子-Ⅰ重建勃起反射通路的实验研究

目的 探讨自体静脉移植结合使用胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)重建勃起反射通路的可行性。方法 将48只雄性成年SD大鼠随机分成4组,每组12只。Ⅰ组:假手术组,只找到双侧海绵体神经(CN)即关闭切口;Ⅱ组:CN离断组,切除大鼠双侧CN约5 mm及其侧支;Ⅲ组:静脉移植 IGF-Ⅰ组,在Ⅱ组的基础上,用大鼠自体静脉移植桥接缺省的CN,并向移植静脉管腔内注射IGF-Ⅰ;Ⅳ组:静脉移植 生理盐水组,用等量的生理盐水代替Ⅲ组的IGF-Ⅰ。4个月后,阿朴吗啡试验评估大鼠的勃起功能;然后在大鼠阴茎海绵体内注射荧光金,对CN逆行追踪。结果 Ⅲ组的勃起率达92％(11/12),明显高于Ⅱ组(50％)和Ⅳ组(O％),P<0.01。荧光显微镜下计数,Ⅲ组盆神经节中荧光金阳性着色细胞数明显多于生理盐水组和CN切断组(P<0.01)。结论 自体静脉移植结合使用IGF-Ⅰ,是一种有效的治疗因CN损伤而致勃起功能障碍的新方法。     

内皮祖细胞灌注供心延长心脏移植物存活时间的实验研究

 目的 研究供体内皮祖细胞（endotherial progenitor cell， EPC）灌注供心对同种异体心脏移植物生存时间的影响。方法 获取Sprague Dawley （SD）大鼠的骨髓细胞，通过密度梯度离心法分离培养单个核细胞，取贴壁细胞选择性诱导培养2周以上，获取内皮祖细胞（EPC）。以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定EPC。20只体重200～250g的雄性SD大鼠为供体，20只体重200～250g的雌性Wistar大鼠为受体，分为4组，每组5对。组I：术后不使用环胞霉素；组II：术后7d每天使用环胞霉素5mg/kg；组III：术中供心经冠脉灌注内皮祖细胞1×106个，术后不使用环胞霉素；组IV：术中供心经冠脉灌注内皮祖细胞，术后7d每天使用环胞霉素5mg/kg。观察各组供心存活时间。结果 贴壁细胞经诱导培养后3d开始伸展，5d形成集落，7~10d增殖加速并出现条索状结构，2周大部分细胞呈多角形。Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双染，免疫荧光染色阳性率大于70％。组I、II、III、IV各组供心平均存活时间分别为6.2±0.8、11.6±1.1、9.4±1.1和18.8±1.6d。组II、III、IV移植物的平均存活时间较组I显著延长（P<0.05）。结论 内皮祖细胞灌注合并环胞霉素运用可以延长大鼠心脏移植物的存活时间。     

树脂-羟磷灰石复合材料应用于经皮椎体成形术的实验研究

目的探讨应用树脂-羟磷灰石（EH）复合材料行经皮椎体成形术的适当配比比例及显影剂的使用。方法按液粉比8：9、8：8、8：7配制成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,分别在粉剂中加入20％硫酸钡的配制成Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组;测量混合时的物料状态和发热温度;Ⅰ～Ⅴ组制成直径5mm,高20mm的圆柱体,行X线摄片,观察显影性;Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组圆柱体进行抗压强度测试。将骨质疏松椎体T8～L5做成压缩骨折模型,配比为8：8的对照组和加入20％硫酸钡的实验组进行配对实验,在37℃水浴中,注入骨水泥,测量椎体中心的温度和椎管后壁的温度（PT）,并记录骨水泥注入量;行X线摄片,观察显影性;在力学材料机上测量两组椎体的强度及刚度,对比EH复合骨水泥加入造影剂前后恢复椎体强度和刚度的能力。结果加入20％硫酸钡的EH材料粥样期适当延长,约60s,温度降低,显影性良好,容易注射,机械强度较高。对照组和实验组均很好地恢复了椎体的强度和刚度,实验组显影性良好,PT不超过50℃。结论加入20％硫酸钡的液粉比为8：8的EH材料是用于治疗疼痛性椎体压缩骨折良好、有效的填充材料。     

INTRATHYMIC INOCULATION OF LIVER SPECIFIC ANTIGEN ALLEVIATES LIVER TRANSPLANT REJECTION

Objective To study the effects of liver specific antigen (LSA) on liver allotransplantation rejection. Methods Orthotopic liver transplantation was performed in this study. Group Ⅰ: syngeneic control (Wistar-to-Wistar); Group Ⅱ: acute rejection (SD-to-Wistar). Group Ⅲ: thymic inoculation of SD rat LSA day 7 before transplantation. The observation of general condition and survival time, rejection grades and the NF-κB activity of splenocytes were used to analyze severity of acute rejection and immune state of animals in different groups. Results The general condition of group Ⅰ was fair post transplantation with no sign of rejection. All recipients of group Ⅱ died within days 9 to 13 post transplantation with median survival time of 10.7 ±1.37 days. As for group Ⅲ, 5 out of 6 recipients survived for a long period with remarkably better general condition than that of group Ⅱ. Its rejection grades were significantly lower than group Ⅱ (P＜ 0.05).NF-κB activity was only detected in group Ⅰ between days 5 and 7 after transplantation, whereas high activity of NF-κB was detected at all points in group Ⅱ and low NF-κB activity was detected in group Ⅲ which was significantly lower than that of group Ⅱ (P ＜ 0.05). Conclusions LSA is an important transplantation antigen directly involved in the immunorejection of liver transplantation. Intrathymic inoculation of LSA can alleviate the rejection of liver allotransplantation,grafts survive for a period of time thereby, allowing a novel way to liver transplantation immunotolerance.