供者KIR基因型B／X对无关HLA全相合造血干细胞移植的影响

目的分析NK细胞免疫球蛋白样受体（KIR）B／X基因型对无关供者HLA全相合造血干细胞移植患者预后的影响。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应（SSP．PCR）和序列特异性寡核苷酸探针聚合酶链反应（SSOP-PCR）的方法,对52对HLA全相合供．受者进行KIR与HLA分型．患者中急性淋巴细胞白血病（ALL）22例,急性髓系自血病（AML）13例,慢性粒细胞白血病（CML）15例,骨髓增生异常综合征（MDS）l例,急性杂合型白血病（HAL）l例。结果①28例供者KIR基因型为B／X,24例供者KIR基因型为A／A。②KIR基因型B／X组患者移植后中性粒细胞和血小板的重建时间与A／A基因型组相比差异无统计学意义（P〉0．05）;两者的Ⅲ^。-Ⅳ^。急性GVHD（10．7％VS20．8％,P=-0．266）和慢性GVHD（53．6％Vs29．2％,P=0．067）之间的差异无统计学意义。B／X基因型组患者移植后3年持续缓解率（70．7％VS62．5％．P=0．414）和3年总生存率（75．5％VS62．5％,P=0．194）高于A／A组,但差异无统计学意义。结论在无关供者HLA全相合造血干细胞移植中,供者KIR基因型B／X可能增加了患者慢性GVHD的发生率,对持续缓解率和总生存率无明显影响。     

供者KIR和受者HLA遗传背景与血缘关系全相合造血干细胞移植预后的关系

目的探索供者抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like re- ceptor,KIR)和受者HLA遗传背景与血缘关系全相合造血干细胞移植(HSCT)预后的关系。方法采用反向序列特异性寡核苷酸探针(RSSOP)和(或)序列特异性引物PCR(PCR-SSP)分型技术检测HLA 基因型,采用PCR-SSP技术检测供者KIR基因型。对59例接受血缘关系HLA-ABDR全相合、非去除 T细胞HSCT的恶性血液病患者病例资料进行回顾性分析。结果Ⅱ-Ⅳ级急性移植物抗宿主病 (aGVHD)发生率在KIR-HLA相容组患者为32％,非相容组患者为78％,两者差异有统计学意义(P= 0．026);Ⅱ-Ⅳ级aGVHD在Bw4相容组患者为24％,Bw4非相容组患者为61％,差异亦有统计学意义(P=0．018)。真菌感染发生率在Bw4相容组患者为14％,Bw4非相容组患者为44％,前者显著低于后者(P=0．028)。髓系疾病中,真菌感染发生率在Bw4相容组与Bw4非相容组患者分别为12％和 80％,前者明显低于后者(P=0．002);C2相容组患者总生存(Overall survival,OS)率显著高于C2非相容组患者(P=0．01)。结论供者KIR和受者HLA遗传背景与血缘HIA全相合HSCT预后与 aGVHD发生率、OS率和真菌感染发生率均有相关关系。供者KIR与受者HLA相容时,受者aGVHD 发生率下降。选择Bw4相容的供者有助于减轻患者aGVHD及真菌感染发生率,选择C2相容的供者有助于提高患者OS率。研究结果为遗传学指标指导下供者优化选择提供分子依据,为临床制定治疗方案提供参考。     

异基因活化的NK细胞与HLA全相合同胞造血干细胞移植预后的关系

最新的研究表明,在HLA全相合同胞造血干细胞移植中,当受者的细胞表面缺乏供者NK细胞抑制型受体的配体时,供者来源的NK细胞同样会发生异基因活化,通过特异性杀伤受体抗原呈递细胞达到阻止GVHD启动的目的,主动攻击受者淋巴细胞促进供者细胞植入,识别和攻击受者白血病细胞以降低移植后白血病复发率,从而改善HLA全相合同胞造血干细胞移植患者预后,同时活化型受体亦会对患者的预后产生影响。本文就抑制性和活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）对HLA全相合同胞造血干细胞移植预后影响的研究进展作一综述：     

供者活化型KIR2DS5在单倍体相合造血干细胞移植预后中的意义

本研究探讨供者杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）和受者人类白细胞抗原（HLA）基因型在单倍体相合造血干细胞移植（HSCT）预后中的意义。26例患者接受单倍体相合HSCT,均未进行体外T细胞去除（TCD）。采用序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR-SSP）分型技术对供、受者HLA和供者KIR基因型进行检测。根据供者KIR和受者HLA-Bw4组、-C1组、-C2组等位基因分析结果进行供受者KIR/HLA分组。对KIR/HLA不合与相合组、Bw4不合与相合组、C2不合与相合组、Bw4和C2均不合组与至少其一相合组在造血重建、移植物抗宿主病（GVHD）、无病生存（DFS）、移植后感染及移植相关死亡（TRM）等方面的差异进行比较;并就供者活化型KIR对单倍体相合HSCT预后的影响进行评价。结果表明：各组在造血重建、急性或慢性GVHD发生率、DFS、移植后感染及TRM等方面均无显著性差异（p均〉0.05）,但C2不合组发生严重GVHD4例。供者活化型KIR2DS5阳性组2年DFS明显优于阴性组,分别为（85.7±13.2）%、（31.2±12.8）%,p〈0.05〕。结论：供者KIR及受者HLA基因型对单倍体相合HSCT预后有影响,供者携带活化型KIR2DS5可能有助于提高患者的DFS。     

HLA相合血缘关系供者异基因造血干细胞移植

异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）使血液系统疾病、遗传性疾病及实体肿瘤的传统治疗方法发生了革命性的变化，尤其为血液系统恶性疾病的治疗开拓了新领域，成为化疗以外的另一重要治疗途径。近年来，随着对移植病理生理和移植免疫认识的逐步深入以及移植相关技术的日趋完善，allo-HSCT的疗效不断提高，HLA相合血缘关系allo-HSCT已成为治疗急性白血病、慢性粒细胞白血病（CML）、重型再生障碍性贫血（SAA）和骨髓增生异常综合征（MDS）的重要手段。     

KIR配体不匹配对异基因造血干细胞移植的影响

近年来,NK细胞及其受体在造血干细咆移植(HSCT)中的作用越来越受到关注。在HLA半相合异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的相关研究中发现,供受者的杀伤细胞免疫球蛋白样受体的配体不匹配可激活NK细胞,因而诱导移植物抗肿瘤效应,还可减少移植物抗宿主病(GVHD)和降低移植排斥率。本文拟就杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其配体对all-HSCT中移植排斥、GVHD及移植物抗肿瘤效应的影响的研究进展进行综述。     

KIR多态性与异基因造血干细胞移植的研究进展

<正>杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)是主要表达于自然杀伤细胞(nature killercell,NK)表面的一类糖蛋白受体,能够与细胞表面的HLA-Ⅰ类分子特异性结合,调控NK细胞的功能。异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后的并发症,如移植物抗宿主病(GvHD)、免疫排斥和移植后复发等,均是影响allo-HSCT治疗效果的主要因素。研究发现,在allo-HSCT中,供者抗受者     

非血缘HLA相合供者造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的临床分析

本研究旨在评价HLA不全相合的亲属供者或HLA相合非血缘供者造血干细胞移植在治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效和安全性。在2005年11月至2011年5月期间采用非血缘供者或者单倍体相合供者造血干细胞移植治疗SAA患者20例,其中亲缘HLA不合单倍体相合供者14例,非血缘HLA相合供者6例。预处理采用氟达拉滨(FLU)、环磷酰胺(CTX)和抗胸腺细胞球蛋白(ATG)方案,移植物抗宿主病(GVHD)预防方案为经典的环孢素A(CsA)联合短程甲氨蝶呤(MTX)及霉酚酸酯(MMF)。对单倍体相合供者采集经G-CSF动员的骨髓及外周血干细胞联合应用;非血缘供者单纯采集外周血干细胞。结果表明:所有患者均获供者型造血重建,粒细胞植活中位时间14(11-20)d,血小板植活中位时间17(13-31)d,2例取得完全供者植入后2个月发生排斥,其中1例进行母亲单倍体相合供者二次移植,达到完全供者持久植入;移植后发生Ⅱ度急性GVHD 4例,慢性GVHD发生7例,其中1例为慢性广泛性GVHD;14例无病生存,所有存活患者最少随访时间在8个月以上,中位随访时间为48个月,血象完全恢复,Kaplan-Meier计算的累积无病生存率为68.9%。结论:采用FLU、CTX和抗淋巴细胞免疫球蛋白进行预处理,用HLA不全相合的亲属供者或HLA相合非血缘供者造血干细胞移植治疗SAA,植入率高,感染发生率降低,获得良好的长期生存疗效。     

NK细胞与造血干细胞移植

造血干细胞移植能重建机体造血和免疫功能，治疗白血病和再生障碍性贫血等某些恶性血液病。现认为，在决定移植术预后的诸因素中，除供、受者间组织相容性抗原的吻合度外，NK细胞表面免疫球蛋白样受体(KIR)介导的NK细胞同种反应性在清除白血病细胞(GVLR)、减弱移植物抗宿主反应(GVHR)和延长移植物存活时间中均起着重要的作用，可作为筛选供、受者的有力依据。本文拟对这一领域的研究进展作一综述。     

HLA单倍体相合外周血造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血

目的 探索HLA单倍体相合外周血造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血的可行性.方法 16例Ⅲ度重型β地中海贫血患儿接受HLA单倍体相合外周血造血干细胞移植.预处理方案:2007年12月前采用A方案,即氟达拉滨(总量150 mg/m2)+白消安(静脉,总量520 mg/m2)+环磷酰胺(总量100 mg/kg)+抗胸腺细胞球蛋白(总量10 mg/kg)+全身照射(总量3 Gy);2007年12月后采用B方案,即氟达拉滨(总量240 mg/m2),不进行全身照射,其余同A方案.移植物抗宿主病(GVHD)预防采用环孢素+甲氨蝶呤+霉酚酸酯三联方案.结果 16例患者中14例(87.5％)成功植活,中性粒细胞≥0.5×109/L的时间为移植后第10～17天,中位时间第13天;血小板≥20×109/L的时间为移植后第14 ～20天,中位时间第15天.植活的14例患者移植后第30天检测证实均为供者型完全嵌合状态.2例患者未能植入,其中1例于移植后第52天自体造血恢复.Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD4例,其中皮肤Ⅱ度GVHD2例,皮肤Ⅲ度GVHD1例,肠道Ⅳ度急性GVHD 1例,广泛型慢性GVHD1例.中位随访时间49个月,14例患者存活,其中13例无病存活.结论 HLA单倍体相合外周血造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血,可以使多数患者获得长期稳定的植活,对于无全相合供者的患儿而言是一种可行的治疗选择,急慢性GVHD仍是影响长期生存率及生活质量的主要因素.     

KIR2DS4等位基因在无关全相合异基因造血干细胞移植中的作用

目的 研究中国南方汉族人群中KIR2DS4等位基因分布及2DS4基因对无关供者全相合造血干细胞移植(HSCT)的影响.方法 采用基因测序(Sequenee-based testing,SBT)和TOPO-TA 克隆相结合的方法 ,对接受HSCT的75对HLA-A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB1高分辨全相合的供、受者进行KIR2DS4等位基因分型,150名供、受者均为中国南方汉族人群,75例受者中急性淋巴细胞白血病(ALL)29例,慢性粒细胞白血病(CML)24例,急性髓系白血病(AML)19例,其他恶性血液病3例.结果 150名供、受者中139例(92.7%)存在KIR2DS4基因,对2DS4基因全长测序后发现4个2DS4等位基因:KIR2DS4*00101、*003、*004和*007;109例(78.4%)存在2DS4*00101;2DS4缺失型(具有1个或缺失2DS4*00101基因)与完整型(具有两个2DS4*00101基因)的存在比率为1:2;发现3个KIR2DS4新基因.当供者KIR分型为B/x(40例)时,移植后总体生存率明显高于供者为A/A组(35例)[RR=3.1(95%CI 1.1～8.6),P=0.007];当供者为完整型(36例)时,移植后总体生存率低于供者为缺失型(39例)(P=0.031);在A/A组中,当供者为完整型(14例)时,移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)的发生率明显高于供者为缺失型(21例)[RR=9.0(95%CI 1.2～66.9),P=0.010],并以Ⅲ～Ⅳ度aGVHD尤为明显(P=0.006).结论 SBT与TOPO-TA基因克隆的高分辨分型方法可用于研究KIR基因家族多态性,并且移植前在HLA分型的基础上对供受者进行KIR2DS4基因分型,可能对临床选择合适的供者提供有利的依据.     

人NK细胞表面KIR与HLA I类抗原

KIR受体与HLA相互作用在人类遗传、免疫应答及异基因造血干细胞移植等方面发挥着重要作用.KIR能识别HLA I类抗原;KIR与HLA各自能独立遗传,HLA配型不能准确推断KIR表型;KIR的表达主要与其基因型有关,HLA对KIR表达的调节作用微乎其微,KIR的基因型可以决定其表现型.供受者间KIR受体-HLA配体不相合有利于异基因造血干细胞移植,尤其是单倍体相合造血干细胞移植,KIR受体-配体模型可以更好地提示造血干细胞移植的预后.本文就KIR与HLA在造血干细胞移植中的相互作用、KIR与HLA的遗传学基础、NK细胞表面KIR表达与HLA的关系及KIR和HLA在免疫应答中的作用作一综述.     

比较脐血与非血缘不全相合供者移植对恶性血液病疗效的Meta分析

目的 分析和比较非血缘脐血干细胞移植（unrelated cord blood transplantation, UCBT）和人类白细胞抗原不全相合非血缘供者移植（human leukocyte antigen mismatched unrelated donor transplantation, HLA MMUDT）对成人恶性血液病的疗效及预后。方法 计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane图书馆的临床对照试验数据库（CENTRAL）、中国生物医学文献数据库（CBM）、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库、维普数据库（VIP）,并对纳入文献的参考文献进行扩大检索。采用RevMan5.3软件进行统计分析。结果 共纳入7篇文献,包含1 275例接受UCBT治疗患者及751例接受MMUDT治疗患者。Meta分析结果显示,UCBT组的急、慢性移植物抗宿主病的发生率均低于MMUDT组（RR=0.89,95%CI=0.80～0.99,P=0.03;RR=0.63,95%CI=0.50～0.79,P＜0.01）,感染相关病死率高于MMUDT组（RR=1.23,95%CI=1.05～1.46,P=0.01）,但是两组的复发率、移植相关病死率、总体生存率、无病生存率差异无统计学意义（RR=0.85,95%CI=0.65～1.11,P=0.23; RR=0.95,95%CI=0.78～1.17,P=0.51;HR=1.01,95%CI=0.90～1.13,P=0.87;HR=1.04,95%CI=0.91～1.20,P=0.56）。结论 对于成人高度恶性血液疾病,未找到全相合血缘和非血缘关系供者而言,脐血移植及不全相合非血缘供者移植可作为一种有效的治疗方法。MMUDT对于感染风险较大、缺乏全相合供者的患者较UCBT有一定的优势。     

Successful treatment of advanced extranodal NK/T cell lymphoma with unrelated cord blood transplantation

Nasal natural killer (NK)/T cell lymphoma is a rare entity of non-Hodgkin's lymphoma which mostly occurs in East Asian countries. The advanced disease above clinical stage III is often refractory to the radiation and chemotherapies, remission is transient even if achieved, and median survival is about 12 months. Thus the prognosis of advanced NK/T cell lymphoma is generally poor, however, the promising results of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for advanced NK/T cell lymphoma have been recently reported. In most of these cases, stem cell sources were human leukocyte antigen (HLA) matched donors and alternative sources were seldom used. We report here a case of a 36-year-old woman who was diagnosed as having an extranodal NK/T cell lymphoma, nasal type. The patient achieved a complete remission after 2 cycles of chemotherapy including Carboplatin, Etoposide, Ifosfamide, and Dexamethasone, but 3-months later relapsed during the search for HLA-matched unrelated donors. She received unrelated cord blood transplantation (CBT) in the second remission achieved by a regimen containing L-asparaginase. The conditioning regimen was 12 Gy of total body irradiation, high-dose cytarabin and cyclophosphamide. FK506 and methotrexate were used for graft-versus-host disease (GVHD) prophylaxis. GVHD involving the intestine and the oral mucosa was observed, but improved without additional immunosuppressive therapies. The patient remains in remission 33 months after CBT. Cord blood thus could be an appropriate stem cell source for patients with advanced NK/T lymphoma who have no HLA matched donors.     

Effect of flavophospholipol on conjugation frequency between Escherichia coli donor and recipient pairs in vitro and in the chicken gastrointestinal tract

OBJECTIVES: To examine the ability of flavophospholipol to inhibit bacterial conjugation between Escherichia coli donor and recipient pairs in vitro and in day-of-hatch chickens. METHODS: In vitro donor cultures were incubated in the presence of 0, 2, 4, 8, 16, 32 and 64 mg/L flavophospholipol during primary overnight mono-cultures only, secondary conjugation cultures only, or throughout primary and secondary cultures. Transconjugants were selected using oxytetracycline and nalidixic acid. Treatment groups A-G (n=20) of day-of-hatch broiler chickens received 0, 2, 4, 8, 16, 32 and 64 g/ton flavophospholipol, respectively, in their feed throughout the experiment. On day 4, all treatment groups were given 0.25 mL of donor and recipient E. coli at 7.0 and 9.0 log10 cfu/mL, respectively. On day 10, the birds were euthanized and the caecal contents were cultured on selective medium (oxytetracycline and nalidixic acid). RESULTS: A dose-dependent reduction in transconjugant populations was observed in vitro when flavophospholipol was present in the secondary conjugation culture. The susceptibility profiles of transconjugants obtained from in vitro studies were identical to the predicted profile of the donor and recipient combination. There was no significant difference (P>or=0.05) in the number of transconjugants isolated from chickens among any of the flavophospholipol treatment groups when compared with the controls. The susceptibility profiles of chicken transconjugants suggested acquisition of naturally occurring plasmids. CONCLUSIONS: Flavophospholipol strongly inhibited conjugation in vitro, but did not prevent recipient E. coli from acquiring resistance determinants in vivo.     

输入供体凋亡细胞对受体外周免疫耐受的影响

背景:预输注供者凋亡细胞能够诱导受者体内产生针对供者抗原发生的特异性免疫耐受,但其具体途径尚不清楚.目的:观察供体凋亡淋巴细胞输注后受体外周血细胞因子的变化.设计、时间及地点:细胞观察性实验,于2007-11/2008-05在南方医科大学附属珠江医院移植免疫实验室完成.材料:供体C57BL雄性小鼠14只,8～10周龄,受体Balb/c雄性小鼠50只,6～8周龄.方法:分离供体小鼠脾脏细胞,放置于紫外线灯距离20 cm处的摇床上照射1 h,紫外线诱导C57BL小鼠脾脏细胞凋亡.将受体Balb/c小鼠随机分为凋亡细胞组和活细胞组,分别将107个供体C57小鼠脾脏凋亡细胞、活细胞经尾静脉输注于受体小鼠.主要观察指标:输注后0,1,3,6,12 h经心脏采血,Luminex技术液态芯片法检测外周血白细胞介素1 β、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素5、白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素12、粒细胞-巨细胞集落刺激因子、干扰素γ、肿瘤坏死因子变化.结果:只检测到白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素12、粒细胞-巨细胞集落刺激因子、干扰素γ 5种细胞因子,其他细胞因子末测出.经紫外线诱导后小鼠脾脏细胞凋亡率达到93.86%.与0 h相比,外周血中干扰素γ和白细胞介素10分别在输注活细胞后6 h和3,6 h明显升高,其他细胞因子无明显变化.与0h相比,输注凋亡细胞1,3,6,12 h后,外周血中各细胞因子无明显变化.活细胞组输注后1 h白细胞介素6和输注后3,6 h白细胞介素10浓度高于凋亡细胞组,其他细胞因子差异不显著.结论:同种异源供者凋亡淋巴细胞输注对外周血细胞因子浓度无变化,提示其对受体外周免疫功能可能无明显影响,其诱导产生的免疫耐受可能主要在局部发挥作用.     

The number of HLA confirmatory tests during unrelated donor search as a driver for the evaluation of back-up haploidentical donor(s)

Introductionthe identification of a suitable donor in an appropriate timing represents a crucial step in the preparation of allogeneic stem cell transplantation (HSCT). At our Institution, for patients lacking an HLA-identical sibling, a haploidentical donor is considered in the absence of a 10/10-matched or a one-locus HLA-mismatched unrelated donor (UD), but the optimal timing of work-up of potential familiar haploidentical donor(s) by the Apheresis Team is actually unknown.Patients & Methodswe analyzed here n = 167 UD searches launched at our Hospital between July 2013 and July 2018 and looked for any correlation between the number of HLA confirmatory tests received and the final type of donor selected for HSCT, in an attempt to identify those situations where prompt evaluation of haploidentical donor(s) is warranted.Resultsa total of n = 117 transplants were performed and haploidentical HSCTs were n = 16 (14 %). In n = 93 cases (56 %) the number of HLA confirmatory tests received were two; they were one, zero and three for n = 52, n = 14 and n = 8 patients, respectively. Only 5 % of haploidentical donors were used when two confirmation test samples were received whereas this percentage rises to 17 % when only one sample reached the HLA lab. When no confirmation tests were available, haploidentical transplant occurred in 100 % of cases.Conclusionsbesides the situations with no HLA confirmation tests, the evaluation of any haploidentical donor(s) should be promptly started also when only one HLA confirmatory test is received, in order to optimise the potential work-up process and avoid delay in transplantation.