基于网络药理学探讨补肾强脊颗粒治疗强直性脊柱炎的机制

目的 采用网络药理学方法研究补肾强脊颗粒治疗强直性脊柱炎的机制.方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集补肾强脊颗粒的主要化学成分及靶点,通过Genecards,Disgenet,TTD数据库获取强直性脊柱炎的主要靶点,并借助STRING平台构建蛋白互作网络;采用Metascape平台进行GO功能富集...     

补肾强脊颗粒治疗强直性脊柱炎疗效与安全性评价

目的评价补肾强脊颗粒治疗强直性脊柱炎（AS）肾虚血瘀证的疗效与安全性.方法采用随机、对照、单盲前瞻性研究,将68例AS肾虚血瘀证患者随机分为中药组和中西医结合组,中药组予以补肾强脊颗粒治疗,中西医结合组予以补肾强脊颗粒联合柳氮磺胺吡啶（SASP）治疗,连续用药6个月,选取治疗前、治疗1个月、治疗3个月、治疗6个月作为评价时点.结果中药组和中西医结合组总有效率分别为81.82%和86.82%,两组比较差异无显著性,但治疗第1个月,中药组和中西医结合组的总有效率分别为15.15%和27.59%,两组比较差异有显著性（P＜0.01）;两组患者Bath病情活动指数、Bath功能指数、疼痛、晨僵等临床症状均有明显的改善,Schober试验、胸廓活动度、指地距、ESR、CRP亦有改善;补肾强脊颗粒治疗AS疗效具有明显的时效性,随治疗时间延长,疗效逐渐增强（P＜0.05或P＜0.01）;中西医结合组起效时间早于中药组.结论补肾强脊颗粒治疗AS临床疗效满意,安全性与依从性好,服用方便,具有广阔的应用前景和开发价值.     

补肾强脊颗粒对细胞因子诱导下强直性脊柱炎成纤维细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的探讨补肾强脊颗粒对强直性脊柱炎(AS)的作用机制。方法以体外培养的AS髋关节囊组织的成纤维细胞为实验对象,分正常组,AS对照组,AS诱导组,兔空白血清组,补肾强脊颗粒小、中、大剂量组和SASP对照组。在细胞因子骨形态发生蛋白(BMP)与转化生长因子-β(TGF-β)的诱导刺激下,观察补肾强脊颗粒对细胞因子诱导后的AS成纤维细胞增殖(样本5个,采用酸性磷酸酶法)、细胞周期(样本3个,采用PI法流式细胞术)及细胞凋亡率(样本3个,采用Annexin V法流式细胞术)的影响。结果补肾强脊颗粒含药血清作用后,对细胞因子诱导下的AS成纤维细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01);使细胞因子诱导下的AS成纤维细胞G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),S期的细胞比例降低(P<0.01);促使细胞因子诱导下的AS成纤维细胞早期凋亡率、晚期凋亡率均有不同程度的增加(P<0.01)。结论补肾强脊颗粒可以通过抑制细胞因子对成纤维细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响而达到抑制成纤维细胞进一步向成骨型的分化。     

补肾强脊丸治疗强直性脊柱炎72例临床观察

目的:探讨补肾强脊丸治疗强直性脊柱炎的临床疗效.方法:72例强直性脊柱炎患者口服补肾强脊丸,日3丸,并配合功能锻炼,观察其对临床疗效的影响.结论:补肾强脊丸治疗强直性脊柱炎疗效甚佳.     

补肾强脊汤治疗强直性脊柱炎36例临床观察

目的：探讨补肾强脊汤治疗强直性脊性炎的临床疗效。方法：36例强直性脊柱炎患者口服补肾强脊汤，日1剂，并配合腰功能锻炼，观察其对临床疗效的影响。结果：总有效率达94．4％。结论：补肾强脊汤治疗强直性脊柱炎疗效甚佳。     

补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎患者关节液成纤维细胞增殖的影响

目的:观察补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎(AS)患者关节液成纤维细胞增殖功能的影响。方法:运用血清药理学方法,选择不同浓度的含药血清与AS患者膝关节液体外培养成纤维细胞共同孵育,于不同时间观察其增殖水平,并与空白血清,SSZ血清组作对照。结果:与正常成纤维细胞相比,AS的成纤维细胞增殖速度快,从第3天开始两者间即有统计学差异。给予补肾舒脊颗粒能明显抑制AS成纤维细胞的增殖,给药3d后,与空白血清对照组相比,差异有统计学意义,并且补肾舒脊颗粒对成纤维细胞增殖的抑制作用有明显的量效关系。结论:补肾舒脊颗粒可通过抑制AS成纤维细胞的增殖,发挥其临床抗炎、抗纤维化的作用。     

益气补肾颗粒治疗对微小残留白血病患者CD4~+CD8~(high) T淋巴细胞和自然杀伤细胞的影响

目的探讨益气补肾颗粒治疗后CD4+CD8highT淋巴细胞的变化及其对微小残留白血病(mini-mal residual leukemia,MRL)预后的意义。方法用多参数流式细胞技术比较分析36例MRL患者应用益气补肾颗粒治疗前后CD4+CD8 highT淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞(NK细胞)改变。结果 (1)MRL患者3年持续完全缓解率、生存率分别为75.0%、80.5%,5年持续完全缓解率、生存率分别为63.9%、72.2%。(2)与治疗前比较,治疗后的MRL的CD4+CD8highT淋巴细胞百分率(%)和绝对值显著上升(P0.01);(3)与治疗前比较,治疗后MRL的NK细胞百分率(%)和绝对值均显著上升(P0.05,P0.01)。结论益气补肾颗粒可能通过调节机体自身免疫功能,提高CD4+CD8highT和NK细胞的绝对数量,杀伤或抑制体内残存白血病细胞,延长MRL患者的无病生存期。     

补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎关节液成纤维细胞周期的影响

目的:观察补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎(AS)患者关节液成纤维细胞周期的影响。方法:运用血清药理学方法共同孵育,选择不同浓度的含药血清与AS患者膝关节液体外培养成纤维细胞,并与空白血清,SSZ血清组作对照。结果:AS成纤维细胞周期中G1、G2期细胞比值均较正常对照组成纤维细胞显著减低,统计学有差异显著(P0.05);AS成纤维细胞周期中S期细胞比值均较正常对照组成纤维细胞显著升高,统计学有差异显著(P0.01)。与空白血清组相比,中药高、中、低剂量组成纤维细胞的S期比例均明显减少,G1、G2期细胞均明显比例增加,统计学均有差异显著(P0.01)。结论:补肾舒脊颗粒可以改变成纤维细胞各期细胞所占百分比,调控成纤维细胞DNA的合成,抑制成纤维细胞的增殖,从而发挥抗炎抗纤维化的作用。     

补肾舒脊颗粒治疗强直性脊柱炎髋关节病变的临床研究

目的观察补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎（AS）髋关节病变患者的治疗作用。方法将患者随机分为两组,治疗组予补肾舒脊颗粒治疗,对照组予柳氮磺胺吡啶片治疗,疗程6个月。观察两组临床症状、体征、中医证候评分、疾病活动性指标、骨密度、骨代谢、髋关节评分等指标的变化。结果治疗组患者的BAS—G、BASDAI、BASFI、夜间痛、脊柱痛、晨僵时间、医生的总体评价、中医证候评分、枕墙距、颌柄距、胸廓活动度等方面均有不同程度改善（P〈0．05）,并且在改善AS患者Harris髋关节评分方面有统计学意义（P〈0．05）,中医疗效评价方面,治疗组明显优于对照组（P〈0．05）。结论补肾舒脊颗粒能显着改善AS患者的临床症状、体征、Bath指数、中医证候,能显著改善患者的髋关节活动功能,对髋关节病变有一定的治疗优势。并且长期服用安全性好．无毒副作用。     

补肾强脊颗粒治疗强直性脊柱炎52例

强直性脊柱炎是以骶髂关节和脊柱慢性炎症为主的周身性疾病。常见症状为腰背僵直疼痛，活动后可缓解．晚期可发生脊柱强直、畸形甚至严重功能受损。目前对本病尚缺乏有效的治疗方法及药物。而中医药治疗该病有一定优势。我们采用在冯兴华主任医师多年临床经验基础上研制的院内制剂补肾强脊颗粒治疗强直性脊柱炎52例，疗效满意，现报告如下。     

补肾颗粒对慢性再生障碍性贫血患者CD28、CD95表达的影响

目的探讨补肾颗粒治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)的作用机制。方法将CAA患者分为中药组(60例)和环胞菌素A组(CsA组,16例);中药组以补肾颗粒为主辨证治疗,CsA组以环孢菌素A为主治疗,疗程6个月,另设健康对照组20名,比较健康对照组与CAA各组治疗前后CD3+、CD3+CD28+、CD3+CD95+的表达水平。结果CAA各组治疗前CD3+、CD3+CD28+、CD3+CD95+的表达均较健康对照组高(P0.05),以肾阴虚型表达异常更甚。各组治疗后CD28表达下调,CD95表达上调。结论CAA患者T细胞CD28及CD95表达异常;补肾颗粒可能通过调节CD28及CD95水平调控CAA患者T细胞的异常激活和凋亡,从而促进造血功能恢复。     

补肾强督方对50例强直性脊柱炎继发骨质疏松症患者血清骨保护素、骨密度及骨代谢的影响

目的 研究补肾强督方对强直性脊柱炎(AS)继发骨质疏松症患者的疗效及机理.方法 应用补肾强督方治疗50例AS骨质疏松症患者6个月,检测患者治疗前后血清骨保护素(OPG)、骨密度,血清骨钙素(BGP)、降钙素(H-CT)、甲状旁腺激素(PTH)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、Ⅰ型胶原羧基端延长肽(CICP)、尿脱氧吡啶啉(DPD)、Ⅰ型胶原交联C末端肽(CTX)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP),观察治疗前后患者功能指数(BASFI)、病情活动指数(BASDI)及症状、体征的变化.结果治疗后患者血清OPG水平、骨密度、BGP、BAP显著升高(P＜0.05或P＜0.01),DPD、CTX显著下降(P＜0.01);ESR、CRP、BASFI、BASDAI、症状、体征等明显改善.结论 补肾强督方可以提高AS患者的血清OPG、骨密度水平,调节AS患者的骨代谢及免疫水平.     

舒督补肾方联合西药治疗活动期强直性脊柱炎85例临床观察

目的观察舒督补肾方治疗活动期强直性脊柱炎的临床疗效。方法将165例活动期强直性脊柱炎患者随机分为两组,对照组(80例)口服柳氮磺吡啶、醋氯芬酸胶囊,治疗组(85例)在西药基础上加用舒督补肾方,两组均治疗6个月。分别于治疗前后观察两组患者晨僵、关节疼痛情况、关节功能等临床指标,血沉、C-反应蛋白、免疫球蛋白等实验室指标,影像学变化及不良反应。结果治疗组总有效率94.12%,对照组为76.25%,治疗组优于对照组(P0.05)。除对照组枕-墙距治疗前后无明显变化外,两组患者其他临床指标和实验室指标均较治疗前改善(P0.05或P0.01),且治疗组治疗后晨僵时间、外周疼痛关节数、血沉、C-反应蛋白等指标与对照组治疗后比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01);治疗前后骶髂关节X线变化,两组比较差异无统计学意义(P0.05);治疗组发生不良反应较对照组少(P0.05)。结论舒督补肾方联合柳氮磺吡啶、醋氯芬酸胶囊治疗活动期强直性脊柱炎优于西药治疗,且不良反应少。     

针灸及其血清对荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖的影响

目的:观察针灸治疗对H_(22)荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞(CD4~+CD25~+regulatory T cells)体外增殖的影响和针灸血清刺激下的CD4~+CD25~+Treg细胞的体外增殖变化,探讨针灸及其血清对荷瘤小鼠免疫调节细胞的干预作用。方法:48只小鼠随机分为电针治疗组、艾灸治疗组、肿瘤对照组、正常对照组。采用H_(22)肿瘤细胞移植性实体瘤模型,电针和艾灸"大椎"治疗后,磁珠分离CD4~+CD25~+Treg细胞,氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同组小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力和针灸血清对CD4~+CD25~+ Treg细胞体外增殖的影响。结果:肿瘤对照组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平比正常对照组明显增高(P<0.05);电针治疗组和艾灸治疗组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平与肿瘤对照组比较均明显降低(P<0.01)。电针治疗组和艾灸治疗组1:1、1:8稀释度血清刺激正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖,较正常对照、肿瘤对照组血清显著增高(P<0.05),各组1:16、1:32稀释度血清对Treg细胞作用的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸治疗能下调荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力。不同浓度针灸血清体外刺激CD4~+CD25~+Treg细胞增殖表现出不一致的效应。     

Beneficial therapeutic effect of Chinese herbal Bushen formula on CHB patients with mildly elevated alanine aminotransferase by down-regulating CD4+CD25+T cells

Ethnopharmacological relevance

To investigate the clinical effects of the Bushen formula on chronic hepatitis B (CHB) patients with mildly elevated alanine aminotransferase (ALT) (1–2 times ULN) and its relevant immune mechanism.

Materials and methods

Fifty CHB patients were enrolled, and they were categorized into two groups according to infection state, including CHB carrier group(24 patients) and mildly elevated ALT (1–2 times ULN) group (26 patients), and 12 healthy volunteers were collected as normal control group. In addition, patients with mildly elevated ALT were taking the Bushen formula for 6 months. Biochemical assessment, viral load quantitation and HBV markers were examined at the Department of Clinical Laboratory, Shanghai Shuguang Hospital. Peripheral blood mononuclear cells were separated from patients and healthy volunteers. T cells were separated from healthy blood, and Hepatitis B core antigen (HBcAg) was added to the culture media. The percentage of CD4+CD25+T cells and the expression levels of IFN-γ and IL-4 were examined by flow cytometry and the expression level of FoxP3 was examined by real-time PCR and flow cytometry. The Chinese medicine symptom complex score was calculated.

Results

The percentage of CD4+CD25+T cells and the expression level of Foxp3 in two CHB patient groups were higher than that in the normal control group, and the percentage of CD4+CD25+T cells and the expression level of Foxp3 in the CHB carrier group were highest. The experiment in vitro showed that both the percentage of CD4+CD25+T cells and the expression of Foxp3 were elevated by HBcAg in CD4+T cells separated from normal peripheral blood. In patients with mildly elevated ALT, the serum ALT level was significantly decreased from 81.77±18.24 U/L to 64.92±20.60 U/L and the serum HBV DNA level was significantly decreased from 6.54±0.95 (log) to 5.15±2.22 (log), and symptom scores were significantly decreased from 6.19±3.99 to 2.77±1.66 after administration of the Bushen formula. In addition, we found that the frequency of CD4+CD25+T cells correlated negatively with the expression level of IFN-γ in CD4+T cells from CHB patients with mildly elevated ALT, and the percentage of CD4+CD25+T cells was decreased from 11.07±4.30% to 8.70±3.49% and the expression level of IFN-γ in CD4+T cells was increased from 13.98±3.25% to 15.85±3.43% after administration of the Bushen formula.

Conclusion

In CHB patients, the percentage of CD4+CD25+T cells and the expression of Foxp3 in peripheral blood were increased, which can be repeated in HBcAg-stimulated healthy CD4+T cells. The Bushen formula has positive effects on CHB patients with mildly elevated ALT (1–2 times ULN) by reducing serum ALT and HBV DNA levels, which is relevant with the decreasing of the percentage of CD4+CD25+T cells and the increasing of the expression level of IFN-γ in CD4+T cells.     

咳喘宁对病毒诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6表达的影响

目的通过观察咳喘宁对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响,阐明咳喘宁防治RSV诱发支气管哮喘的机理。方法分别从磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组大鼠外周血中提取单个核细胞,采用免疫磁珠法分离获得CD4+、CD8+T细胞并对其行纯度鉴定与活力检测。采用免疫荧光法,使用流式细胞仪测定T细胞内STAT6蛋白的表达水平,以中药咳喘宁进行干预,动态观察细胞培养过程中,咳喘宁对CD4+、CD8+T细胞中STAT6蛋白表达的调节作用。结果免疫磁珠法获得的CD4+、CD8+T细胞纯度与活力均支持实验的下行进展。与 PBS 对照组比较,模型组 CD4+T 细胞含量显著升高(P＜0.01),CD8+T 细胞含量升高不明显(P＞0.05)。模型组大鼠CD4+T与CD8+T细胞内STAT6的表达增高,咳喘宁治疗组CD4+与CD8+T细胞内STAT6的表达水平比模型组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与地塞米松、沙丁胺醇组比较,咳喘宁组 CD4+、CD8+T 细胞内 STAT6的表达水平略高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。结论咳喘宁通过下调哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内STAT6的表达,纠正哮喘中Th2细胞的过度增殖分化,影响Th2免疫应答优势,从而减少伏痰的产生,达到防治支气管哮喘的目的。     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏和母胎界面CD4~+CD25~+T细胞表达的影响

目的 观察益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏和母胎界面CD4+CD25+ T淋巴细胞表达的影响。