抑癌基因TSC2相关蛋白tuberin在肺癌组织中表达及临床意义的初步研究

目的通过检测TSC2编码蛋白tuberin在肺癌组织和相应正常肺组织中的表达水平，初步探讨其与临床病理特征的关系。方法收集肺癌组织标本及相应癌旁正常肺组织标本各60例，Western-Blot法检测标本中tuberin和β-actin蛋白含量，采用凝胶成像分析系统测定tuberin带与β-actin带的灰度值，以比值表示TSC2蛋白表达水平，比值大则表明组织中TSC2表达高。结果60例肺癌组织标本中，tuberin阳性表达率为40．0％（24例），相应癌旁正常组织tuberin阳性表达率为93．3％（58例），二者差异有统计学意义（μ=6．278，P〈0．01）。肺癌组织中tuberin阳性表达的患者，其正常肺黏膜组织tuberin均呈阳性表达；且肺癌组织tuberin表达水平较相应正常肺黏膜组织降低，二者差异有统计学意义（t=3．766，P〈0．05）。Tuberin的表达水平及表达阳性率与患者年龄、性别、肺癌病理类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移无关。结论Tuberin的表达水平及表达阳性率与肺癌发生密切相关。     

增殖细胞核抗原、表皮生长因子受体和B淋巴细胞瘤基因在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究增殖细胞核抗原（PCNA）、表皮生长因子受体（EGFR）和B淋巴细胞瘤基因（BCL-2）3种基因蛋白与非小细胞肺癌（NSCLC）临床病理特征的关系。方法应用S-P免疫组化法检测44倒手术切除NSCLC标本中3种基因蛋白的表达。结果44例标本中37例（84．09％）PCNA过度表达，30例（68．18％）EGFR过度表达，19例（43．18％）BCL-2过度表达。PCNA、EGFR及BCL-2阳性表达率在NSCLC淋巴结有元转移患者间均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。PCNA和EGFR阳性表达率与患者生存时间长短组间有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。但是3种蛋白阳性表达率均与肿瘤大小、分化程度无相关性（P〉0．05）。结论PCNA、EGFR和BCL-2基因过度表达可能与NSCLC的转移、预后有关。     

NPCLC中P16和Rb基因产物的表达情况及与细胞增殖的关系

目的：探讨抑癌基因的P16、Rb基因产物在非小细胞肺癌化S－P法，检测68例PCLC患者的手术切除标本的P16、Rb的表达情况，并进行PCNA检测，计算细胞增殖指数（PI，proliferation index)。结果：在68例NPCLC患者标本中，P16、Rb的阳性率分别为64．7％、88．5％，二者在不同组织类型的NPCLC中的表达无显著性差异（P＞0．05），二者的表达均随PI分级的升高有不同程度的下降，31例低度恶性NPCLC肿瘤中，Rb均为阳性表达（＋、＋＋），29例P16阳性或强阳性（＋、＋＋）表达；在37例高度恶性NPCLC中29例Rb阳性或强阳表达，其中P16、表达缺失22例（75．9％）；而在8例Rb阴性的NPCLC中有6例（75％）为P16阳性或强阳性表达，结论：1、P16及Rb参与NPCLC的细胞增殖过程，并且P16蛋白的缺失可能是NPCLC由低度恶性向高度恶性过渡重要事件，2、P16与Rb在高恶性NPCLC肿瘤中呈负性相关性表达，这种负相关在NPCLC中是一常见事，是NPCLC高度恶性的标志之一。     

Survivin和PCNA蛋白在鼻咽癌组织中的表达及与预后的关系

目的检测Survivin和PCNA蛋白在鼻咽癌组织中的表达，了解其临床价值。方法应用免疫组织化学法检测68例鼻咽癌组织中Survivin和PCNA蛋白的表达水平。结果鼻咽癌组织中Survivin蛋白的阳性表达率为72．1％（49／68）：其表达与淋巴结转移和T分期有关（P〈0．05）。肿瘤残留、复发及转移者Survivin表达有增高趋势，但未达统计学意义。生存时间〈5年者Survivin表达明显增高。PCNA的阳性表达率为73．5％（50／68），Survivin与PCNA的表达正相关。结论Survivin对预测鼻咽癌预后有一定的价值。     

抑癌基因PTEN和P16在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 研究抑癌基因PTEN及P16蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学法检测50例非小细胞肺癌石蜡切片及20例癌旁正常组织中PTEN及P16蛋白的表达情况。结果 PTEN及P16在肺癌中的阳性表达与正常肺组织相比差异有显著意义,PTEN表达在鳞癌,腺癌,鳞腺癌中差异有显著意义,腺癌高于鳞癌和鳞腺癌,而P16表达在鳞癌,腺癌,鳞腺癌中差异无显著意义;在非小细胞肺癌中,PTEN及P16蛋白表达随组织分化越差呈递减趋势;PTEN在肺癌中高中分化与低分化,有无淋巴结转移,Ⅰ/Ⅱ,Ⅲ期的阳性表达差异均有显著意义,在生存5年以上的病人中PTEN蛋白的表达显著高于生存5年以下的病人;而P16在高中分化与低分化,有无淋巴结转移中的蛋白表达差异有显著意义,但在Ⅰ/Ⅱ,Ⅲ期及5年生存情况中的蛋白表达差异无显著意义;非小细胞肺癌中PTEN及P16蛋白表达有相关性。结论 PTEN及P16在非小细胞肺癌的发生发展中起重要作用,其蛋白表达与肺癌的分化、分期、分级、转移及生存率密切相关;检测PTEN及P16蛋白的表达有助于非小细胞肺癌的早期诊断及预后判断。     

Notch1及P16在软骨肉瘤中的表达及临床意义

目的 观察软骨肉瘤中Notch1蛋白及P16蛋白的表达情况,探讨其在软骨肉瘤发生发展中的作用机制.方法 选取软骨肉瘤46例,骨软骨瘤18例及正常骨组织10例.以SP法检测组织中Notch1及P16蛋白表达的情况.结果 Notch蛋白阳性表达为细胞膜和细胞浆内有棕黄色颗粒.在骨软骨瘤及软骨肉瘤中Notch1的阳性表达率明显高于正常软骨组织(P＜0.05),软骨肉瘤中Notch1的阳性表达率明显高于骨软骨瘤(P＜0.05).Notch1蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不同组织学分级的软骨肉瘤中的阳性表达率随分化程度降低逐渐增高(P＜0.05).P16蛋白阳性表达为细胞核或/和细胞浆内有棕黄色颗粒出现.P16蛋白在正常软骨组织及骨软骨瘤中的均为阳性表达,在软骨肉瘤中阳性表达率为39.1％ (18/46).软骨肉瘤组织中P16蛋白阳性表达率明显低于其他两种组织(P＜0.05).不同组织学分级软骨肉瘤中P16蛋白的阳性表达率分别为68.8％ (11/16)、30％(6/20)和20％(1/10),阳性表达率随分化程度越低而降低(P＜0.05).Notch1及P16蛋白的表达情况与患者的性别、年龄、体积大小及肿瘤发生部位均无统计学意义(P＞0.05).结论 Notch1蛋白高表达、P16蛋白低表达可能协同促进软骨肉瘤的恶性细胞的增殖能力,在肿瘤的发生及发展起着重要的作用,为进一步的研究和临床治疗提供病理学依据.     

Twist基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：探讨转录调节因子Twist在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及临床意义。方法：应用兔抗人Twist多克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测45例NSCLC组织及12例癌旁正常肺组织中Twist蛋白表达情况。结果：在45例肺癌组织标本中,Twist基因阳性表达为31例（68．9％）,癌旁组织中为2例（16．7％）,两者比较差异有统计学意义（Х^2=10．599,P〈0．01）。Twist高表达与肺癌分化程度相关（P〈0．05）。结论：NSCLC组织中存在Twist基因的高表达,Twist基因表达的上调,对肿瘤的发生、发展起着重要作用。     

RKIP蛋白表达在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨Raf激酶抑制蛋白（RKIP）表达与非小细胞肺癌（NSCLC）临床病理参数及预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测83例NSCLC患者癌组织和65例正常肺组织中RKIP蛋白的表达。结果NSCLC癌组织中RKIP蛋白表达的阳性率20．5％（17／83）,正常肺组织RKIP蛋白表达的阳性率64．6％（42／65）。RKIP蛋白阳性与肿瘤组织分化程度、临床分期、生存时间以及有无淋巴结和远处转移相关（P〈O．05）。结论RKIP蛋白表达与NSCLC发展有关,RKIP可能成为治疗肺癌侵袭转移的新靶点。     

正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞相关指标的表达

目的检测人正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞（BASC）相关指标,明确BASC是否在人肺组织中存在及其组织定位。方法采用组织免疫荧光方法将经过脱蜡、抗原修复好的组织切片通过5％脱脂奶粉溶液封闭检测,再通过先后加入一抗、二抗以及染核、封片等在荧光显微镜下观察,判定结果时可见合成蛋白复合物（SPC）和八聚体结合转录因子4（OCT4）阳性表达细胞呈绿色,Clara细胞分泌蛋白（CCSP）阳性表达细胞呈红色,而SPC／CCSP或CCSP／OCT4双阳性细胞呈黄色,细胞核呈蓝色。结果在人正常肺组织中可检测到SPC、CCSP及OCT4。免疫荧光检测显示,正常肺组织中均可检测到SPC、CCSP双阳性表达细胞,呈现BASC的表型特征,且均表达OCT4,定位于细支气管一肺泡导管连接处。在人肺腺癌组织中亦可检测到BASC样癌干细胞,在30例肺腺癌组织中26例同时检测出SPC及CCSP,属检测出BASC病例。18例同时检测出OCT4表达。结论人正常肺组织中可检测到BASC,且在肺腺癌组织中可检测到具有BASC表型特征的癌干细胞,提示人肺腺癌可能源自BASC的恶性转化。     

Survivin CD44v6在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中Survivin和cd44v6的表达及意义。方法 采用免疫组化法检测Survivin和cd44v6在60例非小细胞肺癌和20例正常肺组织中的表达。结果 80例非小细胞肺癌中Surovivin和cd44v6的阳性表达率分别为60％,67．5％,显著高于正常肺组织中的表达（P〈0、01）,Survivin和cd44v6的表达与肿瘤细胞的分化程度和组织学类型无关,与淋巴结转移TNM分期显著相关。结论 Survivin蛋白异常表达在非小细胞肺癌的侵袭、转移中起重要作用．并与CIM4v6有协同作用。     

PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白表达与胃癌生物学关系研究

目的：本研究旨在探讨PCNA、E2F-1、RASSF1A在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法：采用免疫组化技术（SP法1检测60例胃癌组织及正常胃黏膜中PCNA、E2F-1、RASSF1A蛋白的表达情况。结果：胃癌组织中PCNA蛋白的阳性表达率为80．0％,正常胃黏膜组织中为20．0％,两组比较具有统计学意义（P〈0．01）;PCNA蛋白的表达与分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度有关（P〈0．05）。胃癌组织中E2F-1阳性表达率为73．3％,正常胃黏膜中为8．3％,两者比较有显著性差异（P〈0．01）：E2F-1在癌组织中的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及肿瘤浸润深度无相关性（P〉0．05）。RASSFIA在胃癌中的阳性表达率为40．0％,在癌旁正常黏膜中为100．0％,两者比较差异显著（P〈0．01）;RASSFIA在癌组织中的表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期具有相关性（P〈0．05）。结论：PCNA、E2F-1、RASSF1A在胃癌细胞中异常表达,共同参与了胃癌的发生发展。     

p16在阴茎癌及尖锐湿疣中表达的临床意义

目的研究抑癌基因p16在阴茎癌及阴茎尖锐湿疣中表达的临床意义。方法应用免疫组化SP法检测55例阴茎癌、24例尖锐湿疣、13例正常阴茎组织的p16表达情况,然后对照分析。结果p16在阴茎癌中的表达阳性率(38.33%)明显低于尖锐湿疣(75%)和正常组织的阳性率(100%,P<0.001),且阳性率随着分化程度的降低而降低(P<0.05):Ⅰ级71.43%,Ⅱ级33.33%,Ⅲ级者均阴性;阴茎尖锐湿疣的阳性率比正常组织低(P<0.05)。结论p16基因表达与阴茎癌的发生和恶性程度有关,p16表达缺失可能与尖锐湿疣的癌变有关。     

淋巴管生长因子在甲状腺癌中的表达与意义

目的研究淋巴管生长因子(VEGF-C)在甲状腺癌中的表达与意义。方法应用免疫组化SP法检测44例甲状腺癌中VEGF-C的表达情况,并以17例癌旁正常甲状腺组织作对照。结果VEGF-C在甲状腺癌中有高水平表达(818%),其乳头状癌阳性表达(889%)高于其它类型,其阳性率在有淋巴结转移组(920%)明显高于无淋巴结转移组(684%),P<005。9例死亡病例中7例为阳性表达。结论VEGF-C表达与甲状腺癌病理分型及预后可能有一定关系,与甲状腺癌淋巴结转移密切相关。     

膀胱癌中陷阱受体3、Bcl-2与PCNA的联合诊断价值

目的探讨膀胱癌中陷阱受体3（DcR3）,Bcl-2和PCNA及其联合检测的诊断价值。方法应用免疫组织化学技术检测224例膀胱癌组织标本和56例正常膀胱组织标本中DcR3,Bcl-2和PCNA的表达,并应用受试者工作特征曲线（ROC）分析三项指标及联合检测对膀胱癌诊断的临床价值。结果膀胱癌组中DcR3,Bcl-2和PCNA的表达均明显高于正常膀胱组织（均P〈0．05）。DcR3的表达与膀胱癌的病理分级、是否浸润、淋巴结转移和复发相关（P〈0．05）;Bcl-2的表达与膀胱癌的淋巴结转移相关（P〈0．05）;PCNA的表达与膀胱癌的病理分级和淋巴结转移相关（P〈0．05）。DcR3表达水平和Bcl-2及PCNA呈正相关关系,Bcl-2和PCNA也同样呈正相关关系（P〈0．05）。DcR3,Bcl-2及PCNA联合检测的曲线下面积（AUC）高于单独指标检测值。联合检测DcR3＋PCNA,Bcl-2＋PCNA及DcR3＋Bcl-2＋PCNA的灵敏度均优于单独检测,其中最高者为三者联合组,灵敏度为0．830。联合检测DcR3＋PCNA,Bcl-2＋PCNA及DcR3＋Bcl-2＋PCNA的阳性预测值分别为100％,96．2％,100％,也均高于单独检测。结论DcR3,Bcl-2,PCNA三者联合检测可显著提高膀胱癌诊断的灵敏度和阳性预测值,优于单项检测效果。     

胃癌组织中miR－381与PCNA、CyclinD1、p21表达的关系及临床意义

目的：检测微小RNA（miR－381）、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、p21基因在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达,探讨miR－381在胃癌组织中表达的情况及临床意义。方法实时定量PCR技术检测85例胃癌组织、50例癌旁正常组织中miR－381、PCNA、Cyclin D1、p21的表达情况;记录患者的临床病理资料。分析miR－381与患者临床病理特征的关系;同时分析miR－381与PCNA、Cyclin D1、p21的关系。结果 miR－381在胃癌组织中表达低于癌旁组织;PCNA、Cyclin D1的mRNA在胃癌组织中高于癌旁正常组织,而p21基因的表达在胃癌组织中低于癌旁正常组织（ P ＜0．05）。 miR－381与胃癌的分化、淋巴结转移有关（ P ＜0．05）,与胃癌其他病理特征无明显关系（ P ＞0．05）。相关分析显示,miR－381与Cyclin D1存在负相关（ r ＝－0．3864, P ＜0．05）,与p21存在正相关（ r ＝0．3223, P ＜0．05）。结论 miR－381与胃癌的临床病理特征有关,miR－381可能通过调节Cyclin D1、p21而参与胃癌的进展。     

EZH2与 PCNA、P16蛋白在胃癌组织中表达的关系和意义

目的：检测EZH2、增殖细胞核抗原（ PCNA ）、P16蛋白在胃癌及癌旁正常组织中的表达情况,分析EZH2与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集62例胃癌手术患者的肿瘤及52例癌旁正常胃粘膜组织石蜡标本进行免疫组织化学染色,并收集患者的临床病理特征及随访资料,同时检测PCNA、P16蛋白的表达,分析这3种蛋白质之间的关系;分析EZH2与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。结果胃癌组织中EZH2、PCNA表达均较癌旁组织明显增强（ P ＜0．05）,P16蛋白在胃癌组织中表达明显低于癌旁组织阳性率（ P ＜0．05）;胃癌组织中EZH2与PCNA表达有正相关关系（ r ＝0．3846, P ＝0．002）,EZH2与P16蛋白表达存在负相关关系（ r ＝-0．2756, P ＜0．05）;PCNA与P16表达无明显相关关系（ P ＞0．05）。 EZH2表达与胃癌肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关（ P ＜0．05）;预后分析显示,EZH2强表达患者的生存期比弱表达者明显缩短（ P ＜0．05）。结论胃癌组织中EZH2蛋白表达明显增高,与胃癌部分临床病理特征有关,EZH2蛋白还可以作为预后指标;EZH2蛋白在胃癌中的作用可能与其调节肿瘤细胞增殖能力有关。     

PCNA与P53表达与非小细胞肺癌患者预后的相关性

目的 研究P53、PCNA蛋白表达与非小细胞肺癌患者预后的相关性.方法 选取本院于2008年6月～2010年7月手术切除非小细胞肺癌组织蜡块76例作观察组,同时选取正常肺组织24例作对照组,采用免疫组化SP法对两组组织中PCNA、P53表达情况进行检测;通过回顾性随访,观察其远期生存、复发转移的情况.结果 观察组PCNA、P53阳性率均显著高于对照组（P＜0.05）,分别为72.37%、8.33%和67.26%、4.9%,Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ期患者PCNA阳性率间差异无统计学意义（P＞0.05）,而P53表达阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）;P53、PCNA的表达与生存期有关,生存1年以下和3年的患者的P53表达阳性率分别为50%,20%（P＜0.05）,PCNA的阳性率分别为60%,40%（P＜0.05）,从而提示P53和PCNA表达阳性率越高,患者生存期越短,预后差.PCNA阳性者1年及3年生存率均显著低于PCNA阴性患者（P＜0.05）.结论 PCNA、P53高度表达是对非小细胞肺癌患者预后造成影响的重要因素,其异常表达和肺癌发病、进展与转移间有密切关系,可作为对肺癌恶性程度与预后准确判断的重要指标.     

PAX2和增殖细胞核抗原在肾细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨PAX2和增殖细胞核抗原(PCNA)在肾细胞癌组织中的表达及意义。方法 应用免疫组化SP法检测44例肾细胞癌患者组织样本及ll例癌旁正常肾组织标本中PAX2和PCNA的表达。结果 在肾细胞癌患者组织样本及癌旁正常肾组织标本中PAX2的阳性表达率分别为63．6％和18．2％，两者间有显著差异(P＜0．01)。PAX2的阳性表达随肾细胞癌临床分期的升高而增加，与组织类型及病理分级无明显相关。PCNA在肾细胞癌患者组织中的阳性表达明显高于癌旁正常肾组织(P＜0．01)，并随肾细胞癌临床分期及病理分级的升高而增加，但与组织类型无关。PAX2和PCNA阳性表达间无明显的相关关系。结论 PAX2和PCNA可能参与了肾细胞癌发生和发展的过程，可作为肾细胞癌诊断及恶性程度判断的参考指标。     

原发性非小细胞肺癌中PCNA及survivin的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（Non—small cell lung cancer,NSCLC）中增殖细胞核抗体（Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA）及凋亡抑制基因survivin的表达对患者预后的影响。方法采用免疫组织化学SP法,检测92例非小细胞肺癌组织中PCNA基因及survivin基因的表达,分析PCNA及survivin的表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系及其与患者预后的关系。结果92例非小细胞肺癌中PCNA阳性表达率为60．9（56／92）,其表达与肿瘤大小、组织学类型、有无淋巴。结转移、临床病理分期等无关,而与NSCLC的组织学分级及原发肿瘤T分期有关,在组织学分级为Ⅲ级的肿瘤中的表达明显高于Ⅰ＋Ⅱ级的肿瘤中的表达,差异有统计学意义（66．7％vs52．6％,x^2=4．269,P=0．039）;在T3＋T4期中的阳性表达率明显高于在T1＋T2期中的表达率,差异有统计学意义（75．8％vs52．5％,x^2=4．789,P=0．029）。survivin阳性表达率为46．7％（43／92）,其表达与肿瘤大小、有无淋巴结转移、临床病理分期以及组织学类型等无关,而与NSCLC的组织学分级有关,在组织学分级为Ⅲ级的肿瘤中的表达明显高于Ⅰ＋Ⅱ级的肿瘤组织中的表达,差异有统计学意义（52．1％vs37．5％,x^2=3．975,P=0．046）。单因素生存分析显示PCNA阳性组及survivin阳性组的总生存时间均低于PCNA阴性组及survivin阴性组,差异有统计学意义（P=0．025及0．033）。结论PCNA和survivin表达是NSCLC患者预后不良因素之一,联合检测PCNA和survivin并结合临床病理分期、组织学分级可以更准确地评价非小细胞肺癌患者的预后。     

HPV16-E6蛋白在梅州地区客家人食管鳞癌组织及非癌组织中的表达

目的：通过分析HPV16-E6蛋白在食管正常组织、不典型性增生组织和癌组织中的表达,探讨HPV16-E6蛋白在梅州地区客家人食管鳞癌组发生、发展中的生物学意义。方法应用免疫组织化学方法检测对68例食管正常黏膜组织、20例上皮不典型增生组织及68例癌组织中HPV16-E6蛋白的表达情况进行研究。结果 HPV16-E6蛋白阳性率在正常食管黏膜组织中为14.7％,在上皮不典型性增生组织中为45.0％,在癌组织中为70.6％,各组间差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论 HPV16-E6蛋白与梅州地区客家人食管鳞癌的发生、发展关系密切。