环氧化酶-2抑制剂与抗癌药对鼻咽癌细胞抑制的相互作用

目的探讨环氧化化酶-2(COX-2)抑制剂与细胞毒抗癌药对鼻咽癌细胞抑制的相互作用.方法COX-2抑制剂(尼美舒利和塞莱昔布)单用或分别与顺铂(CDDP),博来霉素(BLM),长春新硷(VCR)联合给药,用噻唑蓝法观察用药对鼻咽癌细胞系CNE1,CNE2和SUNE的细胞毒作用,经s-N-K法统计学检验后再用金正钧氏法q值判断COX-2抑制剂与细胞毒抗癌药的相互作用.结果尼美舒利25μmo1.L-1分别与BLM 0.5,1,2mg.L-1,CDDP 6.25,12.5 mg.L-1和VCR 1mg.L-1合用,CNE1细胞系的抑制率分别为33%,47%,48%,59%,63%,32%(与单用比较,P＜0.05或P＜0.01,q值分别为1.88,2.54,1.65,2.70,1.37,1.45),呈协同作用.尼美舒利25 μ mo1.L-1分别与CDDP 1,2.5 mg@L-1合用,CNE2细胞系的抑制率分别为33%和25%(与单用比较,P＜0.05或P＜0.01,q值分别为0.69和0.32),呈拮抗作用.尼美舒利25 μ mo1@L-1分别与CDDP 6.25,12.5mg@L-1合用,对SUNE细胞系的抑制率分别为21%和17%(与单用比较,P＜0.05或P＜0.01,q值分别为0.50和0.21),呈拮抗作用.塞莱昔布2.5 μmo1@L-1分别与BLM 1,2mg@L-1,CDDP 12.5mg@L-1和VCR 1mg@L-1合用,CNE1细胞系的抑制率分别为43%,58%,50%,39%(与单用比较,P＜0.05或P＜0.01,q值分别为1.59,1.61,1.43,1.49),呈协同作用.塞莱昔布2.5μmo1@L-1与BLM 0.5mg@L1CDDP6.25mg@L-1合用,对CNE1细胞系的抑制率为29%,23%(与单用比较,P＜0.05或P＜0.01,q值为1.11,1.02),呈相加作用.塞莱昔布2.5μmo1@L-1与BLM 1,2mg@L-1,CDDP6.25,12.5mg@L-1合用,对SUNE细胞系的抑制率为16%,60%,19%,48%(与单用比较,P＜0.05或P＜0.01,q值为1.45,1.91,1.23,1.57),呈协同作用.结论尼美舒利分别与BLM,CDDP和VCR并用,对CNE1细胞系的抑制作用呈协同或相加作用.尼美舒利与CDDP合用,对CNE2和SUNE细胞系的抑制呈拮抗作用.塞莱昔布分别与BLM,CDDP和VCR联用,对CNE1和SUNE细胞系的抑制作用呈协同或相加作用.     

丝裂霉素联合塞来昔布对膀胱癌T24细胞增殖的影响研究

目的:研究体外丝裂霉素(MMC)联合塞来昔布对浅表性膀胱癌T24细胞增殖的影响及其可能机制。方法:体外培养浅表性膀胱癌T24细胞,分为MMC[0(对照组)、2、5、10、25、50μmol/L]组及其与塞来昔布(50μmol/L)混合组,每个浓度5个复孔,采用MTT法检测作用24h后细胞的增殖抑制率。采用免疫组化法、实时定量聚合酶链式反应法、酶联免疫吸附测定法检测对照组、MMC(50μmol/L)组和混合[塞来昔布+MMC(50μmol/L)]组作用48h细胞中Bcl-2蛋白、作用24h细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达及作用96h内VEGF蛋白浓度。结果:MMC能明显抑制细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性;塞来昔布能明显增强MMC对细胞的增殖抑制作用(P<0.05);与对照组比较,MMC组和塞来昔布+MMC组细胞中Bcl-2蛋白、VEGF mRNA表达均明显降低(P<0.05),且后2组组间比较有统计学差异(P<0.05);塞来昔布+MMC组细胞中VEGF蛋白浓度随作用时间延长明显降低(P<0.01)。结论:塞来昔布可协同增强MMC抑制T24细胞增殖的作用,其机制可能与降低Bcl-2、VEGFmRNA表达水平和抑制细胞分泌VEGF蛋白作用有关。     

大蒜油与顺铂对人卵巢癌SKOV_3细胞生长抑制的联合作用

目的研究大蒜油(garlicoil,GO)、顺铂(cisplatin,CDDP)对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用及二者合用时的联合作用。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分别用GO、CDDP、GO+CDDP处理24h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GO、CDDP、GO+CDDP对SKOV3细胞的生长抑制作用,用Chou-Talalay联合指数法评价两药合用对SKOV3细胞生长抑制的联合作用。结果单独应用GO作用于SKOV3细胞24h后,MTT检测发现随着GO浓度的增加,抑制率明显增高。GO和CDDP合用时,二者各自对SKOV3细胞的生长抑制作用增强,GO单用时中效浓度(Dm)为670.5mg/L,与CDDP按浓度比1∶1合用时Dm为138.2mg/L,单用时的Dm是合用时的4.852倍;CDDP单用时Dm为7.088mg/L,与GO按浓度比1∶1合用时Dm为1.037mg/L,单用时的Dm是合用时的6.835倍。GO和CDDP合用时,在不同抑制率下联合指数CI均小于1,所以两药合用时对SKOV3细胞的生长起协同抑制作用。结论在本试验条件下,GO能抑制人卵巢癌SKOV3细胞的生长,同时与CDDP合用时表现为协同作用。     

白三烯B4在塞来昔布介导的抗癌效应中的作用

目的 研究白三烯B4(LTB4)在环氧合酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布介导的抗癌效应中的作用.方法 MTT法检测塞来昔布、LTB4和去甲二氢愈创木酸(NDGA)对人结肠癌HT-29细胞和人前列腺癌PC-3细胞生存的影响以及LTB4对塞来昔布抗癌效应的影响.ELISA法检测塞来昔布对癌细胞中前列腺素E2(PGE2)和LTB4表达的影响.结果 塞来昔布抑制HT-29和PC-3细胞的生存及LTB4表达(P<0.05或P<0.01),但仅下调HT-29细胞的PGE2表达(P<0.01).LTB4能拮抗塞来昔布对HT-29细胞生长的抑制作用(P<0.01),NDGA明显抑制HT-29细胞的生存(P<0.01),而对PC-3细胞则没有这些作用.结论 塞来昔布对HT-29和PC-3细胞的抑制效应是COX-2非依赖性的,且只有在HT-29细胞中,塞来昔布的抗癌作用主要是通过下调LTB4实现的.     

甲磺酸伊马替尼联合塞来昔布对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的观察甲磺酸伊马替尼和塞来昔布联合对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法甲磺酸伊马替尼及塞来昔布单独或联合处理胃肠间质瘤细胞株GIST-T1,MTT法检测药物对胃肠间质瘤细胞株的生长抑制,Western blot检测Bax及Bcl-2蛋白表达。结果甲磺酸伊马替尼与塞来昔布联合应用显著增强甲磺酸伊马替尼对胃肠间质瘤细胞增殖;和甲磺酸伊马替尼及塞来昔布单用相比,二者联用后胃肠间质瘤细胞Bax表达增高及Bcl-2表达降低。结论甲磺酸伊马替尼和塞来昔布联合应用显著抑制胃肠间质瘤细胞增殖,可能和促肿瘤细胞凋亡有关,其机制可能与Bax表达上调及Bcl-2表达下调有关。     

环氧化酶-2抑制药对肺癌细胞和骨肉瘤细胞生长的抑制作用

目的观察选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制药塞来昔布、罗非昔布对人骨肉瘤细胞株（HOS-8603）、肺癌细胞株（A-549）的作用以及罗非昔布、塞来昔布对两种细胞抑制效应的比较。方法MTT法测定体外培养的细胞株HOS-8603、A-549对不同浓度的罗非昔布和塞来昔布的敏感性，流式细胞仪分析细胞增殖周期的影响及凋亡。结果塞来昔布、罗非昔布均可明显抑制HOS 8603、A-549细胞的生长（P＜0.05），抑制效应呈现浓度依赖型和时间依赖型。HOS-8603和A-549细胞分裂阻滞在G2/M期，出现凋亡峰，塞来昔布对HOS 8603的作用强于罗非昔布。结论COX-2抑制药塞来昔布尼罗非昔布对骨肉瘤细胞、肺癌细胞的生长有抑制作用，有望成为抗肿瘤新药。     

黄芩素对胰腺癌细胞的生长抑制和促凋亡作用

目的 研究黄芩素对胰腺癌细胞的生长抑制及诱导凋亡作用.方法 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察黄芩素及塞来昔布对胰腺癌细胞株SW1990增殖的影响;用流式细胞术法观察药物处理后细胞凋亡和细胞周期的变化;应用免疫组织化学法观察细胞株经药物处理后Bax及Bcl-2蛋白表达情况.结果 50、100、200、400μmol/L塞来昔布作用24 h后对胰腺癌细胞的杀伤率分别为24.6%、37.2%、59.8%、72.6%,48 h后分别为15.8%、34.0%、75.1%、81.9%.5、10、20、40 μmol/L.黄芩素作用24 h后对胰腺癌细胞的杀伤率分别为11.9%、21.2%、33.1%、51.6%,48 h后分别为16.0%、28.0%、38.6%、55.2%.随着干预药物浓度的升高,2种药物对胰腺癌细胞的杀伤率亦逐渐升高,且差异有统计学意义(P<0.05).20 μmol/L黄芩素作用于SW1990细胞24 h时出现凋亡峰,凋亡细胞占3.6%,48 h时凋亡细胞占4.3%;100 μmol/L塞来昔布组是48 h后出现凋亡峰,凋亡细胞占8.5%;空白对照组未见凋亡峰.100 μmol/L塞来昔布组48 h时的凋亡率高于20 μmol/L黄芩素组(P<0.05).20μmol/L黄芩素组24、48 h对SW1990细胞周期的阻滞率均高于100μmol/L塞来昔布组[72.3%比57.0%,74.2%比66.1%,均P<0.05].20μmoL/L黄芩素组和100μmol/L塞来昔布组Bax蛋白表达分别为+++、++,较空白对照组(+)均有所上调,但塞来昔布组弱于黄芩素.20 μmol/L.黄芩素组和100 μmol/L塞来昔布组Bcl-2蛋白表达分别为+、++,较空白对照组(+++)均减少20 μmol/L黄芩素组较100 μmoL/L塞来昔布组亦减少.结论 黄芩素可抑制胰腺癌细胞增殖,促进胰腺癌细胞凋亡并能将胰腺癌细胞周期阻滞于G1期.黄芩素诱导胰腺癌细胞凋亡可能是通过上调促凋亡蛋白和下调抑制凋亡蛋白实现的.     

塞来昔布安全性与耐受性评价

目的:评价COX-2抑制药塞来昔布的安全性和耐受性.方法:采用随机双盲阳性对照方法,将430例RA和OA病人分成3组,塞来昔布100 mg bid组、塞来昔布200mg bid组和双氯芬酸钠75 mg bid组,比较3组在安全性和耐受性的差异.结果:内窥镜下塞来昔布两组病人胃十二指肠溃疡的发生率比双氯芬酸钠组低4倍,具有统计学差异(P＜0.01).塞来昔布对血小板聚集和出血时间无影响,而双氯芬酸钠可减少血小板聚集,延长出血时间.结论:塞来昔布通过选择性抑制COX-2有效减少了胃肠道的毒性作用,避免了与COX-1抑制相关的生理效应,具有良好的安全性和耐受性.     

塞来昔布对非小细胞肺癌化疗的增敏作用及机制

目的 探讨塞来昔布对非小细胞肺癌(NSCLC)的化疗增敏作用及其机制.方法 应用噻唑蓝比色法(MTT)检测顺铂(DDP)、足叶乙甙(VP16)单独应用及与塞来昔布联合应用的增殖抑制率,并根据金氏公式计算Q值,评价两药的合用效应.应用流式细胞术检测各处理组的凋亡率.结果 DDP联合塞来昔布后对NSCLC抑制作用明显增强,二者合用有协同作用.VP16联合塞来昔布后对NSCLC抑制作用明显增强,二者合用有协同作用.塞来昔布与顺铂联合用药的凋亡率明显高于单用药组(P＜0.01).结论 塞来昔布可增强DDP、VP16对NSCLC的增殖抑制作用,具有化疗增敏作用,其机制可能与塞来昔布促进凋亡有关.     

塞来昔布对结肠癌HT-29细胞生长及骨桥蛋白表达的影响

目的 观察塞来昔布对结肠癌HT-29细胞的生长、凋亡和骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 体外培养结肠癌HT-29细胞分为对照组和不同浓度塞来昔布干预组.MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术分析细胞的凋亡,RT-PCR和免疫组化分析细胞中的OPN mRNA与OPN蛋白表达变化.结果 塞来昔布对HT-29细胞增殖有明显的时间与浓度依赖性抑制作用(P＜0.01).塞来昔布能诱导HT-29细胞凋亡,塞来昔布15、30和50μmol/L的细胞凋亡率分别为28.2％、32.8％和33.1％,均明显高于对照组的26.0％ (P＜0.05).药物干预组OPN mRNA及OPN蛋白表达明显低于对照组(P＜0.01).结论 塞来昔布可能通过抑制OPN表达而抑制结肠癌HT-29细胞的增殖,诱导其凋亡.     

2-苯基-1-丁醇与2-二甲氨基-2-苯基丁腈的合成

目的为马来酸曲美布汀的重要中间体2-二甲氨基-2-苯基-1-丁醇的合成奠定基础。方法苯乙腈与溴乙烷进行烃化反应得2-苯基-1-丁腈,所得产物经水解得2-苯基-1-丁酸,然后通过硼氢化钠-碘体系还原得2-苯基-1-丁醇;苯乙腈与N-溴代丁二酰亚胺进行卤代反应得溴代苯乙腈,所得产物与二甲胺进行烃化反应得2-二甲氨基苯乙腈,然后与溴乙烷进行烃化反应得2-二甲氨基-2-苯基丁腈。结果合成了2-苯基-1-丁醇和2-二甲氨基-2-苯基丁腈,总收率为分别为51%和59.4%。目标产物的结构经核磁共振氢谱、质谱确证。结论本合成方法原料易得,操作简单,收率较高,适合于工业化生产。     

2-吡啶甲醇及2-吡啶甲醛的合成

以 2 -甲基吡啶为原料、过氧化氢为氧化剂制备 2 -吡啶甲醇和 2 -吡啶甲醛,工艺方法经济、安全     

2'-Deoxy-2'-methylenecytidine and 2'-deoxy-2',2'-difluorocytidine 5'-diphosphates: potent mechanism-based inhibitors of ribonucleotide reductase

It has been found that 2'-deoxy-2'-methyleneuridine (MdUrd), 2'-deoxy-2'-methylenecytidine (MdCyd), and 2'-deoxy-2',2'-difluorocytidine (dFdCyd) 5'-diphosphates (MdUDP (1) MdCDP (2) and dFdCDP (3), respectively) function as irreversible inactivators of the Escherichia coli ribonucleoside diphosphate reductase (RDPR). 2 is a much more potent inhibitor than its uridine analogue 1. It is proposed that 2 undergoes abstraction of H3' to give an allylic radical that captures a hydrogen atom and decomposes to an active alkylating furanone species. RDPR also accepts 3 as an alternative substrate analogue and presumably executes an initial abstraction of H3' to initiate formation of a suicide species. Both 2 and 3 give inactivation results that differ from those of previously studied inhibitors. The potent anticancer activities of MdCyd and dFdCyd indicate a significant chemotherapeutic potential. The analogous RDPR of mammalian cells should be regarded as a likely target and/or activating enzyme for these novel mechanism-based inactivators.     

Synthesis and biological activities of 2-pyrimidinone nucleosides. 2. 5-Halo-2-pyrimidinone 2'-deoxyribonucleosides

1-(2-Deoxy-beta-D-ribofuranosyl)-5-bromo-2-pyrimidinone (BrPdR) and 1-(2-deoxy-beta-D-ribofuranosyl)-5-iodo-2-pyrimidinone (IPdR) have been synthesized by condensation of the appropriate silylated bases 2a and 2b, respectively, with 3,5-bis-O-(p-chlorobenzoyl)-2-deoxy-alpha-D-ribofuranosyl chloride (8) in 1,2-dichloroethane, in the presence of SnCl4, followed by separation of the anomeric blocked nucleosides via column chromatography and subsequent deprotection with methanolic ammonia. Both BrPdR and IPdR exhibited significant antiherpes activities against various strains of HSV-1 and HSV-2, the latter compound (IPdR) showing the higher activity as well as the stronger binding to the virus-specific thymidine kinase.     

Molecular modeling of the human P2Y2 receptor and design of a selective agonist, 2'-amino-2'-deoxy-2-thiouridine 5'-triphosphate

A rhodopsin-based homology model of the nucleotide-activated human P2Y2 receptor, including loops, termini, and phospholipids, was optimized with the Monte Carlo multiple minimum conformational search routine. Docked uridine 5'-triphosphate (UTP) formed a nucleobase pi-pi complex with conserved Phe3.32. Selectivity-enhancing 2'-amino-2'-deoxy substitution interacted through pi-hydrogen-bonding with aromatic Phe6.51 and Tyr3.33. A "sequential ligand composition" approach for docking the flexible dinucleotide agonist Up4U demonstrated a shift of conserved cationic Arg3.29 from the UTP gamma position to the delta position of Up4U and Up4 ribose. Synthesized nucleotides were tested as agonists at human P2Y receptors expressed in 1321N1 astrocytoma cells. 2'-Amino and 2-thio modifications were synergized to enhance potency and selectivity; compound 8 (EC50 = 8 nM) was 300-fold P2Y2-selective versus P2Y4. 2'-Amine acetylation reduced potency, and trifluoroacetylation produced intermediate potency. 5-Amino nucleobase substitution did not enhance P2Y2 potency through a predicted hydrophilic interaction possibly because of destabilization of the receptor-favored Northern conformation of ribose. This detailed view of P2Y2 receptor recognition suggests mutations for model validation.