硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对LLC-PK_1细胞DNA合成影响的比较

采用~3H-TdR掺入实验观察了D,L-硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK_1)DNA合成代谢的影响。结果显示,两种硒化合物对DNA的合成均呈双相效应,在硒浓度为0.5～50μmol/L时,能促进DNA的合成,并且D,L-硒代蛋氨酸的作用比亚硒酸钠更为有效;随硒浓度的增高,两种硒化合物均呈现对LLC-PK_1细胞DNA合成的抑制作用,亚硒酸钠的毒性作用明显大于D,L-硒代蛋氨酸,亚硒酸钠浓度为400μmol/L时,LLC-PK_1细胞DNA合成的抑制率为94.1%,而D,L-硒代蛋氨酸浓度为400μmol/L时,仅呈现对LLC-PK_1细胞DNA合成的轻度抑制作用,与文献结果比较,LLC-PK_1细胞对硒的毒性作用有较高的耐受性。     

硒对人羊膜细胞和猴肾细胞核酸合成的影响

作者采用细胞培养技术和同位素技术,研究了硒对人羊膜细胞和猴肾细胞的核酸合成的影响。将细胞悬液和不同浓度的亚硒酸钠溶液共同孵育24小时后,加入氚标记的DNA和RNA合成的前身物质,通过测定细胞内同位素量,可推测细胞合成DNA和RNA的速度。结果表明,硒能促进细胞的DNA和RNA合成,并且是细胞生长所必需的微量元素。     

硒对氟致L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响

目的探讨硒对氟导致的L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响。方法采用80μg/ml氟化钠和/或1.73μg/ml亚硒酸钠对培养的L-02细胞进行染毒,24 h后采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测各组L-02细胞DNA损伤情况;用流式细胞术(FCM)检测各组L-02细胞凋亡率。结果氟组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率明显高于对照组、硒组和氟硒组(P<0.01);而对照组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率与硒组和氟硒组之间无显著性差异(P>0.05)。结论氟可导致L-02细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,适量硒可拮抗氟导致的L-02细胞DNA损伤和细胞凋亡作用。     

氟化物对两种人类细胞系细胞生长的影响以及对HeLa细胞DNA和蛋白合成的作用

本文研究了氟化钠对培养的人类细胞生长的影响以及生长受抑制的机理。于HeLa细胞和人接合(conjunctive)克隆1-5 C-4细胞的培养液中,分别加入0.95和1.90mM氟化钠(相当于18和36ppm F~-),细胞的生长几乎完全停止。为确定氟化钠引起上述两种细胞生长抑制的原因,研究了DNA的合成。结果发现,至少在加入氟化钠之后的头24小时期间,DNA     

微量元素对细胞增殖及DNA合成的作用研究

本实验成功地建立了早期人胚脑细胞、猪甲状腺细胞体外原代单层细胞培养。在此基础上,研究了微量元素碘、硒、氟等对其生长、增殖、形态及~3H-TdR掺入的影响。观察到碘、硒对细胞的增殖和DNA的合成,具有不同程度的增强作用;而氟却有明显的抑制作用;碘、硒均可抵消氟对猪甲状腺细胞、人胚脑细胞的抑制效应。     

硒对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的：研究亚硒酸钠对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法：选用雄性SD大鼠，每组5只，用5，10和20μmol/kg的亚硒酸钠腹腔注射染毒。用流式细胞术研究大鼠肝细胞增殖周期和DNA相对含量（DNARC)，用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果：10和20μmol/kg的亚硒酸钠均可使大鼠肝细胞G0／G1期细胞显减少，5μmol/kg的亚硒酸钠虽可使G0／G1期细胞减少，但无显性差异。S期和G2／M期细胞以及增殖指数变化不明显。5、10和20μmol/kg的亚硒酸钠可引起大鼠肝细胞DNARC下降，DNA损伤率较对照组显增高，而且DNARC和DNA损伤率之间存在负相关关系，随DNA损伤率的增高，DNARC下降，相关系数为：－0．9887（P＜0．01）。结论：一定剂量的亚硒酸钠不仅改变了大鼠肝细胞的增殖周期，还引起DNA损伤，并影响DNA合成，使DNA相对含量显下降。     

试管内MNNG诱发转化细胞的某些生物学特征的观察

用化学物质在试管内建立肿瘤细胞模型是研究化学致癌作用的重要手段,也是鉴定环境致癌因子的重要方法。本文介绍了由MNNG诱发的转化SHE细胞的一些重要生物学特征:(1)细胞倍增时间缩短;(2)单层细胞传代培养可出现转化灶;(3)细胞表面微绒毛增加;(4)细胞分裂增殖旺盛,不但一分为二的细胞较多,而且有直接的和间接的多极分裂;(5)ConA凝集阳性;(6)可在琼脂固体培养基中形成细胞集落并较长期地存活;(7)染色体数增加;(8)可在同种动物身上诱发肿瘤;(9)DNA合成较快;(10)DNA含量较高;(11)培养液氨基酸含量变化测定提示鸟氨酸循环可能发生障碍。本文除介绍测定结果外,并对这些生物学特征变化的意义作了讨论。     

硒对大鼠眼晶体脂质过氧化作用影响的实验研究

用晶体培养方法研究硒与光照射诱发的晶体脂质过氧化作用的关系。结果表明经光照射２４～４５ｈ后晶体丙二醛（ＭＤＡ）含量显著升高（Ｐ＜０．０５）。培养液中含适宜硒浓度（１．１５μｍｏｌ／Ｌ）可使光照射晶体的丙二醛含量减少，并在一定硒浓度范围内经光照射晶体的丙二醛含量与培养液中硒浓度呈负的剂量反应关系。两组在不同硒浓度培养液中培养的晶体经光照射后谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ），超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性无明显差别。推测硒能抑制光照射诱发的晶体脂质过氧化作用，硒对晶体的保护可能是通过谷胱甘肽过氧化物酶以外的其它途径。     

职业人群遗传毒理效应的监测指标之一:人淋巴细胞非程序DNA合成

Rasmussen和Painter(1966)报告了用放射自显影技术显示紫外线辐照哺乳类动物细胞可诱发细胞摄取标记的胸苷(~3H-TdR)至DNA中。此现象区别于正常的DNA合成,本质上不是半保留合成。Djordevic和Tolmach(1967)将这种胸苷的掺入DNA称谓非程序DNA合成(unscheduled DNA synthesis,UDS)。     

NIV毒素和硒对软骨蛋白聚糖代谢的作用

目的 研究大骨节病有关病因因素NIV毒素和硒对软骨细胞外基质蛋白聚糖代谢的损伤和保护作用;探索其引起软骨细胞变性坏死的机制.方法 在体外单层培养的人胚软骨细胞中加入NIV毒素和硒,5 d后收集软骨细胞扣细胞培养液,利用半定量RT-PCR方法检测蛋白聚糖核心蛋白mRNA在软骨细胞中的转录情况;利用咔唑-硫酸法检测软骨细胞培养液中葡萄糖醛酸水平.结果 NIV毒素使软骨细胞中蛋白聚糖核心蛋白mRNA水平明显下降,毒素培养液中葡萄糖醛酸的浓度明显增加.毒素加硒组与毒素组变化趋势一致,但数值略下降.组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NIV毒素能从转录水平抑制软骨细胞蛋白聚糖的合成,加速蛋白聚糖降解,造成基质中蛋白聚糖代谢紊乱,关节软骨受到损伤.补硒可以在一定程度上拮抗NIV毒素对软骨细胞的毒性作用,但保护作用有限,不能从根本上防止损伤的发生.     

硒和锌对人食管癌细胞株Eca109生长增殖影响的血清生理学研究

目的观察不同剂量硒、锌灌胃大鼠血清对人食管癌细胞株Eca109生长增殖的影响。方法将SD大鼠随机分为7组(基础饲料组、低硒组、高硒组、低锌组、高锌组、低硒低锌组、高硒高锌组),每组8只。喂养30天后取大鼠血清培养人食管癌细胞株Eca109和人正常肝上皮细胞株HL7702。用AAS法分别测定各组大鼠血清硒、锌;采用MTT法、3H-TDR掺入实验研究不同浓度硒、锌灌胃大鼠血清对两株细胞生长增殖的影响。结果 (1)基础饲料组血清硒、锌水平最低,高锌组血清锌最高;高硒高锌灌胃组大鼠血清硒水平最高,低硒低锌灌胃组血清硒水平次之,均明显高于基础饲料组;而此两组大鼠血清锌与基础饲料喂饲组大鼠血清锌水平差异无统计学意义(P>0.05);(2)与小牛血清对照组相比,只有高硒高锌灌胃组大鼠血清从第72h起抑制癌细胞生长(P<0.05),其余各组均促进食管癌细胞的生长;且该组大鼠血清也抑制肝细胞生长(P<0.05);(3)高硒高锌灌胃组大鼠血清明显抑制食管癌细胞DNA合成(P<0.05),其余各组与对照组作用相近,但该组对肝细胞DNA合成的抑制作用也最强。结论硒、锌在吸收、代谢等方面可能存在相互抑制作用;血清硒、锌含量较低会促进人食管癌细胞的增殖,而增加硒、锌的摄入可提高血清硒、锌的含量且可能抑制癌细胞的增殖。     

硒对氟致人肝细胞脂质过氧化、DNA损伤及凋亡的影响

[目的 ]研究硒对氟致离体培养人肝细胞脂质过氧化、DNA损伤及诱导凋亡的作用。 [方法 ]体外培养的正常人肝细胞分别接触 80 μg/ml氟化钠和 /或 1.73 μg/ml亚硒酸钠 12h后 ,检测细胞脂质过氧化物 (LPO)水平、还原型谷胱甘肽 (GSH)含量、细胞DNA损伤率、凋亡率和细胞周期构成比的情况。 [结果 ]氟组肝细胞LPO( 2 .88± 0 .5 9)nmolMDA/mg·prot、DNA损伤率 5 9.0 %、凋亡率 15 .5 6%± 2 .0 6%和S期细胞数 4.82 %± 0 .45 % ,均明显高于对照组 ,而GSH含量 ( 4 .2 3± 0 .78) μg/mg .prot则明显低于对照组 ;硒通过增加细胞GSH含量 ,降低LPO水平、DNA损伤率、凋亡率和S期细胞数而拮抗氟产生的毒性作用。 [结论 ]一定剂量的硒可拮抗氟所诱导的脂质过氧化、DNA损伤与细胞凋亡。     

硒对体外培养血管内皮细胞的影响

目的 研究不同浓度的硒对体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC-304)的影响.方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞株,在培养液中加入不同浓度的亚硒酸钠(50、100、500、1 000、2000 nmoL/L),连续培养48 h后,以瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态,以四唑氮蓝(MTT)比色法检测细胞活性,并检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的活力,丙二醛(MDA)、NO的含量.结果 硒浓度为1 000、2000nmoL/L时,细胞出现损伤样改变.硒浓度为100nmol/L时,细胞活性高于正常对照组(P＜0.05);硒浓度为1 000、2000 nmol/L时,细胞活性降低.与对照组比较,硒浓度为50～500 nmol/L时,培养液中的SOD、GSH-Px活力升高,差异有统计学意义(P＜0.05);硒浓度达2000nmoL/L时,SOD、GSH-Px活力明显降低(P＜0.01).与对照组比较,MDA在硒低浓度时无显著变化,当硒浓度升高至1 000、2 000 nmol/L时显著增高(P＜0.05,P＜0.01).低浓度的硒增强eNOS活力,降低iNOS活力,降低NO浓度;高浓度的硒降低eNOS活力,增强iNOS活力,升高NO浓度.结论 低浓度的硒对脐静脉血管内皮细胞有促进增生作用,高浓度的硒有损伤作用,并随剂量的增高而加重.     

硒对肿瘤坏死因子-α诱导的AC16心肌细胞炎性损伤的影响

目的探讨硒对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的AC16心肌细胞炎性损伤的影响。方法将体外培养的AC16心肌细胞分为对照组、硒预处理组(100 μg/L亚硒酸钠预处理4 h)、50 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 50 μg/L TNF-α组、100 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 100 μg/L TNF-α组。各组分别培养24 h后, 收集细胞培养液和细胞进行检测。Griess法检测细胞培养液一氧化氮(NO)含量;荧光倒置显微镜观察细胞Hoechst 33342核染色, 分析核固缩比例;实时荧光定量PCR检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平, 蛋白质印迹法检测核因子-kappa B(NF-κB)p65、NF-κB抑制蛋白-α(IκB-α)蛋白表达水平。结果对照组、硒预处理组、50 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 50 μg/L TNF-α组、100 μg/L TNF-α组和硒预处理+ 100 μg/L TNF-α组细胞培养液NO含量分别为(10.58 ± 2.32)、(9.07 ± ...     

硬质合金粉尘生物学作用的体外研究

本文应用体外细胞培养技术,通过测定豚鼠肺泡巨噬细胞培养液中乳酸脱氢酶活性、人胚肺二倍体成纤维细胞的DNA合成及扫描电镜观察,研究了我国有代表性的4种硬质合金粉尘的细胞毒性。结果表明,硬质合金粉尘可引起乳酸脱氢酶活性一定程度升高,和成纤维细胞DNA合成不同程度降低,以及细胞表面形态学改变,说明硬质合金粉尘具有一定的生物学作用,其细胞毒性明显低于二氧化硅粉尘。     

氟对体外培养血管内皮细胞影响及硒干预作用研究

目的研究不同浓度氟对体外培养血管内皮细胞的影响及硒的干预作用。方法人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)置于37℃,5%CO2,饱和湿度条件下培养。在培养液中加入氟化钠,氟浓度分别为0、100、400、700、1000、2000μmol/L,同时加入硒,浓度为100 nmol/L。连续培养48 h后,收集细胞培养液与细胞。应用瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态,吖啶橙荧光染色测定细胞凋亡,四唑氮蓝(MTT)比色法检测细胞活性;检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量;检测细胞培养液诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性、细胞iNOSmRNA、eNOSmRNA表达;检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)含量。结果在氟浓度100~700μmol/L加硒100 nmol/L,可明显减轻氟对细胞生长的抑制,恢复细胞形态的改变;使SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05)、MDA含量下降(P<0.05);降低iNOS活性和iNOSmRNA表达(P<0.05),升高eNOS的活性和eNOSmRNA表达(P<0.05);减少CAM-1和VCAM-1含量(P<0.05,P<0.01)。结论氟可致血管内皮细胞形态改变、功能异常。适宜剂量硒补充可通过提高抗氧化功能,调整NO代谢,抑制粘附分子异常表达等途径拮抗高氟所致的血管内皮损伤。     

富硒麦芽粉对黄曲霉毒素诱导外周血白细胞DNA非程序合成的影响

本文报告了富硒麦芽粉阻断黄曲霉毒素(AFB_1)诱导血白细胞DNA非程序合成(Unsheduled DNA Synthesis,UDS)的作用。 大鼠以富硒麦芽粉Se lppm饲养,可使外周血白细胞经AFB_1 6×10~(-7)M体外诱导的UDS值明显降低。大剂量AFB_1(1mg/kg)一次灌胃,或以每次250μg/kg,二周内10次灌胃的大鼠,如预先饲以富硒麦芽饲料,亦能明显降低其白细胞UDS值。 正常人每日食用300μg硒的硒麦芽粉强化饼干,一年后,可明显降低AFB_1所致人外周血UDS值,麦芽饼干组UDS值为2.56。而富硒麦芽饼干组UDS值为0.35。 本实验提示:富硒麦芽有阻断致癌物AFB_1对外周白细胞UDS的诱发作用。实验中富硒麦芽无毒性但具有硒的生物效应,可望在低硒或肝癌高发区作为防病防癌食品添加剂推广。     

六价铬对人淋巴细胞程序外DNA合成的影响

铬是机体必需元素,但六价铬(Cr~(+6))对机体却有明显毒性,可干扰许多重要酶系统活性、伤害肝肾、诱发恶性肿瘤。有关六价铬的细胞毒性,虽有研究报导,但对DNA损伤作用的报导不多。我们用健康成人静脉血淋巴细胞为靶细胞,用六价铬盐溶液对细胞直接作用,观察其程序外DNA合成(UDS)情况。现将初步研究结果报告如下。     

硒对中脑神经细胞生长影响的研究

目的 :研究硒对体外大鼠胚胎中脑神经细胞生长的影响。方法 :用原代培养大鼠胚胎中脑神经细胞 ,MTT法检测不同浓度硒作用下神经细胞的存活率 ;透射电镜观察法定性检测细胞凋亡。结果 :低浓度 (≤ 5μmol/ L)的硒对神经细胞的生长无明显影响 ,高浓度的硒 (≥ 1 0 μmol/L)可降低细胞存活率。结论 :硒可能通过诱发神经细胞凋亡而降低细胞存活率     

硒对镉诱导的在体大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡和细胞增殖的影响

目的　研究亚硒酸钠对氯化镉诱导的大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化以及DNA相对含量的影响。方法　选用雄性SD大鼠 ,每组 5只 ,用 5 μmol/kg亚硒酸钠分别与5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉联合作用 ,腹腔注射染毒。用单细胞凝胶电泳研究DNA损伤 ,用末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术检测大鼠肝细胞凋亡 ,用流式细胞术研究细胞增殖周期和DNA相对含量。结果　 5 μmol/kg的亚硒酸钠对 5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉引起的DNA损伤和细胞凋亡显示出良好的拮抗作用 ,也可使DNA损伤率和细胞凋亡率显著下降。 5 μmol/kg的亚硒酸钠明显抑制5 μmol/kg氯化镉引起的G0 /G1期细胞减少 ,并使 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起减少的G2 /M期细胞显著增多。 5 μmol/kg的亚硒酸钠还对 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起的DNA相对含量的下降表现出拮抗作用。结论　一定剂量的亚硒酸钠对一定剂量的氯化镉诱导的DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化和DNA相对含量下降具有一定的拮抗作用