人肝细胞癌及其癌前病变的DNA、AgNORs定量分析

用图象分析法对２０７例人正常肝、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞不典型增生（ＬＣＤ）和肝细胞肝癌（ＨＣＣ）中的细胞ＤＮＡ指数（ＤＩ）、增殖指数（ＰＩ）、核面积（ＮＡ）、二倍体细胞比率（２ＣＲ）和超五倍体细胞百分比（５ＣＥＲ）等项参数进行定量测定；同时进行核仁组织区（ＡｇＮＯＲｓ）计数及其与ＤＮＡ含量相关关系研究。结果显示：人肝癌的发生符合肿瘤发生多阶段理论。癌前病变ＬＣＤ其各项指标均显著增加，其中异倍体ＬＣＤ各项指标与ＨＣＣ＋分接近。因而提出异倍体ＬＣＤ作为病变进入演进期的标志，为肝癌发生的终未阶段，也是癌变的关键。     

胰腺癌AgNORs的定量分析

应用银染色技术对６例正常胰腺、７例慢性胰腺炎和３１例胰腺癌组织的核仁组成区嗜银蛋白进行了定量分析，结果显示：胰腺癌组的ＡｇＮＯＲｓ均值高于正常胰腺组和慢性胰胰腺炎组且差异显著。ＡｇＮＯＲｓ计数与胰腺癌的组织分级也有一定关系。     

形态学定量分析和AgNOR染色计数联合检测大鼠肝癌癌前病变的研究

以二乙基亚硝胺为启动剂，苯巴比妥钠为促进剂，建立短期诱癌实验模型。利用平面立体形态学定量分析和核仁组成区相关嗜角蛋染色计数联合对γ－谷氨酰转肽酶酶病灶进行检测。结果表明，两者联合检测更能客观地反映实验结果，从而为筛选致癌，促癌及抑癌物质提供量化方法。     

胃癌及其癌前病变核仁组成区相关蛋白的研究

本研究应用核仁组成区相关蛋白(AgNOR)染色技术对31例肠上皮化生、11例中重度异型增生、16例肠型胃癌、14例胃型胃癌组织中的AgNOR进行研究,20例正常胃粘膜作对照。发现正常胃粘膜经肠上皮化生到异型增生至胃癌,AgNOR计数/细胞核随病变异型程度的加重而递增,各组间均见显著性差异(P<0.01～0.001),同时观察到胃癌组细胞核内AgNoR大小不等,弥漫分布,有的呈块状分布。结果提示AgNOR计数和形态特点有助于胃癌及癌前病变的鉴别。     

大肠癌及癌前病变细胞AgNORs研究

应用3种方法计数大肠癌及癌前病变细胞核仁组成区嗜银蛋白(AgNORs),并对AgNORs形态进行观察。结果表明,计数核液中所有银染颗粒的方法,能较好地将大肠肿瘤性病变(腺府、腺癌、腺瘤癌变)与非肿痫性病变(幼年性息肉、炎性息肉等)区别开来,且能较好地将大肠腺癌与腺瘤、癌旁粘腆区别开来,同时大肠腺痫细胞AgNORs计数与其组织民型增生程度及组织学类型有关,反映了重度异型增生与绒毛状腺瘤易于恶变的生物学特性。     

肝细胞癌病人血浆循环DNA定量分析及其临床意义

目的　定量检测肝细胞癌 (HCC)病人血浆循环DNA并探讨其临床价值。方法　收集 79例肝功能正常的HCC病人术前血浆样本以及 2 0例健康志愿者、2 0例代偿期肝硬化病人和 2 0例活动性乙型肝炎病人的血浆样本 ,抽提血浆循环DNA。将血浆循环DNA与荧光染料SYBRgreenⅠ按比例稀释并充分混匀后通过紫外与可见光成像分析系统定量。结果　HCC、肝硬化和肝炎病人血浆循环DNA浓度分别为 (47.1± 4 3.7)ng/mL、(30 .0± 1 3.3)ng/mL和 (6 5 .3± 71 .6 )ng/mL ,均明显高于健康人群血浆循环DNA浓度 (1 7.6± 9.5 )ng/mL ,差异在统计学上有显著性 (P =0 .0 0 0 ;P =0 .0 0 2 ;P =0 .0 0 1 ) ,而HCC和肝硬化病人以及病毒性肝炎病人两组之间的血浆循环DNA浓度无明显差异 (P =0 .1 91 ;P =0 .6 85 )。伴肝内播散灶或脉管癌栓的 4 1例HCC病人的血浆循环DNA浓度 (5 4 .3± 4 1 .6 )ng/mL明显高于不伴肝内播散灶或脉管癌栓的 38例病人 (39.3± 4 5 .0 )ng/mL(P=0 .0 0 2 )。血浆循环DNA浓度与HCC病人肿瘤大小、TNM分期、2年无瘤生存率、1年和 2年总体生存率密切相关 (P =0 .0 0 8;P =0 .0 4 0 ;P =0 .0 1 0 ;P =0 .0 1 6 ;P =0 .0 0 1 ) ,而与肿瘤数目、肿瘤包膜、肿瘤分化、血清AFP浓度及 1年无瘤生存率无明显关系。多因素分     

肝细胞癌核仁组成区相关嗜银蛋白定量分析及其临床意义

研究42例肝细胞肝癌、4例肝硬化患者的手术切除后标本的石蜡包埋块,用银染色一步法染色,结果发现：肝细胞核内Ag－NORs颗粒数3例正常为4．12±1．34,4例肝硬化为5．26±1．72,42例肝细胞癌为9．41±2.18;其中19例肝细胞癌见不典型增生肝细胞Ag－NORs为6．15±1．84。随访18例,存活＞1年7例Ag－NORs为8．26±215;存活＜1年11例为Ag－NORs9．45±2．34（P＜0．05）。结果表明：Ag－NORs可作为评估肝细胞癌预后和诊断的有意义的指标。     

人肝细胞总基因组DNA与c—myc,c—N—ras基因甲基化的改变

分别用两种方法研究了人原发性肝细胞癌基因组及特定癌基因片段的ＤＮＡ甲基化情况，并进行对比研究，以＾３Ｈ－ＳＡＭ掺入法研究总基团ＤＮＡ甲基化水平，以限制性内切酶切，Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ吸印法对ｃ－ｍｙｃ，ｃ－Ｎ－ｒａｓ两种癌基因状况进行分析，结果：发现人肝细胞癌区和癌旁区组织内ｃ－ｍｙｃ，ｃ－Ｎ－ｒａｓ癌基因分别有不同程度的低甲基化，且有癌区总基因ＤＮＡ甲基化水平明显下降，本文结果提示，两种方法检测均     

大,小肝细胞癌的DNA定量比较

为研究小肝细胞（ＳＨＣＣ）丐大肝细胞癌（ＬＨＣＣ）细胞生物学特片的差异，采用ＱＤＡ软件分析系统对１１例ＳＨＣＣ和２０例ＬＨＣＣ作ＤＮＡ定量比较。结果显示，８例（７２．７％）ＳＨＣＣ为二倍体细胞（２Ｃ）例（１９例（９５．０％）ＬＨＣＣ是异倍体（ＡＮ）型（Ｐ〈０．０１）。１７例（８５．０％）ＬＨＣＣ的ＤＮＡ直方图为多峰曲线，而９例（８１．８％）ＳＨＣＣ为单峰曲线（Ｐ〈０．０１）。结果表明，ＳＨＣＣ主要     

肝细胞癌核仁组成区相关嗜银蛋白定量分析及其临床意义

研究４２例肝细胞肝癌、４例肝硬化患者的手术切除后标本的石蜡包埋块，用银染色一步法染色，结果发现，肝细胞核内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒数３例正常为４．１２±１．３４，４例肝硬化为５．２６±１．７２，４２例肝细胞胞癌为９．４１±２．１８。     

大肠良恶性肿瘤AgNORs颗粒形态定量分析

目的 :探讨AgNORs在大肠肿瘤中的应用价值。方法 :应用图像分析仪对 10例大肠正常粘膜、4 3例大肠腺瘤及 4 0例大肠腺癌AgNORs进行形态定量分析。结果 :①AgNORs计数、颗粒面积、颗粒面积 核面积等指标在 3组间呈递增趋势而形态系数则逐级减小 ,3组间差异有显著性。②管状腺瘤、混合型腺瘤和绒毛状腺瘤AgNORs计数及面积逐级升高且随体积增大升高明显 ,直径大于 2cm绒毛状腺瘤明显高于其它各组 ,P <0 .0 5。结论 :AgNORs形态定量指标检测是大肠肿瘤良、恶性鉴别诊断及大肠腺瘤癌前病变的检测、治疗方法选择的一项有意义方法     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c—myc,N—ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探讨对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２３１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性，Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌六     

食管癌及癌前病变的核仁组成区蛋白定量研究

应用胶质银技术对正常食管鳞状上皮、单纯增生、非典型增生、原位癌和浸润癌石蜡切片进行核仁组成区蛋白定量研究。发现随病变进展,核仁形成区蛋白计数明显递增,其大小、形态、分布也明显改变。核仁形成区蛋白均值除Ⅱ、Ⅲ级非典型增生间无显著性差异外(P>0.2),其余各病变组间均有显著与高度显著性差异(P<0.05,P<0.001)。表明核仁形成区蛋白定量可鉴别癌及癌前病变,并为食管脱落细胞学诊断奠定了组织学基础。     

卵巢上皮性肿瘤AgNORs形态定量分析

应用AgNORs染色技术．对卵巢上次性肿瘤的瘤细胞核内AgNORs的定量分析，结果显示良，恶性肿瘤之间AgNORs颗粒的数目．大小及分布上有明显的差异（P＜0．01）；交界性肿瘤与良、恶性肿瘤的AgNORs在数量、大小及分布上有一定的重叠．上述结果提示AgNORs定量分析有助于良、恶性肿瘤的鉴别．