抗人IgG单克隆抗体制备和鉴定

以人ＩｇＧ为抗原，采用杂交瘤技术获得６株不同性质的抗人ＩｇＧ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）（ＡＩ２、ＡＩ３、ＡＩ４、ＡＩ５、ＡＩ６、和ＡＩ）。ＡＩ２ＭｃＡｂ具有抗ＩｇＧ１亚类的特异性，可识别ＩｇＧγ链和Ｆ（ａｂ＇）２片段，作用位点可能在人ＩｇＧ１铰链区。ＡＩ３ＡＩ、ＭｃＡｂ分别为ＩｇＧ３、ＩｇＧ４亚类限制性ＭｃＡｂ，可能作用于ＩｇＧＣＨ１区。ＡＩ４ＭｃＡｂ可识别χ和λ型ＩｇＧ四个亚类以及Ｆ（ａｂ＇）２片段，不识别游离χ、λ链。ＡＩ５ＭｃＡｂ特异地抗ＩｇＧ１结合型χ，作用于ＩｇＧ独特型位点。ＡＩ６ＭｃＡｂ只抗λ型ＩｇＧ，可能作用于ＩｇＧＣＬ区。６种抗人ＩｇＧＭｃＡｂ除了ＡＩ５外，均能用于人血清中ＩｇＧ的检测。     

抗人肌红蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定

用纯化的人肌红蛋白（Ｍｂ）抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠通过细胞杂交技术。获得１０株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株．其中３株分泌ＩｇＧ_１亚类抗体，２株为ＩｇＧ_（２ａ），５株为ＩｇＧ_（２ｂ）．间接ＥＬＩＳＡ法证明单抗腹水与Ｍｂ起特异性反应，与人血红蛋白（Ｈｂ）．人白蛋白（Ａｌｂ）无交叉反应．免疫印迹检测结果表明，６株单抗腹水能特异性识别分子量１７ＫＤ的Ｍｂ，抗Ｍｂ单克隆抗体的制备，对于急性心肌梗塞早期诊断很有应用价值．     

脂蛋白脂肪酶单克隆抗体的制备及特征分析

用牛奶纯化的脂蛋白脂肪酶（ＬＰＬ）一分子量为５６ＫＤ，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠利用杂交瘤技术，建立了３０余株分泌抗朱ＬＰＬ单克隆抗体的杂交瘤细胞，对其中２Ｅ５，２Ｇ１０，６Ｄ７，８Ｄ２，７Ｆ４进行特征分析表明：（１）其抗体类别均为ＩｇＧ，亚类分别为ＩｇＧ１，ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ２ｈ，ＩｇＧ１，ＩｇＧ１；（２）抗体效价（细胞培养上清）５×１０＾－２－２×１０＾－３；（３）５种单抗可认为识别三个不同的抗原表     

抗ENA单克隆抗体的研制

目的：制备与分析抗可提取性核抗原（ＥＮＡ）单克隆抗体;方法：以ＥＮＡ为抗原,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合,经反复筛选和再克隆化,建立能稳定分泌抗ＥＮＡ单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的杂交瘤细胞株;结果：共获得１１株能稳定分泌抗ＥＮＡ的杂交瘤细胞株。对其中的５种单克隆抗体（ＩＧ５,２Ｅ５,２Ｃ６,４Ｃ１０和４Ｅ６）进行了初步分析,结果如下：小鼠腹水抗体效价范围２×１０－５～３×１０－６;免疫球蛋白亚类鉴定,１株为ＩｇＧ２ａ,１株为ＩｇＧ２ｂ,其余３株均为ＩｇＧ１;结论：ＥＮＡ作为弱免疫原可用于制备单克隆抗体     

α-2b干扰素联合改良M_2方案治疗Ⅲ期多发性骨髓瘤10例

１９９６年１月～１９９８年１２月,我们用α－２ｂ干扰素（ＩＦＮα－２ｂ）联合改良Ｍ２方案治疗Ⅲ期多发性骨髓瘤（ＭＭ）１０例,取得良好疗效。现报告如下。一、材料和方法１．一般资料：１０例Ⅲ期ＭＭ初治患者,男７例、女３例,年龄４８～７２岁,平均６３．４岁。ＩｇＧ型４例,ＩｇＡ型６例。本组病例诊断及分期均符合有关标准〔１〕,ⅢＡ７例,ⅢＢ３例。２．治疗方案：ＩＦＮα－２ｂ（美国先灵葆雅公司产品）３００万Ｕ,每周３次皮下注射,连用４周。改良Ｍ２方案：氯乙环己亚硝脲０．５～１ｍｇ／ｋｇ,ｐｏ,ｄ１;环磷酰…     

抗内毒素类脂A单克隆抗体杂交瘤细胞的建立及保护性实验研究

采用Ｊ５突变株免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，建立了６株分泌单克隆抗体的杂交瘤，分别命名为 ９Ｇ６，１０Ｈ１１，９Ｈ１，９Ｆ９，１１Ｅ７和１２Ｈ１１。它们的亚类鉴定为ＩｇＭ，ＩＧ１，ＩＧ２ａ和ＩＧ２ｂ。     

抗人乳腺癌血清抗原单克隆抗体GB2的制备及鉴定

采用人乳腺癌血清抗原免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，经ＥＬＩＳＡ筛选，有限稀释及克隆后获得了一析玢泌特异抗体的杂交瘤细胞株，命名为单克隆抗体ＧＰ２（ＭｃＡｂＧＢ２）。ＭｃＡｂＧＢ２经硫酸铵及ＤＥＡＥ纤维素纯化后效价达１：２×１０＾６，经琼脂糖免疫双扩证明ＭｃＡｂＧＢ２属小鼠ＩｇＧ１亚类。免疫印迹结果表明ＭｃＡｂＧＢ２识别的抗原呈两条区带，分子量分别为１１６ｋｄ及４５ｋｄ     

抗沙眼衣原体主要外膜蛋白种特异性单克隆抗体

用人工合成沙眼衣原体主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）氨基端１／４肽链免疫８周龄雄性ＢＡＬＢ／ｃ小鼠３只，第１４天用Ｌ１／４４０／Ｂｕ原体加强免疫，第２４天将免疫反应良好的１只小鼠脾细胞与ＮＳ－１瘤细胞融合。用１／４ＭＯＭＰ和Ｌ１原体抗原包被的聚丙乙烯板检测上清中抗体，淘汰与鹦鹉热衣原体种（ＥＡＥ株）、肺炎衣原体种（ＡＴＣＣＶＲ１３１０株）以及正常组织培养细胞（ＢＧＭＫ）有交叉反应的克隆，最后得到４株抗沙眼衣原体特异性单克隆抗体（ＭＡｂｓ），其抗体属ＩｓＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类。微量免疫荧光试验（ｍｉｃｒｏ－ＩＦ）发现４株ＭＡｂｓ均与本实验室制备的沙眼衣原体Ｌ１、Ｌ２、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ原体及Ｌ２包涵体抗原发生反应，并与沙眼衣原体所有１５个标准血清型结合，其腹水ＭＡｂｓ滴度≥１：１２８００。免疫印迹试验显示４株ＭＡｂｓ均与沙眼衣原体分子量为４００００的ＭＯＭＰ反应。     

黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的制备和鉴定

以自己合成的黄曲霉毒素Ｂ＿１一人血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＨＳＡ）偶联物免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，应用杂交瘤技术，建立了两株能持续分泌抗ＡＦＴＢ＿１单克隆抗体（ＡＦＴＢ＿１ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，命名为ＩＢ５和２Ｆ１，接种ＢＡＬＢ／ｃ鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ鉴定ＭｃＡｂ的反应特异性，使ＭｃＡｂ与固相黄曲霉毒素Ｂ＿１一牛血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＢＳＡ）结合产生５０％抑制所需的ＡＦＴＢ＿１、Ｂ＿２、Ｇ＿１、Ｇ＿２浓度依次为：１Ｂ５４．０、３６．９、２３．３、４０３．３ｎｇ／ｍｌ，２Ｆ１２．４、２．６、２．８、４。７ｎｇ／ｍｌ。     

人抑制素βA亚基单克隆抗体的制备和鉴定

目的：制备人抑制素βＡ（ＩＮＨβＡ） 亚基多肽单克隆抗体（单抗,ＭｃＡｂ）。方法和结果：用固相多态合成法合成了人抑制素βＡ亚基１ － ２８,８２ － １１４ 多肽片段。以粗提的猪卵泡液抑制素（ＩＮＨ） 和合成肽段纯品作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠,经细胞融合与筛选,获得４ 株杂交瘤细胞株,ＥＬＩＳＡ检测腹水效价为１×１０－ ４ ～１ ×１０－ ５ ,抗体特异性试验表明与α亚基片段及其他多肽激素无交叉反应。表位分析表明３ 株ＭｃＡｂ（ 抗ＩＮＨβＡ（８２－ １１４）） 可能针对同一抗原位点。相对亲和力试验表明４Ｇ３＞ ３Ｂ７＞ ６Ｃ５ ＞２Ａ３。抗原竞争试验表明腹水中抗体能明显被人卵泡液和猪卵泡液中和, 而绝经期妇女血清不能中和抗体活性。结论：成功制备抗ＩＮＨβＡ亚基ＭｃＡｂ     

抗HSV－1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７～１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＬｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ｇ）、ＩｇＧ＿３，腹水抗体效价在１０￣（－５）～１０￣（－７）之间免疫沉淀。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３株与１２０～１２８Ｋ多肽，２株与６０Ｋ多肽发生特异性反应，具有ＨＳＶ型共同抗原特异性。７株ＭｃＡｂ与ＣＭＶ均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于ＨＳＶ的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。     

猴EAE致敏前后脑脊液IgG指数和IgG合成率的变化

目的：研究体液免疫在多发性硬化（ＭＳ）病程不同阶段中的作用。方法：采用Ｂｅｋｍａｎｎ免疫仪和ＭｏｎａｒｃｈＰｌｕｓ生化仪，对１０只食蟹猴中ＩｇＧ指数和ＩｇＧ合成率，进行实验性变态反应性脑脊髓炎（ＥＡＥ）致敏前和致敏后不同阶段的自身对照检测。结果：致敏前正常食蟹猴脑脊液（ＣＳＦ）ＩｇＧ指数为０．３±０．１，ＩｇＧ合成率为－４．６±３．３；致敏后１、２、３、４、５周ＩｇＧ指数分别为０．４±０．２、０．７±０．５、０．７±０．４、０．７±０．３、０．６±０．２；而ＩｇＧ合成率分别为－１．３±４．１、２７．１±４０．０、２６．６±３９１、２６．２±３８．２、２４．５±４３．９。致敏后１周与致敏前的ＩｇＧ指数和ＩｇＧ合成率的差异无显著性意义，而致敏后２、３、４、５周与致敏前的差异均有显著性意义，但致敏后２、３、４、５周之间差异无显著性意义。结论：提示体液免疫在ＭＳ和ＥＡＥ中起重要作用，并且持续相当长的时间。     

血透患者病毒感染状况初步调查

目的与方法：对４３例血液透析患者的五种肝炎相关病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＥＶ、ＨＧＶ和ＣＭＶ）标志物进行了检测。结果：以单项抗－ＨＣＶＩｇＧ检出率最高,达５８．１％;抗－ＣＭＶＩｇＭ检出率次之,为４１．９％;其持依次为ＨＢｓＡｇ３０．２％,抗ＨＣＶＩｇＭ２５．６％,抗－ＨＢｃ１８．６％,抗－ＨＢｓ１６．３％,抗－ＨＧＶＩｇＧ９．３％,ＨＢｃＡｇ７．０％,抗ＨＢｅ４．７％,抗ＣＮＭＶ－ＩｇＧ４．７5,ry     

免疫球蛋白亚类、IL-4和IL-6在恶性淋巴细胞血液病中的变化

目的　观察多发性骨髓瘤和淋巴细胞白血病患者血清中免疫球蛋白亚类、ＩＬ－４ 和ＩＬ－６ 的含量变化。方法　采用酶联免疫吸附法测定了５０ 例多发性骨髓瘤（ＭＭ）和淋巴细胞白血病患者血清ＩｇＧ亚类、ＩＬ－４ 和ＩＬ－６ 水平；用免疫单向琼脂扩散法测定了ＩｇＡ亚类水平；并对上述部分参数进行相关分析。结果　ＭＭ 患者中，ＩｇＧ型最多，副蛋白主要分布于ＩｇＧ１ 和ＩｇＧ２ ，其ＩｇＡ及亚类多缺乏；ＩｇＡ１ 型患者血清ＩｇＧ１ 明显降低。病程较长和复发的ＡＬＬ患者血清ＩｇＧ、ＩｇＡ和ＩｇＧ１ 水平均明显低于正常对照组（Ｐ＜０－０５）；初发ＡＬＬ患者接近正常水平。绝大多数ＡＬＬ患者ＩｇＡ１ 和ＩｇＡ２ 水平明显低于正常。同时发现ＡＬＬ患者血清ＩｇＧ１ 水平与ＩＬ－ ４ 含量呈正相关（ｒ＝０－６６８ ，Ｐ＜０－０５） 。结论　多发性骨髓瘤和淋巴细胞白血病患者容易合并免疫球蛋白亚类缺乏。     

抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７￣１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３，腹水抗体效价在１０＾－５￣１０＾－７之间免疫沉淀。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３     

分泌抗丙型肝炎病毒NS5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

目的建立能稳定分泌抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５重组蛋白单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,并对其生物学活性进行实验室鉴定。方法用重组ＨＣＶＮＳ５区蛋白为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞ＳＰ２／０进行融合,经有限稀释克隆３次后制备分泌ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株,并用酶免疫（ＥＩＡ）法对其分泌抗体进行初步鉴定。结果融合后的阳性克隆中筛选出６株能稳定分泌ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株,命名为２Ｃ８,２Ｄ２,１Ｄ６,２Ｇ２,１Ｆ５和１Ｆ１０。这６株ＭｃＡｂ与ＮＳ５重组抗原均有良好的反应性,杂交瘤培养上清的ＥＩＡ抗体滴度为１∶４００～１∶１６００,其中１株诱生的同系小鼠腹水滴度为１∶８００００。这６株ＭｃＡｂ均为ＩｇＧ１亚型。结论该ＭｃＡｂ的制备,可为ＨＣＶ感染者血清和肝组织中抗原检测方法的建立和生物工程药物的研制创造条件。     

抗内毒素类脂A单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及保护性实验研究

采用Ｊ５突变株免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，建立了６株分泌单克隆抗体的杂交瘤，分别命名为９Ｇ６，１０Ｈ１１，９Ｈ１，９Ｆ９，１１Ｅ７和１２Ｈ１１。它们的亚类鉴定为ＩｇＭ，ＩＧ１，ＩＧ２ａ和ＩＧ２ｂ。在酶联免疫吸附试验中证实可与多种革兰阴性杆菌出现阳性反应。其中９Ｇ６单克隆抗体具有高效价的抗类脂Ａ活性，小鼠腹腔内保护实验表明，可产生较广谱的抗革兰阴性杆菌活菌攻击的保护活性。是一种可望有较好临床效果的免疫制剂。文中还讨论了单克隆抗体不同输入时间对保护效果的影响。     

恶性疟原虫抗独特型抗体的初步研究

用抗恶性疟原虫单克隆抗体１３Ａ２，制备兔抗血清，经ＢＡＬＢ／ｃ－ＩｇＧ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ和１３Ａ２ＭｃＡｂ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱提纯，得到抗独特型抗体（Ａｂ２）。免疫双扩散试验和ＥＬＩＳＡ试验表明：抗独特型抗体仅与１３Ａ２ＭｃＡｂ反应。４ｉ试验显示：当恶性疟原虫抗原浓度为８０μｇ／ｍｌ，对１３Ａ２Ｉｄ－Ａｎｔｉｌ３Ａ２Ｉｄ系统产生８１％的抗体结合抑制率，而伯氏疟原虫和诺氏疟原虫抗原检测，抗体结合抑制率分别为２７％和２．５％。兔抗血清中抗Ａｂ２抗体（Ａｂ３）滴度为１：６４０，提示此抗独特型抗体可替代原始抗原诱生抗恶性疟抗体。     

抗人乳腺癌血清抗原单克隆抗体GB2的制备及鉴定

采用人乳腺癌血清抗原免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，经ＥＬＩＳＡ筛选，有限稀释及克隆后获得了一株稳定分泌特异抗体的杂交瘤细胞株，命名为单克隆抗体ＧＢ２（ＭｃＡｂＧＢ２）。ＭｃＡｂＧＢ２经硫酸铵及ＤＥＡＥ纤维素纯化后效价达１∶２×１０６，经琼脂糖免疫双扩证明ＭｃＡｂＧＢ２属小鼠ＩｇＧ１亚类。免疫印迹结果表明ＭｃＡｂＧＢ２识别的抗原呈两条区带，分子量分别为１１６ｋｄ及４５ｋｄ，分布于乳腺癌组织及血清中。     

抗人tPA单克隆抗体的制备

目的：制备抗ｔＰＡ单克隆抗体，用于建立ＥＬＩＳＡ方法和研究ｔＰＡ与肿瘤转移的关系。方法：用基因重组的组织型纤溶酶原激活剂（ｒｔＰＡ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，按常规法作细胞融合，用ＥＬＩＳＡ法筛选出阳性反应的杂交瘤细胞克隆。结果：获得一株杂交瘤细胞株（２Ｂ７）；其免疫球蛋白亚类为ＩｇＧ１；经ＥＬＩＳＡ法和免疫印迹技术证明，此单抗能特异性识别ｔＰＡ。结论：用２Ｂ７ＭｃＡｂ特异性强，用其建立的夹心ＥＬＩＳＡ检测ｔＰＡ的方法线性较好，灵敏度可达１ｎｇ／ｍｌ。２Ｂ７ＭｃＡｂ可望用于ｔＰＡ与肿瘤转移关系及导向溶栓的研究。