溶栓药APSAC的制备和鉴定

重组链激酶（ｒ－ＳＫ）由工程菌提取液经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱纯化，比活性达１０５ＩＵ／ｍｇ，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示分子量为７８．０２４７×１０－２４ｋｇ的一条带。人新鲜血浆经Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤制备纤溶酶原（ｐｌｇ），比活性达２３．７ＩＵ／ｍｇ，活性回收率为１３．６％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示分子量为１４７．７４８９×１０－２４ｋｇ的一条带。对－茴香酸－对－脒基ｒ－ＳＫ和ｐｌｇ的混合物经苯酯盐酸盐（ＡＰＡＮ）修饰后制备茴香酰纤溶酶原链激酶激活剂复合物（ＡＰＳＡＣ），产物经Ｌ－ｌｙｓｉｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示分子量为７８．０２４７×１０－２４ｋｇ和１４７．７４８９×１０－２４ｋｇ两条带，其拟一级水解速率常数为１．２６×１０－４ｓｅｃ－１。体外溶栓实验证明其有溶栓活性。     

重组人呷α8干扰素在大肠杆菌中的克隆与高表达

利用基因重组技术构建了人干扰素α８高表达菌株Ｅ．ｃｏｌｉＸＬ１－ｂＬＵＥ／ｐＢｍ，经酶切鉴定、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ及生物活性测定等分析，表明能特异性地表达具有生物活性的ＩＦＮ－α８，表达量达到总菌体蛋白的２３％，经复性后活为４．８×１０＾７ＩＵ／ｍｇ，具有良好的应用前景。     

结直肠癌Dukes各期局部免疫功能变化研究

采用ＡｐＡＡＰ法、ＥＬＩＳＡ和ＲＩＡ法检测４５例结直肠癌（ＣＲＣ）患者外周血和局部动静脉血Ｔ细胞亚群（ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋）、ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦα和ＰＧＥ２，结果发现，局部动静脉血中ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值随Ｄｕｋｅｓ分期进展而下降；ｓＩＬ－２Ｒ和ＰＧＥ２浓度则随Ｄｕｋｅｓ分期进展而升高，各期差异显著，局部静脉血ＰＧＥ２浓度显著高于局部动脉血；ＴＮＦα水平也随Ｄｕｋｅｓ分期不同而变化，Ｄｕｋ     

人参茎叶皂甙和大豆皂甙对糖尿病大鼠血小板聚集率和TX…

本实验分别经胃给予雄性Ｗｉｓｔａｒ糖尿病（ＤＭ）大鼠人参茎叶皂甙（ＧＳ）１５０ｍｇ／ｋｇ．日大豆皂甙（ＳＳ）１０ｍｇ／ｋｇ．日２０周，观察ＧＳ和ＳＳ对ＤＭ大鼠血糖、胰岛素、血小板聚集率（ＰＡＲ）和ＴＸＡ２／ＰＧＩ２／（Ｔ／Ｐ）的影响。结果显示ＧＳ和ＳＳ均能降低ＤＭ大鼠的血糖、ＰＡＲ和Ｔ／Ｐ值，提高胰岛素水平。     

供转导PDGF-A基因的高滴度逆转录病毒的制备

目的制备高滴度供转导血小板衍生生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）基因的重组逆转录病毒,为体内、外深入研究该基因表达产物自分泌和旁分泌的生物学功能奠定基础。方法将人ＰＤＧＦ－ＡｃＤＮＡ片段插入含巨细胞病毒（ＣＭＶ）启动子序列的逆转录病毒ＧＩＮａ载体的多克隆位点中,将构建的重组质粒导入病毒包装细胞ＰＡ３１７中,经Ｇ４１８筛选并扩增,以病毒液感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞,测病毒滴度,选择出抗性克隆,进行免疫组织化学检测,表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析和３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测生物学活性。结果病毒滴度最高为１．４×１０５ＣＦＵ／ｍｌ;免疫荧光染色法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实ＰＤＧＦ－ＡＡ的表达;抗性细胞条件培养基的细胞活性高达５１．２Ｕ／（１０６·ｄ）。结论供转导ＰＤＧＦ－Ａ基因的高滴度逆转录病毒得以制备,该基因获得有效表达,表达产物具有明显的致丝裂活性。     

血清学与^13C—尿素呼吸试验检测反复腹痛儿童Hp感染比较

目的 探讨血清学及＾１３Ｃ尿素呼吸试验（＾１３Ｃ－ｕｒｅａ ｂｒｅａｔｈ ｔｅｓｔ,＾１３Ｃ－ＵＢＴ）在检测小儿反复腹痛（ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ａｂｄｏｍｉｎａｌ ｐａｉｎ,ＲＡＰ）幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染中的应用及ＲＡＰ与Ｈｐ的关系。方法 采用＾１３Ｃ－ＵＢＴ及血清ＥＬＩＳＡ汉检测抗Ｈｐ－ＩｇＧ。结果 ２００例经＾１３Ｃ－ＵＢＴ检测有５８例检出Ｈｐ感染,检出率２９．４％（１５／５１）,２９．５％（３     

甲状腺细胞产生白细胞介素-6及其调节的研究

目的 研究碘化钠（ＮａＩ）、促甲状腺激素（ＴＳＨ）、白细胞介素－１（ＩＬ－１）、肿瘤坏死因了－α（ＴＮＦ－α）、地塞米松（ＤＥＸ）、肾上腺素等因子对Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）甲状腺细胞（ＴＥＣ）生成ＩＬ－６的影响。方法 以超敏ＥＬＩＳＡ方法,检测甲状腺培养细胞上清液中ＩＬ－６含量。结果 单层培养的ＴＥＣ能够产生高浓度的ＩＬ－６、ＴＳＨ（１０＾３ｍＵ／Ｌ）、ＩＬ－１（１０Ｕ／ｍｌ）、ＴＮＦ－α（１０＾－     

分泌抗人促甲状腺激素（hTSH）单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与经人促甲状腺激素（ｈＴＳＨ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞融合，融合率６０．４％，抗体阳性率４．３％，经３－４次克隆化，筛出３株稳定分泌ＴＳＨＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。用放射免疫分析法（ＲＩＡ）检测小鼠腹水，抗体效价为１０＾－４时，抗体结合率为４５．５％。用ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠腹水，抗体效价达１０＾－５。其中３株细胞做琼脂糖免疫双扩散试验，均显示为ＩｇＧ１，亚类。染色体计数     

人参茎叶皂甙和大豆皂甙对糖尿病大鼠血小板聚集率和TXA_2／PGI_2系统的影

本实验分别经胃给予雄性Ｗｉｓｔａｒ糖尿病（ＤＭ）大鼠人参茎叶皂甙（ＧＳ）１５０ｍｇ／ｋｇ·日和大豆皂甙（ＳＳ）１０ｍｇ／ｋｇ·日２０周，观察ＧＳ和ＳＳ对ＤＭ大鼠血糖、胰岛素、血小板聚集率（ＰＡＲ）和ＴＸＡ２／ＰＧＩ２（Ｔ／Ｐ）的影响。结果显示ＧＳ和ＳＳ均能降低ＤＭ大鼠的血糖、ＰＡＲ和Ｔ／Ｐ值，提高胰岛素水平。     

重组人α8干扰素在大肠杆菌中的克隆与高表达

利用基因重组技术构建了人干扰素α８（ＩＦＮ－α８）高表达菌株Ｅ．ｃｏｌｉＸＬｌ－Ｂｌｕｅ／ｐＢｍ，经酶切鉴定、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ及生物活性测定等分析，表明能特异性地表达具有生物活性的ＩＦＮ－α８，表达量达到总菌体蛋白的２３％，经复性后比活为４．８×１０７ＩＵ／ｍｇ，具有良好的应用前景。     

子宫内膜异位症患者sIL—2R,TNF—α及T细胞亚群的检测及 …

对３６例子宫内膜异位症（Ｅｎｄｏｍｔｒｉｓｉｓ ＥＭＳ）患者的外周血及腹腔液进行了ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ－α及Ｔ细胞亚群的检测,与对照组相比,ＥＭＳ患者ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ－α水平明显升高（Ｐ〈０．０１）．Ｔ细胞亚群ＣＤ４＾＋及ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋经值明显升高（Ｐ〈０．０１）。实验结果显示ＥＭＳ患者免疫调节功能紊乱。     

大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达

用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因（ＡｎｓＢ）两侧序列互补的寡核苷酸Ｅ１，Ｅ２作引物，以大肠杆菌野生株ＣＰＵ２１０００９的染色体ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ扩增得到约１．２ｋｂ的ＤＮＡ片段，将此片段插入ｐＫＫ２３３－２的ｔａｃ启动子下游，转化不同的大肠杆菌宿主菌株，结果表明以ＣＰＵ２１０００９为宿主菌时，转化子的酶表达量最高，重组Ｌ－天门冬酰胺酶占菌体总蛋白４８．３％，发酵液酶活力达４００ＩＵ／ｍｌ；比活为４８ＩＵ／ｍｇ蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示纯化后的重组Ｌ－天门冬酰胺酶分子量与天然酶相同，均为１４０ＫＤ。     

人胃、十二指肠粘膜SS，AVP，EK和β－EP含量测定及其临床意义

作者应用放免分析法对２４例十二指肠溃疡（ＤＵ），１５例胃溃疡（ＧＵ）患者胃、十二指肠粘膜进行了生长抑素（ＳＳ），精氨酸加压素（ＡＶＰ）、脑啡肽（ＥＫ）和β－内啡肽（β－ＥＰ）含量测定．同时以２０例慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）为对照．结果表明，ＤＵ患者球、窦和体部粘膜ＳＳ含量（依次为１５３．５±２７．５，３３０．９±２３．９和１７７．１±３０．９ｐｇ／ｍｇ）显著低于（Ｐ＜０．０５）对照（依次为２５３．７±３４．２，５８８．９±８５．３和２８８．８±４０．５ｐｇ／ｍｇ），ＥＫ（依次为９８．６±１３．２，１０８．２±１６．５和５８．５±１０．３）和β－ＥＰ（依次为１１３．０±２２．６，８８．７±１６．８和８２．８±１８．８ｐｇ／ｍｇ）显著高于（Ｐ＜０．０１）对照（ＥＫ依次为５０．１±８．８，６２．９±１１．４和３０．９±３．０；β－ＥＰ依次为８２．３±８．１，３９．８±６．８和４９．８±９．１）．ＤＵ患者球部粘膜ＡＶＰ（５２．３±７．０ｐｇ／ｍｇ）显著高于（Ｐ＜０．０５）ＣＳＧ（３７．７±４．３ｐｇ／ｍｇ）．ＧＵ组上述激素含量与对照组比较均无显著差异．提示：①ＡＶＰ，ＳＳ，ＥＫ和β－ＥＰ在人胃、十二指肠皆有分布；②粘     

非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影响因素

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活性改变的影响因素。方法测定７７例ＮＩＤＤＭ患者和５０例正常人血糖、总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。ｔ检验、直线相关分析和多元逐步回归分析。结果ＮＩＤＤＭ组血糖、ＨｂＡｌｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＬＰＯ显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＳＯＤ、ＧＳＨＰＸ、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于对照组（除ＧＳＨ的Ｐ＜０．０５外，其他Ｐ＜０．０１）；不同ＨｂＡｌｃ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＬＰＯ、ＴＣ组的红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性有显著性差别。红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１２．８０＋０．２７（ＧＳＨ）－０．１２（ＬＰＯ）－０．０９（ＴＣ／ＨＤＬＣ），红细胞胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１０８．２０＋１．     

去脑垂体大鼠免疫耐受性诱导及产生机制探讨

为控制垂体移植免疫排斥，利用供体Ｗｉｓｔａｒ大鼠活化脾细胞（ＡＳＣ）和（或）环磷酰胺（ＣＰ）对去垂体ＳＤ大鼠进行免疫耐受诱导，同时检测受体Ｔ细胞亚群，细胞因子及ＭＬＲ，结果，ＡＳＣ５×１０＾７／０．５ｍｌ／周２次或ＡＳＣ联合ＣＰ２０ｍｇ／ｋｇ．ｄ２周，使移植皮片ＭＳＴ明显延长，致耐受体ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８细胞以及ＩＬ－２，ＩＬ－６和ＴＮＦ显著低于排斥组。ＭＬＲ显示，受体对特异抗原产生反应。表明Ａ     

大鼠骨骼肌胰岛素受体的部分纯化及其特征

目的：对大鼠骨骼肌胰岛素受体的结构和特征进行分析。方法：采用麦胚凝集素琼脂糖凝胶（ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）部分纯化骨骼肌胰岛素受体；通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、胰岛素结合实验以及受体自身磷酸化和外源性底物磷酸化实验，分析受体的结构，并研究其特征。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明骨骼肌胰岛素受体由两处分子量分别为１３５×１０３ｕ和９５×１０３ｕ亚基组成；受体结合实验经Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析表明受体与胰岛素结合呈负协同效应，最大结合容量为（０．９６±０．３４）ｐｍｏｌ／ｍｇ，受体β－亚基能自身磷酸化，且能激活受体内在酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性，并呈胰岛素剂量依赖关系。结论：ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ纯化的骨骼肌胰岛素受体纯度和活性较好，其结构和特征与其他组织胰岛素受体相同     

缓激肽对血小板源性生长因子诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中一氧化氮及其合酶基因表达的影响祆

目的 探讨缓激肽在对血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）诱导的培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖的影响中一氧化氮（ＮＯ）含量与诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达的变化。方法 取ＳＤ大鼠胸主动脉平没肌细胞进行培养,传至４～６代,分成以下几组：１．对照组;２．ＰＤＧＦ组（５０ｎｇ／ｍｌ）;３．ＰＤＧＦ＋缓激肽（１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ组;４．ＰＤＧＦ＋缓激肽＋Ｈｏｅ１４０（１０＾－４ｍｏ     

自发性高血压大鼠血中内皮素,一氧化氮,丙二醛水平及 …

为探讨内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）在高血压发病中的作用及相互关系。选用自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和对照ＷＫＹ大鼠各１０只,分别测定血浆中ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－,ＭＤＡ及ＥＴ水平,分析血压与ＥＴ、ＮＯ及ＭＤＡ与ＮＯ的关系。结果ＳＨＲ血浆中的ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－、ＥＴ、ＭＤＡ水平明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）,同时ＳＨＲ血压与ＥＴ水平独立相关,偏相关系数为０．８８５５（Ｐ〈０．０１）,ＭＤＡ与Ｎ     

人参总皂甙对人血细胞生成的研究

从人参中提取有效成份人参总皂甙（ＴＳＰＧ），测定它对人骨髓粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ），红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ）和多向祖细胞（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）的刺激增殖作用。结果显示：在培养中加入不同浓度的ＴＳＰＧ５．２５，５０，７５，１００ｍｇ／Ｌ，可促进造血细胞增殖，在体外形成集落。在ＴＳＰＧ５－７５ｍｇ／Ｌ时，ＣＦＵ－ＧＭ集落产率均明显高于不加ＴＳＰＧ的对照组浓度的ＴＳＰＧ使集落产率明显高于对     

释放吲哚美辛的固定式铜宫内节育器减少子宫出血机制的研究

观察放置３种不同类型宫内节育器（ＩＵＤ）妇女置器前、后子宫内膜超微结构及官腔冲洗液前列腺素（ＰＧｓ）含量、组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）和纤溶酶原激活剂抑制剂（ＰＡＩ）活性以及凝血因子Ⅷ相关抗原（ｖＷＦ）含量的动态变化。结果：①ＦＩＣｕ－ＩＵＤ对子宫内膜损伤较ＦＣｕ－ＩＵＤ及ＴＣｕ１２２０Ｃ明显减轻。②置入ＦＣｕ－ＩＵＤ和ＴＣｕ２２０Ｃ后１、３、６个月,６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１ａ）／ＴＸＢ_２比值显著高于置器前（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,ＰＧＥ_２／ＰＧＦ_２比值升高不明显;置器后ｔ－ＰＡ活性升高显著（Ｐ＜０．０１）,ＰＡＩ活性则无明显变化;ｖＷＦ含量置器前、后无统计学差异。③放置ＦＩＣｕ－ＩＵＤ前后,以上各项生化指标的差异均无统计学意义,但与同期 ＦＣｕ－ＩＵＤ和 ＴＣｕ２２０Ｃ相比,６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１ａ）／ＴＸＢ_２比值及 ｔ－ＰＡ活性下降有显著性意义。提示：ＦＩＣｕ－ＩＵＤ释放的吲哚美辛通过减轻Ｃｕ－ＩＵＤ引起的内膜损伤和异物反应,降低Ｃｕ－ＩＵＤ所致的ＰＧＩ２、ｔ－ＰＡ升高和提高ＴＸＡ_２水平,是其减少子宫出血的部分机制。