TNF-α在糖尿病心肌病变中的表达

目的:观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在血清、心肌组织中的表达水平及心肌细胞结构改变,探讨TNF-α在糖尿病心肌病变发生、发展中的作用。方法:建立糖尿病大鼠模型(实验组),分别于6周、10周、14周,在光镜、电镜下观察心肌结构,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TNF-α水平,免疫组化方法检测心肌组织TNF-α表达,并与对照组对比。结果:TNF-α在实验组较对照组表达增加(P<0.01),并随病程进展增加。光镜、电镜下可见糖尿病心肌细胞肿胀、肌丝稀疏,线粒体肿胀、破裂。结论:TNF-α在糖尿病大鼠心肌中表达增强,促进糖尿病心肌病变进展。     

混合稀土“常乐”染毒对糖尿病大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT_4影响的实验研究

目的探讨混合稀土"常乐"染毒对糖尿病大鼠脂肪组织中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白水平的影响。方法将40只健康清洁级Wistar雄性大鼠随机分为3组,分别为对照组(10只)、糖尿病组(18只)和混合稀土"常乐"组(12只)。糖尿病组和混合稀土"常乐"组腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素制备糖尿病模型;混合稀土"常乐"组采用灌胃方式染毒0.2 mg/kg常乐,对照组及糖尿病组均每日给予等剂量的生理盐水,1次/d,连续染毒1个月,然后处死取脂肪组织。采用流式细胞仪检测大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因表达的阳性百分率;采用ELISA法检测大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4蛋白的水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脂肪组织的病理改变;采用免疫组织化学方法检测大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4蛋白的阳性强度。结果与对照组比较,糖尿病模型组大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因阳性百分率、蛋白水平及蛋白的阳性表达强度均显著降低,差异有统计学意义(P0.01);混合稀土"常乐"组大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因阳性百分率、蛋白水平及蛋白的阳性表达强度均略降低,但差异无统计学意义(P0.05);与糖尿病组比较,混合稀土"常乐"组大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因阳性百分率、蛋白水平及蛋白的阳性表达强度均明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论混合稀土"常乐"可上调糖尿病大鼠脂肪组织PPAR-γ和GLUT4的表达水平,从而对糖尿病大鼠机体有一定的保护作用。     

丹参酮ⅡA对压力负荷增加的大鼠TNF-α表达的影响

目的观察TNF-α在压力负荷增加大鼠血清中的表达,并探讨其对心肌纤维化的作用机制。方法 32只成年雄性SD大鼠,随机分成四组(n=8),假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、Tan II A组(Tan II A组,20 mg.kg-1.d-1)及阳性对照药物卡托普利组(Captopril组,100 mg.kg-1.d-1)。除Sham组外,其余3组大鼠均行肾上方腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加心肌纤维化模型,Sham组仅分离腹主动脉而不结扎。术后4周成功造模并开始给药,疗程为4周。8周后检测左室重量指数、心肌组织病理学、心肌羟脯氨酸(HYP)含量、血清TNF-α蛋白的含量。结果与Model组比较,Tan II A组能明显抑制心肌纤维化大鼠心肌组织的病理改变,降低心肌肥厚指数、心肌羟脯氨酸含量以及血清TNF-α蛋白浓度(P0.01)。结论压力负荷增加大鼠血清TNF-α蛋白表达明显升高,表明促炎细胞因子TNF-α在压力负荷增加大鼠心肌纤维化中起着重要的作用;TanII A对心肌纤维化的保护作用可能部分与下调促炎细胞因子表达有关。     

瑞舒伐他汀对心肌肥厚大鼠TLR4信号通路的影响

目的研究瑞舒伐他汀(rosuvastatin,RSV)对压力负荷诱导心肌肥厚大鼠心肌中toll样受体4(TLR4)及其下游核转录因子NF-κB p65、IκBα、炎症因子TNF-α表达的影响。方法采用腹主动脉缩窄大鼠模型,♂Wistar大鼠随机分为假手术组(S)、模型组(M)、RSV给药组(R,10 mg·kg~(-1)·d~(-1))每组10只。行心脏超声学检查,采用RT-PCR、Western blot、免疫组化、ELISA等方法检测心肌组织中心肌肥大基因ANP及TLR4、NF-κB p65、IκBα、TNF-α的表达。将TLR4蛋白水平分别与ANP、NF-κB p65、TNF-α水平进行相关性分析。结果 M组与S组相比,心脏体积和心肌细胞横截面直径、ANP mRNA水平均明显增加(P<0.01),伴TLR4mRNA和蛋白、NF-κB p65及TNF-α的水平明显增加及IκBα蛋白水平减少(P<0.05)。RSV抑制心肌肥厚,下调心肌组织中TLR4mRNA和蛋白、NF-κB p65及TNF-α的表达及上调IκBα蛋白水平(P<0.05)。在M组和R组,TLR4蛋白水平分别与ANP、NF-κB p65、TNF-α水平呈正相关。结论 RSV抑制心脏压力负荷诱导的心肌肥厚的作用可能与其抑制TLR4信号系统有关。     

胸腺肽α1对脓毒症大鼠心肌的保护作用

目的探讨胸腺肽α1对脓毒症大鼠心肌保护作用的可能机制。方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组,分别是对照组,假手术组,脓毒症组及胸腺肽治疗组。采用盲肠结扎穿刺法制造脓毒症模型,胸腺肽治疗组子胸腺肽干预,其他组予生理盐水对照。通过心脏彩超观察大鼠心功能变化,取心肌组织分别检测各组激活p38分裂原激活的蛋白激酶(p38 MAPK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氟(NO)水平,组织切片行HE染色观察组织形态。结果脓毒症组心肌细胞磷酸化的p38 MAPK表达水平较对照组及假手术组上调,TNF-α、NO水平增高。胸腺肽α1能抑制脓毒症大鼠心肌细胞磷酸化的p38 MAPK、TNF-α、NO水平的增高,改善心脏EF值。结论胸腺肽α1可能通过抑制p38 MAPK途径对脓毒症心肌损害具有一定的保护作用。     

口服螺内酯对SHR心肌组织TNF-α表达的影响

目的:观察口服小剂量螺内酯对自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织TNF-α表达水平的影响.方法:20只8周龄雄性SHR随机分为螺内酯组和安慰剂组,每组10只,另设对照组(Wistar-kyoto,n=7).螺内酯组螺内酯双蒸水溶解,20 mg/(kg·d)灌胃,安慰剂组和对照组等容积双蒸水灌胃,持续16周,24周龄大鼠称取体质量,颈动脉插管检测动脉血压.摘取心脏,心尖部横断为两片,分别投入液氮罐中和10％中性甲醛固定液中,用ELASA方法检测心肌组织匀浆上清液TNF-α水平,免疫组化观察TNF-α表达.结果:螺内酯组与安慰剂组比较,收缩压、舒张压、平均动脉压水平无明显变化(P＞0.05),但两组的收缩压、舒张压、平均动脉压均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).安慰剂组与对照组比较,心肌组织TNF-α水平明显升高,螺内酯组与安慰剂组比较心肌组织TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P＜0.01),但未达对照组水平(P＞0.05).结论:SHR大鼠心肌组织TNF-α高表达,口服小剂量螺内酯可降低SHR大鼠心肌组织TNF-α水平.     

黄精多糖通过调节JAK2/STAT3通路改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚

目的探讨黄精多糖调节JAK2/STAT3通路改善异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚的作用。方法异丙肾上腺素背部皮下注射5 mg/(kg·d),1次/d,连续给药14 d,建立大鼠心肌肥厚模型。将60只SD大鼠随机分为6组,包括对照组,模型组,黄精多糖低剂量组(200 mg/kg)、中剂量组(400 mg/kg)、高剂量组(800 mg/kg),普萘洛尔组(150 mg/kg)。造模第2天开始灌胃给药治疗1个月。给药结束后分别检测各组大鼠全心质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVMI);取心脏切片进行HE染色;生物化学法检测血清中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、过氧化脂质(LPO)的含量;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;Western blot检测心肌组织中JAK2、P-JAK2和STAT3、P-STAT3蛋白表达。结果模型组大鼠HMI、LVMI高于对照组(P<0.01),心肌细胞增大;与模型组比较,黄精多糖中剂量组HMI降低(P<0.05),高剂量组HMI、LVMI降低(P<0.05,P<0.01),两组大鼠心肌细胞均缩小。模型组血清SOD、GSH-Px含量低于对照组(P<0.05,P<0.01),血清MDA、LPO、TNF-α、IL-6水平及心肌组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达高于对照组(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,黄精多糖低剂量组血清MDA、LPO降低(P<0.05);中剂量组血清GSH-Px含量升高(P<0.05),MDA、LPO、TNF-α、IL-6水平及心肌组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);高剂量组血清SOD、GSH-Px含量升高(P<0.05),MDA、LPO、TNF-α、IL-6水平及心肌组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。药物作用呈一定的剂量依赖性。结论黄精多糖对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化、抗炎、抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

依托咪酯对糖尿病大鼠肾脏缺血再灌注后心肌的影响

目的观察糖尿病大鼠肾缺血再灌注对远隔器官心肌组织的损伤作用,探讨依托咪酯对心肌组织的保护作用。方法健康成年雄性wistar大鼠36只,体质量300～350g,用链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病。糖尿病大鼠随机分为A组假手术组(n=12),B组肾缺血再灌注组(n=12),C组肾缺血再灌注+依托咪酯组(n=12),实验结束,24h后处死大鼠,光镜观察心肌组织的形态学改变,采用免疫组织化学法对TNF-α和NF-κB进行定性、半定量检测。结果与A组相比,B组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达上调(P<0.05),C组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达差异无统计学意义(P>0.05),与B组相比较,C组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达下调(P<0.05)。结论糖尿病大鼠肾缺血再灌注继发心肌组织损伤,依托咪酯能够明显减轻这种损伤,其保护作用可能与TNF-α表达抑制,TNF-α/NF-κB正反馈信号阻断有关。     

中药仙灵脾对2型糖尿病大鼠炎症因子的影响

目的:评价中药仙灵脾对2型糖尿病大鼠炎症因子的影响。方法:雄性Wistar大鼠70只,从中随机选取10只为正常对照组,其余应用高糖高脂饲料喂养及链脲佐菌素腹腔注射造模,成模2型糖尿病大鼠共44只按血糖值随机分组:糖尿病(DM)模型对照组(16只)、仙灵脾组(16只)、二甲双胍组(12只),各组共相应给药8周,治疗前后取血测量血糖(FBG)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)。结果:成模2型糖尿病各组大鼠FBG,CRP,TNF-α,IL-6水平均较正常对照组大鼠明显增高(P<0.01)。应用仙灵脾及二甲双胍治疗的两组大鼠的FBG,CRP,TNF-α,IL-6水平均较DM模型对照组显著下降(P<0.05),但两治疗组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论:中药仙灵脾治疗2型糖尿病大鼠可降低炎症因子水平,抑制体内炎症反应。     

心肌钙反常模型细胞因子的表达及地尔硫卓的干预作用

目的探讨心肌钙反常模型诱导心肌细胞因子的表达及地尔硫卓的干预作用。方法采用Langendorff装置对离体大鼠心脏进行钙反常灌流(无钙灌流液5min,立即换正常钙灌流液灌流30min),建立心肌细胞钙超载模型。设立钙超载组、正常对照组、无钙对照组、钙超载给药组(地尔硫卓)和无钙给药组。电镜和光镜观察心肌病理和超微结构的变化。原子分光光度计检测心肌钙离子浓度,RT-PCR法测心肌细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1和IL-10的表达。结果钙超载组光镜下未见明显炎症细胞浸润,电镜结果显示心肌细胞膜、细胞核和线粒体明显破坏。与正常对照组比较,TNF-α、IL-1β和IL-6明显增高,而TGF-β1和IL-10无明显变化。钙超载给药组(地尔硫卓)显示心肌损伤明显改善,TNF-α、IL-1β和IL-6明显下降。正常对照组、无钙对照组和无钙给药组心肌光镜和电镜下无明显差异,心肌Ca2+浓度差异无统计学意义,细胞因子的表达差异也无统计学意义。结论心肌钙反常模型诱导心肌表达TNF-α、IL-1β和IL-6,对TGF-β1和IL-10无明显影响,地尔硫卓能抑制心肌细胞钙超载诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6表达。     

异丙酚对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌NF—κB、TNF—α和IL-6的影响

目的探讨异丙酚对糖尿病缺血再灌注心肌保护作用机制。方法健康雄性SD大鼠100只,随机分为糖尿病组76只（76只大鼠造模成功60只）和非糖尿病组24只。非糖尿病大鼠随机分为假手术组（I组）和缺血再灌注组（Ⅱ组）;60只糖尿病大鼠随机分为假手术组（Ⅲ组）、缺血再灌注组（Ⅳ组）和异丙酚低（V组）、中（Ⅵ组）、高（VII组）剂量组,每组12只。记录缺血前、缺血30min、再灌注120min时心率（HR）、平均动脉压（MAP）,并计算心率-血压指数。ELISA测定血清及心肌组织TNF-α、IL-6的含量。免疫组化染色分析心肌组织中NF—KB的核移位,Westemblotting检测心肌组织NF—κB的表达量。结果与I组比较,Ⅲ组缺血前HR、MAP及血压-心率指数降低（P〈0．05或〈0．01）;与Ⅱ组比较,IV组,HR、MAP及血压-心率指数降低（P〈0．05或〈0．01）,血清及心肌组织TNF-α、IL-6含量明显升高（P〈0．05）,NF-κB活化,明显从细胞浆移位于细胞核,表达量也显著增加;与Ⅳ组比较,缺血再灌注后,Ⅵ组、Ⅶ组HR、MAP及血压-心率指数改善（P〈0．05或〈0．01）,血清、心肌组织中TNF-α、IL-6含量明显降低。结论应用异丙酚后能明显抑制糖尿病心肌L／R后NF-κB的活化和TNF-α、IL-6的表达增加,心功能明显改善。     

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠MAI及ET-1蛋白、eNOS蛋白、TNF-α蛋白表达的影响

目的:观察阿托伐他汀对自发性高血压(SHR)大鼠MAI及TNF-α蛋白、ET-1蛋白、eNOS蛋白表达的影响。方法:20只雄性SHR随机分为阿托伐他汀干预组(ATV组)和生理盐水组(NS组),10只正常血压雄性大鼠给予生理盐水灌胃作对照(WKY组)。观察10周后心肌组织和血清中TNF-α、ET-1、eNOS的表达,检测MAI变化。结果:NS组大鼠和ATV组大鼠与WKY组大鼠相比,左室MAI、血清及左室心肌中TNF-α蛋白和血清中ET-1蛋白表达明显升高(P<0.05),而ATV组大鼠与NS组大鼠比较,上述指标均显著低于NS组(P<0.05);eNOS活性显著降低(P<0.05),而ATV组大鼠与NS组大鼠比较,上述指标均显著低于NS组(P<0.05);eNOS活性则显著升高(P<0.05)。结论:阿托伐他汀抑制高血压大鼠心肌细胞凋亡,可能与其抑制TNF-α、ET-1蛋白的表达,提高eNOS活性有关。     

荔枝壳原花青素对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制研究

目的研究荔枝壳原花青素(Procyanidins extracted from the litchi pericarp,LPPC)对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法实验大鼠随机分为5组,连续灌胃两周:空白对照组(control)和脓毒症模型组(LPS)每天给予蒸馏水灌胃1次;LPPC低、中、高剂量组分别每天给予新鲜配制的LPPC 50,100,200 mg·kg-1·d-1灌胃1次。给药结束后,建立脓毒症动物模型。即除空白对照组外所有大鼠腹腔内注射LPS(lipopolysacchride,10mg·kg-1,ip)诱导急性脓毒症模型。4 h后收集大鼠血清,检测血清同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(AST/GOT)的活力。取大鼠心肌组织,测定心肌组织丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。TUNEL染色观察大鼠心肌细胞凋亡情况。Western blot法检测凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3及TNF-α水平。结果与正常对照组(control)比较,脓毒症模型组大鼠血清CK-MB、LDH、AST/GOT以及心肌组织MDA含量均明显升高(P<0.01);同时,心肌组织T-AOC和GSH的活力明显降低(P<0.01);凋亡心肌细胞数量明显增加(P<0.01);Cleaved caspase-3及TNF-α表达水平明显下降(P<0.01)。LPPC预处理明显降低了大鼠血清CK-MB、LDH、AST/GOT以及心肌组织MDA含量;增加了大鼠心肌组织T-AOC和GSH的活力;凋亡心肌细胞数量明显减少;Cleaved caspase-3及TNF-α表达水平明显下降。结论荔枝壳原花青素预处理能够明显减轻脓毒症大鼠心肌细胞凋亡,可能与其抗氧化性损伤作用有关。     

补肾活血化痰方对多囊卵巢综合征模型大鼠的治疗作用机制研究

目的:考察补肾活血化痰方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的治疗作用机制。方法:将50只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组[罗格列酮,3.0 mg/(kg·d)]和补肾活血化痰方高、低剂量组[7.5、5.0 g/(kg·d)],每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用Poresky法复制PCOS模型。造模后,正常对照组和模型对照组大鼠ig生理盐水,各给药组大鼠ig相应药液,每天1次,连续22 d。给药结束后,测定大鼠血清中睾酮(T)、抗苗勒氏管激素(AMH)、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和卵巢组织中转化生长因子β1(TGF-β_1)阳性表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清中T、AMH、IGF-Ⅰ、TNF-α水平及卵巢组织中TGF-β_1阳性表达率均显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,各给药组大鼠血清中T、AMH、IGF-Ⅰ、TNF-α水平及卵巢组织中TGF-β_1阳性表达率均显著降低(P<0.05),且补肾活血化痰方各剂量组指标优于阳性对照组(P<0.05)。结论:补肾活血化痰方能明显降低PCOS模型大鼠血清中T、AMH、IGF-Ⅰ、TNF-α水平以及卵巢组织中TGF-β_1阳性表达率,这可能是其治疗PCOS的作用机制之一。     

康复新液对心衰模型大鼠心肌细胞凋亡指数的影响

目的通过给予心衰模型大鼠灌服康复新液,观察康复新液对大鼠心肌细胞凋亡指数的影响。方法用多柔比星诱导复制心衰大鼠模型,选30只♂SD大鼠,随机均分为康复新液组、卡托普利组、模型组;给予康复新液组、卡托普利组造模成功的大鼠ig相应药物,模型组ig给予生理盐水,各组均给药4周,最后一次给药后24 h时收集大鼠标本,测定各组大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的浓度,然后处死大鼠,测定左心室重量,并检测心肌细胞凋亡指数。结果康复新液组及卡托普利组与模型组对比,均可有效降低大鼠血浆中的AngⅡ、TNF-α、IL-6水平(P<0.05);康复新液组及卡托普利组与模型组对比,大鼠的左室重量指数、心肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.05)。结论康复新液对心衰模型大鼠的心肌功能有激活作用,其可能的机制是能降低大鼠血浆中神经内分泌细胞因子AngⅡ、TNF-α、IL-6的水平,从而改善左室重量指数,抑制心肌细胞的凋亡。     

KLF4在糖尿病小鼠心肌组织的表达及通心络胶囊干预作用研究

目的探讨糖尿病小鼠心肌组织Krüppel样因子4(KLF4)表达及通心络(TXL)对其干预作用。方法 KK/Upj-Ay小鼠40只,随机分为糖尿病模型组、TXL低、中、高剂组,每组10只,另设C57BL/6(C57)小鼠10只作为对照组。按照分组给予不同剂量处理因素,疗程3个月,测定各组空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),空腹胰岛素(FINS)、计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);放射免疫法测定各组血清TNF-α、IL-6水平;HE染色观察心肌组织病理变化;Real time-PCR和Western blot测定心肌组织KLF4 m RNA和蛋白表达;Western blot测定心肌组织核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)核蛋白表达。结果与对照组比较,模型组FBG、Hb A1c、TG、TC、FINS、HOMA-IR及TNF-α、IL-6水平明显增高,KLF4 m RNA和蛋白表达明显降低,NF-κB核蛋白表达明显升高(P<0.01),通心络胶囊能够明显减轻心肌组织病理损伤,降低FINS、TG、TC、HOMA-IR、TNF-α、IL-6水平及NF-κB核蛋白表达,同时上调KLF4表达(P<0.05),但不影响FBG、Hb A1c(P>0.05)。结论 KLF4可能参与了糖尿病心肌病的发生发展。通心络胶囊可减轻糖尿病心肌病理损伤及改善心功能,其机制可能与上调KLF4表达及抑制NF-κB炎症信号通路的激活有关。     

14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯对1型糖尿病大鼠急性心肌缺血的保护作用

目的观察14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯对1型糖尿病急性心肌缺血大鼠心肌组织的保护作用。方法选取50只SD大鼠分为正常组和实验组,正常组10只大鼠,实验组40只大鼠均一次性腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg,制造1型糖尿病动物模型,后选取造模成功的30只大鼠随机分为模型组、药物低剂量组、药物高剂量组,每组10只。药物低、高剂量组分别给予14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200 mg·kg~(-1)·d~(-1),正常组和模型组分别腹腔注射等体积的0.9%氯化钠注射液,连续给药14 d。给药结束后24h,除正常组外,各组大鼠均皮下注射异丙肾上腺素(ISO)5 mg/kg,记录注射异丙肾上腺素后大鼠的Ⅱ导心电图,根据ST段(J点)的偏移判断心肌缺血的程度。断尾取血,测空腹血糖;腹主动脉取血,检测生化指标,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织的形态变化,蛋白质印迹法检测心肌核因子(NF)-_κBp65的表达,免疫组织化学检测肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达量。结果 14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200 mg·kg~(-1)·d~(-1)组均能降低1型糖尿病大鼠急性心肌缺血时的空腹血糖,可降低肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH1)(P<0.05),200 mg·kg~(-1)·d~(-1)组能显著改善糖尿病急性心肌缺血大鼠心电图ST段的偏移程度(P<0.01),100 mg·kg~(-1)·d~(-1)组对ST段的偏移改善不明显(P>0.05)。100 mg·kg~(-1)·d~(-1)组、200 mg·kg~(-1)·d~(-1)组均能改善大鼠的心肌组织病理改变,显著减少TNF-α的表达(P<0.05)和NF-_κBp65的表达(P<0.05)。结论 14-脱羟-11,12-二脱氢穿心莲内酯能降低糖尿病急性心肌缺血大鼠心肌组织中NF-_κBp65、TNF-α的表达,改善心肌组织的损伤。     

卡维地洛对心肌梗死后大鼠肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶的影响

目的:观察卡维地洛对心肌梗死后大鼠心肌组织肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达和基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)表达及活性的免疫药理学作用.方法:结扎左前降支建立大鼠急性心肌梗死模型,梗死后存活24 h者随机分为两组:卡维地洛组(MI-C)给予卡维地洛(Carvedilol)10 mg·(kg·d)-1,梗死对照组(MI)仅给予相同体积的生理盐水15 mL·(kg·d)-1,此外仅穿线不结扎左前降支者作为假手术组(SH),给予生理盐水,均经灌胃(ig)给药.观察各组4周末血液动力学和心室重塑指标以及心肌组织TNF-αmRNA和蛋白表达、MMP-2、MMP-9mRNA表达及活性.结果:与假手术组比较,4周末梗死组大鼠心肌组织上述指标均增加,而卡维地洛治疗组上述指标显著下降伴心室重塑及血液动力学指标改善.此外,MMP-9 mRNA及活性均与TNF-α蛋白表达显著正相关(r=0.52,P＜0.01)(r=0.73,P＜0.01).结论:TNF-α和MMP参与了心梗后心室重塑,TNF-α可能通过促进MMP表达和活性起作用.卡维地洛降低心肌组织TNF-α和MMP的这种免疫药理学作用可能是其对心室重塑有益作用的机制之一.     

阿托伐他汀对心肌梗死大鼠心肌损伤的保护作用及机制

目的 研究阿托伐他汀对于心肌梗死大鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法 选取SD 大鼠,通过结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立急性心肌梗死大鼠模型。选取造模成功后大鼠24 只,随机分为假手术组,模型组和阿托伐他汀组,每组8只。造模观察24 h后,阿托伐他汀按照8 mg·kg-1剂量灌胃给药,模型组、假手术组均采用等量生理盐水灌胃给药,每天1次。3周后处死大鼠,取心肌并分离血清。TUNEL法检测心肌细胞凋亡;ELISA检测血清CK、TNF-α、IL-10及IL-6的含量;Western检测凋亡相关蛋白bcl-2、bax、caspase9/3、cyto C 以及 XIAP的表达变化。结果 与假手术组比较,模型组心肌凋亡率显著上升,CK、TNF-α、IL-10及IL-6含量升高,cyto C、bax 以及caspase蛋白的表达显著提升,而 bcl-2 和 XIAP 的表达则显著降低;阿托伐他汀降低了心肌凋亡率和血清中CK、TNF-α、IL-6的含量,提高了IL-10的含量,抑制bax、cyto C 和caspase表达,bcl-2和XIAP的表达升高。结论 阿托伐他汀对心肌梗死模型大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与减少氧化应激的产生,改变线粒体膜的通透性,影响凋亡相关蛋白XIAP等的表达以及改变炎性因子的释放有关。     

锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用

目的:探讨锌和维生素E对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌凋亡促进因子Smac表达的作用及对糖尿病大鼠心肌细胞保护作用的机制。方法:按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),实验组动物采用腹腔注射链脲左菌素(streptozotocin,STZ),60mg/kg一次注射,制备糖尿病大鼠模型。将40只实验组大鼠按血糖值参考体重分为4组:糖尿病对照组,糖尿病补锌组,糖尿病补VE组,糖尿病补Zn+VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学染色,观察各组心肌组织Smac的表达水平,利用HPIAS-2000图像分析系统测定Smac在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:正常对照组心肌细胞内Smac呈阴性表达,糖尿病对照组心肌细胞内Smac呈阳性表达;糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内Smac呈弱阳性表达;糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内Smac呈阴性表达。图像分析结果显示:糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间Smac的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05);糖尿病补Zn+VE组与正常组之间Smac的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>005)。结论:Zn和VE联合使用可减低糖尿病导致大鼠心肌细胞凋亡的作用。