转录因子Snail介导E-cadherin表达在食管鳞癌迁移和侵袭中的作用

目的探索转录因子Snail、E-cadherin基因在食管鳞癌中的表达及临床病理意义,明确其对食管鳞癌迁移和侵袭的影响。方法食管鳞癌组织及对应癌旁组织标本30例,PCR检测Snail、E-cadherin表达;以癌/癌旁组织相对表达量表示Snail及E-cadherin在mRNA水平表达的差异,分析其与临床病理特征间关系;随机抽取其中4例,Western blot检测Snail、E-cadherin表达。筛选三株食管鳞癌细胞株中的一株进行转染,利用Snail小干扰RNA作为实验组,以双链无义RNA转染作为对照组,检测Snail和E-cadherin表达水平变化,行细胞划痕、侵袭实验。结果 30例食管鳞癌组织较癌旁组织中Snail相对表达量高(1.96±0.75/0.52±0.43,P=0.04),E-cadherin相对表达量低(0.66±0.31/2.19±0.62,P=0.02);食管鳞癌中Snail相对高表达、E-cadherin相对低表达程度均与癌组织浸润深度(P=0.009)、淋巴结转移与否(P=0.047)相关。其中4例病人,癌组织相比对应癌旁组织中Snail蛋白表达高(0.73±0.13/0.23±0.08,P=0.00),而E-cadherin蛋白表达低(0.10±0.06/0.60±0.14,P=0.00)。选取EC109为实验细胞株,PCR结果显示,Snail小干扰RNA转染组较对照组中Snail表达减少(0.53±0.05/1.00±0.15,P=0.00),同时,E-cadherin表达上调(3.28±0.26/1.00±0.18,P=0.00);Western blot检测显示,抑制Snail蛋白表达后(0.25±0.05/0.41±0.10,P=0.03)EC109中E-cadherin蛋白表达上调(0.83±0.11/0.29±0.05,P=0.02)。划痕实验及Transwell细胞侵袭实验示,下调Snail表达后EC109迁移、侵袭能力均减弱(P0.05)。结论转录因子Snail在食管鳞癌中相对高表达,并可能通过介导E-cadherin表达影响肿瘤迁移与侵袭。     

骨髓来源间充质干细胞对胃癌细胞侵袭转移的影响及其机制探讨

目的 分析骨髓来源间充质干细胞(BM-MSCs)在胃癌细胞侵袭转移中的作用,并对其调控机制进行探讨.方法 首先将SGC7901和KATO-Ⅲ胃癌细胞分别与BM-MSCs共培养,Transwell实验检测其侵袭能力变化;其次从KATO-Ⅲ胃癌细胞中分选出CD133+和CD133-细胞,并分别与BM-MSCs共培养,比较其侵袭能力变化,并通过Western blotting检测共培养后胃癌细胞p-AKT和上皮间质转化(EMT)相关因子蛋白表达水平的变化及其与CD133表达间的关系;通过对SGC7901过表达CD133,进一步验证CD133在BM-MSCs影响胃癌细胞侵袭转移中的作用.采用SPSS 17.0统计软件进行分析,计数资料以均数±标准差((-x)±s)表示,行独立样本t检验.结果 SGC7901和KATO-Ⅲ细胞与BM-MSCs共培养后,胃癌细胞的侵袭能力均显著增强,与BM-MSCs共培养的KATO-ⅢCD133+细胞侵袭能力增加的趋势较共培养的CD133-细胞更加明显[(259.0±24.0)个比(58.0±5.6)个,P ＜0.001];CD133+细胞共培养后,p-AKT和Snail、N-cadherin的表达量均显著增高(P值分别为0.003 、0.003、0.002),E-cadherin的表达则低于单独培养组(P=0.021);CD133-细胞共培养后,E-cadherin的表达低于单独培养组(P =0.005),而p-AKT和Snail、N-cadherin的表达与单独培养组比较,差异无统计学意义(P值分别为0.744、0.277、0.275);SGC7901过表达CD133后与BM-MSCs共培养,其侵袭能力增加的趋势较共培养的空白载体对照组更加显著[(239.3±24.0)个比(103.3±15.5)个,P＜0.001],CD133过表达组细胞与BM-MSCs共培养后,p-AKT和Snail,N-cadherin表达水平均显著高于其单独培养组(P值均为0.01),E-cadherin的表达则显著降低(P=0.003);空白载体对照组细胞与BM-MSCs共培养后,Snail和N-cadherin的表达也显著增高(P =0.007,0.004),E-cadherin的表达显著降低(P =0.018),而p-AKT的表达未见明显变化(P=0.193).结论 BM-MSCs通过促进胃癌细胞的EMT进而增强其侵袭转移能力,CD133在该过程中可能是通过PI3 K/AKT信号通路参与对胃癌细胞EMT的调控.     

HIBADH蛋白表达在胃腺癌组织中的临床意义及其在胃癌细胞中的功能研究

目的研究3-羟异丁酸脱氢酶(3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase,HIBADH)蛋白在胃腺癌中表达的临床意义及其在胃癌细胞中的生物学功能。方法回顾性收集2006年1月至2007年12月期间上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科收治的76例胃腺癌患者。采用免疫组织化学染色检测胃癌原发灶、癌旁组织及癌转移淋巴结中HIBADH蛋白的表达,分析胃癌组织中HIBADH蛋白的表达与患者临床病理学特征的关系。在细胞层面,采用分子克隆技术构建HIBADH稳定敲除的MKN45胃癌细胞系。通过细胞增殖实验、迁移实验、侵袭实验及伤口愈合实验(细胞分为转染组和阴性对照组,分别转染干扰序列和阴性对照序列),探索HIBADH蛋白在胃癌细胞中的生物学功能。结果胃腺癌原发灶组织中的HIBADH蛋白表达阳性率较癌旁组织高(χ~2=54.738,P0.001),且胃癌组织中HIBADH蛋白的表达与肿瘤直径、淋巴管浸润、pT分期、淋巴结转移及pTNM分期均相关(P0.05)。在癌转移的淋巴结中,HIBADH蛋白的表达阳性率为100%(48/48)。HIBADH蛋白表达阳性组和HIBADH蛋白表达阴性组患者的术后10年生存率分别为16.4%和69.4%,后者的生存时间较长(χ~2=19.612,P0.001)。HIBADH蛋白表达被干扰后,MKN45胃癌细胞的迁移能力、侵袭能力及伤口愈合能力较阴性对照组均明显下降(P0.05),但细胞增殖能力无明显变化(P0.05)。结论 HIBADH蛋白在胃癌原发灶中的表达提示肿瘤分期晚、患者预后差。抑制HIBADH蛋白表达可降低胃癌细胞的运动能力。     

胃癌KRT17表达及其对上皮间质转化的影响

目的:研究KRT17在胃癌组织、细胞的表达及其对上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的作用。方法:利用RT-PCR法检测32对配对胃癌及癌旁组织KRT17的表达。用RT-PCR及Western印迹法检测胃癌细胞株与永生化胃黏膜上皮细胞KRT17的表达。免疫组织化学染色法评估227例胃癌组织芯片KRT17表达,结合临床病理资料进行初步分析。Transwell实验观察干扰KRT17的胃癌细胞与对照组细胞迁移、侵袭能力的差异。RT-PCR及Western印迹法检测EMT标志物E钙黏蛋白、波形蛋白的表达。结果 :KRT17在胃癌组织和细胞中表达显著增加,其表达高低与肿瘤组织分级(P=0.008),肿瘤浸润深度(T分期)(P=0.027),淋巴结转移(N分期)(P=0.03)密切相关。干扰KRT17后胃癌细胞迁移和侵袭能力明显下降,E钙黏蛋白的表达明显升高,波形蛋白的表达明显降低。结论:KRT17在胃癌组织中高表达,并与临床病理密切相关。KRT17下调后抑制细胞迁移与侵袭,通过抑制EMT的机制产生作用。     

AXL在胃癌中的表达及临床意义

目的检测AXL及上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关基因在胃癌中的表达与临床意义,探索AXL介导的EMT在胃癌发生、发展及侵袭转移中的作用。方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测42例胃癌原发灶及癌旁组织中AXL核酸及蛋白的表达;采用免疫组化技术检测AXL及EMT相关基因在102例胃癌原发灶及相应癌旁组织中的表达,统计分析AXL及EMT相关基因在胃癌原发灶中表达的相关性及与胃癌临床病理特征之间的关系。结果①胃癌原发灶中AXL核酸及蛋白表达均高于其癌旁组织(P0.001;P0.001);AXL、Slug及Vimentin在胃癌中的表达率分别显著高于相应癌旁组织(58.8%比37.3%,P=0.002;54.9%比38.2%,P=0.017;56.9%比33.3%,P=0.001);E-cadherin在胃癌中的表达率显著低于相应的癌旁组织(39.2%比68.6%,P0.001)。②胃癌原发灶中AXL、E-cadherin、S1ug及Vimentin的表达高低分别与T分期(P0.001;P=0.004;P0.001;P0.001)、TNM分期(P=0.023;P=0.023;P0.001;P=0.022)及淋巴结转移(P0.001;P=0.002;P0.001;P=0.005)有关。③在胃癌原发灶中,AXL的表达与S1ug及Vimentin的表达呈正相关(r=0.323,P=0.001;r=0.317,P=0.001);AXL的表达与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.470,P0.001)。④胃癌原发灶中AXL(P0.001)、Slug(P0.001)及Vimentin(P=0.009)阳性表达显示预后不佳;Cox风险回归多因素生存分析显示,AXL阳性表达(P=0.022)、S1ug阳性表达(P=0.004)及淋巴结转移(P=0.029)是影响胃腺癌病人术后生存的独立因素。结论 AXL在胃癌中高表达,在其发生、发展具有重要意义,并可能通过介导EMT的发生促进胃癌的侵袭及转移。     

CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的研究

目的观察胃癌细胞CDl33表达与胃癌侵袭的关系,进而探讨其是否通过上皮间质转化（EMT）促进胃癌侵袭和转移。方法通过免疫磁珠分选技术,将KATO-Ⅲ细胞分为CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞,利用Transwell小室法检测其侵袭能力,并通过Western blot和RT-PCR方法检测siRNA干扰CDl33基因沉默前后其EMT相关因子的表达差异。Western blot法检测50例胃癌组织及癌旁组织CDl33和EMT相关因子的表达．并分析其相关性。结果CDl33阳性组穿膜细胞数（67．7±10．5）显著高于CDl33阴性组（13．3±6．8,P=0．001）。CDl33阳性细胞中Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达显著高于CDl33阴性细胞．而E-cadherin表达则明显低于CDl33阴性细胞（均P〈0．05）。siRNA干扰后,Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达明显下调,而E-cadherin表达则显著上升（均P〈0．05）。胃癌组织中CDl33、Snail及N-cadherin蛋白相对表达为0．635±0．119、0．599±0．114及0．754±0．154,明显高于癌旁组织的0．485±0．116（P=0．029）、0．259±0．108（P=0．020）和0．329±0．134（P=0．001）,而E-cadherin蛋白表达相对表达为0．378±0．123,明显低于癌旁组织的0．752±0．156（P=O．003）。相关分析显示,Snail及N-cadherin的表达与CDl33表达呈正相关（P〈0．05）,而E-cadherin的表达则与CDl33表达呈负相关（P〈O．05）。结论CDl33阳性胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。     

肿瘤出芽与直肠癌淋巴结转移的相关性研究

目的:探讨肿瘤出芽与直肠癌淋巴结转移的相关性。方法:收集我院2015 年4 月—2019 年3 月收治的105 例直肠癌患者临床资料,用免疫组化方法检测上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、转录因子Snail、锌指转录因子Slug 和组织蛋白酶B(Cathepsin B) 蛋白表达情况。探讨患者临床病理特征及E-cadherin、Snail、Slug 和Cathepsin B 蛋白表达情况与患者淋巴结转移的关系。结果:单因素分析表明直肠癌的分化程度、浸润深度、脉管浸润和肿瘤出芽与淋巴结转移相关(P <0.05)。Logistic 分析表明直肠癌分化程度(OR=0.070, 95%CI:0.021~0.235, P <0.05)、浸润深度(OR=7.408, 95%CI:2.223~24.691,P <0.05) 及肿瘤出芽(OR=5.732,95%CI:2.059~15.953, P <0.05) 是影响直肠癌淋巴结转移的重要因素。出芽组的Snail、Slug、Cathepsin B 表达水平高于未出芽组,E-cadherin 表达水平低于未出芽组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:直肠癌病理分化程度、浸润深度、肿瘤出芽与患者淋巴结转移有关,可作为直肠癌淋巴结转移预后的评价指标。     

细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用

目的：探讨细胞核因子Snail在胰腺癌组织中的表达及与胰腺癌上皮-间质转化（EMT）过程的相关性。 方法：采用免疫组织化学方法检测77例胰腺癌组织（研究组）与13例正常胰腺组织（对照组）中的Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达。 结果：研究组中胰腺癌患者胰腺组织中Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达阳性率为70.13%、68.83%、36.36%、72.73%。对照组13例正常胰腺组织中Snail、Slug均不表达,E-cadherin、vimentin的表达阳性率分别为92.31%、7.69%。胰腺癌组织中Snail表达与E-cadherin表达呈负相关（r=-0.225,P=0.025）,与vimentin表达呈正相关（r=0.493,P<0.01）;Slug表达与vimentin表达呈正相关（r=0.358,P=0.001）。Slug的表达与肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关、E-cadherin的表达与淋巴结的转移与肿瘤分化程度有关、vimentin的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关（均P<0.01）。 结论：Snail的高表达可能通过调控EMT过程在胰腺癌的发展过程中发挥作用,是胰腺癌浸润和转移的重要生物学指标。     

circ_0009910在胃癌细胞中作用机制初步研究

目的通过检测分析胃癌细胞中circ_0009910表达,初步探讨其在胃癌细胞中的作用机制。方法用qRT-PCR检测胃癌细胞系BGC823、SGC7901、AGS、MGC803、MKN45中的circ_0009910表达水平,在BGC823、AGS细胞中采用circ_0009910 siRNA转染敲降circ_0009910,验证转染效果;在circ_0009910敲降的BGC823、AGS细胞中,用MTT法检测细胞增殖、平板法检测集落形成、Transwell检测迁移和侵袭、western-blotting检测上皮间质转化(EMT),采用SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果BGC823、SGC7901、AGS、MGC803、MKN45中的circ_0009910相对表达水平为(7.238±0.895)、(5.023±0.786)、(4.184±0.356)、(8.561±1.026)、(3.478±0.301),较正常胃癌显著升高(P<0.01),siRNA转染敲降circ_0009910后,BGC823、AGS细胞活力、集落形成数目、迁移和侵袭能力与对照组相比均明显降低(P<0.01),N-cadherin、Snail蛋白的相对表达降低,而E-cadherin表达增加。结论circ_0009910在胃癌细胞中高表达,可促进胃癌细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭及EMT。     

Tim-3在肝癌细胞上皮间质转化及转移中的作用机制

目的:探讨Tim-3与肝癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的关系及对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞SMMC-7721,RT-PCR检测Tim-3表达差异,将SMMC-7721分为3组,对照组:未接受转染的SMMC-7721;实验组转染Tim-3 siRNA细胞低表达Tim-3;阳性对照组转染PEX-3-hTim-3过表达质粒细胞高表达Tim-3。应用RT-PCR、Western blot检测3组肝癌细胞Tim-3及EMT相关基因:E-cadherin、N-cadherin、MMP-9、Twistl、Slug、Snail、Smad mRNA和蛋白的表达。通过Transwell小室侵袭实验检测3组肝癌细胞迁移和侵袭能力改变;分析Tim-3表达与EMT相关基因表达的相关性。结果:(1)与正常肝细胞L02比较;Tim-3在肝癌细胞中高表达(P<0.05);(2)RTPCR和Western bolt结果提示,实验组上皮标志物E-cadherin表达较对照组明显上升(P<0.05),而间质标志物N-cadherin、MMP-9、Twistl、Snail、Slug、Smad表达较对照组下降(P<0.05),提示EMT受到抑制;阳性对照组中E-cadherin表达较对照组下降(P<0.05),N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snai1、Slug、Smad表达较对照组上升(P<0.05),促进了肝癌EMT;(3)Transwell迁移实验中,实验组与对照组和阳性对照组相比较,肝癌细胞迁移和侵袭细胞数明显减少,3组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05),实验说明Tim-3表达水平的改变,影响肝癌的迁移和侵袭性;(4)Tim-3的表达与EMT标志物的表达做相关性分析显示,Tim-3的表达与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05),与N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snai1、Slug、Smad的表达呈正相关(P<0.05)。结论:Tim-3是肝癌细胞EMT的潜在诱导者,抑制Tim-3的表达,同时抑制肝癌细胞EMT的发生,肝癌细胞迁移和侵袭能力下降。因此,Tim-3有望成为今后的临床抗肿瘤药物新的治疗靶点用于改善和评估患者预后。     

胃癌原发灶中上皮间质转化相关因子和CD133的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的研究上皮间质转化（EMT）相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与胃癌患者临床病理特征、预后及胃癌肿瘤起始细胞表面标志物CD133表达的关系。方法利用Western blot方法检测50例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中EMT相关因子及CD133蛋白的定位及定量表达,分析EMT相关因子及CD133蛋白表达与胃癌患者的临床病理学指标的关系,Spearman等级相关分析EMT相关因子和CD133表达的关系,Kaplan-Meier方法分析EMT相关因子及CD133表达与胃癌患者生存的关系。结果①胃癌组织中Snail、N-cadherin及CD133蛋白表达相对灰度值明显高于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达（Snail：0.599±0.114比0.259±0.108,P=0.020;N-cadherin：0.754±0.154比0.329±0.134,P=0.001;CD133：0.635±0.119比0.485±0.116,P=0.029）,E-cadherin蛋白表达相对灰度值明显低于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达（0.378±0.123比0.752±0.156,P=0.003）。②Snail蛋白、N-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达明显高于无血管浸润、淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移及肿瘤直径〈5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）,而E-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达显著低于无血管浸润、淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移及Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）,CD133蛋白表达平均相对灰度值在有淋巴管浸润、N3淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达显著高于无淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移、肿瘤直径〈5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）。③Snail、N-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达分别均呈正相关（rs=0.278,P=0.048;rs=0.406,P=0.003）,而E-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达呈负相关（rs=-0.504,P=0.000）。④Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表达组的生存时间明显长于其高表达者（P〈0.05）,联合EMT相关因子和CD133蛋白表达能够最有效预测患者生存。结论EMT与胃癌肿瘤起始细胞特性之间存在明显相关,并且两者与胃癌的高侵袭的临床病理特征相关,联合EMT相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与CD133能够最有效预测胃癌患者的预后。     

Slug在胰腺癌中的表达及干扰Slug对胰腺癌转移的影响

目的 探讨Slug和E-CADHERIN(E-cadherin)表达与胰腺癌转移的关系以及干扰Slug转录因子对胰腺癌转移的影响.方法 采用免疫组化和RT-PCR技术分别检测36例胰腺癌组织中Slug、E-cadherin和mRNA表达.将肝脏高转移潜能的胰腺癌细胞株SW1990H4,分为3组:对照组、空载体质粒(shRNA-1)和转染干扰S1ug质粒(Slug-shRNA-1),观察Slug对E-cadherin mRNA表达的逆转作用,及对SW1990H4体外侵袭、运动的抑制作用.结果 胰腺癌组织中Slug高表达,而E-cadherin低表达.转移组胰腺癌组织中Slug蛋白和mRNA表达明显高于非转移组,差异分别有统计学意义(P＜0.05),而E-cadherin在转移组胰腺癌中无表达.PCR产物凝胶电泳结果显示,Slug mRNA在空白对照组SW1990H4中表达为0.985±0.016,E-cadherin mRNA表达为0.120±0.001.shRNA-1时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.973±0.014,E-cadherin mRNA表达水平分别0.160±0.001,与对照组比差异分别无统计学意义(P＞0.05).转染Slug-shRNA-1组瞬时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.554±0.011,E-cadherin mRNA表达水平为0.36±0.002,与对照组和shRNA-1组比差异分别有统计学意义(P＜0.05).SW1990H4稳定转染后,shRNA-1和Slug-shRNA-1组Slug mRNA表达水平分别为0.968±0.015,0.206±0.017,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),而E-cadherin mRNA表达水平分别为0.18±0.002,0.727±0.006,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).体外细胞运动实验表明,对照组、转染shRNA-1和SlugshRNA-1组跨膜细胞数393±28、352±24、96±13,差异有统计学意义(P＜0.01).重组细胞基底膜(Matrige1)侵袭实验显示,3组穿透基底膜细胞数分别为223±69、202±64、65±19,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Slug高表达,E-cadherin低表达与胰腺癌的转移相关.胰腺癌细胞中存在Slug mRNA与E-cadherin mRNA表达的逆转关系,抑制Slug mRNA的表达对胰腺癌细胞的侵袭和运动有抑制作用,可能为胰腺癌转移的基因治疗提供新的靶点.

Abstract：

Objective To investigate expression of slug and E-cadherin in pancreatic cancer tissues and determine the inhibitory effects of anti-Slug, an anti-sense plasmid, on the invasion of pancreatic cancer cell lines in vitro. Methods Slug and E-cadherin protein and mRNA was analyzed by IHP and RT-PCR in 36 cases of pancreatic cancer. Then anti-Slug plasmid was transfected into herin and Slug expression. The inhibitory effects of anti-sense Slug were also detected by Transwell motility assay and Matrigel invasion assay. Results The expression of Slug and mRNA in metastatic pancreatic cancer tissue was higher than that in non-metastatic tissue. E-cadherin and mRNA was lower in metastasis tissues(P＜0.05). The inverse relationships were further observed by transient transfection of anti-Slug into SW1990H4 cells. The downregulated expression of Slug and re-expression of E-cadherin were found. The Slug mRNA levels were 0.985±0.016,0.973±0.014, 0. 554±0. 011 after 0, 48 h of transfection of anti-sense Slug, and that of E-cadherin were 0.120±0.001, 0.360±0.002, 0. 727±0. 006, respectively. The diference was significant between different time points (P＜0.05). The Slug mRNA levels were 0. 206±0.017, 0.968±0.015, and that of E-cadherin were 0. 18±0.002,0.727±0.006 after stable transfection of anti-sense Slug, and control plasmid, respectively. The diference was significant (P＜0.05). The motility activity(393±28, 352±24, 96 ±13 )and the invasion activity (223 ± 69, 202 ± 64, 65 ±19) of1 antisense Slug transfectant cells were significantly decreased as compared with those of control cells (P＜0.05). Conclusions Higher expression of slug and lower expression of E-cadherin is related to the invasion and metastasis in pancreatic cancer. A reverse corelation of E-cadherin and Slug expression exists in pancreatic cancer. Slug is possibly a potential target for cancer gene therapy blocking invasion and metastasis in human pancreatic cancer.     

E-cadherin和Slug在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨胃癌患者肿瘤组织中E-cadherin及Slug的表达与肿瘤病理特征及预后的关系。方法：免疫组化检测82例胃癌患者瘤组织E-cadherin及Slug的表达,并分析它们与患者的病理特征及生存时间的关系。结果：E-cadherin保留表达率为47.6%,Slug阳性表达率为39.0%。E-cadherin的表达率差异与患者的N分期有关,Slug的阳性表达率差异与患者的性别、T分期及N分期有关（均P<0.05）;在E-cadherin表达保留组,Slug的表达与N分期、M分期、静脉侵袭、血行性转移和腹膜复发有关,而在E-cadherin表达降低组,Slug的表达与T分期有关（均P<0.05）;E-cadherin表达保留患者5年生存率高于E-cadherin表达降低患者（79.5% vs. 60.5%）,Slug阳性患者的5年生存率低于Slug阴性患者（59.4% vs. 74.0%）（均P<0.05）;E-cadherin表达保留组中,Slug阳性患者5年生存率低于阴性患者分别为（48.4% vs. 87.5%）（P<0.05）,而E-cadherin表达降低组中,Slug阳性及阴性患者生存率无统计学差异（58.3% vs. 68.4%）（P>0.05）。结论：E-cadherin及Slug的表达主要与胃癌TNM分期有关;E-cadherin表达保留的患者中Slug的阳性表达对不良预后有预测意义。

     

Tiam1基因在胃癌细胞的表达及其生物学行为研究

目的构建Tiam1基因的真核表达载体,评估其转染人胃癌细胞株MKN45细胞后对胃癌细胞功能的影响。方法实时荧光定量PCR分析Tiam1基因在胃癌细胞中的表达;将外源性重组真核表达载体Tiam1基因(N1/Tiam1)转染到人胃癌细胞株MKN45内,经G418筛选并建立稳定表达Tiam1基因的胃癌MKN45细胞株,为:N1/Tiam1组,转染空质粒细胞(N1)组和未处理细胞(MKN45)组的两个对照组分别为:N1组和MKN45组;通过细胞增殖、划痕和侵袭实验分别观察上调Tiam1基因表达后的胃癌细胞功能。结果与N1组相比,N1/Tiam1组中Tiam1蛋白表达明显上调[(0.36±0.05)vs.(2.67±0.14),P<0.01];与对照组相比较,N1/Tiam1实验组较N1对照组细胞增殖数量明显增加(P=0.000);与转染N1空载体的MKN45细胞对照组相比,转染了N1/Tiam1高表达质粒的MKN45细胞促进胃癌细胞的迁移和侵袭。结论 Tiam1基因真核表达载体的筛选成功,为继续深入的研究Tiam1基因在胃癌中的功能奠定了基础。     

转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在直肠癌中的表达及意义

目的 探讨转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在直肠癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化SABC法检测101例直肠癌组织中Snail、E-cadherin的表达,分析二者在不同临床病理分期与分化程度的直肠癌中的表达及其与预后的关系.结果 免疫组化检测结果显示直肠癌组织中Snail的阳性表达率为78.2%(79/101),直肠癌组织中E-cadherin的阳性表达缺失率为62.4%(63/1 01),Snail与E-cadherin的表达呈显著负相关.Snail、E-cadherin的表达与直肠癌的Dukes分期及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 Snail蛋白的高表达和E-cadherin蛋白的低表达可能是直肠癌侵袭转移的重要生物学标志.     

Snail介导的EMT在上皮性卵巢癌组织中的作用

目的：检测Snail、E-cadherin及Vimentin在上皮性卵巢癌组织中的表达,探讨Snail介导的上皮间质转化（EMT）在卵巢癌发生、发展及转移中的作用。方法采用免疫组化法分别检测Snail、E-cadherin、Vimentin在48例卵巢浆液性腺癌、卵巢交界性浆液性肿瘤及卵巢浆液性腺瘤中的表达,探讨EMT相关因子表达强度的相关性及与临床病理特征之间的关系。结果（1）Snail、Vimentin在卵巢浆液性腺癌中的表达率为（68.75%/66.67%）,高于卵巢交界性浆液性腺瘤的（41.67%/37.50%）及卵巢浆液性腺瘤的（25.00%/18.75%）,结果均具有显著的统计学差异（P＜0.05）,E-cadherin在卵巢浆液性腺癌中的表达率为27.08%,低于与卵巢交界性浆液性腺瘤的54.17%及卵巢浆液性腺瘤的75.00%,结果均具有统计学差异（P＜0.05）。而卵巢交界性浆液性腺瘤组与卵巢浆液性腺瘤组比较,三种蛋白的表达均无统计学差异（P＞0.05）。（2）Snail、E-cadherin及Vimentin的表达高低与FIGO分期、分化级别、有无淋巴结转移及腹膜种植有关。（3）在卵巢浆液性腺癌中,Snail与Vimentin的表达呈正相关（r=0.477,P＜0.05）,Snail与E-cadherin的表达呈负相关（r=-0.601,P＜0.05）,而E-cadherin与Vimentin表达的相关性不明显（r=-0.206, P＞0.05）。结论在上皮性卵巢癌组织中,Snail、Vimentin表达上调,E-cadherin表达下调,提示Snail介导的EMT可能与卵巢癌的发生、发展及浸润转移有关。     

RhoA和Snail的表达与胃癌生物学行为的关系

目的检测RhoA和Snail在胃癌组织中的表达,以探讨它们与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学方法检测189例胃癌患者术后石蜡标本中RhoA和Snail蛋白的表达,分析它们的相关性以及与胃癌临床病理学特征和生存的关系。结果①RhoA和Snail在胃癌组织中的表达阳性率均分别明显高于其在癌旁组织（RhoA：P=0.008;Snail：P=0.000）和正常胃黏膜组织（RhoA：P=0.010;Snail：P=0.000）中的表达阳性率;RhoA在癌旁组织中的表达与其在正常胃黏膜组织中的表达差异无统计学意义（P=0.782）,而Snail在癌旁组织中的表达明显高于其在正常胃黏膜组织中的表达,差异有统计学意义（P=0.001）。②RhoA在胃癌组织中的阳性表达与胃癌的TNM分期和Lauren分型有关（P〈0.05）,而与胃癌的肿瘤直径、有无淋巴结转移及分化程度无关（P〉0.05）。Snail在胃癌组织中的阳性表达与胃癌肿瘤直径、有无淋巴结转移、分化程度、TNM分期及Lauren分型均有关（P〈0.05）。RhoA和Snail在胃癌组织中的阳性表达均与患者的性别和年龄无关（P〉0.05）。③胃癌组织中RhoA蛋白和Snail蛋白的表达呈显著正相关（rs=0.203,P=0.005）。④肿瘤TNM分期、RhoA及Snail表达和淋巴结转移均为胃癌术后患者的独立预后因素（P〈0.05）。结论 RhoA和Snail在胃癌组织中表达上调,它们可能共同参与了胃癌的发生、发展过程,且RhoA/Snail信号途径可能在胃癌的浸润和转移过程中发挥着重要作用。     

乙酰肝素酶及E-钙黏蛋白对胃癌侵袭转移的影响

目的 探讨乙酰肝素酶及E-钙黏蛋白对胃癌侵袭转移的影响.方法 收集2005年2月至2007年5月辽宁省肿瘤医院手术切除的50例胃癌标本.采用RT-PCR法检测乙酰肝素酶mRNA及E-钙黏蛋白mRNA在胃癌组织中的表达,同时应用免疫组织化学法检测E-钙黏蛋白在胃癌组织中的表达.计量资料采用方差分析和t检验;计数资料采用χ~2检验.结果 乙酰肝素酶与E-钙黏蛋白的表达在胃癌的细胞分化程度、淋巴结转移、TNM分期方面比较,差异有统计学意义(t=1.999,4.258,1.735;1.286,6.794,3.091;χ~2=6.273,9.397,5.640,P<0.05).乙酰肝素酶阳性/E-钙黏蛋白阴性与未分化型、淋巴结转移及TNM Ⅲ、Ⅳ期有关(χ~2=11.306,10.208,8.420,P<0.05).结论 乙酰肝素酶在胄癌组织中的表达增高,E-钙黏蛋白在胃癌组织中表达降低,乙酰肝素酶与E-钙黏蛋白的异常表达具有协同作用,两者同时异常表达使胃癌细胞具有更强的侵袋转移能力.