马兜铃内酰胺I对肾小管上皮细胞的损伤作用

目的:了解马兜铃内酰胺I(AL-I)是否导致肾小管上皮细胞损伤.方法:以体外细胞培养的人类近端肾小管上皮细胞系(HK-2)为研究对象,以马兜铃酸I(AA-I)为阳性对照,采用LDH释放试验检测AL-I的直接细胞损伤作用;用相差显微镜、电子显微镜观察细胞形态变化,用流式细胞仪分析细胞DNA含量以及细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)表达水平,以了解细胞凋亡情况;采用ELISA法检测细胞培养上清液中细胞外基质成分纤连蛋白(FN)以及促纤维化细胞因子转化生长因子β1(TGF β1)的分泌水平.结果:AL-I(2.5～20 mg·L-1)具有浓度依赖的直接细胞损伤作用;细胞形态、DNA含量及PS表达水平分析表明,AL-I在上述浓度范围内能够导致HK-2细胞凋亡,并能够导致HK-2细胞分泌TGF β1及FN.与AA-I的作用进行比较发现:在相同浓度情况下,AL-I的直接细胞毒作用强于AA-I,但其导致细胞凋亡、TGF β1及FN分泌的能力弱于AA-I.结论:马兜铃酸的代谢产物AL-I能够造成肾小管上皮细胞的损伤,作用与AA-I相似.尽管其致损伤作用较AA-I弱,但仍有可能是含马兜铃酸中药导致肾脏损伤及其纤维化过程的毒性成分之一.     

广防己提取物在大鼠体内的毒代动力学及组织分布研究

目的建立检测广防己提取物中的马兜铃酸-I(AA-I)和马兜铃内酰胺-I(AL-I)的HPLC方法,观察毒性剂量下广防己提取物中 AA-I 及其代谢物AL-I在大鼠体内的变化规律.方法广防己提取物单次灌胃125、62.5、12.5mg/kg,按规定时间采集大鼠血浆、胆汁、尿、粪便及组织样品,HPLC法测定样品中AA-I和AL-I的浓度.同时监测大鼠肝、肾功能及肝、肾的组织形态学变化.结果毒性剂量下的广防己提取物的代谢符合非线性代谢动力学特征,属血管外给药二室开放模型.大、中剂量组的主要代谢参数如下t1/2α分别为1.03h、0.45h,t1/2β分别为6.10h、6.54h,CL分别为3.02、1.41ml/min·kg, AUC分别为33.10、35.22 min/μgoml,Tpeak分别为0.62、1.35h,V/F分别为16.09、11.26.AA-I和AL-I在大鼠体内特异分布并蓄积.广防己提取物对大鼠肾脏的损害呈剂量依赖性.结论毒性剂量下的广防己提取物在大鼠体内的代谢符合非线性代谢动力学特征,大鼠肾损害的程度与肾脏中AL-I浓度的相关性较好.     

马兜铃酸I药动学研究进展

马兜铃酸I在体内吸收迅速,分布迅速,大多数实验表明其体内分布呈一室模型,少量实验呈二室模型,马兜铃酸I的消除与其给药剂量有关,低剂量组消除较快,高剂量组消除较慢。马兜铃酸I药动学特征可能决定了其蓄积毒性的产生。     

补体C3a分子及其受体在马兜铃酸I肾损伤大鼠体内表达分析

摘要：目的 分析补体C3a(complement 3a)及其受体C3aR(complement 3a receptor)在马兜铃酸I肾损伤大鼠体内表达情况，初步探究其在马兜铃酸肾病中的作用。方法 SD大鼠按体重完全随机分为溶媒对照组，马兜铃酸I(Aristolochic acid I,AAI)低、高剂量(2.25、9.0mg·kg-1)组，连续腹腔注射给药14天，取血清，检测肌酐(serum creatinine, Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、补体C3、C3a；用HE法染色观察肾脏病理组织学变化；用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析肾脏组织C3aR蛋白的表达；用免疫组织化学方法分析肾脏组织C3aR的表达变化。结果 与对照组相比，给药AAI组Cr、BUN水平显著升高(P<0.05，P<0.01)；补体C3水平显著降低，而C3a水平显著升高(P<0.05，P<0.01)；肾脏病理学检查显示肾脏有明显病变；Western blot结果显示，与溶媒对照组相比，AAI低、高剂量组大鼠肾脏中C3aR蛋白表达水平明显升高，且呈剂量依赖关系(P<0.01)；免疫组化分析显示，溶媒对照组肾组织中可在肾小管上皮细胞见C3aR少量表达，AAI给药后不同剂量组的大鼠肾组织中C3aR主要表达在系膜细胞、肾小管上皮细胞等，且C3aR表达显著高于对照组，随病理损伤程度增加而增多。结论 C3aR在马兜铃酸I致肾损伤大鼠肾脏组织中有表达，通过与其配体结合可能引起肾组织的损伤。补体C3a及其受体在马兜铃酸肾病中发挥一定的作用。     

马兜铃酸I在大鼠体内的代谢特征研究

目的:研究口服马兜铃酸 I(AA-I)在大鼠体内的药物代谢动力学特点.方法:以125I标记的AA-I作为示踪剂,给予大鼠一次口服关木通水煎剂10 g*kg-1和125I标记AA-I(含AA-I 37.2 mg*L-1)的混合药液,测定全血125I-AA-I浓度及血浆蛋白结合率,采用3P87程序拟合并计算药物代谢动力学参数.同时测定肝、肾等9种脏器中的125I-AA-I含量,计算ID%、分布比值,观察上述指标随时间的动态变化,分析比较AA-I在不同脏器的分布特点.结果:大鼠一次口服关木通水煎剂后,AA-I迅速吸收入血,于30 min达到高峰,持续至1.5 h,随后其浓度逐渐降低,于24 h后仅存微量,给药后10 d时68.9%的AA-I以蛋白结合形式存在.经拟合其特征符合血管外给药二室模型,所得参数显示:口服AA-I在0.74 h达峰(Tmax),达峰浓度(Cmax)0.92 mg*L-1,分布半衰期(t1/2α)0.68 h,消除半衰期(t1/2β) 20.46 h,表观分布容积(V/F)87.39 mL,总清除率CL(s) 5.85 mL*h-1 (0.10 mL*min-1).服药后AA-I迅速分布至全身,5 min时即已达到分布比值的高峰,24～48 h处于最低水平;而后AA-I在肝、肾的分布比值又不断增高,肝脏在第4 d达峰,而后再次下降;在肾脏则继续升高,至观察结束(第40 d)最为突出,明显高于其他脏器(P<0.05).结论:AA-I口服后吸收迅速,在体内的分布具有器官特异性,可能在肝脏进行部分代谢;肾脏组织分布多、清除缓慢,其药代动力学特征可能与其长期肾毒性有关.     

丹酚酸B干预慢性马兜铃酸肾病大鼠疗效研究

目的:建立慢性AAN大鼠模型及观察SalB的干预作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,正常组灌服生理盐水,实验组按马兜铃酸5mg/kg.d灌服马兜铃酸单体,建立慢性AAN动物模型,治疗组按SalB10mg/kg.d灌胃治疗。各组分别在第2、4、6、8周留取24h尿液,在第4、8周取血,分离血清,检测肾功能指标,第8周留取肾组织,观察病理变化。结果:随着饲养时间的延长,马兜铃酸模型组尿β2-MG、尿NAG水平明显升高,肾小管间质病理损害明显,而SalB治疗组尿β2-MG、尿NAG水平及肾小管间质病理损害较模型组明显减轻。结论:初步建立了慢性AAN动物模型及SalB对马兜铃酸肾小管间质损害有一定的保护作用,能有效的降低尿β2-MG、尿NAG水平,明显改善肾小管间质病理损害,改善肾功能。     

马兜铃酸I致大鼠肾损伤后血清miRNA差异表达的研究

目的筛选马兜铃酸I(AAI)致大鼠肾损伤后血清中差异表达的微小RNA(micro RNA,miRNAs),为阐明miRNAs调控马兜铃酸肾病的机制研究提供靶标并奠定研究基础。方法 SD雄性大鼠随机分为对照组及AAI(2.25 mg/kg)组,连续ip给药14 d造成肾损伤模型后,对大鼠肾脏进行HE染色观察肾损伤程度。利用miRNAs芯片技术寻找AAI组及对照组大鼠血清中差异表达的miRNAs,预测靶基因,采用实时定量PCR(qRT-PCR)验证芯片结果的可靠性,并对部分结果进行信号通路分析。结果 HE染色显示AAI组大鼠肾脏出现不同程度的病变;miRNAs芯片结果显示有5个miRNAs(miR-10a-3p、miR-207、miR-3594-3p、miR-874-3p、miR-9a-3p)表达明显上调,无明显下调的miRNAs,并预测Rhebl1、Usp10等16种基因为差异表达的miRNAs靶基因;qRT-PCR验证结果与芯片结果基本一致;信号通路分析结果显示MAPK信号通路等相关性较大。结论芯片分析得到的差异表达的miRNAs可能与AAI致肾毒性机制相关,为进一步深入研究特定miRNAs的调控机制提供新的靶点,并为后期生物信息学层次的研究提供有效依据。     

商陆皂苷甲对水负荷大鼠肾脏AQP2及AQP4表达的影响北大核心CSCD

目的:观察商陆皂苷甲对水负荷大鼠肾脏水通道蛋白2(AQP2)及水通道蛋白4(AQP4)表达的调节作用,研究商陆皂苷甲利尿作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、氢氯噻嗪组及商陆皂苷甲高、中、低剂量组,腹腔注射给药,氢氯噻嗪组给予氢氯噻嗪0.4 mg/kg,商陆皂苷甲高、中、低剂量组分别给5.2、2.6、1.3 mg/kg商陆皂苷甲,收集并测量给药后6 h内的尿量;水负荷实验结束后将大鼠麻醉处死,运用免疫组化及Real Time-PCR技术检测大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达的变化。结果:与空白对照组比较,商陆皂苷甲高剂量组大鼠尿量显著增多,肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达显著下调(P<0.05);商陆皂苷甲中、低剂量组尿量及肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达差异无统计学意义。结论:商陆皂苷甲通过下调大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达,使水分重吸收降低,可能是其利尿作用的机制之一。     

青木香水煎剂所含马兜铃酸对大鼠肾损害的实验研究

青木香为马兜铃科植物马兜铃的干燥根茎,本文主要通过动物实验观察青木香水煎剂引起的肾损害及与剂量之间的关系.将SD大鼠随机分为高、中、低剂量组及正常对照组4组,分别采血、留尿,做肾功检测及尿比重和尿NAG定量检测.发现高、中剂量青木香水煎剂可引起大鼠肾脏损伤,而低剂量短期应用对大鼠肾脏无明显不良影响,马兜铃酸是青木香引起肾损害的主要毒性成分.     

商陆皂苷甲对水负荷大鼠肾脏AQP2及AQP4表达的影响

目的:观察商陆皂苷甲对水负荷大鼠肾脏水通道蛋白2(AQP2)及水通道蛋白4(AQP4)表达的调节作用,研究商陆皂苷甲利尿作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、氢氯噻嗪组及商陆皂苷甲高、中、低剂量组,腹腔注射给药,氢氯噻嗪组给予氢氯噻嗪0.4 mg/kg,商陆皂苷甲高、中、低剂量组分别给5.2、2.6、1.3 mg/kg商陆皂苷甲,收集并测量给药后6 h内的尿量;水负荷实验结束后将大鼠麻醉处死,运用免疫组化及Real Time-PCR技术检测大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达的变化。结果:与空白对照组比较,商陆皂苷甲高剂量组大鼠尿量显著增多,肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达显著下调(P0.05);商陆皂苷甲中、低剂量组尿量及肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达差异无统计学意义。结论:商陆皂苷甲通过下调大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达,使水分重吸收降低,可能是其利尿作用的机制之一。     

我和中西医结合事业

我毕业于中医院校 ,分配至基层医院 ,当时特定的形势及医疗实践教育我、引导我走上中西医结合道路 ,至今已 3 6年 ,抚今追昔 ,感慨万千。当时正值“文革”期间 ,有真才实学的权威、老师多数被打倒。我出身不好 ,不许“搞革命” ,只许“促生产” ,所以较早就承担内科病房工作 ,急、危、重症病人多 ,风险大。在“阶级斗争”甚嚣尘上的年代 ,临床救治只能成功 ,不许失败 ,否则扣上“阶级报复”的帽子 ,比当今医患摩擦、经济索赔 ,更为可怕。记得有 1例慢性支气管肺气肿伴肺心病患者合并严重感染后 ,未及时治疗 ,来院后发展为呼吸衰竭、肺性脑病…     

我与中药现代化

类风湿性关节炎 (RA)和强直性脊柱炎 (AS)是两种致残率很高的慢性关节疾病 ,早期诊断、合理治疗可明显减少致残率 ,提高生活质量。然而目前早期误诊、误治率仍相当高 ,为此我刊特邀部分中西医结合风湿病专家就RA与AS的诊断、治疗问题进行讨论 ,以飨读者 ,供同道参考。     

HPLC-ELSD测定黄芪提取物中黄芪皂苷Ⅰ,Ⅱ及乙酰黄芪皂苷

目的:研究以HPLC-ELSD法测定黄芪提取物中黄芪皂苷Ⅰ,Ⅱ,乙酰黄芪皂苷Ⅰ的含量。方法:色谱柱为WelcC18(4.6 mm×250 mm5,μm),流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,漂移管温度80℃,气体(空气)压力为50 psi。结果:黄芪皂苷Ⅰ,Ⅱ,乙酰黄芪皂苷Ⅰ的平均回收率分别为101.16%,99.34%,100.43%,RSD分别为2.76%,2.28%,2.55%,含量分别为4.01%,1.70%,3.67%。结论:方法简单易行,结果可靠,分离效果好,可作为黄芪提取物中皂苷类成分定量的方法。     

真正尝到了中西医结合的甜头

1958年，湖南农村麻疹、白喉等急性传染病流行，湖南医学院师生组成若干医疗队到农村除害治病。我担任医疗队队长，带领3O余人到茶陵县下乡巡回医疗。刚到乡村就听到一片啼哭声，经询问得知，一家农户中有3个孩子不到7天就先后被急病（白喉）夺去了生命。全村已有二三十个孩子因麻疹或白喉而丧生。可见我们医疗队的任务重大，立即投入了与白喉、麻疹斗争的紧张战斗中。开始用西医一般常规疗法，该病病死率很高，单用中医的方法治疗也不能控制流行，病死率仍很高。根据已学到的中西医理论，我提出到祖国医学宝库中“勤求古训，博采众方”，…     

挑战—选择—坚定

198 0年 7月 3日上午 ,我非常高兴地收到了来自我国著名高等医学学府中山医学院的研究生录取通知书 ,这是我医学生涯中最重大的转折点。我攻读的专业是病理生理学 ,导师是我国著名的中西医结合专家侯灿教授。回顾十多年来的历程 ,我在中西医结合的道路上经历了挑战—选择—坚定     

九节龙皂苷I衍生物的合成及细胞毒活性研究

目的对九节龙皂苷Ⅰ进行结构修饰得到新的结构类似物,并对其抗肿瘤活性进行研究。方法通过对九节龙皂苷Ⅰ的30位醛基进行氧化、还原或氨基化合物的缩合得到一系列新的化合物,并采用MTT法对合成的衍生物进行9种人癌细胞毒活性研究,通过IC50来评价其抗肿瘤活性。结果得到的新化合物a、b、d和中间体c,分别为氢化九节龙皂苷Ⅰ、加氧九节龙皂苷Ⅰ、九节龙皂苷缩4-苄基-3-氨基硫脲和九节龙皂苷缩肼基二硫代甲酸甲酯;其中化合物a和中间体c对常见的9种人癌细胞IC50相比原皂苷均降低(P<0.05),说明其对肿瘤细胞的抑制能力较原皂苷增强。结论通过对九节龙皂苷I进行结构修饰,能够使其抗肿瘤活性增强。     

我要的睡眠

睡眠像是水和空气，每天都必不可少，有时候梦境连连让人疲倦，有时候失眠令人沮丧，有时候嗜睡让司机们困扰不已。到底是身体机能出了毛病，还是我们被睡眠的表象所迷惑？[编者按]     

烟若虚体斗有形物似无心人长情

我打算抽一辈子烟斗。尽管如火如荼的反烟运动已是全球性的趋势，虽千万人，吾往矣。大家都说抽烟会伤身，可是阿斗如是说：不抽烟斗，伤心啊!