产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性特点。方法对我院2004年7月～2006年7月间各类临床标本分离出的大肠埃希菌307株和肺炎克雷伯菌202株，用CLSI／NCCLS推荐的表型确证法检测其ESBLs，采用K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验，分析产ESBLs菌株的分布及耐药性。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLS菌株的检出率分别为38．4％（118／307）和31．7％（64／202），主要分布于尿和痰、咽拭子中，病区主要集中于肺科、神经外科、感染科、泌尿外科、ICU室。产ESBLs菌株对亚胺培南和美罗培南呈高度敏感，对哌托西林／三唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦、头孢西丁耐药率较低，对其他抗菌药物均出现较高耐药。结论产ESBLS的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分布在不同病区的不同标本中，碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南是治疗产ESBLS菌株感染的较佳药物。     

96株大肠埃希菌耐药性及其产ESBLs、AmpC酶菌株基因型检测

目的 了解大肠埃希菌耐药现状及其及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）菌株基因型,以指导临床医师合理使用抗菌药物。方法自本院尿路感染患者标本中分离大肠埃希菌96株,采用确证试验和改良三维试验检测其ESBLs、AmpC酶表达情况,用K-B法测定其对亚胺培南等16种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测TEM、SHV、PER、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX—M-3群、DHA和ACT-1基因型分布情况,用接合转移试验了解耐药基因转移方式。结果96株大肠埃希菌单产ESBLs30株,同时产ESBLs和AmpC酶4株,单产AmpC酶2株;产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟四种抗生素耐药率达到100％,而对左氧氟沙星、复方新诺明和呋喃妥因的耐药率亦〉80％,对亚胺培南和美罗培南均敏感;ESBLs基因型以CTX—M和TEM型为主,AmpC酶基因为DHA型,两酶能通过接合转移方式将质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论大肠埃希菌所致感染对碳青霉烯类药物较为敏感;临床应及时了解本地区产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药表型和基因型,以指导临床合理使用抗生素、延缓细菌耐药性产生、控制耐药菌株播散和流行。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和耐药质粒谱分析

目的研究大肠埃希菌(Escherichiacoli)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella peumoniae)临床分离株耐药性及其质粒谱变化。方法对福建医科大学2所附属医院分离的E.coli和K.peumoniae共53株行药敏试验,检出产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的菌株用碱变性法提取质粒,采用0.8%琼脂糖凝胶电泳分析质粒谱。结果产ESBLs菌株对多数青霉素和头孢菌素类抗生素耐药,对碳青霉烯类和酶抑制剂敏感(P0.05)。不产ESBLsE.coli菌对喹诺酮类的敏感性高于产酶菌株(P0.01)。受检菌株对丁胺卡那霉素的敏感性较高。产ESBLs菌株60.0%检出质粒,其中50%携带0.9 kb质粒。对环丙沙星耐药的E.coli,50%携带4.2 kb质粒;4株对丁胺卡那霉素耐药的E.coli中,2株携带9.4kb质粒。结论E.coli和K.peumoniae产ESBLs主要由质粒介导。0.9 kb质粒可能与产ESBLs有关;4.2 kb的质粒可能与环丙沙星耐药有关;9.4 kb质粒可能与丁胺卡那霉素耐药有关。     

儿科院内感染肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶基因型检测及分析

采用琼脂纸片扩散法和双纸片协同试验,对儿科院内感染肺炎克雷伯菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测;用PCR检测耐药基因和DNA序列,分析产ESBLs菌株的基因型.结果 从422份感染标本中分离出201株肺炎克雷伯菌,产ESBLs菌株阳性率39.4%(63/201);携带blaCTX-M-11基因17株(17/63,26.9%)、blaTEM-1基因7株(7/63,11.1%)、blaSHV-2基因5株(5/63,7.8%).ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率高于ESBLs阴性株,只对亚胺培南敏感.提示吉林地区儿科院内感染肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率高,并呈多重耐药性,携带三种ESBLs基因型.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对九种抗菌药物的耐药性分析

目的 了解肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的检出率及耐药性。方法 采用琼脂稀释法对2001年4月～2002年2月四川大学华西医院从临床标本中分离的非重复大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行产ESBLs株的初筛，用NCCLS推荐的纸片扩散法作确证试验，并测定产ESBLs株对9种抗菌药物的MIC值。结果 大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs株的检出率分别为26．4％和18．2％。产ESBLs菌株多呈多重耐药，耐药性由高至低依次为环丙沙星(93．3％)、头孢噻肟(70％)、头孢哌酮／舒巴坦(66．7%)、氨曲南(63．3％)、阿米卡星(36．7％)、头孢西丁(20％)、头孢他定(16．7%)、头孢吡肟(10％)，亚胺培南100％敏感。结论 产ESBLs细菌多呈多重耐药。亚胺培南是治疗产ESBLs细菌感染的最可靠药物。     

肺结核患者合并肺炎克雷伯菌感染的耐药监测分析

目的分析肺结核合并肺炎克雷伯菌感染患者的耐药性。方法对2009-2011年从我院临床确诊的肺结核患者痰培养标本中分离的317株肺炎克雷伯菌药敏试验结果进行分析。结果从317株肺炎克雷伯菌中检出产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌101株,检出率31.7%,产ESBLs菌株对大部分抗生素耐药,对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦100%敏感。结论我院肺结核合并肺炎克雷伯菌感染患者产ESBL s株多种抗菌药物耐药,及时监测、合理选用抗菌药物对临床抗感染治疗有重要意义。     

产ESBLs大肠埃希菌的分布及耐药性分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)在我院2008-2012年的临床分布和耐药情况。方法采用VITEK-Compact系统和Phoenix 100系统进行细菌鉴定,稀释法进行体外抗菌药物敏感试验。结果临床分离ECO 630株,其中产ESBLs的ECO菌363株,总产酶率为57.62%。产ESBLs的ECO标本呼吸道最多(44.63%),其次是尿液(33.61%)、血液(7.44%)等,科室分布依次是重症监护室(31.13%),其次为妇产科(9.09%),心脏外科(9.09%)。药敏结果显示:产ESBLs的ECO对临床常用抗菌药物均产生了严重耐药性,对亚胺培南高度敏感,对哌拉西林/他唑巴坦及阿米卡星耐药率较低,对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,差异有统计学意义(P0.05)。结论产ESBLs的ECO菌检出率呈逐年上升趋势,产ESBLs的ECO对临床常用抗菌药物均产生了严重耐药性,在治疗ECO时应根据实验室结果合理选用抗菌药物。     

临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析及耐药基因和Ⅰ类整合子的检测

目的了解产超广谱B．内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及相关耐药基因之间的关系。方法采用K—B琼脂扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗生素的耐药性,用PCR技术检测相关耐药基因和Ⅰ类整合子并用DNA序列分析确认其所产生基因型。结果检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44．4％。所有检测菌株对亚胺培南全部敏感;56株ESBLs阳性的菌株有44株扩增到TEM基因（78．6％）,SHV型阳性的有2株（3．6％）,CTX-M型阳性的有48株（85．7％）,OXA型阳性的有1株（1．79％）,intl1阳性菌株有35株（62．5％）,占未检出PER和VEB型。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs较高,耐药显著,碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs细菌最有效的药物;TEM型和CTX-M型ESBLs为我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要基因型,携带Ⅰ类整合子基因是导致细菌产ESBLs的重要原因。     

猪源产志贺毒素大肠埃希菌耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的了解我国猪源产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)产超广谱β内酰胺酶(Extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)情况及其基因型。方法对22株分离自重庆地区2个规模化养殖场健康猪粪的STEC菌株进行药物敏感性检测、ESBLs表型确证及7种类型(blaSHV,blaLEN,blaOKP,blaTEM,blaCTX-M,blaGES及blaKPC)ESBLs基因型PCR检测和测序分析。结果 22株携带stx2e的STEC菌株中2株对所有23种测试抗生素敏感,其余菌株除对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其他抗生素均存在不同程度耐药。10株STEC菌株(占45.45%)产ESBLs酶。PCR检测其中1株为blaCTX-M-1基因型,其余9株为blaCTX-M-9+blaTEM-1基因型。结论重庆地区猪源STEC中存在较高比例的产ESBLs菌株。在加强人和动物STEC感染检测与监测的同时,应进行细菌耐药性监测。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性和基因分型研究

目的调查重庆地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法采用纸片扩散法测定10种抗菌药物对产ESBLs肺炎克雷伯菌的敏感性,应用PCR方法检测产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因。结果35株产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感,对头孢吡肟耐药率为22.9%;但对其他抗菌药物耐药率均>50%,其中对头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松的耐药率分别为82.9%、68.5%和65.7%;基因型分析显示有26株携带CTX-M基因,24株携带TEM基因,15株携带SHV基因。结论产ESBLs的肺炎克雷伯菌耐药严重,重庆地区以CTX-M型ESBLs多见。     

肺结核伴肺炎克雷伯菌感染患者情况和耐药分析

目的了解本院肺结核患者肺炎克雷伯菌的感染情况和耐药性。方法收集经临床确诊为肺结核伴有肺炎克雷伯菌感染患者中分离出肺炎克雷伯菌的药敏数据,并对其耐药情况进行回顾性分析。结果 587株肺炎克雷伯菌检出241株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌,检出率为41.1%,这三年的ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率是逐年增高的,依次为36.9%,43.1%,43.3%。检出人群中以≤20岁和≥60岁年龄段所占的比例最高,产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性要高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌,对头孢一代、二代、三代耐药,但对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦保持高度敏感。结论应加强肺炎克雷伯菌耐药监测,以指导合理用药减少耐药菌的发生和医院感染。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒AmpCβ内酰胺酶基因型的检测

目的了解产质粒介导的AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型。方法收集2002年1月至2004年5月间呼吸科临床标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共110株，用酶提取物三维试验检测AmpC酶；用等电聚焦电泳、耐药质粒电转化试验、聚合酶链反应（PCR）及测序确定AmpC酶基因型。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为9．30％（4／43），4．48％（3／67）。药敏试验结果显示产酶株对头孢西丁全部耐药，对第三代头孢菌素、酶抑制剂、氨曲南、阿米卡星及环丙沙星均有不同程度耐药，对头孢吡肟及亚胺培南较敏感。7株产AmpC酶菌株中有5株通过电转化试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌，经PCR扩增和测序证实为质粒介导DHA-1型AmpC酶。结论临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中已经出现产质粒介导AmpC酶菌株，其耐药性能够水平传播，给临床抗感染治疗带来重大威胁。     

大肠埃希菌产ESBLs菌株的耐药谱动态观察

目的动态观察大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的耐药谱变化,为临床合理选用抗菌药提供依据。方法对2007~2009年临床分离的248株大肠埃希菌标本进行病原菌鉴定及药敏试验,用纸片扩散确证法判断产ESBLs菌株（即ESBLs阳性菌）。结果 248株大肠埃希菌中,ESBLs阳性菌137株（占55.2%）,其检出率为2007年65.6%、2008年53.8%、2009年50.0%,呈逐年下降趋势;产ESBLs菌株的大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类、单酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等抗菌药呈多重耐药,对亚胺培南高度敏感。结论大肠埃希菌ES-BLs阳性菌检出率较高,临床治疗中应严格掌握抗菌药的应用指征,动态监测其耐药谱变化。     

龙岩市肺炎克雷伯菌分子分型与耐药性分析

目的 了解龙岩地区人感染肺炎克雷伯菌的分子分型特征、耐药特性及部分耐药机制,为肺炎克雷伯菌感染的防治提供参考。方法 收集2017-2020年龙岩市辖区综合医院分离的人感染肺炎克雷伯菌,采用PFGE技术进行分子分型检测,运用BioNumerics软件进行聚类分析,采用MIC法及K-B法进行耐药性检测。结果 66.67%的肺炎克雷伯菌分离自痰液标本,129株肺炎克雷伯菌分子分型与聚类分析显示龙岩市人感染肺炎克雷伯菌菌株间相似度为54.3%～100%,可分为118个PFGE型别,不存在优势流行型别。对110株肺炎克雷伯菌进行药敏试验,有92株耐药,耐药率为0.90%～22.73%,其中产AmpC酶菌3株,占3.26%(3/92),该菌对左氧氟沙星敏感;产ESBLs酶菌株占21.82%(24/110),对多粘菌素B和亚胺培南均敏感。产AmpC或ESBLs菌株对抗菌药物的耐药率显著高于不产AmpC和ESBLs的菌株(χ²_AmpC=60.682,P<0.01;χ²_ESBLs=122.038,P<0....     

尿路感染患者产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解尿路感染患者中产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs)大肠埃希菌的耐药现状,指导临床合理用药。方法从我院2015年1月—2016年1月间尿路感染患者的尿液中分离出大肠埃希菌株。所有菌株采用法国梅里埃公司VITEK2 Compact分析仪进行细菌鉴定,纸片扩散法检测大肠埃希菌产ESBLs的产生情况及耐药特点。结果从尿路感染患者中共检出大肠埃希菌432株,其中有226株产ESBLs,检出率为52.31%,药物敏感性试验结果显示产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率仅为0.88%;其次为呋喃妥因,耐药率为19.91%;耐药率最高的为氨苄西林,为98.23%;对含酶抑制剂的药物其耐药率也明显增加。与非产ESBLs菌株耐药性相比,产ESBLs株的耐药率显著增高。结论尿路感染患者中分离得到产ESBLs大肠埃希菌的比例较高,积极检测和监测产ESBLs大肠埃希菌及其耐药情况对于临床合理用药、院内感染控制及流行病学调查极为重要。     

细菌性痢疾流行特点及志贺菌耐药性研究

目的研究近年来肠道门诊细菌性痢疾流行概况及志贺菌耐药特点,为细菌性痢疾临床治疗和预防控制提供依据。方法采用志贺菌及沙门菌琼脂培养基培养,可疑菌株经VITEK-32细菌鉴定仪及血清凝集鉴定到群,K-B法检测抗菌药物的耐药性,纸片确认试验检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,三维试验检测AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）。结果 279例细菌性痢疾感染患者主要以宋内志贺菌（201株,占72.4%）和福氏志贺菌（76株,占27.2%）感染为主,且患者主要集中在0～11岁年龄段,占总感染率的71.3%（199/279）,高发季节为7-11月。药敏结果显示,志贺菌对氨苄西林、哌拉西林和复方新诺明的耐药率较高,均〉60%;对环丙沙星和左旋氧氟沙星的耐药率较低,均〈40%,未发现耐哌拉西林/他唑巴坦和亚胺培南的志贺菌。151株志贺菌纸片确认试验为产ESBLs阳性菌株,占54.1%（151/279）;未发现AmpC酶阳性者。结论我院肠道门诊细菌性痢疾以感染宋内志贺菌和福氏志贺菌的婴幼儿为主,且宋内志贺菌有增高趋势,2种志贺菌对部分种类的抗菌药物药敏性差别较大,临床医师应根据菌群鉴定及药物敏感试验结果合理选择抗菌药物。     

猪源产志贺毒素大肠埃希茵耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的了解我国猪源产志贺毒素大肠埃希菌（Shigatoxin-producingEscherichiacoli,STEC）产超广谱8内酰胺酶（Extended—spectruml β-lactamases,ESBLs）情况及其基因型。方法对22株分离自重庆地区2个规模化养殖场健康猪粪的STEC菌株进行药物敏感性检测、ESBLs表型确证及7种类型（blaSHV,blaLEN,blaOKP,blaTEM,blaCTX-M,blaGES及blaKPC）ESBLs基因型PCR检测和测序分析。结果22株携带stx2e的STEC菌株中2株对所有23种测试抗生素敏感,其余菌株除对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其他抗生素均存在不同程度耐药。10株sTEc菌株（占45．45％）产ESBLs酶。PCR检测其中1株为blaCTX-M-1基因型,其余9株为blaCTX-M-9 ＋blaTEM-1基因型。结论重庆地区猪源STEC中存在较高比例的产ESBLs菌株。在加强人和动物STEC感染检测与监测的同时,应进行细菌耐药性监测。     

体内诱导铜绿假单胞菌对环丙沙星及亚胺培南交叉耐药研究

目的 研究环丙沙星及亚胺培南体内诱导铜绿假单胞菌交叉耐药性及交叉耐药机制。方法 以环丙沙星或亚胺培南治疗小鼠铜绿假单胞菌腹膜炎,诱导交叉耐药菌,分析比较交叉耐药菌与敏感菌的DNA旋转酶gyrA基因变异、内外膜蛋白差异和细菌对药物摄取的差异。结果 体内环丙沙星诱导产生环丙沙星诱导产生环丙沙星耐药菌的交叉耐药率为3.8%,环丙沙星对交叉耐药菌最低抑菌浓度（MIC）增加16-64倍,亚胺培南对交叉耐药菌MIC增加4-16倍;体内亚胺培南诱导产生亚胺培南耐药菌的交叉耐药率为0.98%,环丙沙星对交叉耐药菌MIC增加64倍,亚胺培南对交叉耐药菌MIC增加4-8倍。体内诱导交叉耐药菌的产生与药物剂量相关。6株交叉耐药菌gyrA PCR-SSCP（单逻构象多态性）分析发现,3株细菌与亲菌力有差异;细菌内外膜蛋白分析,耐药菌与亲株菌无差异;细菌对环丙沙星聚积测定,所有交叉耐药菌胞内的药物浓度仅为亲株PA5的1/2-1/3,加入氰氯苯腙（CCCP）后,胞内药物浓度上升至PA5水平或更高。结论 环丙沙星及亚胺培南均可体内诱导铜绿假单胞菌交叉耐药,铜绿假单胞菌对环丙沙星及亚胺培南交叉耐药机制以药物主动外排为主。     

湖北地区三级医院2002～2005年大肠埃希菌耐药性分析

目的了解湖北地区大肠埃希菌（EC）的耐药性及流行趋势，为临床提供诊疗依据。方法采用WHONET4—5．0软件对2002-2005年湖北地区17所三级医院成人患者临床标本中分离的7435株EC的耐药性监测资料进行统计分析（药敏试验采用KB纸片扩散法）。结果湖北地区EC对常用抗菌药物的耐药率总体持平或略有上升，对氨苄西林耐药率高达90％～92％，对亚胺培南100％敏感；产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）菌株的检出率逐年上升。结论湖北地区EC的耐药情况仍十分严重，应对EC行耐药性动态监测并及时公布结果，以指导临床用药及控制耐药菌传播与流行。     

肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌感染的分布状况及耐药特点。方法对我院临床标本分离出的肺炎克雷伯菌用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证法检测ESBLs,K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验。结果肺炎克雷伯菌产ESBLs的检出率为34.4%,其主要以呼吸道感染为主。产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率为0。产ESBLs菌株对抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论产ESBLs菌对常用抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs菌株,碳青霉烯类抗生素亚胺培南是治疗产ESBLs菌株感染的理想药物。