脊髓灰质炎病毒衣壳多肽VP1、VP2和VP3诱生中和抗体

作者研究了脊髓灰质炎(以下简称脊灰)病毒的三个重要衣壳多肽VP1、VP2和VP3的抗原性和免疫原性。采用提纯的脊灰活毒或福尔马林灭活病毒(I型Mahoney株、11型MEF株及l型Saukett株)作为分离衣壳多肤的原材料,用SDSpAGE进行分离。每隔3~6周给Wistar鼠及新西兰兔重复肌注50一10郊g多肤以制备抗多     

合成肽诱导抗脊髓灰质炎病毒中和抗体

作者按Hopp等的方法,合成含有Ⅰ型脊髓灰质炎病毒结构蛋白VP1氨基酸顺序的5种肽。用6种单克隆中和抗体(能分别与不同的中和反应抗原决定簇A、B、C、D、E和F相结合)与5种合成肽作ELISA,测定这些合成肽被单克隆抗体(McAb)识别的能力。结果表明,5种肽中有4种能被McAb所识别。     

重组甲型肝炎病毒蛋白VP1和VP3启动中和抗体应答

将甲型肝炎病毒(HAV)核壳蛋白VP1和VP3的6个重叠的亚基因互补(cDNA)片段插入表达载体pBD或pUR中,转入大肠杆菌,在含有异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导剂的培养基中培养,表达出6个β-半乳糖苷酶-HAV融合蛋白。这些融合蛋白水溶性差,不能用放射免     

脊髓灰质炎病毒嵌合体诱生广泛反应性HIV-1中和抗体

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜蛋白(env)具有广泛的序列异质性和抗原变异性,也存在着抗原性保守位点.理想的疫苗应含有此保守位点,以便诱生能与许多病毒分离株起反应的抗体.作者选用HIV-1跨膜糖蛋白gp41(组特异性抗原决定簇),以Ⅰ型脊髓灰质炎病毒Sabin疫苗株为表达载体(pCASl),用DNA重组技术构建成脊髓灰质炎病毒/HIV-1抗原嵌合体Sl/env/3.     

用单克隆中和抗体确定Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的亚型

脊髓灰质炎病毒型内抗原差异的分析在流行病学以及灰质炎疫苗安全性和效果的研究中具有重要意义。灰质炎病毒的型内鉴别方法很多,其中以应用交叉吸附免疫血清的抗原标志试验最好,但所有这些方法都不易制备高特异性的     

脊髓灰质炎病毒VP1区的基因变化及疫苗衍生脊髓灰质炎病毒的流行情况

脊髓灰质炎(脊灰)病毒有3个血清型.VP1是脊灰病毒衣壳蛋白之一,它有4个抗原决定簇,可以诱导中和抗体,具有血清型特异性.脊灰病毒由于其RNA依赖性RNA聚合酶缺乏严密的自我校正功能,在自身复制过程中精确性下降,因此,会产生很多点突变,出现一些VP1区核苷酸突变热点.口服脊灰减毒活疫苗(OPV)的应用,有效地控制了脊灰,但因OPV病毒在人体肠道内复制过程中发生碱基突变,导致其神经毒力回升,引起疫苗相关麻痹型脊灰和出现疫苗衍生脊灰病毒(VDPV),使全球多次发生循环VDPV事件,对消灭脊灰带来新的挑战.为此,有关学者建议停止使用OPV,改用脊灰灭活疫苗或两种疫苗相结合的序贯免疫程序.     

脊髓灰质炎病毒中和抗体检测血清参考品的制备及稳定性

目的 制备抗脊髓灰质炎(脊灰)病毒血清作为检测参考品,并研究其稳定性.方法 用1、2、3型脊灰病毒分别接种非洲绿猴肾细胞,收获病毒液,超滤浓缩后纯化病毒抗原,并进行蛋白含量和纯度检测.用纯化的病毒抗原免疫新西兰白兔获得分别抗3个型别的血清,过滤、分装、冻干后,进行无菌检验、支原体检验、水分测定,用微量细胞病变抑制法进行特异性检测.3名实验员各标定5次候选参考品的中和抗体效价,计算变异系数.血清放置于-20℃进行稳定性分析.结果 纯化的1、2、3型脊灰病毒抗原蛋白含量分别为12.3、10.4、9.8μg/ml.电泳蛋白条带的相对分子质量与文献报道一致.高效液相色谱法检测的1、2、3型脊灰病毒抗原蛋白纯度分别为100％、99％和96％.抗各型脊灰病毒血清仅可中和对应型别,而不能中和另两个型别脊灰病毒或肠道病毒.无菌检验、支原体检验结果及水分含量(均低于3％)均符合药典要求.血清参考品的抗1、2、3型脊灰病毒中和抗体效价分别为73 587、3 264、34 857.候选参考品在-20℃放置5年后中和抗体效价未降低(t=-1.25,P=0.225).结论 制备的抗1、2、3型脊灰病毒冻干血清参考品稳定性好,适用于检测Sabin株脊灰灭活疫苗免疫原性及脊灰病毒特异性中和抗体.     

用HEp-2细胞和Vero细胞检测脊髓灰质炎病毒和抗体

用于检测脊髓灰质炎病毒和抗体的方法很多,本文报道应用HEp-2细胞和Vero细胞检测的结果。试验应用156～165代HEP-2细胞     

HIV-1疫苗诱导广泛中和抗体应答

 诱导中和抗体是许多有效疫苗的关键特征,也是在动物模型中唯一证明能完全阻断HIV感染的免疫应答.但是,HIV-1广泛的遗传变异性和复杂的免疫逃避机制,已经使得迄今为止所有利用HIv-1疫苗免疫原诱导有效中和抗体应答的尝试受到阻碍.最近对病毒免疫逃避机制有了进一步了解,同时对病毒包膜糖蛋白结构和免疫生物学特性的研究也不断深入,这些都将有助于克服困难,设计出新的免疫原诱导产生保护性抗HIV-1抗体.     

紫外线照射对脊髓灰质炎病毒衣壳的致变作用

本文作者用蔗糖密度梯度离心方法研究了紫外线(UV)照射对[~3H]尿苷标记的Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的致变作用,通过梯度离心分离到的亚病毒颗粒用SDS-PAGE进行多肽成分分析,并就亚病毒颗粒的性质和UV致变作用的某些特性作了描述。     

古巴脊髓灰质炎疫苗强化免疫和血清中和抗体阳性率调查

三价口服脊髓灰质炎疫苗（TOPV）的效果在热带地区比温带地区差,但可以通过增加免疫次数等多种方法提高其免疫原性。目前有关TOPV免疫次数超过6次的报道很少。而古巴的做法提供了进行血清中和抗体阳性率与免疫次数关系研究的机会。     

Ⅰ型脊髓灰质炎病毒壳体蛋白VP1在大肠杆菌中的表达

脊髓灰质炎(以下简称脊灰)病毒壳体多肽中的VP1能诱生中和性抗体,在探索用DNA重组技术生产亚单位脊灰疫苗时,应研究VP1在大肠杆菌中的纯化和表达。     

贵州省福泉县健康人群脊髓灰质炎中和抗体水平监测

福泉县位于贵州省黔南州中部，辖16乡（镇）268197人，自1986年开展计免冷链以来，于1989年发生脊髓灰质炎（以下简称脊灰）l例。为了解健康儿童脊灰抗体水平状况，1992年底我们对该县10岁以下人群进行了监测，现将结果报告如下。l材料与方法1．互监测对象：在该县境内随机选择了3个乡作为监测点，每个监测点按年龄组构成分为7组，各年龄组随机抽取30名健康儿童共计210名为监测对象。1．2标本及实验方法：每个监测对象采取耳垂血0．3～0．sml，分离血清后保存于一20C的冰箱内待检；在省卫生防疫站脊灰实验室按照全国统一脊灰中和抗体测定法…     

抗Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和性单克隆抗体的产生及其特性

作者分别用Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型脊髓灰质炎病毒Sabin疫苗株、MEF-1及Saukett株作免疫原,通过26次融合,用中和试验筛选出350株能稳定地分泌抗脊髓灰质炎病毒中和性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞.其中分泌抗Ⅰ型病毒的McAb55株,Ⅱ型180株、Ⅲ型115株.先用各型的2个参考毒株检测McAb的中和活性,若为阳性,再与每个血清型已知特性的5个类疫苗株(VL)及5个     

可溶性抗原与ISCOM相结合:HIVgp120 ISCOM诱导病毒中和抗体

免疫刺激复合物(ISCOM)是一种稳定的蛋白抗原颗粒复合体,可作为病毒外膜两歧性糖蛋白的提呈系统。与微团或病毒颗粒中的抗原相比,它能显著提高病毒抗原诱导抗体应答的免疫原性,并刺激免疫动物产生抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞应答。本文     

艾滋病中和抗体和抗原

直到最近,发展艾滋病疫苗的许多工作仍集中在激发中和抗体应答上。经重组技术大量产生的人类免疫缺陷症病毒(HIV)包膜糖蛋白(中和作用的病毒靶)作为疫苗极少获得成功。中和抗体结合的特异性抗原决定簇的结构已经清楚,尽管其主要抗原决定簇是高度变异的,但其他一些抗原决定簇是保守的,从而可设计第二代疫苗。同时,仅使用灭活病毒作为免疫原在猿猴免疫缺陷症病毒(SIV)动物模型中的研究表明,一种有效的艾滋病疫苗至少是可能的。目前,各种HIV疫苗制剂正在研究之中,前景是乐观的。     

应用固相化抗体免疫吸附法浓缩和提纯脊髓灰质炎病毒

抗脊髓灰质炎病毒(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)抗体与 sepbarose-4B 相偶联,所制得免疫吸附剂对活病毒及灭活病毒都具有高结合容量。结合的抗原用高浓度硫氰酸铵洗脱。洗脱后立即用凝胶过滤法脱盐,可得纯化和浓缩的抗原。本免疫吸附法具有特异性强和简单快速等优点,可用于大规模分离和纯化脊髓灰质炎病毒以供制备灭活疫苗之用。     

从1名健康疫苗接种者分离到的重组3型/2型脊髓灰质炎病毒及其包含的嵌合核壳VP1的鉴定

从接种口服脊髓灰质炎疫苗后约 1 2周的 1名 2岁男孩的粪便标本中分离到Sabin3/Sabin2 /Sabin3( S3/2 /3)型间重组脊髓灰质炎病毒。　　由于该分离株的初步鉴定为嵌合 Sabin3/Sabin2核壳结构 ;从而使作者进一步研究了这个病毒的整个基因组序列、抗原特性和温度敏感性。　　研究表明 ,第 1个重组连接位于编码VP1核壳蛋白的基因区 ,在 32 74和 32 85位核苷酸之间 ;第 2个连接则位于 RNA聚合酶区域 ( 6 82 4和 6 82 5位核苷酸 )。重组把 6个 Sabin2衍生氨基酸引入 Sabin3核壳中的VP1羧基末端。重组病毒的全基因组与其亲代 Sabin株在 33…     

从1名健康疫苗接种者分离到的重组3型／2型脊髓灰质炎病毒及其包含的嵌合核壳VP1的鉴定

从接种口服脊髓灰质炎疫苗后约12周的1名2岁男孩的粪便标本中分离到Sabin3／Sabin2／Sabin3(S3／2／3)型问重组脊髓灰质炎病毒。