急性白血病病人XIAP和Caspase-3的表达及其临床意义

目的:通过对急性白血病患者及健康成人骨髓细胞中X连锁凋亡抑制蛋白(x chromosome linked inhibitor of apoptosisprotein,XIAP)、半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)表达的检测,探讨XIAP及Caspase-3在急性白血病(AL)发生、发展过程中的作用以及二者相关性,为临床诊疗及预后提供有价值的参照指标。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测50例AL患者及30例健康成人骨髓细胞中XIAP及caspase-3的表达情况。数据结果采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用独立样本t检验。Caspase-3与XIAP的相关性采用Spearman等级相关进行相关分析,P值<0.05视为有统计学意义。结果:①急性白血病患者骨髓细胞中XIAP的表达水平明显高于正常健康成人骨髓细胞中XIAP表达水平(P<0.05);急性白血病患者骨髓细胞中Caspase-3的表达水平明显低于正常健康成人骨髓细胞中Caspase-3表达水平(P<0.05),二者的表达呈负相关(r=-0.837,P<0.05);②急性白血病初治患者骨髓细胞中XIAP的表达水平较复发组患者骨髓细胞中XIAP的表达明显减低(P<0.05)。③急性白血病初治患者骨的表达水平明显高于复发组患者骨髓细胞中Caspase-3表达水平(P<0.05)。④在急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病患者中XIAP及Caspase-3的表达水平无明显差异(P>0.05)。⑤初治急性白血病患者XIAP高表达组的完全缓解率低于低表达组,Caspase-3高表达组的完全缓解率高于低表达组(P<0.05)。结论:AL患者XIAP的表达高于对照组,Caspase-3的表达低于对照组,两者呈负相关,提示XIAP高水平表达与Caspase-3低水平表达可能与AL的发生发展密切相关。XIAP高表达及Caspase-3低表达的病人完全缓解率低,预后不良,提示这可能是导致白血病细胞对化疗药物不敏感的原因之一,但XIAP及Caspase-3在AL发生发展中的具体机制还有待于进一步研究。     

测定MVD、TSP-1在白血病中的临床意义

目的探讨骨髓微血管密度(MVD)和凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)在白血病中的表达及意义。方法选择白血病患者27例(19例急性白血病AL、8例慢性粒细胞白血病CML)为研究组,正常对照组20例,利用SP免疫组化法检测研究组治疗前后及对照组骨髓组织MVD及TSP-1表达情况。结果①MVD、TSP-1在AL、CML不同疾病中的同一阶段,测定水平均无显著性差异(P>0.05);而在初诊组与未缓解组,MVD值高于对照组及缓解组(P<0.01),TSP-1阳性率低于对照组及缓解组(P<0.05)。②TSP-1和MVD之间具有负相关性。结论联合检测MVD与TSP-1,有助于更准确的评价疾病状态,指导治疗。     

血清乳酸脱氢酶在诊断急性白血病中的作用

目的探讨血清乳酸脱氢酶(LDH)水平对急性白血病(AL)患者临床诊疗意义。方法 45例AL患者作为观察组,同期45例健康体检者作为健康对照组,检测并比较两组化疗前、化疗后的LDH水平。结果 AL患者治疗前外周血LDH为(958.24±132.10)IU/L,明显高于健康对照组(135.80±31.55)IU/L水平(P<0.05),急性淋巴细胞白血病(ALL)患者与急性非淋巴细胞白血病(ANLL)治疗前外周血LDH水平均呈高表达状态,差异无统计学意义(P>0.05);AL患者治疗后患者LDH含量较治疗前均有明显下降,症状缓解者LDH含量明显低于症状未缓解者(P<0.05)。结论 LDH水平监测对急性白血病患者治疗效果评价以及判断患者预后发挥重要作用。     

白血病抑制因子基因在急性白血病患者中的表达及意义

目的研究急性白血病(acute leukemia,AL)患者外周血白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)mRNA的表达水平及其与AL病情、疗效和预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例不同类型以及同一类型不同阶段AL患者[初治患者16例(初治亚组)、完全缓解患者12例(完全缓解亚组)、复发患者9例(复发亚组)]LIF的mRNA的表达水平,并与20例健康者(对照组)比较。结果初治亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于对照组和完全缓解亚组(P<0.05);复发亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于完全缓解组(P<0.05);复发亚组与初治亚组比较及完全缓解亚组与对照组比较,LIF基因mRNA阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);LIF基因表达率在急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者间无显著性差异(P>0.05)。结论 LIF基因表达水平与AL患者病情变化密切相关。检测AL患者LIF基因表达情况,为AL患者检测病情、疗效评价、指导临床用药和预后判断,提供了一定的理论依据。     

高白细胞性急性白血病临床特征和免疫表型研究

目的探讨高白细胞性急性白血病的临床特征及免疫表型特点。方法采用流式细胞术对48例高白细胞性白血病(HLAL)和189例非高白细胞性白血病(NHLA)患者进行免疫表型检测,并对结果及临床特征进行分析。结果 HLAL与NHLAL比较,患者起病急,进展快,完全缓解(CR)率低(P<0.05),髓外浸润明显,骨髓增生活跃(P<0.05)。高白细胞性急性淋巴细胞白血病(HLALL)可以同时表达不同系列的抗原。HLALL、高白细胞性急性髓系白血病(HLAML)、非高白细胞性急性淋巴细胞白血病(NHLALL)与非高白细胞性急性髓系白血病(NHLAML)4组CD7抗原表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。HLAML和NHLAML,髓系抗原表达阳性率较高的均为CD33和CD13。结论 HLAL与NHLAL相比进展较快,骨髓增生更为活跃,预后不良。急性淋巴细胞白血病(ALL)的白血病细胞异质性更高,尤其是HLALL。CD7系列特异性不明显,CD33和CD13作为髓系的特异性抗原较为可靠。     

米托蒽醌联合阿糖胞苷或长春新碱疗法对急性白血病的临床疗效

目的探讨米托蒽醌联合阿糖胞苷或长春新碱疗法对急性白血病(AL)的临床治疗效果。方法选取2010年1月至2014年6月在我院接受治疗的AL患者100例为研究对象,按照是否使用米托蒽醌治疗分为观察组和对照组,观察组(60例)采用米托蒽醌联合阿糖胞苷(MA)疗法或米托蒽醌联合长春新碱(MVP)疗法进行治疗,对照组(40例)采用柔红霉素联合阿糖胞苷(DA)疗法或柔红霉素联合长春新碱(DVP)疗法进行治疗,对比两组患者的临床治疗效果。结果对两组不同类型AL的治疗效果进行比较,观察组急性淋巴细胞白血病(ALL)患者治疗总有效率显著高于对照组ALL患者(91.67%vs 61.11%,P<0.05);观察组急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者治疗总有效率显著高于对照组ALL患者(94.44%vs 40.91%,P<0.05)。观察组骨髓抑制发生率明显高于对照组(93.3%vs 70.00%,P<0.05);非造血系统毒副作用组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论采用米托蒽醌联合阿糖胞苷或长春新碱化疗方案治疗急性白血病,疗效显著,能有效促进骨髓造血恢复。     

急性白血病患者血清及脑脊液中基质细胞衍生因子-1α的检测意义

目的探讨急性白血病(AL)患者血清及脑脊液(CSF)基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的表达水平及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测初诊、未治和经标准方案化疗2个疗程后的56例AL患者以及10例同期颅脑外伤患者(对照组)的血清及CSF中SDF-1α的水平。结果初诊未治时,急性淋巴细胞白血病(ALL)组、急性髓细胞白血病(AML)组、中枢神经系统白血病(CNSL)组和非中枢神经系统白血病(N-CNSL)组血清、CSF中SDF-1α浓度均明显高于对照组(P<0.01),且ALL组明显高于AML组(P<0.01),CNSL组明显高于N-CNSL组(P<0.01)。经标准方案化疗2个疗程后与治疗前比较,ALL组和AML组血清、CSF中SDF-1α水平均明显降低(P<0.01)。AL患者经标准方案化疗2个疗程后未缓解(NR)组血清、CSF中SDF-1α浓度明显高于完全缓解(CR)组(P<0.01)。经标准化疗方案治疗2个疗程后,CNSL组血清、CSF中SDF-1α浓度明显高于N-CNSL组(P<0.01)。结论 SDF-1α可作为AL特别是CNSL患者的病情检测指标,有助于判断病情发展、估计预后,其表达与AL的分型可能具有一定相关性。     

血液病患者血及骨髓涂片中微小病毒B19的检测

目的 :用聚合酶链式反应 (PCR)技术检测白血病患者骨髓及血涂片中微小病毒 B19- DNA,从而了解白血病患者 B19的感染情况。方法 :收集临床已确诊的白血病患者的骨髓及血涂片标本 ,其中 ,骨髓涂片标本 43例 (急性淋巴细胞白血病 17例 ,急性非淋巴细胞白血病 18例 ,混合白血病 2例 ,慢性粒细胞性白血病 6例 ) ,血涂片 30例 (急性淋巴细胞白血病 12例 ,急性非淋巴细胞白血病 14例 ,慢性白血病 4例 ) ,正常体检人员血涂片 30例。用本文建立的PCR及限制性内切酶酶切检测的方法检测所收集标本的 B19- DNA进行病例对照研究。结果 :骨髓涂片和血涂片之间 B19的检出率无统计学差异 (P>0 .0 5 ) ,但是二者与正常对照组相比均有统计学差异 ,分别为 P<0 .0 0 5和 P=0 .0 5。急性淋巴细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病和慢性白血病 B19的检出率之间无统计学差异 (P>0 .0 5 )。结论 :研究显示白血病患者由于化疗及免疫功能低下 ,易感染 B19病毒 ,病毒感染后易诱发骨髓造血功能低下。     

MAOP方案治疗初治成人急性淋巴细胞白血病的疗效分析

目的:探讨MAOP方案治疗初治成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的疗效及特点。方法:比较分别用MAOP方案和DOLP方案治疗的36例和32例初治ALL的缓解率及白细胞和血小板减少情况。结果:MAOP方案组29例达完全缓解(CR率为80.6%),2例达部分缓解(PR率为5.6%);总有效率为86.1%。该化疗方案的不良反应主要表现为不同程度的骨髓抑制、消化道症状以及轻度肝功能异常等,无严重不可逆的脏器功能损害发生。与DOLP方案组比较,完全缓解率差异无统计学意义(P>0.05),但在白细胞和血小板减少平均持续时间方面要短(P<0.05)。结论:MAOP方案诱导治疗初治成人急性淋巴细胞白血病,具有缓解率高、骨髓抑制时间短、患者耐受性好等优点,可作为诱导缓解成人急性淋巴细胞白血病的备选方案之一。     

抗凋亡蛋白Livin在急性白血病中的表达

目的研究Livin在急性白血病中的表达,探讨其临床意义。方法采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例急性白血病(AL)患者(AL组)LivinmRNA的表达水平,其中初治患者16例(初治亚组)、复发患者11例(复发亚组)、完全缓解患者13例(缓解亚组)。另选10例健康人(对照组)的标本作正常对照。结果初治亚组中LivinmRNA的表达较对照组明显升高(P<0.05),治疗缓解后的表达水平下降(P<0.05),复发时又再次升高;初治亚组Livin阳性的患者缓解率(14.3%)低于表达阴性的患者(77.8%)(P<0.05)。LivinmRNA的表达与AL患者性别、年龄无关(P>0.05)。结论 Livin基因的过度表达参与了AL的发病,并且是AL复发的高危因素。Livin基因的高表达是判断AL预后不良的指标之一。     

SIRT1在贲门癌中的表达及临床病理学意义研究

目的研究SIRT1表达与责门癌临床病理学间的关系及对预后的影响。方法应用组织芯片技术和免疫组化方法检测176例贲门癌组织和32例正常贵门组织中SIRT1、p53、Ki67蛋白的表达情况。结果SIRT1在贲门癌中的阳性表达率高于正常贲门中的阳性表达率（P〈0．01）;176例贲门癌中,SIRT1在淋巴结有转移组中的表达高于淋巴结无转移组（P〈0．01）;且SIRT1表达与贲门癌TNM分期呈正相关（P〈0.05）。SIRT1阳性组的Ki67蛋白水平高于SIRT1阴性组（P〈0．05）。其中90例有随访资料的贲门癌病例中,SIRT1阳性患者的3年生存率及平均生存时间,低于SIRT1阴性表达患者（P〈0．05）。结论SIRT1在贵门癌组织中存在过表达。与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤增殖状态以及预后相关,可能成为判定贵门癌恶性程度及评估预后的生物学指标。     

MMP-9/TIMP-1与肝癌侵袭转移及病毒抗原表达的相关性研究

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂-1(TIMP-1)在人肝癌及癌旁组织中的表达和肝癌生物学行为及病毒抗原表达之间的关系。方法:应用免疫组织化学法(SP)研究40例肝癌及癌旁组织中MMP-9、TIMP-1和HBsAg、HCV抗原的表达。结果:MMP-9在肝癌和癌旁组织表达阳性率分别为70.25%和75%,癌组织明显减低(P<0.01)。TIMP-1在肝癌组织和癌旁组织中的表达阳性率分别为57.5%和62.5%,肝癌中的表达较癌旁肝组织表达减低,但差异无显著性。转移组癌及癌旁组织MMP-9的表达显著高于无转移组(P<0.05);而TIMP-1则明显低于无转移组(P<0.05)。肝癌、癌旁组织MMP-9、TIMP-1表达随着无病毒感染、单一病毒感染、双重感染分组而增高,且MMP-9表达与病毒抗原表达明显相关(P<0.05)。HBsAg、HCV虽可在癌组织及癌旁组织表达,但有一定差异:HBsAg主要在癌旁组织表达(70%),高于癌组织表达(27.5%);而HCV在癌组织表达(27.5%)与癌旁组织表达(30%)水平相当。结论:MMP-9、TIMP-1在肝癌及癌旁组织中的表达明显增高,可能对于判断肝癌的侵润、转移有重要价值;HBV、HCV感染可能与MMP-9表达增加有关。     

肥胖症患者脂肪组织中的 SIRT1 mRNA 和蛋白 表达水平及临床意义

目的 探讨肥胖症患者脂肪组织中的沉默信息调节因子 1 （SIRT1）mRNA 和蛋白表达水平及其在肥胖症 治疗中的临床意义。方法 选取接受肥胖治疗的患者 105 例, 以体质量指数 （BMI） 分为肥胖症组 （BMI≥23 kg/m2） 和 对照组 （18.5 kg/m2≤BMI＜23 kg/m2）; 取 2 组患者腹膜脂肪组织。采用实时荧光定量 PCR 法检测 2 组患者脂肪组织 SIRT1 mRNA 表达水平; 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测脂肪组织 SIRT1 的蛋白表达水平。并分析 2 组 SIRT1 蛋白表达水平与 BMI、 总胆固醇（TC）、 三酰甘油（TG）、 空腹血糖（FPG）、 空腹胰岛素（FINS）以及胰岛素抵抗指数 （HOMA-IR） 的相关性。结果 肥胖症组 SIRT1 mRNA 和蛋白表达水平均低于对照组 （P<0.05）。肥胖症组脂肪组织 中 TC、 TG、 FPG、 FINS 及 HOMA-IR 均高于对照组（P＜0.05）。SIRT1 的蛋白表达水平与总 TC、 TG、 FPG、 FINS 及 HOMA-IR 呈负相关 （r 分别为-0.391、 -0.941、 -0.184、 -0.215 及-0.990, 均 P＜0.05）。结论 肥胖症患者腹膜脂肪组 织中 SIRT1 mRNA 和蛋白表达水平较非肥胖患者均明显下降, 且 SIRT1 蛋白表达水平与肥胖相关指标呈相关性, 对 临床治疗肥胖症具有一定的指导作用。     

EGCG通过调控DNA结合蛋白Ku70促进肺癌细胞凋亡

目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯[（-）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对人肺腺癌细胞株的凋亡诱导作用,探讨Ku70在EGCG促肺癌细胞凋亡中的作用机制。方法 构建pSliencer 4.1-CMV-shKu70质粒干扰Ku70的表达,建立细胞系;MTT法和Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡;Western blot法检测Bax、caspase-3（17 kDa）、Ku70蛋白的表达;免疫共沉淀法检测Ku70和Bax之间的相互作用。结果 EGCG可明显抑制A549的增殖（P<0.01）,并诱导其凋亡（P<0.05）,上调Bax、caspase-3表达,下调Ku70表达。抑制Ku70的表达后,EGCG对A549细胞的抑制增殖和促进凋亡作用更加明显,进一步显著上调caspase-3的表达（P<0.05）,但是Bax的表达无明显变化;同时EGCG可以减弱Ku70-Bax之间的相互作用（P<0.05）。结论 EGCG可抑制人肺腺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,其机制与抑制Ku70的表达,抑制Ku70-Bax之间的相互作用,激活Bax,启动caspase级联反应有关。     

老年急性白血病43例临床特征分析

目的分析老年人急性白血病（AL）的临床特点及治疗效果。方法回顾分析43例60岁以上老年AL患者的临床资料,并与同期住院的132例中青年AL患者进行比较。结果老年急性髓细胞白血病（AML）：急性淋巴细胞白血病（ALL）为4.38∶1。老年AL患者合并有基础疾病者为86.0%、治疗相关死亡率（33.3%）均高于中青年组（P〈0.01）;骨髓增生低下发生率（14.0%）、既往骨髓增生异常综合征（MDS）病史率（9.3%）均高于中青年组（P〈0.05）;完全缓解（CR）率（21.2%）、1年生存率（27.3%）均低于中青年组（P〈0.01）。结论老年AL有其临床特点,目前尚无早期诊断治疗的有效策略,应引起重视。     

不同浓度米诺环素对人胶质瘤细胞增殖、自噬、凋亡的影响及其机制

摘要：目的 探讨不同浓度米诺环素对人类胶质瘤 U87 和 LN229 细胞增殖及凋亡的影响和作用机制。方法 （1）U87和LN229细胞设对照组（DMSO处理），5 μmol/L米诺环素组和10 μmol/L米诺环素组，分组处理72 h 后采用 MTT法检测细胞增殖水平，免疫荧光标记检测细胞自噬蛋白微管相关蛋白l轻链3B亚基（LC3B）表达水平，Western blot法检测细胞自噬和凋亡相关蛋白的表达变化。（2）构建沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）-shRNA载体，观察 敲低SIRT1表达后，不同浓度米诺环素对U87和LN229细胞自噬的影响。结果 （1）与对照组相比，5 μmol/L和10 μmol/L米诺环素组细胞增殖能力下降，免疫荧光标记显示胞浆内自噬标记蛋白LC3B的表达增多，Western blot结果 显示哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）水平显著降低，自噬基因相关蛋白5（Atg5）、磷酸化AMP依赖的蛋白激酶α亚 基（p-AMPKα）、SIRT1水平显著增加（P＜0.05）。与对照组相比，10 μmol/L米诺环素组B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、磷 酸化 p70 核糖体蛋白 S6 激酶（p-p70s6k）水平显著降低，活化形式的 Caspase-3（Cleaved caspase-3）水平显著增加 （P＜0.05），而5 μmol/L米诺环素组除Cleaved Caspase-3表达水平下降外其他凋亡相关蛋白水平未见显著变化（P＞ 0.05）。（2）敲低SIRT1表达后，shSIRT1组mTOR和LC3B表达水平较对照组明显下降；而经过米诺环素处理后，mTOR 的表达出现明显升高，而LC3B表达水平仅部分恢复。结论 5、10 μmol/L的米诺环素均能有效抑制人类胶质瘤U87 和LN229细胞的生长，其机制可能与AMPK/SIRT1通路诱导细胞自噬和p70s6k/Bcl-2通路诱导细胞凋亡有关。     

胃癌生存素PCNA基因蛋白的表达及其相关性分析

目的：探讨胃癌组织中生存素基因蛋白表达与胃癌生物学行为及PCNA蛋白表达的相关性。方法：应用免疫组化SP法检测51例胃癌组织、47例非癌胃黏膜组织中生存素和PCNA基因蛋白的表达。结果：生存素和PCNA蛋白在胃癌组织与非癌胃黏膜组织中表达的阳性率差异有显著性（P〈0.05）。生存素蛋白表达与胃癌淋巴结转移、临床分期与浸润深度有关（P〈0.05）,而PCNA蛋白表达与胃癌病理分级和淋巴结转移有关（P〈0.05）。生存素表达与PCNA表达呈正相关。结论：生存素和PCNA基因蛋白在胃癌的发生、发展中发挥重要作用,二者的检测对胃癌恶性度的判定、预后和进一步治疗提供有效的依据。     

性激素受体和基质金属蛋白酶在子宫内膜异位症的表达

目的检测雌、雄激素受体（ER、PR）和MMP-1在子宫内膜异位症（EMS）患者的异位内膜和在位内膜中表达,探讨三者在子宫内膜内异症发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学PV-9000法分别检测ER、PR和MMP-1的表达。研究组：84例EMS的异位内膜和44例在位内膜;对照组：32例子宫肌瘤者正常子宫内膜。结果异位内膜组织中ER、PR的表达明显低于正常内膜组织和在位内膜组织（P〈0.01、P〈0.05）,而异位内膜组织中MMP-1的表达强度明显高于正常内膜组织（P〈0.05）;在位内膜组织ER、PR表达却明显高于正常内膜组织（P〈0.05）。结论ER、PR和MMP-1在异位内膜和EMS在位内膜中的异常表达,可能与EMS的发生发展有关。     

E-cadherin和HSP70在肝细胞癌中的表达

目的:探讨E-cadherin和HSP70在不同分化程度HCC中的表达情况以及两者的相关性。方法:采用免疫组织化学方法,检测41例肝癌组织及5例癌旁正常肝脏组织中E-cadherin和HSP70的表达情况。结果:E-cadherin在正常肝脏组织中呈高表达,而在HCC中表达降低且与分化程度有关,部分低分化的HCC组织中表达缺失(P<0.05);HSP70在HCC中表达升高,与正常组比较差异有显著性,且与分化程度有关。相关性分析发现E-cadherin和HSP70在HCC中的表达成负相关(r=-0.322,P<0.05)。结论:HCC中,E-cadherin表达降低,HSP70表达升高,提示两者在HCC侵袭和转移中存在一定的相关性。     

WT1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在急性白血病(AL)患者中的表达情况及其临床意义.方法:采用实时定量RT-PCR方法动态检测60例初治AL患者WT1基因的表达,评估AL患者的缓解率、复发率及完全缓解后微小残留病(MRD)检测.结果:初治AML各亚型中M3基因表达阳性率最高,为82.4%,其WT1基因中位表达水平最高,达1579.6,显著高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05);AL患者中,WT1基因表达阳性组CR率显著低于阴性组,阳性组缓解后半年内复发率显著高于阴性组,差异均有统计学意义(均P<0.05),初治组、复发组及未缓解组AL患者WT1基因中位表达水平明显高于完全缓解组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:WT1基因在AL患者骨髓细胞中表达水平可作为临床评估疾病的发生、发展、判断预后及检测MRD的指标.