钒酸氧化法在测定血清总胆红素及直接胆红素值中的应用

[目的 ]对钒酸氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素值的适用性进行评价 .[方法 ]采用钒酸氧化法测定血清总胆红素及直接胆红素值 ,并与重氮试剂法进行比较 ,同时对钒酸氧化法的重复性试验、线性试验、干扰试验以及回收试验进行分析总结 .[结果 ]钒酸氧化法与重氮试剂法有很好的相关性 ,测定总胆红素的线性可达 6 84 0 μmol/L ,直接胆红素可达 340 0 μmol/L ;总胆红素日内变异为0 2 0 %～ 1 2 6 % ,直接胆红素日内变异为 0 5 2 %～ 1 0 6 % ;总胆红素和直接胆红素的日间变异各为1 13%～ 2 10 % ,1 4 3%～ 2 10 % ;总胆红素及直接胆红素的平均回收率各为 10 2 74 % ,10 1 71% ;当稀释后的血红蛋白含量低于 7 9g/L时有轻微的干扰 .[结论 ]钒酸氧化法适用于血清总胆红素和直接胆红素的日常测定     

血清总胆红素、直接胆红素的钒酸氧化法测定

目的 :对钒酸氧化法和改良 J- G法测定血清胆红素进行方法学评价。方法 :对钒酸氧化法测定血清中的总(直接 )胆红素的重复性试验、线性试验、干扰试验、回收试验进行评价。结果 :钒酸氧化法和改良 J- G法有很好的相关性(Y1 =0 .99X+1.39,r=0 .98;Y2 =1.36 X+3.0 9,r=0 .96 ) ;测定总 (直接 )胆红素的线性分别达到 6 84 μmol/ L 和 342μmol/ L;测定总 (直接 )胆红素天内重复性变异平均分别为 1.80 %和 2 .13% ,天间重复性变异分别为 2 .5 6 %和 2 .79% ;总 (直接 )胆红素的回收率平均分别为 99.6 %和 99.2 % ;溶血、脂血、低浓度维生素 C(小于 0 .3g/ L)对测定无明显干扰。结论 :钒酸氧化法是一种准确、灵敏、适用于实际工作的胆红素测定方法。     

钒酸氧化法和重氮法测定溶血、黄疸、乳糜血标本胆红素的结果评价

目的 用钒酸氧化法和重氮法测定溶血、黄疸、乳糜血标本进行胆红素测定，评价两种方法的抗干扰能力。方法 采用WAKO钒酸氧化法测定试剂盒测定血清中的总胆红素和直接胆红素与重氮法测定血清胆红素方法进行比较，结果做统计学处理。结果 钒酸氧化法对溶血、黄疸、乳糜血标本测定结果与重氮法测定胆红素结构有显著性差异（P〉0．01）。结论 钒酸氧化法是一种准确、灵敏的测定胆红素方法，该法操作简单，基本上不受溶血、黄疸、乳糜血的干扰，且试剂稳定。     

钒酸氧化法和重氮法检测胆红素的方法学评价

目的:寻找一种精密、准确、使用方便且特异的检测血清总(直接)胆红素的方法.方法:对钒酸氧化法和重氮法进行方法学评价,包括精密度、线性范围、准确度、方法比较和干扰因素.结果:两种方法检测总(直接)胆红素的精密度和准确度均符合要求,两种方法检测结果有良好的相关性(TBIL:r=0.997,DBIL:r=0.987,均符合r≥0.975)同时有极显著性差异(P<0.01),钒酸氧化法检测直接胆红素的线性范围略窄于重氮法,但是它的精密度和准确度略优于重氮法,而且抗血红蛋白和三酰甘油干扰的能力明显强于重氮法.结论:钒酸氧化法是一种精密、准确使用方便且特异的、值得推广的、适用于血清总胆红素和直接胆红素日常测定的方法.     

血清胆红素3种测定方法的比较

目的 选择测定血清胆红家的最佳方法。方法 用重氮酸盐法、钒酸盐氧化法、胆红素氧化酶法对血清总胆红素(TBI)和直接胆红素(DBI)分别进行测定并比较。结果 3种方法重复性试验批内变异和批间变异分别小于3．0％和5．0％；回收率均小于5．0％；重氮法和钒酸盐法测定TBI的线性范围为0-700μmol／L，氧化酶法为0-550μmol/L；3种方法测定DDI的线性范围为0-400μmol/L；3种方法测定TBI、DBI，每2种方法之间具有高度相关性。结论 钒酸盐法与氧化酶法、重氮酸盐法相比，测定TBI和DBI具有检测范围大，抗干扰能力强等特点，更适合于临床常规检测。     

钒酸氧化法测定血清总胆红素评价

目的 探讨溶血、脂血对钒酸氧化法测定血清胆红素的干扰影响.方法 用钒酸氧化法测定血清总胆红素,并与二氯苯胺法和改良J-G法测定结果比较.结果 钒酸氧化法与二氯苯胺法和改良J-G法有良好的相关性(Y1=0.98X-0.32,r=0.99;Y 2=0.97X+3.26,r=0.95).结论 钒酸氧化法测定血清胆红素简单、快速、稳定,线性范围宽,能抵抗溶血、脂血干扰.     

钒酸氧化法与重氮法胆红素测定的动力学研究

目的研究采用不同方法进行胆红素测定时的反应动力学。方法采用BECKMAN CX7全自动生化分析仪测定不同胆红素测定试剂的反应动力学曲线。结果用钒酸氧化法进行直接胆红素测定和用重氮法(二甲亚砜作增溶剂)进行总胆红素测定时,反应在1min内完成;用钒酸氧化法(表面活性剂作增客剂)进行总胆红素测定时,反应约在5min完成;用重氮法进行直接胆红素测定时,反应没有明显终点。结论直接胆红素测定时,部分间接胆红素参与重氮化反应,而不参与钒酸氧化反应;在总胆红素测定时,二甲亚砜的增溶效果优于表面活性剂。     

对国产钒酸氧化法试剂测定血清胆红素方法的评价

目的:用国产钒酸氧化法试剂测定血清胆红素并对其方法进行了评价。结果:批内总胆红素高低值分别为CV=1.78%和1.95%,直接胆红素高低值分别为CV=1.85%和2.3%。总胆红素回收率101.6%、直接胆红素回收率103.3%。总胆红素:Y(计)=0.996X(测)-1.15,r=0.994;直接胆红素:Y(计)=1.003X(测)-0.52,r=0.996。血红蛋白达到15 g/L有极轻微干扰。     

硝酸氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素

测定血清总和直接胆红素虽已有不少方法 ,但重氮反应法和改良Ｊ Ｇ法的试剂的稳定性不够 ,胆红素氧化酶法的酶试剂成本昂贵 ,而钒酸氧化法中的钒酸 (强氧化剂 )对仪器存在潜在的携带污染。我们发展的硝酸氧化法 ,其优点是硝酸钠终浓度仅为ｌｍ ｍｏｌ/Ｌ ,对仪器的携带污染甚微 ,试剂稳定性好 ,适合各种类型的自动分析仪。现报告如下。1　原理　　硝酸是一种化学氧化剂 ,在ｐＨ为2 .9的柠檬酸缓冲液条件下 ,总和直接胆红素被氧化为胆绿素 ,根据胆红素在 4 5 0ｎｍ波长处加入硝酸钠前后特有黄色吸光度的下降吸光率 ,与标准比较推算出胆红素浓…     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的方法学评价

目的：寻找一种更简便，准确的测定血清胆红素的方法。方法：通过方法学试验对钒酸盐氧化法测定血清胆红素进行评价。结果：重复性试验批间CV值为1．3％；线性试验表明总胆红素在581．2μmol/L以下线性良好；回收试验得到回收率为101．1％，比较试验，与重氮法比较相关系数为0．998；以及干扰试验表明溶血、乳糜对本测定不产生干扰，以上试验均较理想。结论：钒酸盐氧化法测定血清胆红素是较理想的方法。     

SCR氧化法测定血清胆红素的质量评价

目的 :评价 SCR氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 :测定精密性、准确性、抗干扰性及与改良 J- G法的相关性。结果 :总、直接胆红素的精密度分别为批内 CV 0 .76 %与 0 .86 % ,日间 CV为 1.0 0 %和 1.2 6 % ;平均回收率为总胆红素 10 0 .4 % ,直接胆红素 98.6 % ;与改良 J- G法的相关性为 :总胆红素 Y(SCR) =0 .96 3X(改良 J- G) +0 .16 6 ,r=0 .998,直接胆红素 :Y(SCR) =1.0 0 3X(改良 J- G) - 0 .0 90 ,r=0 .998;血红蛋白浓度和甘油三酯在 5g/ L和 8.0 0 m mol/ L以下无干扰。结论 :该法准确、稳定、简单、快速 ,完全可以满足临床应用。     

钒酸盐氧化法与干化学法测定总胆红素的方法学比较

目的:分析钒酸盐氧化法与干化学法测定血清(浆)总胆红素结果的相关性,并对两法进行偏倚评估,建立仪器间的校正方法.方法:依据美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件方案,每天随机从临床样本中抽取8份,分别用两种方法进行总胆红素的测定,共测定5d,应用SPSS软件对所测数据进行统计.结果:以钒酸法为对比方法(X),对干化学法(Y)进行评估,两者测定总胆红素的回归方程为Y=1.006X 0.746,相关系数r2=0.999.总胆红素浓度为34.2μmol/L、171μmol/L、342μmol/L时,干化学法的相对偏倚分别为2.78%、1.04%、0.82%.结论:两种方法测定血清(浆)总胆红素具有良好的相关性,其相对预期偏倚随总胆红素浓度增高而降低.     

亚硝酸钠氧化法测定血清胆红素的质量评价

目的:评价亚硝酸钠氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法:测定精密性、准确性、抗干扰性及与改良J-G法的相关性。结果:总、直接胆红素的精密度分别为批内CV0.94%与0.98%,日间CV为1.1%和1.24%;平均回收率为总胆红素102.2%,直接胆红素98.1%;与改良J-G法的相关性为:总胆红素Y(亚硝酸钠)=0.959X(改良J-G) +0.186,r=0.992,直接胆红素:Y(亚硝酸钠)=1.006X(改良J-G)-0.091.r=0.991;血红蛋白浓度和甘油三酯在4 g/L和4.00mmol/L以下无干扰。结论:该法准确、稳定、简单、快速,完全可以满足临床应用。     

用NCCLS-EP方案评价KHC3法的总胆红素检测性能

目的通过美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的EP系列方案对KHC3法在血清总胆红素检测中的总体性能进行评价,了解该方法能否满足临床需要。方法对KHC3法的精密度、线性、抗干扰能力、回收率进行测定,评价与改良J—G法的相关性。结果高低水平的平均精密度分别为CV批内=1．97％、CV批间=2．93％、CV日间=3．33％、CV总=3．88％。在（15—424）μmol／L的检测范围内,该方法的线性良好。当血清标本中的肝素≥625U／L、TG≥4．8mmol／L、Hb≥1．9g／L、VitC≥0．25g／L、EDTA—K2≥0．4g／L时,会影响测定结果。葡萄糖、枸橼酸钠对高、低值血清的TB测定均无干扰。KHC3法（Y）和改良J-G法（X）间的总胆红素测定值有很好的相关性（Y=0．861X＋2．293,r=0．999）。结论KHC3法是测定血清总胆红素浓度的一种良好方法,其灵敏度和特异性能满足常规医学实验室检测血清总胆红素的要求。     

各种胆红素对血清甘油三酯浓度测定的影响

目的 :探讨各种胆红素对过氧化物酶偶联Trinder反应的甘油三酯氧化酶测定方法的影响。方法 :配制含有不同浓度的未结合胆红素 (Bu)、结合胆红素 (Bc)、δ胆红素 (δ Bil)的血清 ,通过测定甘油三酯浓度分析不同胆红素对甘油三酯氧化酶方法的干扰。结果 :来自Bc的干扰要比Bu大得多 ,当浓度为 4 0 0 μmol/L时 ,回收率只有 5 6 .0 %;Bu的干扰总的来说比较轻 ,当浓度 4 0 0 μmol/L时 ,回收率仍达 87.1 %;δ Bil的干扰最轻 ,随着血清中δ Bil浓度的提高 ,对甘油三酯测定影响基本稳定 ,回收率一直保持在 93.1 %以上。结论 :Bu、Bc、δ Bil对甘油三酯氧化酶测定方法影响程度不同 ,在实际工作中应予以重视。     

酶重氮法测定血清δ胆红素

提要黄疸血清中的部分胆红素和白蛋白共价结合形成δ胆红素(B_6)。为了测定血清中这个色素成分,我们建立了一种酶重氮法。该法测定B_6具有快速、简便、灵敏度高、准确度及重复性好等优点。对平均浓度为0.89mg/dl,2.98mg/dl和7.80mg/dl的Bδ作重复性试验,批内变异系数3.4％,2,8％和3.0％,日间变异系数为5.3％,3.7％和4.1％。在两个患者血清中(Bδ分别为0.83mg/dl和2.40mg/dl)加入已知量的Bδ平均回收率为95％和94％。与简易树脂吸附法相比较,相关系数r=0.9988,直线回归方程Y(酶重氮法)=1.02x(简易树脂吸附法)—0.02。     

胆红质的反应浓度因素在双波长全自动生化分析仪中的作用

胆红质的测定在临床具有重要的意义，但由于胆红质不稳定，胆红质的标准液是造成测定误差的一个重要原因。且标准液昂贵，又不易保存，为了解决这一问题，把胆红质标准用双波长全自动生化分析仪连续测定，通过反应吸光度和标准液含量求出反应浓度因素。在同一批试剂中，用浓度因素代替标准液进行检测，经精密度和回收试验，标准差为０．６８，变异系数为０．４９％，回收率均值为９９％。获得满意结果。     

KHC_3法测定胆红素试剂的研制

目的:探讨建立一种新型KHC3法测定血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的新方法。方法:采用化学氧化法测定血清胆红素反应到达终点时的吸光度,与标准品相比较,求得标本中总胆红素和直接胆红素的浓度。结果:精密度试验TBIL批内高低浓度CV值为0.78%、1.44%;DBIL为0.96%、1.85%。TBIL批间为3.36%、2.66%及3.79%;DBIL批间为4.03%、3.25%及2.96%。线性范围:TBIL可达515μmol/L;DBIL可达171μmol/L;总胆回收率98.4%～105.3%,平均102.1%;DBIL回收率为98.5%～101.5%,平均为99.7%。与其他相关试剂比较TBILγ=0.9954～0.9994;DBILγ=0.9950～0.9985。溶血、脂浊和维生素C干扰试验表明:标本中Hb小于10g/L,TG小于7.55mmol/L,VitC小于0.1g/L,对TBIL和DBIL的测定基本无干扰。结论:本试剂方法简便,结果准确、线性范围宽,试剂稳定,价格低廉,完全可用于检测临床标本。     

胆红素氧化酶及其变异体在胆红素血症评价中的应用

目的 探讨胆红素氧化酶中配位氨基酸对保持酶活性的重要性和酶促反应的动力学,并评价胆红素氧化酶突变体能否作为一种更好的高胆红素血症的诊断试剂。方法 胆红素氧化酶突变体I402G和C457S通过聚合酶链反应获得,并经氨基酸序列测定加以证实。钌搀杂的突变体C457S通过变异体与钌配合物的直接反应得到。研究了重组胆红素氧化酶及其变异体的光谱学性质,以及重组胆红素氧化酶和变异体I402G的酶促反应的动力学。结果 变异体I402G和C457S被成功的表达和纯化。变异体I402G表现出较低的活性(1.67U/mg),C457S则完全失去了活性(0U/mg),但是钌搀杂的突变体C457S表现出较高的活性(5.50和6.42U/mg)。光谱学实验结果表明I402G突变体在较低的pH时第一类铜呈+1价态,即还原态;突变体C457S中失去第一类铜,使得突变体无法保持完整的活性中心,从而失去了酶活性。酶促反应的动力学实验显示重组胆红素氧化酶和变异体I402G动力学参数k_cat分别为235.8min^-1和6.9min^-1,说明重组胆红素氧化酶具有很高的催化能力。结论 配位的氨基酸对保持重组胆红素氧化酶及其变异体活性中心的完整性和酶活性具有重要的意义。重组胆红素氧化酶远比突变体I402G和C457S的活性高,说明突变体I402G和C457S不适合作为诊断试剂。钌搀杂有助于在突变体C457S中形成新的完整的活性中心,从而产生酶活性。