云南个旧和宣威地区肺癌p53突变检测研究

目的　云南个旧及宣威地区是云南省肺癌的两大点状高发区 ,个旧以矿工为高发人群 ,宣威以农民为高发 ,该两地区肺癌发生的病因已初步阐明 ,本研究旨在深入探讨其发病的分子生物学基础。方法　对 2 6例个旧矿工肺癌患者 ,15例宣威农民肺癌患者 ,应用聚合酶链反应 -单链构象多态性法研究 p5 3第 5至第 8外显子突变 ,并对有突变的个体进行测序。结果　发现云锡矿工肺癌患者中有 13例、宣威农民肺癌患者中有 4例发生 p5 3突变 ,应用 DNA测序 ,发现云锡矿工肺癌中有 1例于第 135位密码子发生突变 ,由 GCC→ GTC,导致氨基酸改变 ,由丙氨酸→缬氨酸 (Ala→ Val) ,宣威农民肺癌患者中有 1例于 2 47位密码子突变 ,由 AAC→ TTC,导致氨基酸发生改变 ,由天冬酰氨→苯丙氨酸 (Asn→ Phe)。结论　 p5 3突变在云锡矿工肺癌和宣威农民肺癌中较常发生 ,并发现两例新的突变位点。 p5 3突变与病人的年龄、性别、坑龄及组织学分类无明显联系     

云南个旧和宣威地区肺癌p53突变检测研究

目的 云南个旧与及宣威地区是云南省肺癌的两大点状高发区,个旧以 矿工为高发人群,宣威以农民为高发,该两地区肺癌发生的病因已初步阐明,本研究旨在深入探讨其发病的分子生物学基础。方法 对26例个旧矿工肺癌患者,15例宣威农民肺癌患者,应用聚合酶链反应－单链构象多态性法研究p53第5至第8外显子突变,并对有突变的个体进行测序。结果 发现云锡矿工肺癌患者中有13例、宣威农民肺癌患者中有4例发生p53突变,应用DNA测序,发现云锡矿工肺癌中有1例于第135位密码子发生突变,由GCC→GTC,导致氨基酸改变,由丙氨酸→缬氨酸（Ala-Val),宣威农民肺癌患者中有1例于247位密码子突变,由AAC→TTC,导致氨基酸发生改变,由天冬酰氨→苯丙氨酸（Asn-Phe)。结论 p53突变在云锡矿工肺癌和宣威农民肺癌中较常发生,并发现两例新的突变位点。p53突变与病人的年龄、性别、坑龄及组织学分类无明显联系。     

乳腺癌P53基因点突变的检测

目的：探讨Ｐ５３基因点突变检测在乳腺癌预后判断中的意义。方法：应用聚合酶链反应———单链构像多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法对３５例乳腺癌患者的Ｐ５３基因位点的点突变进行检测。结果：３例出现点突变，经ＤＮＡ序列分析，１例为第１３６密码子ＣＡＡ（Ｇｌｎ）被ＣＡＧ（Ｇｌｎ）替代，１例为第２２７密码子ＴＣＴ（Ｓｅｒ）被ＧＣＴ（Ａｌａ）替代，１例为第２７３密码子ＣＧＴ（Ａｒｇ）被ＣＡＴ（Ｈｉｓ）替代。结论：Ｐ５３基因突变可能是引起乳腺癌分化不良的因素之一，并可能预示着乳腺癌预后较差。     

肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ）、聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况。８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９的第三个碱基发生了ＡＧＧ／ＡｒｇＡＧＴ／Ｓｅｒ突变。以上结果提示，ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变主要以点突变为主，主要发生在密码子２４９，其突变率、突变谱和突变方式与启东等ＨＣＣ高度流行区相似     

用PCR─SSCP法检测鼻咽癌细胞株P~（53）基因点突变

用ＰＣＲ─ＳＳＣＰ法检测鼻咽癌细胞株Ｐ￣（５３）基因点突变我们经过反复摸索，用非同位素ＰＣＰ─ＳＳＣＰ方法分析了鼻咽癌细胞中Ｐ￣５３基因外显子８点突变。兹报告如下：采用并培养存在Ｐ￣５３基因外显子８第２８０密码子点突变（ＡＧＡ→ＡＣＡ）的鼻咽癌细胞株...     

骨髓增生异常综合征患者N－ras原癌基因突变的研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及直接测序法研究ＭＤＳ患者Ｎ－ｒａｓ原癌基因点突变。检测２６例（２８例次），发现Ｎ－ｒａｓ原癌基因第１外显子突变者１４例（５０％），统计表明Ｎ－ｒａｓ原癌基因突变与ＭＤＳ白血病转化及患者生存期缩短均有相关性（Ｐ＜０．０５），对预测ＲＡ、ＲＡＳ转化白血病有参考价值。对１例发现突变的标本进行直接测序证实为１２密码子第２碱基的Ｇ→Ａ转换。     

骨髓增生异常综合征患者N—ras原癌基因突变的研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及直接测序法研究ＭＤＳ患者Ｎ－ｒａｓ原癌基因点突变。检测２６例（２８例次），发现Ｎ－ｒａｓ原癌基因第１外显子突变者１４例（５０％），统计表明Ｎ－ｒａｓ原癌基因突变与ＭＤＳ白血病转化及患者自下而上期缩短均有相关性（Ｐ〈０．０５），对预测ＲＡ、ＲＡＳ转化白血病有参考价值。对１例发现突变的标本进行直接测序证实为１２密码子第２碱基的Ｇ→Ａ转换。     

云南个旧、宣威地区肺癌Bcl-2和Bax的检测研究(摘要)

目的从细胞凋亡角度研究云南个旧及宣威地区肺癌的发病机制.方法以个旧矿工肺癌57例,宣威农民肺癌36例和其他地区肺癌20例,应用免疫组化方法分别检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达,并应用图象分析系统进行定量分析.     

非小细胞肺癌P53基因突变的研究

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对３５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）肿瘤切除组织的Ｐ５３基因５￣８号外显子进行突变检测，对８号外显子同时采用ＰＣＲ－ＤＧＧＥ进行突变检测。发现ＮＳＣＬＣ中Ｐ５３突变率为６５．７％。Ｐ５３率在肿瘤细胞不同分化程度间有显著差异，低分化ＮＳＣＬＣ的Ｐ５３突变率（８９．５％）明显大于高、中分化的ＮＳＣＬＣ（３７．４），虽然有纵膈淋巴结转移的Ｐ５３突变率（７１．４％）高于无给膈转移者（５７     

非小细胞肺癌与p53基因序列分析

目的：研究非小细胞肺癌与ｐ５３基因突变的关系。方法：采用聚合酶链式瓜和ＤＮＡ双链直接测序方法对３７例非小细胞肺癌组织标本进行ｐ５３基因外显子５,６,７,８序列分析。结果：１５例突变,总突变率为４０．５４％。分别为２３７,２４３位密码子突变各１例,２８５位密码子突变２例,２７３位密码子突变的７例,另有４例标本同时存在第２５２和２５４位两个密码子突变为ＴＴＣ,这种突变方式尚未见报道。存在突变的１５例患     

NDPK在云锡矿工肺癌与富源农民肺癌中的表达

应用免疫组化ＬＳＡＢ法,比较二磷酸核苷激酶在云锡矿工肺癌和富源农民肺癌中的表达,以阐明ｎｍ２３蛋白的作用。结果：ＮＤＰＫ在云锡矿工和富源农民肺鳞癌中表达阳性率分别为５６．４％（２２／３９％）和５８．３％（７／１２）Ｐ〉０．０５）,列联系数０．１２ １）;肺腺癌中表达阳性率为６１．１％（１１／１８）和８４．２％（１６／１９）Ｐ〈０．０５）,列联系数０．４４１ ４）。在支锡矿工和富源农民肺癌无淋巴结转     

肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除术标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ），聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况，８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９     

肺癌MDM2蛋白表达与p53基因突变的关系

目的研究肺癌ＭＩＤ２蛋白表达与ｐ５３突变之间的关系。方法：用免疫组化检测１２５例肺癌ｐ５３和ＭＤＭ２蛋白表达，以聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测ｐ５３基因第５￣８外显子的突变。结果：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测阳性的５２例肺癌ＭＤＭ２阳性率为１９．２％，而阴性的７３例肺癌ＭＤＭ２蛋白阳性率为３５．６％，统计学检验显示肺癌ＭＤＭ２蛋白表达与Ｐ５３突变之间呈负相关（Ｘ＾２＝３．９８，Ｐ     

P53基因突变与肺癌预后复发转移的关系

目的 探讨Ｐ５３基因突变与肺癌病理特征、预后、复发转移的关系。方法 聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测１５５例原发肺癌手术标本中Ｐ５３基因５～８外显子突变。结果 小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）Ｐ５３突变率８０％,非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）５３．８％（７８／１４５）。９４例随访病人中,Ｐ５３阳性组一年存活率为６８．６０％,而Ｐ５３阴性组为９７．７％（Ｐ〈０．０５）。Ｐ５３突变组术后     

P21、P185、P53蛋白表达及P53基因突变与膀胱癌移行细胞生物学行为关系的研究

目的：探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为产关系。方法：采用免疫组织化学方法及分子生物学技术,检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例Ｐ５３基因突变。结果：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为６２．２％（５１例）、５８．５％（４８例）、３１．７％（２６例）。１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变,其中全部有第２８０位密码子Ｇ－Ｃ突变;３例合并有２４８密码子     

肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的５第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变     

肺癌患者P53基因突变的检测

应用多聚酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）研究技术，从分子生物学角度探讨Ｐ５３肿瘤抑制基因在肺癌中的突变情况。结果：①３６例肺癌中有１７例出现Ｐ５３基因突变，占４７％；其中鳞癌突变发生率为２９％（４／１４），腺癌为５０％（５／１０），小细胞肺癌为７３％（８／１１）；１例肺泡癌未发现突变。②突变集中在Ｐ５３基因的第５、６和７个外显子，分别有６、３和３例肺癌在相应的外显子部位发生突变。③突变类型均为插入型突变，分别插入３～６个碱基对。结论：细胞分化程度低的肺癌Ｐ５３基因突变发生率高，预后差     

变性梯度凝胶电泳和单链构象多态性分析检测肺癌p53基因8号外显子突变

目的：检测ｐ５３基因８号外显子突变。方法：分别采用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）和单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ），对３５例肺癌病人手术切除组织的ｐ５３基因８号外显子（Ｅｘｏｎ８）进行突变检测。结果：采用ＤＧＧＥ检测的突变率为２０％，而ＳＳＣＰ检测的突变率为１１％。ｐ５３基因Ｅｘｏｎ８的总突变率为２３％。结论：ＤＧＧＥ检测ｐ５３基因突变的敏感性高于ＳＳＣＰ。     

人卵巢癌P53基因的突变

目的：了解人卵巢癌中Ｐ５３基因突变的特点及其与临床分期的关系。方法：采用聚合酶链反应单链构像多态性分析及序列分析，对６０例卵巢癌组织及癌旁组织Ｐ５３基因外显子５、６、７进行了筛查。结果：所有癌旁组织均未发现突变，癌组织有９例发生了Ｐ５３基因的突变，并对其中５例进行了序列分析，证实了其突变的存在。５例测序标本中有４例发生了Ｇ∶Ｃ→Ａ∶Ｔ的转换突变。９例阳性标本分别为临床Ⅰ期２例，临床Ⅲ期６例，临床Ⅳ期１例。结论：人卵巢癌中Ｐ５３基因的突变是自发性突变的结果。Ｐ５３基因改变可能发生于卵巢癌早期，并持续存在于肿瘤发展的全过程，是卵巢癌发生发展的危险因素之一。推测２４５位密码子是我国卵巢癌患者的一个突变热点。     

肺癌MDM2蛋白表达与p53基因突变的关系

目的：研究肺癌ＭＤＭ２蛋白表达与ｐ５３突变之间的关系。方法：用免疫组化检测１２５例肺癌ｐ５３和ＭＤＭ２蛋白表达，以聚合酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）方法检测ｐ５３基因第５～８外显子的突变。结果：ＰＣＲＳＳＣＰ检测阳性的５２例肺癌ＭＤＭ２阳性率为１９．２％；而阴性的７３例肺癌ＭＤＭ２蛋白阳性率为３５．６％。统计学检验显示肺癌ＭＤＭ２蛋白表达与ｐ５３突变之间呈负相关（χ２＝３．９８，Ｐ＜０．０５）；ＭＤＭ２蛋白阳性与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、分化程度、临床分期和ｐ５３蛋白表达无显著相关性。结论：ＭＤＭ２过度表达可能在ｐ５３基因没有突变肺癌的发生过程中起重要作用