糖基化：未来可期的新型疾病标志物

糖基化是蛋白质翻译后修饰的重要形式之一,糖蛋白的糖链在细胞识别、细胞间信号传递、细胞迁移、增殖及分化中均具有重要作用,唾液酸化、岩藻糖基化及糖链分支程度与肿瘤、自身免疫性疾病等发生发展密切相关,聚糖和异常糖基化糖蛋白为疾病发生发展提供了新型生物标志物和干预靶标,并已经成为临床诊断与治疗的研究热点。     

基于凝集素芯片的蛋白质糖基化修饰检测方法

目的:建立针对组织和血清样本中蛋白质糖基化的凝集素芯片检测方法 ,并结合凝集素印迹法验证,以实现样品间糖基化修饰差异的高通量筛选。方法:采用包含91种凝集素的凝集素芯片,利用生物素标记的组织总蛋白质样品,比较实验的重复性及不同上样量的芯片实验效果。利用生物素标记的去高丰度蛋白质血清和全血清样品,比较两者芯片实验的检出情况及全血清样品不同上样量的芯片实验效果。以最优条件筛选癌组织与癌旁组织样品之间及不同疾病患者血清样品之间的糖基化修饰差异,采用凝集素印迹法验证凝集素芯片实验结果。结果:芯片重复性良好(r>0.94),组织样品在0.625~1.250μg/m L时实验效果较佳;去高丰度蛋白质血清和全血清样品以高浓度上样时(≥20μg/m L),两者检出相近。标记后的全血清样品取2μL稀释至150μL时,实验效果最佳。筛选出检测信号有差异的凝集素经凝集素印迹法验证,结果与芯片检测一致。结论:该凝集素芯片实验体系稳定、可靠,可用于筛选临床样本间的糖基化修饰差异,有助于发现疾病相关的糖蛋白生物标志物。     

血小板糖基化的研究进展

糖基化是蛋白质翻译后修饰的重要途径之一。通过调节蛋白质活性,糖基化参与细胞功能的发挥及疾病的发生发展。血小板糖蛋白具有丰富的糖萼,其糖基化在血小板生成、分化中发挥重要作用,与出血及血栓性疾病的发病机制密切相关,多个糖蛋白分子,如P选择素、C型凝集素样受体2、血小板内皮细胞黏附分子等的糖基化修饰均参与调控血小板的功能。该文主要综述了血小板糖基化在出血及血栓性疾病中的研究进展及主要检测方法。     

去唾液酸化对免疫性血小板减少症影响的研究进展

免疫性血小板减少症(ITP)中一部分病人对常规一线治疗如肾上腺糖皮质激素、静脉注射丙种球蛋白(IVIG)等反应欠佳。近些年发现,这类病人存在FC-非依赖性血小板清除途径,主要是血小板表面糖蛋白发生去唾液酸化,最终被肝细胞表面的Ashwell-Morell受体(AMR)识别和吞噬,而不依赖于网状内皮系统FC受体介导的吞噬。各种原因引起的血小板神经氨酸酶(Neu1)表达上调均可使血小板表面糖蛋白发生去唾液酸化,如血小板的冷藏储存、败血症以及ITP等。目前发现,抗GPIbα抗体阳性的ITP接受一线治疗往往无效,推测抗GPIbα抗体可引起FC-非依赖性血小板清除。动物实验进一步证实抗GPIbα抗体可引起血小板去唾液酸化。有人尝试应用唾液酸酶抑制剂治疗此类ITP并获得了血小板的持续反应。本文结合血小板去唾液酸化的最新研究进展,对去唾液酸化在ITP发病机制和治疗方案选择中的作用作一综述。     

糖蛋白糖链结构分析与恶性肿瘤的诊断

糖蛋白糖链结构与疾病关系密切，恶性肿瘤患者甲胎蛋白、转铁蛋白、碱性磷酸酶、γ－谷氨酰转移酶、人绒毛膜促性 腺激素、Ｔ抗原、α１抗胰蛋白酶及前列腺酸性磷酸酶等糖链结构发生改变。临床检验中常用凝集素进行糖链结构分析。本文对恶 性肿瘤糖蛋白糖链结构改变的     

凝集素及其应用的研究进展

正凝集素是1类具有特异性糖基结合性糖蛋白。凝集素通常带有糖识别区域(CRD)[1],该区域氨基酸序列特性及其三维结构决定该凝集素糖结合活性[2],不同种类凝集素对不同类型糖基化修饰有识别偏好性。1凝集素分类及生物活性1888年首次从蓖麻子中发现凝集素,目前已有几百种凝集素从植物、动物、微生物中鉴定分离。1.1植物凝集素植物凝集素种类繁多。根据凝集素受体蛋     

糖蛋白糖链结构分析与恶性肿瘤的诊断

糖蛋白糖链结构与疾病关系密切,恶性肿瘤患者甲胎蛋白、转铁蛋白、碱性磷酸酶、γ－谷氨酰转移酶、人绒毛膜促性腺激素、Ｔ抗原、α１抗胰蛋白酶及前列腺酸性到酶等糖链结构发生改变。临床检验中常用凝集素进行糖链结构分析。本文对恶性肿瘤蛋白糖链结构改变的常见类型、检测方法、应用及展望作一综述。     

唾液酸化胎球蛋白A lectin-ELISA方法的建立及其在原发性肝细胞癌中的诊断价值

目的:建立检测唾液酸化胎球蛋白A（Sia-fetuin A）的凝集素-酶联免疫吸附试验方法（lectin-ELISA）,探讨其在原发性肝细胞癌（HCC）中的诊断价值。方法:收集2017至2020年于上海东方肝胆外科医院就诊的HCC患者300例,疾病对照160例（包括肝硬化亚组36例、慢性乙型肝炎亚组124例）,另同期收...     

人血清转铁蛋白糖基化研究进展

转铁蛋白是血清中浓度较高的糖蛋白之一。由于其特殊的生理功能,转铁蛋白一直受到国内外研究者的关注。随着对转铁蛋白功能、结构研究的不断深入,其抗菌活性、营养细胞、促进生长分化等功能逐渐被揭示。转铁蛋白已被广泛用于铁代谢相关疾病的诊断,与肝脏的病理生理状态也有着密切的关系。近年来,随着糖组学研究的不断深入和相关检测技术的发展,学者们在多种疾病中发现了转铁蛋白糖基化修饰的异常,尤其是在肿瘤状态下的改变更为明显。文章对转铁蛋白及其糖基化改变与疾病的关系及在疾病诊断中应用作一综述。     

外源性凝集素对糖蛋白和糖脂糖链结构的识别及其临床应用

对糖蛋白和糖脂糖链结构的测定已经成为临床实验室诊断疾病,尤其是肿瘤诊断的一个新的方向。外源性凝集素是分析糖链结构最常用和有效的工具。本文综述了多种常用凝集素的糖链专一性及其临床应用和方法。     

甲胎蛋白异质体检测及应用

甲胎蛋白(AFP)是一种糖蛋白,在哺乳动物胚胎期由肝脏实质细胞和卵黄囊细胞合成,来源于内胚层的胃肠道粘膜细胞也可少量合成。在正常情况下,AFP主要存在于胎儿循环中,随着胎儿发育成熟,AFP合成逐渐减少。出生时脐血中AFP浓度可达10~100mg/L,出生后一年降至正常成人水平。但若新生儿AFP明显升高提示新生儿肝炎,先天性胆道闭锁或有能分泌AFP的胚胎性恶性肿瘤。早在上世纪中期,就有学者发现肝细胞癌患者血清AFP淀粉凝胶电泳时常出现不同的迁移率,而新生儿,胎儿的AFP电泳迁移率相同。当时认为是AFP所含的唾液酸含量不同所致,并提出AFP异质体的概念。AFP异质体形成的确切机制还不十分清楚,其过程可能是这样的:增生的肝细胞及肝癌细胞于G1期和S期合成AFP并将其分布于核周,内质网腔及高尔基体分泌小囊中,位于粗面内质网及高尔基体中的AFP在糖基化转移酶参与下受到不同的糖基化修饰后分泌到循环中。由于糖基化的不同,导致了AFP异质性的差异。另一可能的原因是糖基化转移酶异常造成糖基化后AFP构象的改变。AFP的糖链结构能与多种凝集素相作用,与不同凝集素结合的AFP分子结构蛋白部分基本相同,但糖链部分有所不同。不同的糖链...     

外源性凝集素对糖蛋白和糖脂糖链结构的识别及…

对糖蛋白和糖脂糖链结构的测定已经成为临床实验室诊断疾病，尤其是肿瘤诊断的一个新的方向。外源性凝集素是分析糖链结构最常用和有效的工具。本文综述了多种常用凝集素的糖链专一性及其临床应用和方法。     

糖化血红蛋白实验室检测技术及方法学进展

糖化血红蛋白A1c(Haemoglobin A1c,Hb A1c)是人体血液中葡萄糖与血红蛋白β链N-末端缬氨酸(βN-1-去氧果糖基血红蛋白)残基以共价键结合的稳定的一类化合物。目前Hb A1c是评价糖尿病患者长期血糖控制状况的"金标准",在糖尿病治疗及其并发症监测中具有重要价值。临床实验室采用的Hb A1c检测技术方法达30多种。根据其实验原理一般分为两类:一类是基于糖基化与非糖基化血红蛋白所携带的电荷不同,如离子交换层析法、电泳法;另一类是基于糖基化与非糖基化血红蛋白的化学结构不同,如免疫法、酶免法以及亲和层析法等。论述了糖化血红蛋白A1c实验室检测技术及方法学评价新的进展。     

存在冷凝集现象患者输血的护理

一些患者行交叉配血时可发生冷凝集现象,这和血清中的冷凝集素效价有关。健康人血清中冷凝集素效价一般不高,正常范围在1:32以下,0～5℃时作用最强,20℃时通常不发生凝集,在37℃时反应消失。某些疾病如溶血性贫血、肺炎、肝硬变等患者的血清中冷凝集素效价可达1:64或更高,这种冷凝集素能够     

PCR-RFLP法测定日本人群apoE基因型

apoE有三种主要异型:E_2、E_3、E_4.由于这些异型电荷不同构成了用IEF法测定apoE多态性的理论基础.apoE以唾液酸化的形式分泌人血液.循环中约80%的apoE是脱唾液酸的.但apoE唾液酸化与脱唾液酸的比例在不同的个体之间不相同.由于apoE分子的唾液酸化引起了电荷的改变.因而给用IEF法分析apoE带来了困难.为了解决这一问题.可在IEF前     

复发性口腔溃疡病程中唾液pH值动态观察

复发性口腔溃疡是口腔常见疾病,病因尚不完全清楚,其病变过程中唾液pH值的改变,目前国内未见报道。本文观察了29例复发性口腔溃疡患者在正常时与发病初期及恢复期不同流速时的唾液PH值的改变,从而提供确定用药方法及处理方法。临床资料一、方法选择:唾液pH值测试法常用指示剂     

糖基化修饰后人血小板形态、超微结构及功能的研究

经糖基化修饰可使4℃保存的血小板在输入体内后延长其存活。本研究探讨尿苷二磷酸半乳糖（UDP—Gal）糖基化修饰对血小板形态、结构、功能以及其膜糖蛋白的影响。实验分为室温对照组、冷藏对照组和修饰组。用荧光标记的特异凝集素（FITC—RCA I）检测膜糖蛋白糖残基变化，用扫描、透射电镜观察修饰后血小板形态和超微结构的变化，用比浊法测定血小板聚集率，用流式细胞术检测血小板膜蛋白CD42b、膜表面标志CD62P以及血小板凋亡标志annexinV结合率。结果表明，UDP—Gal修饰组RCAI结合率显著高于室温对照组和冷藏对照组（P〈0．01）；与新鲜血小板相比，UDP—Gal处理后的血小板超微结构无明显变化，而冷藏对照组则有伪足延伸等形态学改变；修饰后最大聚集率可达新鲜血小板的50％以上；血小板膜蛋白CD42b、膜表面标志C1362P及annexinV结合率与室温对照组相比均无明显差异。结论：UDP—Gal可使β-半乳糖有效地结合于链聚糖末端，糖基化血小板仍然具有较强的聚集活性和相对完整的超微结构，功能基本正常。     

孕妇心脏功能变化与妊娠结局的研究进展

孕妇心脏结构、功能等随孕周发生一系列适应性变化。正常孕妇心脏泵血功能增强,心率加快,心输出量增加,舒张功能及结构也发生改变。当出现孕期并发症,如妊娠期高血压疾病,胎儿生长受限,心脏疾病或双胎妊娠时,孕妇心脏功能发生不同变化。随妊娠期高血压疾病进展程度不同,孕妇心血管系统改变不同。合并妊娠期高血压时,孕妇心脏表现为心输出量增高,全身血管阻力降低;子痫前期临床症状出现前,表现为心输出量增高,全身血管阻力与正常孕妇未见明显差异;子痫前期临床症状出现后,孕妇心输出量降低,全身血管阻力增加,围产结局不良。早发与晚发子痫前期孕妇心脏功能亦表现不同。妊娠合并胎儿生长受限时,孕妇心血管系统呈低排高阻循环状态,表现为心输出量低而全身血管阻力高。妊娠合并心脏疾病时,不同种类疾病心功能受损程度不同,围产结局不同。妊娠早期合并不同疾病孕妇心脏功能已发生相应改变。双胎妊娠孕妇心脏功能不同变化与妊娠结局相关。     

糖蛋白抗原242、199检测在胰腺癌诊断中的应用

糖蛋白抗原(CA)199是一种神经节甙脂蛋白,在血清中以粘蛋白的形式存在,在消化道肿瘤尤其是胰腺癌中有较高的阳性率[1].CA242是一种唾液酸化的粘蛋白类的肿瘤相关抗原,有研究[2]指出其在腺癌有较高的检出率.我们运用微粒子捕捉酶联免疫吸附方法对胰腺癌患者血清,CA242和CA199讲行检测,旨在对胰腺癌临床应用作一评价.     

介绍一种冷凝集素综合征患者抽血方法

静脉抽血是护士在临床工作中常见的一项技术操作,通过抽取静脉血液检验患者体液,可以诊断许多身体疾病。冷凝集素综合征是由于自身反应性红细胞凝集及冷诱导因素导致慢性溶血性贫血和微循环栓塞为特征的一组疾病。冷凝集素的冷抗体在31℃以下温度时能作用于自身的红细胞抗原而发生可逆性的红细胞凝集。