疼痛及针刺镇痛时孤啡呔受体mRNA的变化

目的：观察大鼠在福尔马林致痛及针刺镇痛时孤啡肽受体ｍＲＮＡ在一些与镇痛有关核团的变化情况。方法：采用原位杂交组织化学技术。结果：电针后１０ｈ，导水管周围腹侧区、中缝背核及中缝大核内孤啡肽受体ｍＲＮＡ阳性神经元数增多；而在大鼠脚掌注射福尔马林后，上述核团内孤啡肽受体ｍＲＮＡ阳性神经元数却明显减少；电针并注射福尔马林，脑内孤啡肽受体ｍＲＮＡ水平介于单用电针和福尔马林之间。结论：电针能促进孤啡肽受体的合成而伤害性刺激抑制孤啡肽受体的合成。     

鼠尾伤害性刺激与颧髎穴电针后弓状核-导水管周围灰质-延髓头端腹内侧区的前脑啡肽原mRNA的表达及与Fos蛋白共存

成年SD大鼠分成对照、尾部电流所致伤害性刺激、面部颧髎穴电针三组，分别观察弓状核、中脑中央灰质和延髓头端腹内侧区原位杂交后在神经元中首脑啡肽联原(PPE)mRNA的表达与Fos免疫阳性神经元的分布。痛刺激后上述各部位的PPEmRNA在神经元内均有不同程度表达，但当颧髎穴电针时表达更明显，细胞数也较多。尤其在延髓头端腹内侧区更显著，而在对照动物仅在面神经核等与运动有关核团出现表达，在PPEmRNA与Fos免疫组化相结合实验中．痛组与针刺组动物中皆可观察到一定比例数神经元的共存，及单独Fos和单独EnkmRNA阳性神经元的存在。     

苍白球在电针镇痛及兴奋尾壳核镇痛中的作用

用行为学和电生理学的方法 ,探讨苍白球在电针镇痛及兴奋尾壳核镇痛中的作用。结果表明 :电针可以延长辐射热引起的缩腿潜伏期 ,电针或兴奋尾壳核可抑制丘脑束旁核神经元的伤害性反应 ;苍白球微量注射红藻氨酸 7d后 ,电针对辐射热引起的大鼠缩腿潜伏期无明显影响 ,电针或兴奋尾壳核对丘脑束旁核神经元的伤害性反应亦无明显影响 ,与毁损前相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,与苍白球微量注射生理盐水 7d后 ,电针可延长大鼠缩腿潜伏期 ,及电针或兴奋尾壳核对束旁核神经元伤害性反应的抑制作用相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结果提示 :苍白球在电针及兴奋尾壳核镇痛中发挥重要作用     

苍白球在电针镇痛及兴奋尾壳核镇痛中的作用

用行为学和电生理学的方法,探讨苍白球在电针镇痛及兴奋尾壳核镇痛中的作用.结果表明:电针可以延长辐射热引起的缩腿潜伏期,电针或兴奋尾壳核可抑制丘脑束旁核神经元的伤害性反应;苍白球微量注射红藻氨酸7 d后,电针对辐射热引起的大鼠缩腿潜伏期无明显影响,电针或兴奋尾壳核对丘脑束旁核神经元的伤害性反应亦无明显影响,与毁损前相比有显著性差异(P＜0.05),与苍白球微量注射生理盐水7 d后,电针可延长大鼠缩腿潜伏期,及电针或兴奋尾壳核对束旁核神经元伤害性反应的抑制作用相比有显著性差异(P＜0.05).结果提示:苍白球在电针及兴奋尾壳核镇痛中发挥重要作用.     

福尔马林致炎大鼠鞘内注射布托啡诺后脊髓背角NMDA受体的表达

研究背景与目的: 酒石酸布托啡诺是一种阿片类镇痛剂,对阿片受体具有激动/拮抗双重作用。其在临床和动物实验中的应用已有报道,但还未见鞘内应用于福尔吗林炎性痛大鼠模型的报道.另外在疼痛机制形成过程中,NMDA受体激活起着非常重要的作用。故我们假设鞘内注射酒石酸布托啡诺应用于福尔马林炎性痛大鼠时能产生明显的镇痛效果,其产生镇痛的机制可能是通过抑制NMDA受体表达来实现. 方法: 在大鼠的左后足掌面皮下注射5%福尔马林50μl致痛前30min,健康雄性SD大鼠接受生理盐水,低剂量布托啡诺（12.5μg）,高剂量布托啡诺（25μg）鞘内注射;对照组在福尔马林注射前不注射任何试剂,为了更进一步的研究,我们在设计中加入鞘内注射非选择性NMDA受体拮抗剂氯胺酮,也分别在福尔马林致痛前30min,鞘内注射低剂量（50μg）,高剂量（100μg）或低剂量（50μg）混合低剂量布托啡诺进行注射。与疼痛相关的行为学测定通过计算大鼠后爪理毛行为（后爪的离地、舔足/咬足）总计反应时间来确定,记录福尔马林诱导出注射后爪的双相理毛行为时间(在福尔马林注射后第1时相, 0-5 min; 第 2时相, 10-60 min ).所有大鼠均在注射后2h处死,用免疫组化法测定大鼠L5节段脊髓背角NMDA受体的表达。 结果：鞘内单独用布托啡诺当剂量增加到25μg时,以及鞘内低剂量布托啡诺和氯胺酮联合使用时都引起第1和2时相的后爪理毛行为的总计反应时间明显减少;其余的组别对福尔马林1和2时相都没有明显影响。鞘内单独用高剂量布托啡诺以及低剂量布托啡诺和氯胺酮联合处理都可以显著降低福尔马林致痛大鼠L5脊髓背角NMDA受体表达。 结论：本研究结果揭示鞘内用布托啡诺能够对福尔马林诱导的疼痛产生明显的镇痛作用,并具有剂量依赖性,其镇痛机制可能是通过抑制NMDA受体激活产生;不过具体NMDA受体抑制机制是否与鞘内布托啡诺激活к受体或μ受体有关还需要更进一步的研究来确定。     

鼠尾伤害性刺激与颧Liao穴电针后弓状核—导水管周围灰质—延髓头端腹？…

成年ＳＤ大鼠分成对照，尾部电流所致伤害性刺激，面部颧Ｌｉａｏ穴电针三组，分别观察弓状核，中脑中央灰质和延髓头端腹内侧区原位杂交后在神经元中前脑啡肽原（ＰＰＥ）ｍＲＮＡ的表达与Ｆｏｓ免疫阳性神经元的分布，痛刺激后上述各部位的ＰＰＥｍＲＮＡ在神经元内均有不同程度表达，但当颧Ｌｉａｏ穴电针时表达更明显，细胞数也较多。尤其在延髓头端腹内侧区更显著，而在对照动物仅有面神经核等与运动有关核闭出现表面，在ＰＰＥ     

大鼠丘脑中央下核内注射5-HT2受体拮抗剂噻庚啶对强电针镇痛的阻断效应

以辐射热诱发浅麻大鼠甩尾(TF)反射潜伏期为痛反应指标,观察了不同强度电针的镇痛效应及丘脑中央下核(Sm)内微量注射5-HT2受体拮抗剂噻庚啶(CPT)对其效应的影响.结果表明,弱电针刺激(0.5mA)"足三里穴”仅可轻度抑制大鼠TF反射,而强电针(5 mA)对TF反射的抑制作用明显大于弱电针;单侧Sm内微量注射CPT(50 ng)可轻度易化TF反射,并使强电针的镇痛效应明显减弱,而对弱电针的效应无明显影响.提示Sm内的5-HT及其受体亚型(5-HT2受体)可能参与强电针的镇痛效应并具有紧张性下行抑制性影响.     

神经生长因子缓释微球植入后阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元的变化

背景：已有研究表明,神经营养因子对中枢和周围神经损伤后的存活修复有促进作用。然而,神经生长因子是大分子蛋白类物质,生物半衰期很短,很难透过血脑屏障,寻找有效的神经营养因子投递系统至关重要。 目的：观察了神经生长因子微球对阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元的保护作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2005-11/2006-07在广州医学院神经生物学实验室完成。 材料：采用双乳化技术制备神经生长因子缓释微球。28只SD大鼠,随机分为3组：正常对照组8只,模型对照组8只,神经生长因子缓释微球植入组12只。 方法：模型对照组和神经生长因子缓释微球植入组左侧穹隆海马伞切断制备阿尔茨海默病模型,正常对照组不做任何处理。神经生长因子缓释微球植入组切断后即刻行基底前脑注射神经生长因子缓释微球。正常对照组和模型对照组注射等量生理盐水。 主要观察指标：注射4周后,利用免疫组化法观察各组大鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元变化。 结果：28只大鼠均进入结果分析。模型对照组损伤侧的内侧隔核和斜角带核的神经生长因子受体阳性神经元大量减少,分别减少59.7%和54.4%;神经生长因子缓释微球植入组损伤侧的内侧隔核和斜角带核细胞数分别减少17.9%和19.8%,明显高于模型对照组损伤侧的神经生长因子受体阳性神经元存活数（P < 0.05）。 结论：神经生长因子缓释微球植入对阿尔茨海默病模型鼠基底前脑神经生长因子受体阳性神经元有明显的保护作用。     

大鼠尾核内一氧化氮对apelin受体mRNA表达的影响(英文)

目的研究大鼠尾核内一氧化氮(nitric oxide,NO)的作用机理及其与apelin 受体mRNA表达的相关性。方法大鼠尾核内微量注射NO前体L-精氨酸(L-Arg)、NG-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)和生理盐水(NS),应用逆转录 - 聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠尾核给药 4、8、12、24 及 48 h 后一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS) mRNA和apelin受体mRNA表达的变化及二者的相关性。结果注射L-Arg后大鼠尾核nNOS和apelin受体的mRNA表达明显升高,注射L-NAME后大鼠尾核nNOS和apelin受体mRNA表达明显降低,且均有统计学意义。注射L-Arg和L-NAME后,nNOSmRNA和apelin受体mRNA的表达呈正相关。结论在中枢神经系统,尤其是在尾核中,NOS的活性是NO作为神经递质或调质参与包括中枢痛觉调制作用在内的多种生物学作用的关键因素之一,尾核内NO的神经生物学作用可能与apelin受体作用相关 。     

大鼠尾核内一氧化氮对apelin受体mRNA表达的影响

目的研究大鼠尾核内一氧化氮（nitric oxide,NO）的作用机理及其与apelin受体mRNA表达的相关性。方法大鼠尾核内微量注射NO前体L-精氨酸（L-Arg）、N^G-硝基-L-精氨酸甲酯（N^G-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME）和生理盐水（NS）,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测大鼠尾核给药4、8、12、24及48h后一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS）mRNA和apelin受体mRNA表达的变化及二者的相关性。结果注射L-Arg后大鼠尾核nNOS和apelin受体的mRNA表达明显升高,注射L-NAME后大鼠尾核nNOS和apelin受体mRNA表达明显降低,且均有统计学意义。注射L-Arg和L-NAME后,nNOSmRNA和apelin受体mRNA的表达呈正相关。结论在中枢神经系统,尤其是在尾核中,NOS的活性是NO作为神经递质或调质参与包括中枢痛觉调制作用在内的多种生物学作用的关键因素之一,尾核内NO的神经生物学作用可能与apelin受体作用相关。     

电针可增强大鼠脑内前脑啡肽原mRNA的表达：原位杂交组织化学研究

本文采用原位杂交组织化学技术，结合计算机图象处理系统，对电针后大鼠脑内前脑啡肽原（ＰＰＥ）ｍＲＮＡ的表达进行半定量的观察。ＰＰＥｍＲＮＡ探针以半抗原的地高辛标记。电针１０小时之后，ＰＰＥｍＲＮＡ阳性信号的强度和神经元内合ＰＰＥｍＲＮＡ的面积在许多与痛和镇痛有关的核团明显增加，如尾核，伏核，视前区，中脑的脚间核，导水管周围灰质，黑质，红核等。表明电针促进了ＰＰＥｍＲＮＡ在大鼠脑内的表达。这可能是针刺具有累积和长期效应的机制之一。     

β—淀粉样蛋白对大鼠学习记忆功能及脑胆碱乙酰转移酶和生长抑素表达的影响

目的：探讨Meynert核注射β-淀粉样肽（Aβ）大鼠学习记忆功能ChAT,SOM神经元的影响。方法：将1μLAβ1-40（10μg/μL）在立体定位仪下注入大鼠右侧Meynert核，分别于1周，4周时测定其学习记忆能力和脑组织中ChAT及SOM免疫反应阳性神经元的表达。结果：Aβ注射1周后，实验组出现学习记忆障碍，呈渐进性加重，4周时更为显著，在无名质区Meynert核及其边周，海马区和额，顶部皮质区，正常对照组和假手术组均有广泛的ChAT及SOM免疫反应阳性神经元分布，而实验组则减少，在4周时，实验组ChAT及SOM免疫反应阳性神经元表达显著减少，以Meynert核及其边周最显著。结论：Meynert核注射Aβ可使大鼠发生较持久的学习记忆功能障碍，Aβ致Meynert核、海马和皮质区的ChAT及SOM能神经元的减少，可能是学习记忆功能障碍和痴呆形成的重要因素之一。     

糖尿病大鼠下丘脑中胃动素的表达及中枢注射红霉素对胃运动的影响

目的 以往的研究表明胃动素存在于大鼠的中枢神经系统,在中枢注射胃动素具有促进清醒大鼠胃运动的作用.但糖尿病大鼠中枢胃动素表达含量及中枢注射胃动素对糖尿病大鼠胃运动的潜在作用目前尚未报导.本研究探索糖尿病大鼠胃动素免疫阳性神经元在下丘脑的表达,观察侧脑室微量注射胃动素受体激动剂红霉素(erythromycin,EM)对正常和糖尿病大鼠胃运动的作用.方法 采用免疫组织化学方法测定下丘脑胃动素免疫阳性神经元的分布特征.在胃窦浆膜层植入应力传感器,测定清醒大鼠胃运动的幅度和频率.结果 糖尿病大鼠下丘脑室旁核和视上核胃动素免疫阳性神经元数量明显高于正常对照大鼠(P＜0.05).脑室内微量注射EM可以明显促进糖尿病大鼠的胃运动.注射91.56 nmol的EM五分钟后,大鼠胃窦运动幅度升高(174.82±48.62)%(P＜0.05),运动频率加快(70.43±27.11)%(P＜0.05).在脑室内微量注射胃动素拮抗剂GM-109后,再注射EM,其促胃运动效应可被部分阻断.结论 糖尿病大鼠中枢胃动素对胃运动有一定的调制作用,而且脑室内微量注射的EM是通过脑内的胃动素受体介导而发挥其促胃动力效应.     

孤啡肽对创伤应激大鼠海马组织中IL-1βmRNA水平的影响

研究孤啡肽 (orphaninFQ ,OFQ)对机体免疫功能的调节机制 ,采用以单碱基突变模板作为内标的逆转录 聚合酶链式反应技术 ,观察侧脑室注射 (icv)OFQ对创伤应激介导的免疫功能低下大鼠海马IL 1βmRNA水平的影响。结果发现大鼠经手术创伤后 ,海马组织中IL 1βmRNA水平较正常大鼠有明显升高 (P <0 .0 1) ;icv 1μg(0 .5 5nmol)OFQ对正常大鼠海马组织中IL 1βmRNA水平无明显影响 ;icv 1μgOFQ可降低创伤大鼠海马组织中IL 1βmRNA水平 (P <0 .0 5 ) ;创伤大鼠侧脑室内注射 1μg孤啡肽的同时 ,注射 1μg [Phe1Ψ(CH2 NH)Gly2 ] nociceptin(1 13) NH2 ([F/G] NC 1 13,孤啡肽衍生物 ) ,结果海马组织中IL 1βmRNA水平与单纯创伤大鼠无显著性差异。结果提示孤啡肽通过作用于脑内的孤啡肽受体参与对创伤大鼠免疫功能的调节 ,其影响途径之一可能为抑制海马组织内IL 1βmRNA基因表达 ,[F/G] NC 1 13能特异性阻断OFQ的作用     

LPS激发大鼠前脑神经元Fos和小胶质细胞OX42表达改变

目的 探讨单次腹腔注射LPS后前脑神经元和小胶质细胞的可塑性变化和相互关系。方法 应用抗Fos、抗TH或抗OX42单一、以及抗Fos／抗TH／抗OX42三重免疫组化标记方法，观察大鼠单次腹腔注射LPS后，Fos阳性神经元、Fos／TH阳性神经元、OX42阳性小胶质细胞在脑内的表达分布及时程变化，以及Fos阳性神经元或Fos／TH阳性神经元与OX42阳性小胶质细胞之间的关系。结果：Fos阳性神经元分布在额、顶皮质，扣带回和梨状皮质，外侧隔核腹侧部，杏仁中央核，海马CA2区、CA3区、齿状回，下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和第三脑室周围灰质等。Fos阳性神经元在注射后30min出现表达，注射后1～3h为表达高峰。反应阳性小胶质细胞首先于脑室周围灰质出现，注射后6h达到高峰，胞体变大，突起变粗，OX42呈阳性深染，密集分布于Fos阳性神经元的表达区域。下丘脑Fos／TH／OX42三重染色切片显示：由LPS激活的Fos／TH阳性神经元周围被OX42阳性细胞包绕并接触，表明神经元和小胶质细胞在对LPS刺激的反应中关系密切。结论 在外周免疫刺激下，下丘脑、扣带回、梨状皮质和海马内的神经元和小胶质细胞可能参与免疫调节。     

尿道伤害性刺激诱导的FOS阳性神经元在大鼠腰骶髓内的分布

观察了给予尿道伤害性刺激后ＦＯＳ阳性神经元在大鼠腰骶髓内分布情况。在向大尿道内导入１００μｌ２％福尔马林后,大量ＦＯＳ阳性神经元出现在脊髓要６和骶１节段的后角内侧部和后连合核内。双侧切断阴部神经几乎可完全阻断ＦＯＳ在腰骶髓的表达,但ＦＯＳ表达不受切断双侧盆神经的影响。行为学观察发现神经完整的大鼠和切断盆神经的大鼠大福尔马林刺激后表现为频繁舔舐尿道外口,而切断阴部神经的大鼠则未见此明显的行为学反应。     

糖尿病大鼠下丘脑中胃动素的表达及中枢注射红霉素对胃运动的影响(英文)

目的以往的研究表明胃动素存在于大鼠的中枢神经系统,在中枢注射胃动素具有促进清醒大鼠胃运动的作用。但糖尿病大鼠中枢胃动素表达含量及中枢注射胃动素对糖尿病大鼠胃运动的潜在作用目前尚未报导。本研究探索糖尿病大鼠胃动素免疫阳性神经元在下丘脑的表达,观察侧脑室微量注射胃动素受体激动剂红霉素(erythromycin, EM)对正常和糖尿病大鼠胃运动的作用。方法采用免疫组织化学方法测定下丘脑胃动素免疫阳性神经元的分布特征。在胃窦浆膜层植入应力传感器,测定清醒大鼠胃运动的幅度和频率。结果糖尿病大鼠下丘脑室旁核和视上核胃动素免疫阳性神经元数量明显高于正常对照大鼠(P<0.05)。脑室内微量注射EM可以明显促进糖尿病大鼠的胃运动。注射91.56nmol的EM五分钟后,大鼠胃窦运动幅度升高(174.82±48.62)%(P<0.05),运动频率加快(70.43±27.11)% (P<0.05)。在脑室内微量注射胃动素拮抗剂GM-109后,再注射EM, 其促胃运动效应可被部分阻断。结论糖尿病大鼠中枢胃动素对胃运动有一定的调制作用,而且脑室内微量注射的EM是通过脑内的胃动素受体介导而发挥其促胃动力效应。     

尿道伤害性刺激诱导的FOS阳性神经元在大鼠腰骶髓内的分布

观察了给予尿道伤害性刺激后FOS阳性神经元在大鼠腰骶髓内分布情况.在向大鼠尿道内导入100 μl 2%福尔马林后,大量FOS阳性神经元出现在脊髓腰6和骶1节段的后角内侧部和后连合核内.双侧切断阴部神经几乎可完全阻断FOS在腰骶髓的表达,但FOS表达不受切断双侧盆神经的影响.行为学观察发现神经完整的大鼠和切断盆神经的大鼠在福尔马林刺激后表现为频繁舔舐尿道外口,而切断阴部神经的大鼠则未见此明显的行为学反应.结果提示,大鼠腰6和骶1节段的后角内侧部和后连合核可能为脊髓内接受尿道伤害性信息的主要区域,尿道的伤害性信息是由阴部神经传入的.     

中枢P物质参与电针镇痛的证据

本文采用放射免疫分析和甩尾测试法观察不同频率电针对大鼠脊髓Ｐ物质（ＳＰ）释放的影响。发现在电针有效组，２Ｈｚ（低频）电针时大鼠脊髓灌流液中ＳＰ—ｉｒ明显减少，而１５Ｈｚ（中频）、１００Ｈｚ（高频）和２／１５Ｈｚ（变频）刺激时，ＳＰ—ｉｒ明显增加。在电针无效组，各种频率电针时的ＳＰ—ｉｒ测定均无明显变化。脊髓蛛网膜下腔（ｉ．ｔ．）注射高选择性非肽类ＳＰ受体拮抗剂ＲＰ６７５８０可明显阻断１５Ｈｚ、１００Ｈｚ和２／１５Ｈｚ电针镇痛，而对ＺＨＺ电针镇痛无影响。注射ＲＰ６７５８０的同分异构体ＲＰ６８６５１则不能阻断上述各频率的电针镇痛作用。鉴于中、高频和变频电针促进脊髓ＳＰ的释放，而阻断ＳＰ受体可阻断上述电针镇痛，提示电针引起大鼠脊髓中释放的ＳＰ不是参与伤害感受，而是发挥了镇痛作用．关键词     

代谢型谷氨酸受体在大鼠脑干臂旁核中的分布

采用免疫组织化学方法观察了大鼠脑干臂旁核中代谢型谷氨酸受体亚型的分布情况。结果表明：代谢型谷氨酸受体１α亚型免疫阳性神经元仅分布于小脑上脚内侧极处，外内亚核、外外亚核、内外亚核及腰区中只有弱免疫阳性的神经毡；上外亚核、外外亚核及外内亚核中有浓密至中等强度的代谢型谷氨酸受体５亚型免疫阳性神经毡的分布；此外，内外亚核中尚有少量代谢型谷氨酸受体７亚型弱免疫阳性神经元。而代谢型谷氨酸受体２／３亚型在臂旁核所有亚核中均未见分布。本研究结果提示不同亚型的代谢型谷氨酸受体可能参与臂旁核对不同生理过程的调控。