用于鼻内免疫的实验性型B群链球菌荚膜-霍乱毒素B亚单位偶联疫苗的制备和临床前评估

B群链球菌 ( GBS)会对新生儿、围产期妇女及免疫损害成人造成严重的感染 ,其中2 /3的侵袭性疾病是由具有荚膜的 型菌株引起的。血清抗荚膜多糖 ( CPS)抗体能阻止细菌侵入血流 ,而粘膜抗体则对阻止 GBS在女性生殖道定居及预防新生儿呼吸道感染更重要。本研究目的在于 ( 1 )制备 型 GBSCPS与蛋白质的偶联物 ;( 2 )评估 型 GBSCPS-蛋白偶联物皮下和鼻内免疫诱生的局部和全身免疫应答 ;( 3)研究霍乱毒素 ( CT)在 GBS偶联疫苗中的佐剂作用。　　作者由无乳链球菌 M732株培养物纯化获得 型 GBS CPS,以己二酸二酰肼 ( ADH)为间…     

B群链球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗的临床效力

为研究 B群链球菌 ( GBS)结合疫苗的临床稳定性及效力 ,作者将 a、 b、 、 及 型GBS荚膜多糖 ( CPS)分别与破伤风类毒素( TT)、 型 CPS与白喉类毒素 ( - CRM1 97)结合制成结合疫苗 ,其中疫苗 - TT(第 91 - 1批 )、 a- TT和 b- TT为单剂液体制剂 ,其余则为以蔗糖作为赋形剂的多剂冻干制剂。　　作者将不同类型和剂量的 CPS于 0及2 1天分别腹腔接种雌鼠 ,于 2 1天将雄鼠与雌鼠交配 ,所产新生鼠于 4 8小时内接种半数致死量 ( L D50 )的 GBS,计算新生鼠的存活率。为评价 CPS免疫原性与效力的关系 ,作者选择 2 .0、0 .2、0 .1…     

直肠接种重组霍乱毒素B亚单位疫苗的局部和全身免疫应答

作者的研究旨在评估接种含霍乱毒素Ｂ亚单位 (ＣＴＢ)的霍乱疫苗后 ,直肠接种途径诱导直肠组织和血液特异性抗体分泌细胞(ＡＳＣ)应答的能力。　　 8名 2 0～ 4 4岁健康志愿者 ( 3名女性 )通过直肠途径接种灭活的Ｂ亚单位全细胞霍乱疫苗 ,共 3次 ,每次间隔 2周。每剂疫苗含1 .0ｍｇＣＴＢ及 1 0 11加热和福马林灭活的弧菌 ,通过直径 3ｍｍ的橡皮管插入肛门内 5ｃｍ接种。在首次接种前和末次接种后 7天采集直肠活组织 ( 8人 )、直肠分泌液 ( 5人 )和血液标本 ( 8人 )。分离直肠组织和血液中的单个核细胞 (ＭＮＣ) ,通过酶联免疫斑点法的双色…     

鼻腔免疫和口服霍乱毒素B亚单位菌苗后下呼吸道及男性泌尿道抗体应答

作者用霍乱毒素 B亚单位 (CTB)菌苗免疫 1 5名男性 (1 9～ 33岁 )志愿者 ,其中 9人采用鼻腔免疫法 ,接受 2 5 0μg CTB,间隔 2周免疫 2次 ;另 6人采用口服免疫法 ,接受1 .0 mg CTB和 1 0 1 1 个加热和福马林灭活的霍乱弧菌 ,间隔 2周免疫 2次。免疫前及末次免疫后 2周分别采集血清、支气管肺泡洗液(BAL)及尿液 ,采用 ELISA法测定特异性抗CTB抗体。结果表明 ,鼻腔免疫组 8人血清CTB特异性 Ig A和 Ig G抗体水平有明显增加 ,9人 BAL特异性 Ig G抗体水平均升高 8倍 ,6人 BAL 特异性 Ig A抗体增加 5倍。在口服组 ,4人血清 CTB特…     

产生霍乱毒素B亚单位的重组卡介苗诱导的免疫应答

经粘膜途径接种的抗原的免疫原性通常弱于全身途径接种,因此粘膜抗原接种后需要粘膜佐剂以获得有效水平的免疫应答。已知五聚体形式的霍乱毒素B亚单位( CTB)是有效的粘膜佐剂,当经粘膜途径与抗原一起给予时能增强抗原特异性分泌性Ig A( SIg A)应答,但口服CTB会被粘膜局部的酶和正常菌群快速清除,为延长CTB在呼吸道粘膜的持续时间,作者将含CTB编码基因的p ENCTB转入卡介苗( BCG) 1 1 73P2株,构建出能分泌和产生CTB的重组( r) BCG。用免疫印迹法检测r BCG表达的CTB,用GM1神经节苷脂连接试验检测已装配的CTB的亚单位数。结果…     

小鼠对破伤风类毒素与重组霍乱毒素B亚单位鼻腔接种的免疫应答[英]

为将破伤风类毒素 (TT）的免疫接种方法由肌肉或皮下注射改为鼻内接种,作者检测了小鼠对铝吸附ΤΤ（aΤΤ）和未吸附TT（nTT）与重组霍乱毒素B亚单位（rCTB）鼻内接种的全身和粘膜免疫应答。作者选用7周龄雌性BALB/c小鼠为研究对象,一组小鼠分别鼻内接种加或不加rCTB的aTT,另一组小鼠则接受加或不加rCTB的nTT。研究显示,不管rCTB是否存在,鼻内接种0.SLf aTT均能诱导高水平的TT特异性血清IgG和中等水平的TT特异     

Ⅱ型B群链球菌荚膜多糖结合疫苗在健康妇女中的安全性和免疫原性

B群链球菌 ( GBS)是感染新生儿和其母亲的常见病原体 ,其中约 1 5 %的侵袭性 GBS病是由 型 GBS荚膜多糖 ( CPS)引起的。在研制预防 GBS感染的多价疫苗过程中 ,发现各型 GBS CPS与破伤风类毒素 ( TT)偶联能增强疫苗的免疫原性。本文评估了 CPS-TT结合疫苗在健康妇女中的安全性及免疫原性。　　作者用高碘酸钠使 CPS的唾液酸残基部分氧化为醛基 (分别为 31 %、5 7%和 73% )后 ,将各氧化的 CPS分别与 TT结合制成结合疫苗。用母体接种 -新生小鼠 GBS感染模型评估 31 % - TT、 57% - TT和 73% - TT显示 ,3种 - TT中 ,…     

霍乱毒素B亚单位与胰岛素B链结构类似多肽融合蛋白的制备

为了在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)与胰岛素B链(9-23)肽段结构类似多肽(Ins B(9-23))的融合蛋白,使用基因工程方法构建了CTB与Ins B(9-23)的融合基因CTB-Ins B-X若干,并将融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌株经乳糖诱导后,其表达产物经过12%SDS-PAGE分析表明该菌株可以包含体形式表达融合蛋白,并制备得到纯度较高的重组蛋白。该重组蛋白的包含体经过变性、复性后,可以在体外自组装成五聚体结构。GM1-ELISA分析结果表明,重组蛋白在体外可以与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异性结合,表明该融合蛋白保持了CTB形成五聚体的生物活性。     

重组霍乱毒素B亚单位作为佐剂与DTP共同鼻腔免疫能提高白喉和破伤风抗毒素水平

霍乱毒素B亚单位（CTB）是一种五聚体，能与细胞膜上的GM1神经节苷脂结合。日本名古屋城市大学Isaka等将携带pNU212-CTB的短芽孢杆菌HPD31株表达的重组（r）CTB作为黏膜佐剂，与DTP一同鼻腔免疫，研究rCTB的黏膜免疫佐剂作用。     

口服霍乱毒素或B亚单位免疫后粘膜内免疫应答的IgA同型限制

本文研究了用霍乱毒素(CT)一次或多次口服免疫后,各种组织中的抗毒素抗体应答,并比较了对CT和B亚单位的免疫应答。口服CT或B亚单位免疫后粘膜产生IgA的结果表明,1、2或5次免疫后,测定不同时间小鼠肠洗液IgA抗毒素滴度,