Schiff试剂配制方法的改进和体会

DNA是遗传的物质基础,应用Feulsen反应法显示细胞DNA是常用的组化染色技术,其中Schiff试剂是染色成败的关键因素。Schiff试剂（希夫试剂）,又称品红醛试剂,与醛类反应呈紫红色。它有多种不同的配制方法,归结起来有经典热配法和冷配法掰。以前经常采用的热配法,配制过程繁琐,常会因一个步骤的偏差而造成配制失败,笔者改用冷配法,收到了与热配法同样的染色效果,现将体会介绍如下。     

微波辐射在组织切片标本肝糖原显示中的应用

过碘酸雪夫氏反应 (PAS技术 )是显示肝细胞内糖原常用的细胞化学技术[1] ,这种传统的方法复杂而费时 ,虽不断有改良的新方法[2 ] ,却仍存在时间偏长 ,出片率底的不足。近年来微波辐射已作为一门新技术应用于组织学标本制作中[3,4 ] ,但有关用于肝糖原显示的报道不多见。本文应用微波技术和传统PAS法结合显示肝细胞内糖原 ,结果大大缩短了制作时间 ,减小了组织细胞的收缩 ,效果令人满意。1　材料和方法1.1　试剂①Boin氏固定液。② 1%过碘酸溶液 ;③Schiff氏染液。④苏木精染液。以上试剂按传统PAS法配制。1.2　微波炉日本产NationalNN…     

霉菌性阴道炎两种特殊染色诊断法的比较

目的对两种不同的真菌染色法在念珠菌阴道炎真菌染色的方法和效果方面予以比较。方法对疑似念珠菌阴道炎患者阴道脱落上皮细胞涂片50张,随机抽取25张作六胺银染色,另25张做过碘酸雪夫(pas法)染色。结果六胺银染色方法显示:芽生孢子和假菌丝呈黑褐色,背景橙黄色,阳性率为76%;过碘酸雪夫染色法显示:芽生孢子和假菌丝红色,背景紫蓝色,阳性率为80%。结论过碘酸雪夫染色法简便易行,着色鲜亮,试剂配制简单,成本较低,真菌染色阳性率较高,是诊断念珠菌阴道炎非常好的实验方法,值得推广。     

改良Hiss氏荚膜染色法

常用的细菌荚膜染色法有Hiss氏法[1]墨汁负染法、Muir法[2]及王全德[3]等人的方法，其中Hiss氏法被认为是经典的方法，但该方法的加热染色过程不易掌握，作者将此改为不加热染色，能显示出清晰的荚膜。l材料与方法1．二动物昆明种小鼠，体重209左右，由新乡医学院动物室提供。1．2试剂与菌种皿型肺炎链球菌购自河南医科大学微免教研室，甲醇（AP）购自北京化工三厂，Hiss氏染液、20％CuSO4，用前配制。13方法取皿型肺炎链球菌感染致死的小鼠腹腔液徐片，充分自然干燥。取徐片30张作对照组，按Hiss氏经典法染色镜检；另取涂片为实验组进…     

不同复染剂对肺结核痰厚涂片结果评价

有文献记载抗酸染色可用孔雀绿染色法[1] ,检验抗酸杆菌。为此 ,我们分别用美兰和孔雀绿做复染剂 ,对痰涂片的结果进行了分析和比较 ,其方法介绍如下。1标本来源和涂片方法1.1　标本来源　门诊治疗的肺结核病人痰标本 10 5份。1.2　涂片方法　每份标本同时涂两张片 ,一次性取 0 .2ｍｌ干酪性和脓性血痰 ,反复分别涂两张 2 0ｍｍ× 2 5ｍｍ卵圆形痰片 ,每片涂 0 .1ｍｌ痰量为宜 ,尽量涂匀 ,减少标本间差异 ,自然干凉后 ,火焰固定 ,染色。2　试剂配制和染色方法2 .1　试剂配制2 .1.1　美兰染色法[2 ] 　 (1)染色剂— 5 %石碳酸复红液 :取碱性…     

提高胆红素标准液稳定性的方法

配制胆红素标准液一般都用混合血清作稀释剂[1、2 ] ,由于胆红素的易氧化性及血清易出现絮状沉淀等原因 ,致使稳定性很差。我们根据高浓度多元醇具有抗氧化及高渗抑菌作用这一机制[3 ] ,选用丙三醇加响入胆红素标准液中 ,配制出可长期保存使用的胆红素标准液 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　材料　改良Ｊ-Ｇ法 :试剂为北京化工厂试剂盒 ,操作按说明进行 ,以 72 1分光光度计 ,1ｃｍ杯 ,波长 6 0 0ｎｍ比色。1.2　方法1.2 .1　原标准液 (171μｍｏｌ/Ｌ) ,按经典法配制[1] 。作者单位 :黑龙江省第三医院秦皇岛分院邮　　编　 0 660 0 0　　收…     

4-叔丁基苯甲酸甲酯的合成

4 叔丁基苯甲酸甲酯是合成新型防晒剂Avobenzone的重要中间体 ,也是重要的医药化工中间体及有机合成试剂。本文对 4 叔丁基甲酸甲酯的合成进行了研究 ,采用了合成路线如下。以甲苯为原料合成Ⅲ ,文献报道有异丁烯法 ,C(CH3 ) 3 Cl在FeCl3 [1] 或在Mo(CO) 6[1] 的催化下的Frieldel Crafts反应法 ,前者需要高压下反应 ,后者需无水操作反应 ,条件均较苟刻 ,我们参考有关文献[2 ,3 ] ,采用叔丁醇经Frieldel Crafts反应制得。与前面两方法比较 ,其合成成本低 ,反应条件温和 ,得率高 ;Ⅱ的制备法有高锰酸钾氧化法、空气氧化法 ,高锰酸钾氧…     

配制温度对苯佐卡因软膏主药含量的影响

苯佐卡因软膏目前仍是医院外科、皮肤科常用的制剂 ,制备时可采用冷配法或热配法[1] 。若用冷配法配制时由于凡士林粘稠度大 ,不易得到含量均匀的成品 ;而用热配法将凡士林加热熔化时往往不注意实际温度 ,凡士林在容器中全部熔化时温度已超过 6 0℃ ,得到的软膏其主药含量偏低。为使配制既省时省力 ,又能确保成品含量与理论量一致 ,笔者对凡士林温度对苯佐卡因含量的影响进行了实验。结果表明 ,将凡士林加热到 5 0℃为宜 ;6 0℃时凡士林完全熔化 ,虽配制容易 ,但会导致苯佐卡因含量偏低。1　方法与结果1.1　仪器、药品与试剂　电热恒温干燥…     

一种含吲哚基希夫碱的合成及其抗菌活性研究

目的:研究对(N,N-二甲氨基)苯甲醛缩色胺希夫碱的制备方法及抗菌活性。方法:通过色胺与对(N,N-二甲氨基)苯甲醛反应合成出一种新型含吲哚基希夫碱,该希夫碱经过核磁共振、红外、紫外光谱等表征。采用滤纸片法测定该希夫碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念株菌的抗菌活性。结果:该希夫碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌都有抑制作用,且抑制活性与浓度呈现一定的依赖性;当含吲哚基希夫碱的浓度达到0.20 mol/L时,对大肠杆菌的抑菌圈直径达到18 mm,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达到14 mm,对白色念珠菌的抑菌圈直径仅达到7 mm。结论:通过色胺与对(N,N-二甲氨基)苯甲醛反应制得含吲哚基希夫碱,该希夫碱的抗菌活性对大肠杆菌达到高度敏感,对金黄色葡萄球菌具有中度敏感,而对白色念珠菌低度敏感,为进一步研究吲哚类希夫碱的生物活性提供参考依据。     

西西里1例脂蛋白沉积症(Urbach-Wiethe病)患者细胞外基质蛋白1基因(ECM1)的新突变

背景:脂蛋白沉积症(LP)即U rbach-W iethe病,是一种罕见的常染色体隐性遗传病,特征为声音嘶哑、疣状皮肤浸润和瘢痕。细胞外基质蛋白1(ECM1)基因突变导致LP。目的:报道1例西西里LP患者ECM1的分子学研究,以扩大这一遗传性皮肤病的突变谱。方法:研究对象为一位32岁女性,11岁时被确诊为LP,父母近亲婚配。其临床表型与Urbach-W iethe病相符,表现为丘疹/结节、硬结状斑块,有时皮肤和黏膜发生溃疡,皮外表现有癫痫、声音嘶哑和神经精神异常。受累皮肤取活检标本行苏木素-伊红染色、过碘酸-希夫染色(PAS)和PAS淀粉酶染色分析。直接测序法…     

A-O组合染色法显示神经尼氏小体、髓鞘和红细胞成分的应用

在实验动物和人体的神经组织染色中 ,神经尼氏小体和髓鞘染色应用较广。为了能够在组织中同时显示这些成分 ,我们选用天青 A和橘黄 G进行组合染色 (简称 A- O组合染色 ) ,染色效果满意 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料及试剂　狗神经脊髓组织 5 0例由本校实验动物中心提供 ,经 15 %中性甲醛固定液 [1 ] 及时固定 ,常规组织脱水、透明、浸蜡、包埋和切片。天青 A乙醇原液 :天青 A (上海试剂三厂 ) 0 .5 g,2 0 %乙醇 10 0 m l;天青 A乙醇应用液 ,天青A乙醇原液 10 ml,2 0 %乙醇 90 m l,使用临时配制。橘黄 G染色液 :橘黄 G(上海试剂…     

用氰化高铁血红蛋白液作标准测定血清游离血红蛋白

测定血清(浆)游离血红蛋白的经典方法是以联苯胺作显色底物的比色法。在此方法中,其血红蛋白标准液存在配制繁杂、保存时间短的缺点,加之临床样本零散,每次测定要花费很多时间配制标准液。作者通过在传统方法的基础上,用氰化高铁血红蛋白(ＨｉＣＮ)作标准,进行了血清游离血红蛋白测定的探索,证实血红蛋白转化为ＨｉＣＮ后仍有类似过氧化物酶的作用。因而,用ＨｉＣＮ作标准解决了原方法之不足。现报道如下:1　材料与方法11　试剂111　氰化高铁血红蛋白转化液(试剂1):配制同文齐氏(ＶａｎＫａｍｐｅｎ-Ｚｉｊｌｓｔｒａ)液[1]。用其1/2浓度。1…     

川续断皂苷乙通过调节细胞免疫平衡对哮喘小鼠气道炎症的减轻作用

目的 旨在评估川续断皂苷乙(DB)对哮喘小鼠气道炎症的影响,并初步探讨潜在的机制。方法 采用卵清蛋白(OVA)构建哮喘小鼠模型。将小鼠按随机数字表法随机分为5组：正常对照组、模型(OVA)组、地塞米松(DEX)组[灌胃给予0.075 mg/(kg·d)地塞米松)]、低剂量DB(L-DB)组[灌胃给予10 mg/(kg·d)川续断皂苷乙]和高剂量DB(H-DB)组[灌胃给予60 mg/(kg·d)川续断皂苷乙]。采用HE染色、Masson染色和过碘酸雪夫(PAS)染色进行组织病理学分析。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中的炎症介质水平。通过流式细胞仪分析肺细胞中的T辅助细胞(Th)和调节性T细胞(Treg)的占比。结果 与正常对照组相比,OVA组小鼠血清IgE、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平、BALF中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-10水平显著降低,而IL-13、IL-4、IL-17、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)水平、BALF中嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(LYM...     

两种鼠蚤成熟过程中组织化学研究Ⅰ糖原和PAS物质

目的：探讨不等单蚤Monopsyllns anisus(Rothchild）和级慢细蚤Leptopsylla segnis(Schoenherr）吸血消化成熟过程中糖原和PAS物质的变化。方法：用高碘酸－希夫反应（Periodic acid-Schiff reaction PAS)法显示未吸血蚤、吸血后不同消化时间蚤体内糖原和PAS物质。结果：2种蚤糖原和PAS物质以脂肪体含量最高。吸血后成蚤消化道各部分PAS反应均有增高，不同消化时间（24、48、72h）不存在显著差异。2种蚤中雌蚤吸血后卵黄细胞发育过程中PAS反应的变化相似，但不等单蚤发育较缓慢细蚤迟缓。结论：吸血将导致2种蚤消化道糖原不同程度的增加。亦能促进雌蚤卵黄细胞的发育。     

SF-3000型分析仪测定血小板减少可信程度的分析

现在临床上普遍使用血细胞分析仪计数血小板(PLT),仪器分析血小板减小的数据是否可信?2002年8月～2003年12月,我们对506例仪器分析显示PLT<90×109/L的患者血样用手工法及血涂片进行综合分析,现报告如下。1材料和方法1.1材料日本Sysmex公司生产SF鄄3000型血液细胞分析仪。仪器法使用日本Sysmex公司生产SF鄄3000原装全套试剂。传统手工法试剂按文献[1]方法配制,改良手工法试剂按文献[2]方法配制。1.2方法用EDTA鄄K2抗凝全血1ml,充分混匀后,1h内在SF3000血细胞分析仪上分析完毕。挑选PLT<90×109/L的血标本506例,分为以下3组:①A组:…     

蟾蜍血细胞内DNA显示的孚尔根反应

目的 熟悉并掌握孚尔根反应的原理及实验操作方法,观察DNA细胞的形态和结构。方法 取蟾蜍血细胞涂片,60℃1NHCL水解后,用Schiff试剂染细胞核,亮绿复染细胞质。结果 显微镜下观察到细胞核被染成紫红色,细胞质为绿色。结论 DNA细胞的核质红绿染色鲜明且清晰美观,让学生对生物学研究有了初步的认识。     

制作永久性阴道毛滴虫标本染色方法的改进

阴道毛滴虫永久性标本制作和染色方法的报道很多 ,染色效果众说纷坛。多年来 ,我们在制作教学标本的过程中 ,对阴道滴虫的制作和染色进行了一些改进 ,获得较满意的效果。现报道如下。1　材料与方法1.1　虫株来源　无菌操作下取患者含阴道毛滴虫的阴道分泌物 ,接种于 8ｍｌ肝浸汤培养基内 ,加灭活小牛血清 2ｍｌ及青、链霉素适量 ,置 37℃培养箱4 8ｈ ,转种一次。1.2　染色液的配制　 (1)吉氏染色液及瑞氏染色液配制按郑思民方法配制[1] ;(2 )混合染色液配制 :吉氏液 1ｍｌ,ｐＨ 7.0的磷酸缓冲液 5ｍｌ,瑞氏液 2ｍｌ。1.3　制片和染色　 (1)…     

长期大泡性角膜病变与周边角膜上皮结膜化和角膜缘缺损有关联

目的:研究大泡性角膜病变(BK)中的周边角膜新生血管形成是否与角膜上皮结膜化(角膜缘干细胞缺乏的一种表现)相关。设计:观察性病例对照研究。受试者:16例BK患者。方法:患者被分为2组:无周边角膜新生血管形成BK组[NV(-)组;5例,5眼]和BK伴新生血管形成组[NV(+)组;11例,13眼]。角膜上皮结膜化程度的评定是用在周边血管化的角膜处采集细胞印记标本经碘酸-希夫染色后确定的,对2组患者的病程持续时间也作比较。16例患者全部接受了穿透性角膜移植术(PK),对2组患者PK术后的角膜再上皮化时间进行比较。主要观察指标:以细胞印记学方法检查的杯…     

过碘酸雪夫反应MAYER胭脂红染色体会

我院于2008年开展了肺灌洗技术,肺泡蛋白沉积症(PAP)是肺灌洗技术适用证的一种,其病理改变主要特点是肺泡及细支气管内有嗜酸PAS强阳性物质填充,成分为糖蛋白和磷脂。胸部CT对PAP的诊断有一定帮助,过碘酸雪夫反应阳性,为确诊提供了有力依据。为此我科应临床要求开展了过碘酸雪夫反应(PAS)、MAYER胭脂红染色。现报告如下。     

对羟基苯甲醛葡萄糖苷衍生物的合成

目的：对羟基苯甲醛葡萄糖苷与已合成的氨基酸酯反应合成希夫碱。方法：用葡萄糖、对羟基苯甲醛为原料合成4-甲酰苯基2,′3,′4,′6′-四-O-乙酰-β-D-吡喃葡萄糖苷,然后与氨基酸酯反应,合成希夫碱化合物。结果：利用红外光谱、核磁共振和元素分析等方法确定了它们的结构。结论：实验合成了5个新化合物。