大鼠原位肝移植模型的建立及高免疫应答鼠种的选择

总结１２７例大鼠原位肝移植模型的建立及体会。移植肝的血管重建采用肝上下腔静脉缝合加肝下下腔静脉及门静脉袖套法吻合，供受体手术共用时９５～１０５分钟，移植肝冷缺血６０分钟，无肝期１７分钟。手术成功率９３．７０％（１１９／１２７），一周存活率８９．７６％（１１４／１２７）。在ＳＤ→ＳＤ、Ｗｉｓｔａｒ→Ｗｉｓｔａｒ，Ｌｏｕ／ｃ→Ｌｏｕ／ｃ，ＴＪＲ／１→ＴＪＲ／１，ＳＤ→Ｗｉｓｔａｒ，Ｗｉｓｔａｒ→ＳＤ，     

大鼠原位肝移植模型制作的进展

稳定的肝移植动物模型是肝移植实验研究的基础 ,特别是大鼠原位肝移植模型 (ratorthotopiclivertransplanta tionmodel,ROLTM ) ,是最为常用的一种。本文对近十余年来国内外大鼠原位肝移植模型制作方面的进展进行综述。1　概　　述ROLTM是研究肝移植器官保存、缺血—再灌注损伤、血流动力学、药理学、移植排斥反应及免疫耐受等方面的理想动物模型[1] ,是一种较为复杂又较难掌握的动物模型。高水平的显微外科技巧和长期的训练是建立模型的两个基本要求。2　ROLTM制作的进展2 .1　发展历史ROLTM最先由美国的Sun等 (1973年 )报道 ,方…     

大鼠原位肝移植手术技巧探讨

目的熟悉大鼠原位肝移植模型的手术步骤,总结手术技巧。方法在传统"二袖套法"基础上,改进部分手术操作,共施行大鼠原位肝移植50例。结果初步建立了大鼠肝移植模型,手术成功率为90%。结论改进方法简便易行,初学者可较快掌握手术操作。     

大鼠原位肝移植急性排斥模型的建立及论证

目的建立大鼠原位肝移植急性排斥模型。方法通过改良的二袖套法,以Lewis(RTl 1)大鼠作为供体,Brown Norway(BN Rt1n)大鼠作为受体,进行原位肝移植。实验组(n=15),术后未进行特殊的干预;对照组(n=15),术后1-7d用FK506 0.2mg.kg-1.d-1灌胃。术后观察两组受体的生存情况,检测肝功能、细胞因子变化、肝组织急性排斥反应和肝细胞凋亡。结果实验组平均生存时间(9.17±1.17)d,明显短于对照组的(50.17±8.50)d(P<0.05);术后实验组在肝功能各指标水平、细胞因子(IL-2,IFN-γ)表达水平、肝组织排斥活动指数(RAI)和肝细胞凋亡数方面明显高于对照组,而实验组的细胞因子(IL-4,IL-10)浓度明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论以近交系Lewis大鼠为供体、BN大鼠为受体进行肝移植,发生的急性排斥反应强烈而且稳定,是较为理想的大鼠肝脏移植急性排斥模型。     

大鼠原位肝移植中预防血管并发症的体会

目的通过对"二袖套法"大鼠肝移植模型的训练,总结预防血管并发症的经验。方法早期阶段:采用经典"二袖套法"建立大鼠原位肝移植模型,实验总数150例。观察术中及术后血管并发症的发生发展,加以分析总结,针对性地对操作技术进行改进。后期阶段:采用改进的方法建立模型,实验总数439例。结果模型建立的后期阶段与早期相比,血管并发症明显减少,48h存活率、周存活率明显升高。结论应用改进的操作方法行大鼠原位肝移植术,能明显降低血管并发症的发生,提高大鼠存活率。     

改良双套管法大鼠原位肝移植术

目的制作改良双套管法大鼠原位肝移植模型。方法在原二袖套法的基础上,于受体门静脉和肝下下腔静脉吻合前放出部分高凝血液,而肝上下腔静脉的吻合是供肝膈肌环与受者肝上下腔静脉血管之间进行（降落伞式吻合）,胆道处理的改进和受体肝脏切除时排出肝脏内血液保证受体的有效血容量。结果改良双套管法吻合效果确实可靠,手术成功率达95％,动物的周存活率为97％。结论该模型稳定可靠,可用于大鼠肝移植方面的研究。     

大鼠原位肝移植肝上腔静脉吻合方式的比较

对80只大鼠施行原位同种异体肝移植。肝以上腔静脉吻合采用二种方式(套管法20例,改良缝合法60例)。前法吻合肝上腔静脉的操作平均历时8.6min,成功率为90％,一周存活率为10％;后法吻合肝上腔静脉的操作平均历时10min,成功率为93.3％,一周存活率为88.3％。前法移植的肝其存活率低于后法(P<0.01),故无实际应用价值。后法较经典缝合法可缩短手术操作时间和无肝期,大鼠有较高的存活率。     

单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨

目的探讨单人建立稳定大鼠原位肝移植模型的手术难点及技巧。方法对200只成年雄性SD大鼠,采用改良的Kamada二袖套法,单人及双人裸眼下行大鼠原位肝移植各50对。结果单人与双人操作组供体手术时间、受体手术时间、无肝期分别为（27.22±1.03）min和（26.47±1.16）min、（50.58±3.10）min和（48.18±3.70）min、（11.60±0.11）min和（11.28±0.08）min。单人与双人操作组手术成功率、1周存活率、1个月存活率分别为90%和94%、88%和88%、84%和86%。结论改良的二袖套法,单人操作简便,成功率高,无需助手协助,可为大鼠原位肝移植实验提供稳定可靠的动物模型。     

改进小体积肝移植供肝大鼠模型建立方法的实验研究

目的探讨改进切肝技术,以建立更可靠的小体积肝移植供肝大鼠模型。方法以Kamada的“二袖套法”为基础,建立30％小体积肝移植中叶供肝大鼠模型。实验分两组：Ⅰ组（28只）,常规方法切肝,以中叶作供肝;Ⅱ组（36只）,改进为左叶和右叶的切肝方法,余方法步骤同Ⅰ组。观察两组手术并发症和7d生存率。结果Ⅱ组肝后下腔静脉狭窄的发生率明显低于Ⅰ组（P〈0．05）,其他并发症发生率两组间无明显差异（P〉0．05）。术后7d生存率Ⅱ组（60％,21／36）高于Ⅰ组（33％,9／28）,但差异未显示有统计学意义（Χ^2=0．272,P〉0．05）。结论采用中叶供肝、改进切肝技术,可以建立更稳定可靠的部分体积肝移植供肝大鼠模型。     

原位肝移植大鼠肝内门-体分流量的变化

目的 测定原位肝移植大鼠移植肝肝内门-体分流量的变化。方法健康清洁级封闭群雄性SD大鼠，分为供体组和受体组，采用简化二袖套法建立大鼠原位肝移植模型（rat orthotopic liver transplantation model。ROLTM）24只，分为移植后2h、4d、7d三组，每组8只。各组于相应时间点进行肝脏活体在体灌注。经小隐静脉插管连续灌注D-山梨醇，同时取门静脉和肝静脉血，用酶分光光度法测定山梨醇浓度，计算肝内门-体分流量。结果2h、4d、7d组肝内门-体分流量分别为39．9％，52．3％，27．6％，组间差异显著，且均比正常大鼠明显增高。结论 ROLTM大鼠移植肝血供恢复后即存在肝内门-体分流，并随时间推移分流量变化呈先增加后减少的过程。     

活体肝移植肝动脉重建技术与并发症

目的 探讨活体肝移植中肝动脉重建的显微外科技术,以降低肝动脉栓塞的发生率,提高患移植后的生存率。方法 本组24例,其中右半肝活体肝移植6例,左半肝移植16例,左外叶2例;采用显微外科技术行肝动脉吻合。吻合的方式是端端吻合。结果11例肝动脉直径＜2mm,重建肝动脉时间为24～88min。行单支动脉吻合20例,两支动脉吻合4例;2例患术后出现肝动脉血栓形成,均须行再次肝移植后恢复。本组肝动脉血栓的发生率为8．3％。结论 显微外科技术重建肝动脉可减少肝移植术后肝动脉栓塞的发生。     

前列地尔对大鼠移植肝肝功能的影响

目的 探讨前列地尔对冷保存2、4 h的移植肝肝功能的影响.方法 64只雄性SD大鼠,随机均分为4组:A1组(供肝冷缺血2 h)、A2组(供肝冷缺血2 h,静脉注射前列地尔2μg/kg)、B1组(供肝冷缺血4 h)和B2组(供肝冷缺血4 h,静脉注射前列地尔2 μg/kg).门静脉复流6 h后,检测胆汁流量和血浆中ALT、AST、LDH.结果 术后6 h,A2组和B2组胆汁分泌量均多于各自对照组(P<0.05),但ALT、AST、LDH水平均低于各自对照组(P<0.05).结论 前列地尔可以改善受体大鼠术后肝功能.     

Construction and demonstration of acute rejection model after orthotopic liver transplantation in rats

目的 建立大鼠原位肝移植急性排斥模型.方法 通过改良的二袖套法,以Lewis (RTl1)大鼠作为供体,Brown Norway(BN Rtln)大鼠作为受体,进行原位肝移植.实验组(n=15),术后未进行特殊的干预;对照组(n=15),术后1-7 d用FK506 0.2 mg·kg-1·d-1灌胃.术后观察两组受体的生存情况,检测肝功能、细胞因子变化、肝组织急性排斥反应和肝细胞凋亡.结果 实验组平均生存时间(9.17±1.17)d,明显短于对照组的(50.17±8.50) d(P＜0.05);术后实验组在肝功能各指标水平、细胞因子(IL-2,IFN-γ)表达水平、肝组织排斥活动指数(RAI)和肝细胞凋亡数方面明显高于对照组,而实验组的细胞因子(IL-4,IL-10)浓度明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 以近交系Lewis大鼠为供体、BN大鼠为受体进行肝移植,发生的急性排斥反应强烈而且稳定,是较为理想的大鼠肝脏移植急性排斥模型.     

暴发性肝功能衰竭的急诊肝脏移植治疗

目的探讨急诊肝脏移植对暴发性肝功能衰竭(FHF)的疗效。方法回顾性分析笔者所在中心2005-03～2006-03收治7例暴发性肝功能衰竭患者的临床资料及其治疗效果。结果行急诊肝脏移植治疗6例,术后1例并发原发性移植肝无功能,5例患者于48h内苏醒。1例男性患者术后并发急性肾功能衰竭,1例患者术后发生排斥反应,经治疗后逆转。1例男性患者并发口腔严重溃疡。2例并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS),行气管切开。目前生存4例均生活状况良好,已重返工作岗位。结论急诊肝脏移植是治疗暴发性肝功能衰竭的有效方法,为患者等待供体赢得宝贵的时间是提高移植成功率的关键。     

不使用T型引流管胆管端端吻合在成人经典原位肝移植中的应用

目的 评估不使用T型引流管的胆管端端吻合在成人经典式原位肝移植中应用的可行性及安全性。方法 2003年7月～11月期间,在美国得克萨斯州大学圣安东尼奥器官移植中心共进行成人经典式原位肝移植手术36例,术中不使用静脉转流,所有病例均采用不使用T型引流管的胆管端端吻合进行胆道重建,肝移植手术后平均随访时间4．8个月。结果 平均手术时间190min,平均热缺血时间为34min,平均冷缺血时间为5．2h。出现胆道并发症3例（8．3％）,其中胆瘘2例,胆道狭窄1例,未见胆道感染、结石形成以及胆管缺血性坏死等并发症。结论 胆管端端吻合在成人经典式原位肝移植中应用是可行的、安全的,绝大多数肝移植手术行胆管端端吻合时无须常规使用T型管引流。     

胆囊癌原位移植模型的建立及探讨

目的 阐释裸鼠胆囊癌原位移植模型的优缺点,同时讨论胆囊癌动物模型的发展方向.方法 创建裸鼠胆囊癌原位移植模型,以成瘤率,淋巴结、腹水、肝肺转移等为指标,对原位移植瘤模型进行评价.结果 原位移植瘤模型在成瘤率、淋巴结移位、腹水、肝肺转移、微淋巴管密度方面具备优势.结论 胆囊癌原位移植瘤模型具有更高自发转移率,其生物学特性和人胆囊癌更为接近,是胆囊癌生物学研究的重点方向之一.     

利伐沙班对原位肝移植大鼠血液流变学的影响

目的 探讨利发沙班对肝移植大鼠血栓形成的预防作用.方法 成年大鼠40只,随机分为A、B、C、D四组,均开腹行原位肝移植.于术前1 d、手术中、术后1、2、3 d,A组分别口服利伐 沙班1次,剂量为5 mg/kg,B组分别静脉输注低分子右旋糖酐20 ml,C组分别皮下注射低分子肝素 200 U/kg,D组为空白对照组,只作肝移植,不用抗凝药物.术前、术后2 h和术后3 d检测血液流变学.结果 与D组比较,A、B、C组大鼠肝移植前后血液流变学均有明显改善.A、B、C三组血液流变学指标差异无统计学意义.D组有1只大鼠死亡.结论 利伐沙班能有效预防大鼠肝移植术后血液的高凝状态.