黄芪对豚鼠哮喘模型核因子κB表达作用的研究

支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病 ,多种炎症细胞及其产生的细胞因子等炎症蛋白参与了哮喘的发病机制。核因子κＢ(ＮＦ κＢ)作为一种转录因子调节多种炎症蛋白基因的表达 ,从而参与了哮喘的炎症机制[1] 。近来有研究发现黄芪能降低哮喘患者的气道高反应性 ,并能调节哮喘患者的免疫功能。本研究观察豚鼠哮喘模型ＮＦ κＢ表达的特点及相关的肺功能和气道炎症程度 ,并观察黄芪对ＮＦ κＢ表达的影响。材料与方法　选健康雄性豚鼠 30只 ,体重 2 0 0～ 35 0ｇ,随机分为 3组 ,每组 10只。腹腔内注射 10 %卵清蛋白(ＯＶＡ)溶液 1ｍｌ致敏 ,2…     

NF-κΒ活性增加参与由于一氧化氮合成长期慢性抑制所致的大鼠心血管重构

研究背景 :给予大鼠Ｎ 硝基 Ｌ 精氨酸甲基酯 (Ｌ ＮＡＭＥ) ,使其内皮一氧化氮(ＮＯ)合成受到长期慢性抑制 ,引起血管的早期炎症改变 (冠状动脉管壁单核细胞浸润 ,核转录因子ＮＦ κＢ激活 ,和单核细胞化学趋化蛋白 1表达 )以及随后的动脉粥样硬化 (管壁中层增厚和管周纤维化 )和心肌纤维化。然而 ,并没有ＮＦ κＢ在这一过程中的重要性的直接证据。方法和结果 :应用顺反子诱饵策略检验ＮＦ κＢ在心血管重构病原学上的意义。结果发现 ,对在体心脏转染ＮＦ κＢ的顺反子诱饵寡核苷酸可以预防Ｌ ＮＡＭＥ导致的早期炎症和随后发生的冠脉管…     

核因子—κB的研究现状

自 198 6年发现核因子 κＢ(ＮＦ κＢ)以来 ,由于在炎症性疾病中的特殊作用 ,引起了人们的广泛兴趣。ＮＦ κＢ是在进化学上高度保守的一种转录因子。广泛存在于各种组织中 ,并调节多种前炎症介质的表达。1　ＮＦ κＢ/ＲＥＬ的生物学特性ＮＦ κＢ亚单位克隆已经揭示其内部有一个保守的中心区域 ,Ｒｅｌ同源结合域。内含ＤＮＡ结合区 ,二聚体化区和核定位序列 ,分别负责ＤＮＡ结合 ,二聚体化和与ＩκＢ家族成员相互作用以及携带核定位信号 (ＮＬＳ)。在哺乳动物中ＮＦ κＢ/Ｒｅｌ家族有 5个多肽链亚基 ,Ｐ5 0 /Ｐ10 5 ,Ｐ65 /ＲｅｌＡ ,…     

急性肺损伤大鼠肺组织核因子-кB活性的变化

现在认为 ,急性肺损伤 (ＡＬＩ)是全身失控性炎症反应导致多器官功能障碍综合征的肺部表现 ,其严重阶段即为急性呼吸窘迫综合征 (ＡＲＤＳ) ,是机体过度炎症反应导致肺血管内皮和肺泡上皮广泛损伤的结果[1] 。核因子 κＢ(ＮＦ κＢ)是有关炎症病理过程中许多炎性介质、黏附分子基因表达调控的关键性转录因子 ,它是起动多形核白细胞 (ＰＭＮ)炎症的关键 ,ＮＦ κＢ的活性与ＡＬＩ和ＡＲＤＳ密切相关[2 ] 。本研究通过观察ＡＬＩ大鼠肺组织ＮＦ κＢ活性的变化 ,探讨其机制及其在ＡＬＩ发生发展中的意义。一、材料与方法1.模型复制和分组 :健…     

透析相关性淀粉样变关节滑膜组织中核转录因子的活化

透析相关性淀粉样变 (ＤＲＡ)时关节滑膜组织呈以单核细胞浸润为主要表现的慢性炎症。核转录因子κＢ (ＮＦ κＢ)的活化在各种炎症因子基因的转录调节中起重要作用 ,本观察旨在探讨ＤＲＡ时关节组织中ＮＦ κＢ的活化、分布及其与关节炎症反应之间的关系。一、材料与方法1.组织标本 :经刚果红和抗 β2 微球蛋白 (β2 Ｍ)染色证实的ＤＲＡ关节标本 12例。其中 8例标本取自手术中 ,4例标本来自尸检。均为慢性血透病人。对照组 4例 ,关节组织来自非肾脏病、无关节疾病史的尸检标本。2 .免疫组化染色 :采用ＤＡＫＯＥＮＶＩＳＩＯＮ试剂盒 (丹…     

小鼠哮喘模型中白细胞介素5等对嗜酸细胞凋亡的调控作用

先前我们已证实在小鼠哮喘模型中白细胞介素 5 (ＩＬ 5 )和ＩＬ 10分别上行和下行调节气道炎症 ,二者的动态平衡是决定嗜酸细胞 (ＥＯＳ)浸润与消散的重要因素[1] 。我们的研究进一步动态观察哮喘动物模型气道炎症全过程的变化 ,旨在探讨炎症促进因子ＩＬ 5和炎症抑制因子ＩＬ 10对ＥＯＳ凋亡的调节作用。对象与方法　哮喘模型制作 :10周龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 10只 ,雌雄不限 ,体重 (10± 2 )ｇ ,由华西医科大学动物中心提供。所有动物随机分配为对照组 (11只 )、致敏激发 (ＳＣ)组(77只 )。ＳＣ组小鼠腹腔注射 10 %卵白蛋白 (ＯＶＡ) 0 1ｍｌ…     

哮喘豚鼠肺组织中嗜酸细胞凋亡与白细胞介素5mRNA表达？…

目的 探讨哮喘时嗜酸细胞（ＥＯＳ）凋亡与肺组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达的关系。方法 将豚鼠随机分为对照组（正常组７只）、哮喘组（８只）、地塞米松组（８只），应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术和原位杂交方法，检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中不同密度ＥＯＳ凋亡百分比和肺组织ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达。结果 （１）正常对照组ＢＡＬＦ中低密度ＥＯＳ、正常密度ＥＯＳ凋是     

急性肺损伤时黄芪对核因子κB及白细胞介素6 mRNA表达的影响

黄芪能提高机体免疫能力 ,对急性肺损伤 (ＡＬＩ)有一定的治疗作用 ,但机制尚不清。核因子κＢ(ＮＦ κＢ)在细胞因子的转录调控中起了重要的作用。为了观察黄芪对肺损伤的治疗作用即抗炎作用是否与ＮＦ κＢ的活化被抑制有关 ,我们进行了相关实验研究。材料与方法　ＳＤ大鼠 5 4只 ,体重 2 0 0～ 30 0ｇ ,由华中科技大学同济医学院动物房提供。将 5 4只大鼠分为对照组 18只、模型组 18只、黄芪组 18只。每组分第 1、3、4ｈ 3个时段各 6只放血杀死。分析纯油酸购自湖北大学化工厂 ,ＮＦ κＢＰ6 5抗体购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司。肺损…     

核因子-κB与阿尔茨海默病

早在 2 0世纪 80年代中期Ｓｅｎ和Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ〔1〕 即在Ｂ淋巴细胞中发现一种特异结合于免疫球蛋白κ轻链基因增强子上的核转录因子蛋白 ,因而命名为核因子 κＢ (ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκＢ ,ＮＦ κＢ)。ＮＦ κＢ是机体细胞快速反应系统中关键的因子 ,随其功能变化可快速调节细胞的转录程序 ,使其能适应外界应激情况〔2〕 。ＮＦ κＢ本身和调节分子的复杂性使得ＮＦ κＢ可在不同的细胞中发挥不同的生理作用。　　一、ＮＦ κＢ的功能与活化　　 1.ＮＦ κＢ的结构与活化 :现已证实多种细胞中均有ＮＦ κＢ ,其蛋白亚基主…     

哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与白细胞介素—1β转换酶,Fas表达的关联 …

支气管哮喘是由嗜酸粒细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症性疾病。哮喘患者肺内嗜酸粒细胞浸润是其显著的病理特征。这种嗜酸粒细胞增多,除了与哮喘体内嗜酸粒细胞生成增多外,还与嗜酸粒细胞在肺内生存时间延长,即正常的细胞凋亡受到抑制有关。本实验通过观察哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(ＢＡＬＦ)中嗜酸粒细胞的凋亡和白细胞介素1β转换酶(ＩＣＥ)及Ｆａｓ的表达,探讨哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与ＩＣＥ和Ｆａｓ表达的关系。一、材料与方法1.健康雄性豚鼠30只,体重400～500ｇ,随机分为2组,每组15只。哮喘组:采用卵白蛋白致敏和激发建立哮喘模…     

核因子-κB与治疗类风湿关节炎的药物

转录因子核因子 κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ κＢ ,ＮＦ κＢ)是可与多种基因启动子或增强子上的κＢ位点发生特异性结合并能促使基因的转录的蛋白质总称。ＮＦ κＢ为ＮＦ κＢ Ｒｅｌ家族的一员。在哺乳动物细胞中 ,已区分出如下几种核因子 κＢ的蛋白质 :ｐ6 5 ,ｃ Ｒｅｌ,ＲｅｌＢ ,ｖ Ｒｅｌ,ｐ5 0 ｐ10 5与 ｐ5 2 ｐ10 0 ,其中ｐ5 0与ＲｅｌＡ (ｐ6 5 )两亚基形成的异二聚体为最常见的形式[1 ,2 ] 。当细胞处于静息状态时 ,ＮＦ κＢ同源或异源二聚体与抑制性蛋白κＢ (ＩκＢｓ)以非活性的形式结合成三聚体存在于细胞质中。…     

核因子-κB与多器官功能障碍综合征

多器官功能障碍综合征 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｏｒｇａｎｄｙｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓｙｎｄｒｏｍｅ ,ＭＯＤＳ)早期即有过度的炎症反应。外源性因子通过多种途径 ,活化巨噬细胞产生致炎性细胞因子 ;缺血再灌注损伤、微循环障碍引起氧自由基等释放 ;激活中性粒细胞、内皮粘附分子 ;内毒素血症激活免疫活性细胞、补体系统、凝血系统等可继续发展至ＭＯＤＳ。与致炎性细胞因子有直接关系的上游信号分子为核因子 κＢ (ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκＢ ,ＮＦ κＢ) ,ＮＦ κＢ的活化和易位入细胞核后介导致炎性细胞因子的转录[1] 。氧自由基在细胞…     

致敏大鼠肺内细胞增殖与凋亡的研究

为探讨支气管哮喘时气道重塑的特点及细胞增殖与凋亡机制对气道重塑的调节 ,我们检测了卵蛋白 (ＯＶＡ)致敏不同时间大鼠气道粘膜下细胞增殖及凋亡指数的变化、增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)表达的变化以及气道基底膜Ⅲ型胶原表达的变化 ,并对与细胞增殖、凋亡密切相关的Ｆａｓ/ＦａｓＬ抗原表达进行研究。材料与方法　雄性ＳＤ大鼠 2 4只 ,随机分为 4组 ,每组各 6只。对照 1周组和对照 3周组 :以生理盐水代替抗原进行注射和雾化吸入 ;致敏 1周组和致敏 3周组 :参照文献 [1]方法给予ＯＶＡ致敏和激发。雾化后分别于第 7、2 1ｄ经0 3%戊巴比妥…     

卡介菌多糖核酸对哮喘小鼠Th1/Th2类某些细胞因子分泌的影响

通过观察小鼠支气管肺泡灌洗液 (ＢＬＡＦ)中干扰素γ(ＩＦＮ γ)和白细胞介素 4(ＩＬ 4)水平来反映气道炎症的变化 ,并与地塞米松的疗效比较 ,探讨卡介菌多糖核酸对Ｔｈ1/Ｔｈ2反应的调节作用机制。对象与方法　试剂 :小鼠ＩＦＮ γ酶联免疫吸附测定(ＥＬＩＳＡ)试剂盒、ＩＬ 4ＥＬＩＳＡ试剂盒 (深圳晶美公司 )、卵白蛋白干粉剂 (ＯＶＡ ,上海华美公司 )、卡介菌多糖核酸注射液 (湖南九芝堂公司 )、地塞米松磷酸钠注射液 ,氢氧化铝凝胶。选 8～ 10周龄、体重 18～ 2 2ｇ的雄性ＢＡＢＬ/ｃ小鼠 32只 ,随机分成正常对照组 (Ａ组 )、哮喘组 (…     

哮喘患者外周血单个核细胞核因子-κB活化水平的研究

淋巴细胞的作用在哮喘的炎症机制中尤为关键 ,我们以往的研究也表明 ,哮喘患者外周血淋巴细胞的活化与患者病情密切相关[1]。有研究发现 ,主要成分是淋巴细胞的外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)的活化与核因子 κＢ(ＮＦ κＢ)的激活有关[2 ]。本研究通过观察哮喘患者ＰＢＭＣ中ＮＦ κＢ的活化是否增加以及与患者病情的关系 ,意在从细胞内转录因子活性变化的角度探讨哮喘的发病机制。一、对象和方法1 .对象 :哮喘组 :急性发作期哮喘患者 1 6例 ,男、女各 8例 ,平均年龄 3 3岁 ,均符合中华医学会呼吸病学分会制定的诊断标准 ,抽血前 1周内未用…     

核因子-κB与肾脏疾病

核因子 (ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ ,ＮＦ) ＫａｐｐａＢ(κＢ)是一种重要的核转录因子 ,它参予细胞内的信号传递 ,调控多种基因的表达。它的异常激活或完全抑制与多种疾病的发生有关[1～ 4 ] 。多种肾脏疾病 ,如肾小球肾炎、肾细胞癌、糖尿病肾病、间质性肾炎及肾纤维化等 ,均伴有ＮＦ κΒ转录活性的异常。1　ＮＦ κＢ的结构及特点现已明确 ,ＮＦ κΒ是一序列特异性的ＤＮＡ结合蛋白 ,与其细胞内抑制物ＩκΒ结合 ,以非活性形式存在于胞浆中。多种物质 ,如肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)、脂多糖 (ＬＰＳ)或佛波乙酯 (ＰＭＡ)等 ,可刺激…     

CD86对抗原引起气道嗜酸细胞浸润和气道高反应性作用的研究

目的　探讨ＣＤ８６ 分子对抗原引起气道炎症和气道高反应性的影响,加深认识ＣＤ８６ 在支气管哮喘发病机制中的作用。方法　应用鸡卵清蛋白致敏和刺激ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠（ 每组８ 只） 以诱导嗜酸细胞（ＥＯＳ）聚集到气道,收集支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ） 细胞并以流式细胞仪检测ＣＤ８６ 分子的表达水平;观察静脉注射抗ＣＤ８６ 单克隆抗体后ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数和气道反应性的变化。结果　小鼠经抗原致敏和刺激后ＢＡＬＦ中可以见到大量的ＥＯＳ,气道反应性亦明显升高,ＢＡＬＦ细胞所表达的ＣＤ８６ 水平也随之增高。经抗ＣＤ８６ 单克隆抗体处理后,ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数降低了６７％ （ Ｐ＜０－０１）;同时,气道反应性也下降６９％ （ Ｐ＜ ０－０１）。此外,抗ＣＤ８６ 单克隆抗体还可以抑制肺组织局部白细胞介素４ 和白细胞介素５ 的产生。结论　抗ＣＤ８６ 单克隆抗体能够抑制气道ＥＯＳ浸润和降低气道反应性,其作用机制可能是通过抑制局部白细胞介素４ 和白细胞介素５ 产生而实现。提示抑制气道抗原呈递细胞的活性应有益于哮喘的治疗。     

CD86对抗原引起气道嗜酸细胞浸润和气道高反应性作用？…

目的 探讨ＣＤ８６分子对抗原引起气道炎症和气道高反应性的影响,加深认识ＣＤ８６在支气管哮喘发病机制中的作用。方法 应用鸡卵清蛋白致敏和刺激ＢＡＬＢ／ｃ小鼠以诱导嗜酸细胞（ＥＯＳ）聚集到气道,收集支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ０细胞并以流式细胞仪检测ＣＤ８６分子的表达水平;观察静脉注射抗ＣＤ８６单克隆抗体后ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数和气道反应性的变化。     

核因子-κB对哮喘炎性因子的调控

核因子κＢ（ＮＦκＢ）是近年来发现的重要基因转录因子,参与许多炎性因子的调控。哮喘气道炎症由多种细胞因子、粘附分子和炎性介质参与形成,因此对哮喘患者ＮＦκＢ的研究具有重要意义。一、ＮＦκＢ／ＮＦκＢ抑制因子（ＩκＢ）的种类和基本结构ＮＦκ...     

哮喘豚鼠肺组织粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子mRNA表达及雷公藤的影响

目的探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）在哮喘嗜酸细胞（Ｅｏｓ）炎症中的作用。方法建立哮喘豚鼠实验模型，用雷公藤处理，观察肺组织Ｅｏｓ密度，斑点分子杂交检测支气管肺组织ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ含量。结果哮喘组肺组织Ｅｏｓ浸润密度增加，ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达水平增高，与对照组相比差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。雷公藤处理后ｍＲＮＡ表达显著降低，但Ｅｏｓ浸润密度减少不明显。结论ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达增加可能是导致哮喘Ｅｏｓ气道炎症的原因。雷公藤能抑制ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达，可能具有哮喘抗炎治疗的潜在应用价值。