急性运动轴索型神经病患者血清对大鼠脊髓运动神经元凋亡相关蛋白表达的影响

目的采用蛋白质组学技术研究急性运动轴索型神经病(AMAN)患者血清对大鼠脊髓运动神经元凋亡相关蛋白表达的影响。方法分别以16例AMAN患者和16名健康献血者的血清对原代培养大鼠脊髓运动神经元进行干预,24 h后行双向凝胶电泳,MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定神经元发生变化的蛋白,表达水平上升或下降超过30%的点判定为差异蛋白质点。结果 AMAN患者血清干预与健康献血者血清干预的大鼠脊髓运动神经元比较,有21种差异表达蛋白,其中内质网蛋白29、不均一核糖核蛋白H、蛋白酶体α亚基1、3-磷酸甘油醛脱氢酶、电压门控阴离子选择性通道蛋白1为凋亡相关蛋白。结论在AMAN患者血清作用下,大鼠脊髓运动神经元的细胞凋亡相关蛋白表达发生了变化。     

大鼠坐骨神经损伤修复术后相应脊髓节段Bcl-2、Bax蛋白表达及神经细胞凋亡

目的探讨成年大鼠坐骨神经损伤修复术后相应脊髓节段Bcl-2、Bax蛋白表达及神经细胞凋亡为临床治疗周围神经损伤提供实验依据。方法选取健康成年大鼠68只,随机分为正常对照组、假手术组和实验组,分别于术后不同时间取相应脊髓节段做HE染色、TUNEL染色、免疫组化染色,进行脊髓切片形态观察、检测神经细胞的凋亡及脊髓Bcl-2、Bax蛋白表达。结果假手术组术后无阳性变化。实验组术后脊髓前角运动神经元胞体数目减少,1d后可见脊髓内TUNEL阳性细胞,14d后表达至高峰。1d后,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达,14d后达高峰,28d后仍有表达。Bcl-2/Bax值越小,凋亡细胞数量越多。结论大鼠坐骨神经损伤修复术后相应脊髓节段存在神经细胞凋亡,Bcl-2/Bax比值的变化是神经凋亡的重要指标。     

大鼠坐骨神经移植后脊髓相应节段运动神经元中P-Erk1/2的表达和变化

目的 研究成年大鼠坐骨神经损伤后脊髓相应节段运动神经元中P-Erk1/2的表达和变化.方法 健康成年雄性Wister大鼠共50只,坐骨神经切断组,将动物模型于术后1W、2W、4W、6W、8W处死后取患侧L4～L6脊髓,Western-Blot方法 检测P-ERK1/2在脊髓中的表达变化,并将两组所得数值进行统计学分析.结果 脊髓前角运动神经元中的P-ERK1/2在假手术组仅有少量表达并维持在一定的水平;在坐骨神经切断组中,术后1W内表达增加、2W达高峰、8W恢复正常水平.结论 大鼠坐骨神经切断后可能是通过激活MAPK/ERK1/2信号通路的方式,对脊髓前角运动神经元的凋亡进行调控.     

热休克蛋白27对大鼠臂丛神经根撕脱伤后脊髓运动神经元细胞凋亡的影响

目的:观察热休克蛋白27(Hsp27)对大鼠臂丛神经根撕脱后脊髓前角运动神经元细胞凋亡的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为实验组和对照组.实验组动物分别以45℃热休克预处理15min,42℃维持20min,室温恢复24h后,在手术显微镜下进行脊髓C5～T1节段神经根撕脱术,分别于术后12h及1,3,5,7d处死动物.对照组仅施行臂丛神经根撕脱术,并分别于术后12h及1,3,5,7d处死动物.各组分别进行Hsp27免疫组织化学染色和原位末端标记法(TUNEL)检测脊髓运动神经元细胞凋亡情况,结合图像对结果进行分析.结果:两组Hsp27表达高峰均在热休克后1d;实验组脊髓运动神经元细胞凋亡在1d达到高峰,而对照组出现在3d,且凋亡细胞数明显高于实验组.结论:Hsp27可抑制臂丛神经根撕脱伤后脊髓运动神经元凋亡.     

脊髓损伤大鼠细胞凋亡、自噬程度的评估及阿魏酸的干预作用研究

目的:研究脊髓损伤大鼠细胞凋亡、自噬程度的评估及阿魏酸的干预作用。方法:选择成年雄性SD大鼠并分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)、阿魏酸干预组(FA组),通过动脉夹夹持的方法建立脊髓损伤模型,给予100mg/kg的阿魏酸灌胃、2次/日干预。干预后7、14d时,测定脊髓组织中凋亡分子、凋亡抑制分子、细胞自噬分子的表达量。结果:SCI组大鼠脊髓组织中PARP-1、AIF、ASK-1、mTOR、PI3K、Akt、Beclin1、LC3-Ⅱ的蛋白表达量显著高于Sham组,Survivin、NAIP、Bcl-2的蛋白表达量显著低于Sham组;FA组大鼠脊髓组织中PARP-1、AIF、ASK-1、mTOR、PI3K、Akt、Beclin1、LC3-Ⅱ的蛋白表达量显著低于SCI组,Survivin、NAIP、Bcl-2的蛋白表达量显著高于SCI组。结论:阿魏酸对脊髓损伤过程中的细胞凋亡、自噬具有抑制作用。     

血管内皮生长因子防止脊髓运动神经元凋亡的研究

目的研究成年大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子对运动神经元的神经保护作用以及Caspase-3 mRNA表达与运动神经元凋亡的关系。方法用72只SD大鼠制作成脊髓损伤模型,随机分为对照组、应用VEGF组和VEGF拮抗组。伤后6、12、24h和3、7、14d取材。应用原位杂交、TUNEL技术研究运动神经元的凋亡。结果Caspase-3 mRNA在VEGF组脊髓组织中的表达下调,在VEGF拮抗组中表达增高。TUNEL阳性细胞计数显示脊髓损伤后VEGF拮抗组有多量神经元丢失,而VEGF组神经元丢失数量明显减少。结论VEGF可以防止成年大鼠脊髓损伤后运动神经元的凋亡,其作用可能是由Caspase-3介导的。     

大剂量甲泼尼龙对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞bcl-2、bax及凋亡的影响

目的 观察大剂量甲泼尼龙治疗对大鼠受损脊髓神经细胞凋亡及凋亡基因表迭的影响.方法 选取48只雌性SD大鼠随机等分为二组,对照组与治疗组.按N ystrom和Berglund法造大鼠急性脊髓损伤(ASCI)模型制模,分别于伤后4h,8h,1d,3d,7d和14d时从二组中各随机选取4只动物灌注固定后取材.免疫组织化学检测损伤段脊髓内bcl-2和bax蛋白表达,TUNEL检测细胞凋亡,染色结果应用图像分析仪进行半定量分析.结果 大鼠急性脊髓损伤(AScl)后4h即可见脊髓内TUNEL阳性细胞,8h表达达高峰,此后表达量逐渐下降,14d时仍可见少量阳性细胞.凋亡相关蛋白bcl-2和bax,伤后1d时达高峰,14d时仍有表达.与对照组相比,治疗组中8h,ld和3d时间点凋亡细胞敷减少有统计学意艾,8h和ld时bcl-2蛋白表达增高及bax蛋白表达减少有统计学意义.结论 大鼠ASCI后,大剂量甲泼尼龙治疗可通过改变损伤段脊髓内凋亡相关蛋白bel-2和bax的表达,从而减少神经细胞凋亡的发生.     

大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元凋亡及其机制研究

目的探讨大鼠坐骨神经损伤后雪旺细胞（schwann cells，SCs）中核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）的表达及其对脊髓运动神经元凋亡的调控作用。方法健康成年雄性SD大鼠36只，体重200～250g，随机分为正常对照组（n=-6）和坐骨神经钳夹损伤组（n=30）。采用免疫组化、计算机图像分析技术，对正常和损伤后不同时间1、3、7、14及21d的坐骨神经SCs中NF—κB的表达进行检测。同时取与坐骨神经相连的L4～L6段脊髓作原位末端标记技术（TUNEL）检测脊髓运动神经元的凋亡。结果与正常对照组相比较，损伤组坐骨神经SCs中NF—κB的表达显著改变，其变化趋势为先升高后降低，伤后3d达高峰。随后逐渐下降，21d接近正常值；损伤组脊髓运动神经元凋亡数在损伤后表现出相同的变化趋势。相关分析表明两者呈显著正相关。结论坐骨神经损伤后脊髓运动神经元发生不同程度的凋亡，SCs中NF—κB可能参与这种凋亡的调控过程。     

腺病毒介导的脑源性神经营养因子基因脊髓内转移对神经根损伤后细胞凋亡的影响

目的观察腺病毒介导的脑源性神经营养因子（BDNF）基因脊髓内转移对神经根损伤后细胞凋亡的影响。方法在大鼠神经根切断吻合模型基础上,通过显微注射法在立体定位仪上将复制缺陷型重组腺病毒载体（AxCA-BDNF）直接转移至大鼠神经根损伤部相应的脊髓腹角。术后1、3、7、14、28d利用DNA末端原位标记、免疫组化、原位杂交,观察脊髓凋亡细胞、Caspase-3、bcl-2及iNOS表达的改变。结果神经根损伤诱导Caspase-3和iNOS的表达,触发运动神经元凋亡;AxCA-BDNF治疗后腹角运动神经元不但较少表达Caspase-3和iNOS,而且bcl-2表达增加,发生凋亡的细胞减少。结论AxCA-BDNF介导的外源性BDNF基因转染对脊髓运动神经元具有保护作用,其作用机制与AxCA—BDNF抑制内源性的死亡程序有关。     

雌二醇在大鼠脊髓损伤模型中抗自噬作用的研究

目的 探讨自噬在雌二醇干预严重脊髓损伤(SCI)过程中的作用。 方法 选取72只SD雌性大鼠,体重为200~220 g。采用随机数字表法分为3组,每组24只。其中2组(模型组和干预组)采用动脉夹(15 g闭合力)建立大鼠严重脊髓损伤夹闭模型。干预组在脊髓损伤前1周即开始隔天肌注苯甲酸雌二醇,持续到安乐死之前。为比较高剂量雌二醇的疗效,脊髓损伤后7、14、21、28 d采用BBB(Basso,Beattie,Bresnahan)评分评估大鼠运动功能。实时荧光定量PCR和蛋白印记检测脊髓损伤后3 d自噬标志物表达变化。免疫组化法检测损伤后3 d LC3在运动神经元中的免疫活性。 结果 高剂量雌二醇明显改善大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复,损伤后14、21、28 d各时间点对应的BBB评分较模型组高。脊髓损伤术后3 d,模型组的LC3、Beclin-1表达高于假手术组,雌二醇干预治疗在mRNA和蛋白水平上抑制其表达。与之相反,自噬底物P62在模型组较假手术组相比有明显降低。然而,给予雌二醇治疗后,P62表达显著增加。免疫组化结果显示脊髓损伤后运动神经元中增强的LC3免疫活性被高剂量雌二醇所抑制。 结论 雌二醇在脊髓损伤过程中的神经保护效应在一定程度上与抑制过度自噬相关。      

群体康复训练对运动发育迟缓婴幼儿精细运动功能的影响

目的:探讨群体康复训练对运动发育迟缓婴幼儿精细运动功能的影响。方法:选取0-3岁运动发育迟缓婴幼儿34名,随机分为训练组与对照组各17名。训练组婴幼儿采用群体康复训练,对照组婴幼儿不进行训练。训练前、训练后3、6个月评估精细运动能力。结果:训练组婴幼儿训练前、训练3个月后与对照组FMFM各能区得分比较,差异无统计学意义(P>0.05);训练6个月后婴幼儿上肢关节活动能力及操作能力得分有明显差异(P<0.05);13~18月龄及19~24月龄婴幼儿FMFM总分明显提高(P<0.05);训练后婴幼儿精细运动能力与粗大运动能力相关性更显著(P<0.05)。结论:运动发育迟缓婴幼儿进行群体康复训练能提高精细运动能力,为接受学校教育、提高社会适应能力、获得自理能力及回归社会奠定基础。     

群体康复训练对运动发育迟缓婴幼儿粗大运动功能的影响

目的:探讨群体康复训练对运动发育迟缓婴幼儿粗大运动功能的影响。方法:选取0~3岁运动发育迟缓婴幼儿34名,随机分为训练组与对照组各17名。尝试群体康复训练模式,由康复医生与康复治疗师指导,保育员配合康复。对运动发育迟缓婴幼儿训练前、训练后3、6个月,分别采用粗大运动功能测试量表(GMFM)进行评估。结果:群体康复训练6个月后,训练组与对照组婴幼儿组间比较GMFM总分及B区、C区有统计学意义;13~18月龄与19~24月龄运动发育迟缓婴幼儿康复GMFM总分有显著性差异;不同疾病类型中脑瘫与听力障碍婴幼儿康复效更明显(P<0.05)。结论:运动发育迟缓婴幼儿采用群体康复训练模式能有效提高粗大运动功能。     

运动神经元病及运动神经元病综合征31例临床分析

运动神经元病(MND)为选择性侵犯运动神经元的神经系统变性病,主要表现为骨骼肌萎缩、无力,直至呼吸肌麻痹而死亡。临床表现为运动神经元病(MND)而有明确病因者,称为运     

Management of motor neurone disease

Motor neurone disease is a progressive neurodegenerative disorder leading to severe disability and death. It is clinically characterised by mixed upper and lower motor neurone involvement affecting bulbar, limb, and respiratory musculature. Recent guidelines have established diagnostic criteria and defined management of the condition. In a proportion of familial amyotrophic lateral sclerosis there is a mutation in the gene encoding the enzyme copper/zinc superoxide dismutase 1; this has allowed mutation screening and generated considerable laboratory based research. The diagnosis must be given with care and consideration and close follow up is essential. Management involves a multidisciplinary team based in the hospital and the community. Riluzole is the only drug shown to have a disease modifying effect and has been approved by the National Institute for Clinical Excellence. The essence of care is good symptomatic management, including nutritional support with percutaneous endoscopic gastrostomy and ventilatory care with non-invasive ventilation. Palliative care should be introduced before the terminal stages after careful discussion with the patient and carers. Knowledge of this condition has grown dramatically recently with a parallel improvement in treatment and ability to deal with the most troublesome problems.     

Prognosis for gross motor function in cerebral palsy: creation of motor development curves

Context  Lack of a valid classification of severity of cerebral palsy and the absence of longitudinal data on which to base an opinion have made it difficult to consider prognostic issues accurately. Objective  To describe patterns of gross motor development of children with cerebral palsy by severity, using longitudinal observations, as a basis for prognostic counseling with parents and for planning clinical management. Design  Longitudinal cohort study of children with cerebral palsy, stratified by age and severity of motor function and observed serially for up to 4 years during the period from 1996 to 2001. Setting  Nineteen publicly funded regional children's ambulatory rehabilitation programs in Ontario. Participants  A total of 657 children aged 1 to 13 years at study onset, representing the full spectrum of clinical severity of motor impairment in children with cerebral palsy. Main Outcome Measures  Severity of cerebral palsy, classified with the 5-level Gross Motor Function Classification System; function, formally assessed with the Gross Motor Function Measure (GMFM). Results  Based on a total of 2632 GMFM assessments, 5 distinct motor development curves were created; these describe important and significant differences in the rates and limits of gross motor development among children with cerebral palsy by severity. There is substantial within-stratum variation in gross motor development. Conclusions  Evidence-based prognostication about gross motor progress in children with cerebral palsy is now possible, providing parents and clinicians with a means to plan interventions and to judge progress over time. Further work is needed to describe motor function of adolescents with cerebral palsy.