石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用

在肾脏的病理诊断中,肾穿刺组织必须进行冷冻切片免疫荧光染色[1,2]、石蜡切片HE、Masson、PAS、PASM染色和电镜检查等,以达到正确的诊断.光镜观察时须有10个以上的肾小球才能作出客观的诊断[3,4].在肾脏的病理诊断中,冷冻切片免疫荧光染色具有不可或缺的作用,但有时各种原因导致所取的肾小球数目不够或基层单位无冷冻切片设备等因素均给诊断带来困难.因此,我们通过对肾活检组织石蜡切片进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现介绍如下.     

肾穿刺组织免疫荧光检测阳性对照片的制作

肾穿刺活检是肾病诊断的重要依据,免疫荧光检测对肾病的诊断、分类具有及其重要的作用,在肾活检病理诊断中的地位是其他组织化学、电子显微镜检查等无法替代的[1]。免疫荧光检测结果在实际操作中易受试剂、温度、人为因素等的影响,此时需设置阳性对照以验证荧光检测结果的可靠性。本科室经过摸索发现制作肾穿刺组织免疫荧光检测阳性对照片可提高检测结果的准确性,现介绍如下。1材料与方法1.1材料冷冻切片机,肾穿刺组织,OCT胶,防脱片载玻片。     

肾活检冷冻组织石蜡制片的方法

肾空刺取出肾组织后,一般分为3部分,一部分制作成石蜡切片,一部分制作成冷冻组织切片,另一部分进行电镜检查。石蜡切片是肾活检病理诊断的最重要部分,若因切片未见肾小球或因其他原因导致制片失败,则不能进行肾活检病理诊断。而冷东肾组织经冻融后一般不能制备出满意的石蜡切片。     

石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用

在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。     

微波在肾穿刺活组织检查快速病理诊断中的应用

微波在肾穿刺活组织检查快速病理诊断中的应用师锁柱程庆砾陈香美朱宁陈振玉肾穿刺活组织检查（肾活检）是目前确诊肾小球疾病及肾间质病变的唯一方法。由于肾活检标本小、切片薄（厚２μｍ），在固定、浸蜡、包埋、切片及染色等方面要求较高，加上染色种类较多（每例病人...     

一种富含脂肪的淋巴结组织冷冻切片制作方法及体会

<正>术中快速冷冻切片诊断需要在组织离体30 min内发出病理诊断报告，淋巴结组织是手术室常见的术中快速冷冻切片标本，手术医师根据病理医师的诊断报告明确淋巴结组织是否发生了肿瘤转移，进而指导后续手术。因此，淋巴结组织冷冻切片质量的优良与否直接影响病理诊断的准确率和手术方案的选择。其中富含脂肪的淋巴结组织冷冻切片制作尤为棘手，因其组织成分特殊，同时含有脂肪组织和淋巴结组织，而这两种组织对于冷冻切片温度的选择又截然不同，给冷冻切片制作带来一定的困难。     

肾活检组织纤连蛋白免疫荧光定量测定技术的初步应用

根据组织切片中荧光强度与自动测光仪所示曝光系数成反比之原理,设计了一种肾活检组织免疫荧光定量检查的方法。用此方法对6例正常人和49例各种肾小球疾病的肾活检组织肾小球中纤连蛋白(FN)的含量进行了测定,发现系膜增生性肾小球肾炎,小球内FN含量明显高于正常,而局灶节段或球性硬化型肾小球肾炎,小球中FN明显减少。其他类型的肾小球疾病小球中FN含量的变化不大。认为免疫荧光定量检查方法可作为一种新技术,选择应用于肾活检免疫病理检查。     

一种薄壁类组织的冷冻制片方法

正目前,术中快速冷冻切片病理检查是手术病理诊断中最高效、便捷的方法,与临床治疗紧密联系,其制作具有质量要求高、诊断者责任重、诊断时间短(30 min内)等特点。因此,制作一张比较完整的冷冻切片对病理诊断极为重要。在实际工作中,对于特殊类型的组织如皮肤、囊壁、胃肠道、子宫腔样组织等需要竖直包埋于冷冻托上,此类组织壁较薄,因其没有可依靠物常常会在包埋过程中发生倾斜,导致镜下组织出现卷曲、折叠,严重影响病理医师的精确诊断。本科室经过多次实践,研究一种针对此类组织提高冷冻切片质量的可行方法,已通过国家专利审核,现介绍如下。     

肾穿刺石蜡切片厚度对肾小球系膜区及基膜PASM染色的影响

<正>肾穿刺活检组织病理诊断中，过碘酸六胺银染色(periodic acid-silver metheramine,PASM)是重要的检查方法，主要用于显示肾小球系膜区范围和基膜增厚以及“钉突”、“梯状”等病理变化，是肾小球疾病鉴别的重要手段之一^[1]。PASM染色质量对诊断有一定程度的影响。切片过厚肾小球结构重叠，难以分辨，半薄切片制片时不仅切片难度增加，且切片过薄高温孵育容易掉片。本实验经过多年研究找到一种最佳PASM染色的切片厚度，现报道如下。     

几种常见免疫复合物性肾炎肾小球免疫荧光和Masson三色染色的对比观察

肾穿刺组织的免疫病理（免疫荧光或免疫组化）和Masson三色染色法,对于确定一些常见的抗体介导或免疫复合物性肾小球肾炎是重要的两种检查手段,尤其是对于尚未开展常规电镜检查的单位,加强对两者检查结果的对比观察,对于确定肾小球肾炎的病理类型有着十分重要的意义。本文集中比较观察不同类型肾小球肾炎病变肾小球免疫荧光和Masson三色染色所示免疫球蛋白或补体的形态特征,增强对其识别或鉴别能力,以图提高对一些常见免疫复合物性肾炎的诊断水平。     

乳腺与子宫组织的恒低温冷冻切片方法探讨

冷冻切片在组织学技术中被广泛应用,特别对临床手术患者术中快速病理诊断意义尤其重要,制作一张优良的冷冻切片是术中快速病理诊断的根本保证.但对一些特殊组织如乳腺、子宫颈等组织,要制作出优良的冷冻切片比较困难.     

肾穿刺标本的免疫组化二步法染色

多年来我们在国内积极推广肾穿刺免疫组化染色,这是因为肾穿组织免疫组化染色较免疫荧光法更适合我国国情。肾穿组织免疫组化染色与免疫荧光法比较具有以下特点：①不需新鲜组织;②不需冷冻切片机及荧光显微镜;③可重复及进行回顾性研究;④最大限度保留了标本资源;⑤适合于远程邮寄病理检验。目前,不少单位已将免疫组化法应用于肾穿标本 ,但普遍认为肾穿刺免疫组化染色难度大。笔者曾报道过免疫组化二步法用于肾穿刺标本染色,近年来通过不断摸索与改进,方法学已相当稳定,染色效果满意。     

大鼠脑组织厚冷冻切片的经验探讨

正现阶段利用动物模型可以帮助我们发现引起精神疾病临床症状的脑部异常变化,进而为治疗提供重要的理念与依据。动物模型的脑组织切片的特殊染色、免疫组化染色、免疫荧光染色等病理学技术是观察脑部组织异常改变非常重要的方法。如对大鼠脑组织行振动切片高尔基染色,以对神经元的形态进行定性或定量的观察[1]。相关文献中也经常会进行冷冻厚切片(25～50 μm)的制作[2-3]。与临床病理相比,动物实验性研究的冷冻切片病理技术操作及结果展示上会有所不同[4]     

新鲜组织短时固定对冷冻切片质量的影响

<正>冷冻切片是在低温环境下将术中取下的新鲜组织快速冷冻至一定硬度再制作切片,常用于临床病理快速诊断和部分形态学研究工作。用于临床的冷冻切片能够让外科医师在手术过程中尽快了解病变性质并及时决定手术方式[1-2]。精准的术中快速病理诊断结果,需高品质的冷冻切片作为保障。多种因素影响冷冻切片的效果,如冷冻时间与温度、取材、切片技术和染色等[3-4],而冰晶的形成是影响病理诊断的重要因素之一。因此在冷冻切片中防水是必须注意事项:     

肾穿刺活检组织切片制备技术的改进

肾穿刺活检组织切片的制备是病理技术工作中一项特殊的技术,其制备质量的优劣在一定程度上关系到临床肾病诊治工作的开展。为提高肾穿刺活检组织切片制备技术、准确把握肾脏疾病的诊断与治疗,作者收集141例肾穿刺活检组织标本,在组织标本的切割分配与固定、半薄切片的制备以及常规染色、特殊染色和免疫组化染色方面,对肾穿刺活检组织切片的制备进行改良,效果良好,现介绍如下。     

微小组织冷冻切片方法的改进

快速冷冻切片是一种在术中做出病理诊断以便决定进一步治疗方案的快速诊断技术。然而在临床实践中 ,常因组织微小 ,制作不出良好的切片而难以作出病理诊断。我们在实践工作中摸索出一种快速简便的微小组织冷冻切片方法 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　 (1)德国产Ｌｅｉｃａ恒冷切片机。 (2 )冷冻切片组织为我院活体组织检查中取出的微小组织 ,如纤支镜、胃镜、膀胱镜等活检组织 ,肝、肾、甲状腺和乳腺穿刺组织 ,脱落细胞收集物等。 (3)小滤纸片 ,将大滤纸用剪刀剪成 1ｃｍ× 1ｃｍ× 1ｃｍ大小 ,多片重叠成厚约 0 5～ 1ｃｍ ,放在组织…     

提高冷冻切片诊断准确性的经验和体会

手术中冷冻切片诊断是病理科的急诊工作 ,其重要性和责任都很大 ,因此如何提高冷冻切片病理诊断的准确性是大家极为关注的问题。其关键在两方面 :一是冷冻切片质量 ,二是病理医师的诊断水平。一、提高冷冻切片诊断的准确性1 冷冻切片质量是术中病理诊断准确性的重要保证。由于术中病人在手术台上等结果 ,要求尽量缩短时间 ,因此 ,力争一次成功制成优质冷冻切片极为重要。 ( 1)临床医师送检标本切忌用生理盐水浸泡或用湿纱布包裹组织。由于经液体浸泡后 ,组织内水分会增加 ,易造成冷冻后组织内冰晶形成增多。因此 ,在制片过程中冰晶溶解 ,形…     

病理冷冻切片制作质量的探讨

目的 探讨病理冷冻切片制作的质量.方法 严格规范操作取材、切片、固定、染色、封片等制片过程中的各个环节,对制片质量进行观察.结果 经光镜观察切片,切片组织切面完整,厚薄均匀,效果良好,所制切片色彩鲜艳,对比清晰.结论 只有严格规范地做好制片中各个环节的技术操作,才能避免冷冻切片制作中出现各种常见问题,提高冷冻切片质量,为临床医师决定手术方式、范围,缩短手术时间,确定进一步治疗方案,提供可靠的诊断依据,对临床治疗具有重要意义.     

冷冻切片中几种不同引导切片法的比较

<正>冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定的硬度,然后进行切片的方法。因其操作过程较石蜡切片快速,简便,易于操作,在组织学技术中的应用十分广泛,尤其对临床手术患者的术中快速病理诊断具有重要意义,而高质量的冷冻切片对于确保术中病理诊断的科学性和可靠性,具有至关重要的作用[1]。因此,在冷冻切片过程中,高效的切片技术     

冷冻切片流程中的常见问题及优化措施

<正>冷冻切片技术是临床病理学诊断中常用的一种技术方法,其主要原理是在低温环境下使组织在较短时间内达到适合的硬度,随后进行快速切片、染色完成制片工作,进而于显微镜下观察切片对肿瘤性质进行判定,为临床医师在手术中确立手术方案提供强有力的支撑^[1]。冷冻切片质量直接影响了术中病理医师快速诊断的速度及准确率,因此,在短时间内完成一张优质的冷冻切片非常重要。